專利名稱：一種肥料中多種農藥的檢測方法
技術領域：
本發明屬于借助于材料的物理化學性質進行測試的領域，具體為一種對肥料中的農藥進行檢測的方法。
背景技術：
農藥指在農業上用于防治病蟲以及調節植物生長、除草等藥劑。植物生長調節劑，是用于調節植物生長發育的一類農藥，包括人工合成的化合物和從生物中提取的天然植物激素。在農業生產上使用，可有效調節作物的生育過程，達到穩產增產、改善品質、增強作物抗逆性等目的。殺蟲劑主要用于防治農業害蟲和城市衛生害蟲的藥品，在二十世紀，隨著農業的迅速發展，殺蟲劑令農業產量大升。但是，幾乎所有殺蟲劑都會嚴重地改變生態系統，大部分對人體有害，其它的會被集中在食物鏈中。常用的植物生長調節劑和殺蟲劑包括:復硝酹鈉(Sodium Nitrophenolate),主要含有3個成分,包括:1，2-硝基苯酹鈉,分子式:C6H4NO3Na,分子量:161.09 ;2，4-硝基苯酚鈉，分子式=C6H4NO3Na,分子量:161.09 ;3，5_ 硝基愈創木酚鈉，分子式=C7H6NO4Na,分子量:191.12，為廣譜型植物生長調節劑，可加速植株生長發育、促根壯苗、保花保果、提高產量、增強抗逆能力等，既可單獨使用，又可與肥料、農藥、飼料等復配使用。胺鮮酯(DA-6, Diethyl aminoethyl hexanoate),分子式:C12H25NO2 ;分子量:215.33，少量的DA-6可使豆類產量增加60%，甜菜等經濟作物增產50%，DA-6不僅在根本上促進植物生長，也可明顯增加果品自然香味和色澤，增強植物抗逆能力。萘乙酸鈉(Sodium a -naphthyl acetate),分子式=C12H9O2Na,生長素類植物調節劑，明顯促進根系的尖端發育、誘導開花、防止落花落果、形成無核果實、促進早熟、增產等作用。赤霉素(Gibberellic acid)，分子式=C19H22O6 ;分子量:346.37，提高無籽葡萄產量，打破馬鈴薯休目民，當晚稻遇陰雨低溫而抽穗遲緩時，用赤霉素處理能促進抽穗，或在雜交水稻制種中調節花期以使父母本花期相遇等。甜菜堿(Betaine)，分子式C14H9C12;分子量354.49，用于棉花、小麥、水稻、玉米、蕃茄、果樹和各種塊根作物上，抗倒伏，促進作物生長，可增產10% 30%,也可使馬鈴薯塊莖增大。阿維菌素(Avermectin),分子式:C48H72O14(Bla);分子量:873.09，對螨類和昆蟲具有胃毒和觸殺作用，主要用于農作物、家禽、家畜體內外寄生蟲和害蟲，如寄生紅蟲、雙翅目、鞘翅目、鱗翅目和有害螨等。氯吡脲(Forchlorfenuro)，分子式:C12H10ClN3O ;分子量:247.68，可用于西瓜、葡萄、獼猴桃，表現在促進莖、葉、根、果生長、促進結果，增加西紅柿、茄子、蘋果等水果和蔬菜的產量。通常來說，按照農藥登記批準標簽上標明的使用劑量、時期和方法，使用植物生長調節劑或殺蟲劑對人體健康不會產生危害。但如果使用上出現不規范，可能會使作物過快增長，對農產品品質和口感產生一定影響；更重要的是，對于農產品生產來說，植物生長調節劑的濫用，會最終危害食品安全。一般來說，肥料中不是不允許添加殺蟲劑、殺菌劑以及植物生長調節劑，而是要按照規范條件生產添加。例如，北京已經立法嚴厲打擊在肥料中非法添加使用農藥(包括生長調節劑)等行為并加強對農藥等物質的監測，檢測和抽查工作。蔬果從使用調節劑到上市出售，會經過一段時間的間隔期，其殘留基本測不出來，但是對肥料直接進行檢測，結果會準確很多。

發明內容
針對現有技術存在的問題，本發明的目的是提出一種肥料中多種農藥的檢測方法。實現本發明目的的具體技術方案為:一種肥料中多種農藥的檢測方法，包括步驟:1)將肥料樣品溶解，過濾并取濾液；2)用液相色譜-串聯質譜法檢測濾液；3)用標準曲線外標法檢測肥料樣品中農藥的含量。其中，所述多種農藥為復硝酚鈉、胺鮮酯、萘乙酸鈉、赤霉素、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲中的一種或多種。其中,所述溶解是用乙腈水溶液溶解。所述過濾是使用0.2-0.4μηι濾膜過濾。

其中，所述步驟2)中液相色譜的流動相為A:含質量比例0.1-0.2%甲酸和4-6mmol/L乙酸銨的水溶液，B:乙腈，柱平衡時間4_6min,流速0.2-0.4mL/min,進樣量8-12 μ L。其中，所述步驟2)中液相色譜使用梯度洗脫的方法，梯度洗脫的程序為:
