專利名稱：一種用于utmd介導基因轉導的裝置的制作方法
技術領域：
本實用新型涉及微生物培養器械技術領域，具體涉及ー種基因轉染細胞培養裝置。
背景技術：
有效的基因轉導方法是成功進行基因治療的ー個重要步驟，其中非侵襲、靶向的基因傳輸系統在臨床上顯的尤為重要。目前常見的基因轉導方法主要包括病毒載體介導和非病毒載體介導的基因傳輸。雖然病毒載體介導的基因傳輸有較高的基因轉染率，但出于對該方法安全性的考慮，其臨床應用受到了限制。理想的基因轉導系統要具有以下幾個特點靶向細胞的特異性；抗代謝性降解和/或免疫系統攻擊；安全性，副作用最小。目前， 基因轉導技術已經取得了進展，但是仍未建立起ー個理想的媒介系統。 超聲輻照可使各種類型載體介導的體外培養細胞的目的基因表達增加。超聲靶向微泡破壞(UTMD)誘導的聲孔作用，能引起短暫的細胞膜通透性増加，可將外源性分子轉運入胞內，能有效提高質粒DNA的轉染率。利用UTMD增強基因表達的技術具有實用性，特別是對于細胞培養物。將病毒載體或化學載體介導的基因傳輸方法與UTMD相結合的主要方法是將預先配置的轉染復合物與微泡混合液加入含有細胞懸液的細胞培養皿中，置于超聲裝置中，進行超聲輻照。病毒載體或化學載體絡合質粒DNA可増加超聲輻照期間的質粒穩定性，超聲輻照及微泡能顯著增強其基因轉染率。用于UTMD介導的基因轉染細胞培養皿要有良好的密閉性能，轉染存儲器及微泡混合物存儲器要與培養皿單向連同，輻照前按需供給，保證轉染環境避免污染。然而，目前臨床上還沒有出現ー款真正意義上的用于UTMD介導基因轉染的細胞培養皿及其附件裝置。因此，有必要對現有技術進行改進。
發明內容為解決上述問題，本實用新型的目的是提供一種用于UTMD介導基因轉導的裝置。本實用新型的目的主要通過以下技術方案實現一種用于UTMD介導基因轉導的裝置，包括微泡溶液存儲室、轉染溶液存儲室、細胞培養室、和外殼蓋，微泡溶液存儲室和轉染溶液存儲室上的頂部壁上設置有加樣ロ，加樣ロ通過密封蓋密封；微泡溶液存儲室和轉染溶液存儲室通過流量控制閥與細胞培養室相連；微泡溶液存儲室、轉染溶液存儲室、細胞培養室呈品字形置于外殼蓋內；所述的細胞培養室，包含底壁、側壁和頂壁，頂壁上設有進水管道，進水管道突出到頂壁外，進水管道內側設置有單向閥，進水管道外側上部設置有螺紋，螺紋與密封防護帽相連接，密封防護帽內壁頂端設置有防漏硅膠墊。細胞培養室等分為上、下兩部分，通過螺紋及防漏硅膠墊密封連接。進ー步，所述的細胞培養室、微泡溶液存儲室和轉染溶液存儲室為長方體結構。進ー步，所述的細胞培養室、微泡溶液存儲室和轉染溶液存儲室采用無毒聚氯こ烯板材制作。進ー步，所述的細胞培養室外壁中間空心，空心處含有雙蒸水。[0009]有益效果本實用新型結構簡單、設計合理，使用本培養皿能有效的確保超聲輻照在培養皿介質中的傳遞，促進質粒DNA的胞內傳輸；本實用新型轉染溶液存儲室和微泡溶液存儲室分別與細胞培養室單向連同，輻照前能保證微泡溶液和轉染溶液的按需供給，保證轉染環境避免污染。

圖I是本實用新型結構剖視圖；圖2是本實用新型細胞培養室結構示意圖；圖3是本實用新型外觀結構圖； 圖中1、細胞培養室；2、防漏硅膠墊；3、雙蒸水；4、密封防護帽；5、外螺紋；6、進水管道；7、防漏硅膠墊；8、內螺紋；9、單向閥；10、流量控制閥；11、微泡溶液存儲室；12、密封蓋；13、加樣管道；14、轉染溶液存儲室；15、外殼蓋
具體實施方式
以下結合附圖I、圖2、圖3對本實用新型作進ー步說明一種用于UTMD介導基因轉導的裝置，包括微泡溶液存儲室11、轉染溶液存儲室14、細胞培養室I和外殼蓋15，微泡溶液存儲室11和轉染溶液存儲室14上的頂部壁上設置有加樣管道13，加樣管道13通過密封蓋12密封；微泡溶液存儲室11和轉染溶液存儲室14通過流量控制閥10與細胞培養室I單向相連；所述的細胞培養室I，包含底壁、側壁和頂壁，頂壁上設有進水管道6，進水管道6突出到頂壁外，進水管道6內側設置有單向閥9，細胞培養液通過單向閥9從細胞培養室I外流入培養室內，在單向閥9的作用下能避免液體的回流。進水管道6外側上部設置有外螺紋5，密封防護帽4內壁設置有內螺紋8和防漏硅膠墊7，進水管道6和密封防護帽4通過螺紋及防漏硅膠墊密封防護帽密閉連接。細胞培養室I等分為上、下兩部分，上部培養室內壁底端設置有內臺階及螺紋，下部培養室外壁頂端設置有外臺階及螺紋，外臺階上安裝有一圈防漏硅膠墊2，培養室上、下兩部分通過螺紋及防漏硅膠墊2密閉。作為優選的實施方式，細胞培養室I、微泡溶液存儲室11和轉染溶液存儲室14采用無毒聚氯こ烯板材制作。作為優選的實施方式，細胞培養室I、微泡溶液存儲室11和轉染溶液存儲室14為長方體形。作為優選的實施方式，超聲處理前，待細胞生長到80% 90%融合吋，將細胞用PBS沖洗后，O. 25%胰酶消化、收集，制備細胞懸液。無FCS培養基2000 μ I/樣品，細胞密度為I X IO6個/ml，通過進水管道6加入到細胞培養室I中。作為優選的實施方式，微泡溶液存儲室11用于存儲微泡，微泡的獲得通過購買Bracco公司的SonoVue微泡,使用前溶解于5ml生理鹽水,通過倒置或振蕩使微泡均勻分布，泡徑為2 8 μ m，密度為2X 108 5X 108/ml，濃度5mg/ml。使用前放置于微泡混合物存儲器I中。通常在注入上述微泡溶液存儲室11前Ih制備微泡溶液，制備后迅速進行實驗。[0021]作為優選的實施方式，轉染溶液注入上述轉染溶液存儲室14前，需要預先加入一定比例的質粒溶液。室溫下迅速行超聲輻照，持續時間以細胞不足以貼壁為宜。超聲處理后8h更換含10% FCS的培養基，繼續培養。 上述實施方式僅是本實用新型的優選實施方式，并非僅有的實施方式，只要以基本相同的手段到達到本實用新型的效果均在本實用新型的保護范疇之內。
權利要求1.一種用于UTMD介導基因轉導的裝置，包括微泡溶液存儲室(11)、轉染溶液存儲室(14)、細胞培養室(I)和外殼蓋(15)，其特征在于微泡溶液存儲室(11)和轉染溶液存儲室(14)上的頂部壁上設置有加樣管道(13)，加樣管道(13)通過密封蓋(12)密封；微泡溶液存儲室(11)和轉染溶液存儲室(14)通過流量控制閥(10)與細胞培養室(I)單向相連，微泡溶液存儲室(11)、轉染溶液存儲室(14)、細胞培養室(I)呈品字形置于外殼蓋內。
2.如權利要求I所述的ー種用于UTMD介導基因轉導的裝置，其特征在于所述的細胞培養室(I)，包含底壁、側壁和頂壁，頂壁上設有進水管道出)，進水管道(6)突出到頂壁外，進水管道出)內側設置有單向閥(9)，進水管道(6)外側上部設置有外螺紋(5)，密封防護帽(4)內壁設置有內螺紋(8)和防漏硅膠墊(7)，進水管道(6)和密封防護帽(4)通過螺紋及防漏硅膠墊(X)密閉。
3.如權利要求I所述的ー種用于UTMD介導基因轉導的裝置，其特征在于所述的細胞培養室(I)等分為上、下兩部分，上部培養室內壁底端設置有內臺階及螺紋，下部培養室外壁 頂端設置有外臺階及螺紋，外臺階上安裝有一圈防漏硅膠墊(2)，培養室上、下兩部分通過螺紋及防漏硅膠墊(2)密閉。
4.如權利要求I所述的ー種用于UTMD介導基因轉導的裝置，其特征在于所述的細胞培養室(I)、微泡溶液存儲室(11)和轉染溶液存儲室(14)采用無毒聚氯こ烯板材制作。
5.如權利要求I所述的ー種用于UTMD介導基因轉導的裝置，其特征在于所述的細胞培養室(I)、微泡溶液存儲室(11)和轉染溶液存儲室(14)為長方體形。
專利摘要本實用新型涉及一種用于UTMD介導基因轉導的裝置，包括微泡溶液存儲室、轉染溶液存儲室、細胞培養室和外殼蓋，微泡溶液存儲室和轉染溶液存儲室上的頂部壁上設置有加樣口，加樣口通過密封蓋密封；微泡溶液存儲室和轉染溶液存儲室通過流量控制閥與細胞培養室相連；微泡溶液存儲室、轉染溶液存儲室、細胞培養室呈品字形置于外殼蓋內。本實用新型結構簡單、設計合理、密封性強；使用本裝置能有效的確保超聲輻照在培養皿介質中的傳遞，促進化質粒DNA的胞內傳輸；同時本實用新型內的轉染溶液存儲室和微泡溶液存儲室與細胞培養室單向連同，輻照前能保證微泡溶液和轉染溶液的按需供給，保證轉染環境避免污染。
文檔編號C12M1/00GK202643683SQ201220348770

公開日2013年1月2日 申請日期2012年7月12日 優先權日2012年7月12日
發明者陳智毅, 梁琨, 邱日想, 林雁, 楊鳳 申請人:陳智毅