序號時間(min)A ( %)B ( % )
1O60-8020-40
22.5-3.55-2080-95
312.0-13.05-2080-95
413.0-14.060-8020-40
517.5-18 560-8020-40 。優選地，所述 梯度洗脫的程序為:
序號時間(min)A (%)B (%)
1O65-7525-35
23.08-1288-92
313.08-1288-92
413.165-7525-35
518.065-7525-35 。A和B的％是體積比例。其中，所述步驟2)中質譜檢測使用電噴霧質譜檢測，電噴霧電壓為-4000至-5000V 和 +5000 至 +5500V。其中，電噴霧電壓為+5000至+5500V條件下質譜檢測的農藥為胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲中的一種或多種(正離子掃描)；電噴霧電壓為-4000至-4500V條件下質譜檢測的農藥為復硝酚鈉、萘乙酸鈉、赤霉素中的一種或多種(負離子掃描)。其中，復硝酚鈉主要含有3個成分，包括:1，2-硝基苯酚鈉，2，4-硝基苯酚鈉，3，5-硝基愈創木酚鈉。其中，步驟2)中檢測所述濾液中各農藥的母離子和子離子對，若其離子色譜峰保留時間與標準工作溶液一致；且濾液(樣品)中目標化合物的兩個子離子的相對豐度與濃度相當標準溶液的相對豐度在偏差不超過30%范圍內一致，則判斷該樣品中存在該種農藥；若上述兩個條件不同時滿足，則判斷不含該種農藥。其中，所述步驟3)中標準曲線是用不同濃度的所述農藥分別配制為標準溶液，用液相色譜-串聯質譜法檢測其色譜峰面積而得的標準曲線。即以濃度為橫坐標，定量離子對的色譜峰面積為縱坐標分別繪制各個農藥的標準曲線，采用該曲線以外標法分別計算待測肥料樣品中10種農藥的含量。本發明的有益效果在于:本發明的方法可以對肥料中存在的多種農藥同時進行定性和定量的測定，包括對植物生長調節劑和殺蟲劑的測定，為環境保護和食品安全提供了有效的控制檢測手段。本方法對4-硝基苯酚鈉和5-硝基愈創木酚鈉的儀器檢出限可達到0.01mg/L，萘乙酸鈉可達
0.025mg/L,2-硝基苯酹鈉和赤霉素可達0.lmg/L。本方法檢出限低，結果準確,可一次檢測多種農藥，快捷高效。


圖1為5種農藥:胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲的正離子掃描總離子流色譜圖。圖2-6分別為胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素、氯吡脲的離子對提取色譜圖。圖7為5種農藥萘乙酸鈉、赤霉素、I，2-硝基苯酚鈉，2，4-硝基苯酚鈉、3，5-硝基愈創木酚鈉的負離子掃描總離子流色譜圖。圖8-11分別為4-硝基苯酚鈉、2-硝基苯酚鈉、5_硝基愈創木酚鈉、萘乙酸鈉、赤霉素的離子色譜圖。
具體實施例方式現以以下最佳實施例來說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。實施例中使用的超聲處理設備為昆山KQ-200KDE型超聲波儀；固相萃取小柱購自美國菲羅門公司；0.22 μ m濾膜購自天津市津騰實驗設備有限公司。實施例1:水溶性肥料樣品中農藥的檢測1.樣品預處理將水溶性肥料樣品振蕩混勻，稱取約0.5g樣品于IOOmL容量瓶中，用乙腈/水(50/50, v/v)振蕩溶解、定容，混勻后過0.22 μ m濾膜于進樣小瓶中，上LC-MS/MS測定。對于含量超過線性范圍的樣品將定容溶液進一步稀釋，以使其含量在儀器線性范圍內后再上LC-MS/MS測定和定量。2.LC-MS/MS 測定儀器:Agilent 1200高效液相色譜(美國，安捷倫)-API2000三級四極桿串聯質譜聯用儀(美國，AB SCIEX)，配備電噴霧(ESI)離子源；
色譜柱:AgilentXDB C18，4.6X 150mm，粒徑 5 μ m ;流動相:(A)水(含0.1%甲酸和5mmol/L的乙酸銨)；(B)乙腈；流速:0.3mL/min ；進樣量:IOyL;柱溫:室溫(約26°C);柱平衡時間(下一個樣品進樣前):5min (正離子掃描)和4min (負離子掃描)；梯度洗脫程序如表I和表2。表1:實施例1正離子檢測的梯度洗脫程序
權利要求
1.一種肥料中多種農藥的檢測方法，包括步驟: 1)將肥料樣品溶解，過濾并取濾液； 2)用液相色譜-串聯質譜法檢測濾液； 3)用標準曲線外標法檢測肥料樣品中多種農藥的含量。
2.按權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述多種農藥為復硝酚鈉、胺鮮酯、萘乙酸鈉、赤霉素、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲中的一種或多種。
3.按權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟I)中的溶解是用乙腈水溶液溶解。
4.按權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟2)中液相色譜中，其流動相為A:含質量比例0.1-0.2%甲酸和4-6mmol/L乙酸銨的水溶液，B:乙腈，柱平衡時間4_6min。
5.按權利要求4所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟2)中液相色譜使用梯度洗脫的方法，梯度洗脫的程序為:序號時間(min )A ( %)B ( % )1O60-8020-4022.5-3.55-2080-95312.0-13.05-2080-95413.0-14.060-8020-40517.5-18.560-8020-40 。
6.按權利要求5所述 的檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫的程序為:序號時間(min)A ( %)B (% )1O65-7525-3523.08-1288-92313.08-1288-92413.165-7525-35518.065-7525-35 。
7.按權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟2)中質譜檢測使用電噴霧質譜檢測，電噴霧電壓為-4000至-5000V和+5000至+5500V。
8.按權利要求7所述的檢測方法，其特征在于，電噴霧電壓為+5000至+5500V條件下質譜檢測的農藥為胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素和氯吡脲中的一種或多種；電噴霧電壓為-4000至-4500V條件下質譜檢測的農藥為復硝酚鈉、萘乙酸鈉、赤霉素中的一種或多種。
9.按權利要求1-8任一所述的檢測方法，其特征在于，步驟2)中檢測所述濾液中各農藥的母離子和子離子對，若其離子色譜峰保留時間與標準工作溶液一致；且目標化合物的兩個子離子的相對豐度與濃度相當標準溶液的相對豐度在偏差不超過30%范圍內一致，則判斷其中存在該種植物生長調節劑；若上述兩個條件不同時滿足，則判斷不含該種農藥。
10.按權利要求1-8任一所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟3)中標準曲線是用不同濃度的所述農藥分別配制為標準溶液，用液相色譜-串聯質譜法檢測其色譜峰面積而得的標準曲線。
全文摘要
本發明提供一種肥料中多種農藥的檢測方法，包括步驟1)將肥料樣品溶解，過濾并取濾液；2)用液相色譜-串聯質譜法檢測濾液；3)用外標法檢測肥料樣品中農藥的含量。本發明的方法可以對肥料中存在的多種農藥同時進行定性和定量的測定，包括對植物生長調節劑和殺蟲劑的測定，為環境保護和食品安全提供了有效的控制檢測手段。本方法中胺鮮酯、甜菜堿、矮壯素、阿維菌素、氯吡脲的儀器檢出限均可達到0.01mg/L，4-硝基苯酚鈉和5-硝基愈創木酚鈉的檢出限可達0.01mg/L，萘乙酸鈉可達0.025mg/L，2-硝基苯酚鈉和赤霉素可達0.1mg/L。本發明的方法檢出限低，結果準確，可一次檢測多種農藥，快捷高效。
文檔編號G01N30/88GK103091436SQ20121042973
公開日2013年5月8日 申請日期2012年10月31日 優先權日2012年10月31日
發明者趙魯, 趙永志, 程言君, 李昌偉, 邱靜, 哈雪嬌, 孫薊鋒, 蔣增, 張騰飛 申請人:輕工業環境保護研究所