一種海盤車多糖的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種海盤車多糖在預防和治療神經(jīng)退行性疾病包括帕金森病和老年性癡呆疾病中的應用。所述的海盤車多糖來源于羅氏海盤車和多棘海盤車，系采用稀酸提取，經(jīng)過過濾，脫鹽等步驟制得海盤車多糖。海盤車多糖具有顯著的神經(jīng)保護作用，對神經(jīng)毒素損傷兩種細胞系具有明顯的修復作用，表明它們可以用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病如帕金森病和老年性癡呆的治療藥物和保健品的制備。
【專利說明】一種海盤車多糖的應用
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及海盤車多糖在制備治療帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中的應用。
【背景技術】
[0002]隨著人類平均壽命的逐年增加，世界正步入全球老齡化時代。與年齡有關的神經(jīng)退化性疾病也隨之增加，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)方面，主要表現(xiàn)為興奮與抑制過程減弱，大腦功能降低，記憶力減退和喪失，隨后出現(xiàn)識別功能的進行性減退和情緒紊亂的加重等。老年性癡呆已成為心腦血管疾病和腫瘤之后的第四位疾病。目前，全世界65歲以上人群中老年性癡呆患病率約為5%。而老年性癡呆因其復雜的發(fā)病機理，近期在防治上不可能取得突破性進展，故西方有專家預言，老年性癡呆將是21世紀人類第一殺手。帕金森病又稱震顫麻痹，是中老年人常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，帕金森病的主要病理特征是是因位于中腦部位"黑質"中的細胞發(fā)生病理性改變后，多巴胺的合成減少，抑制乙酰膽堿的功能降低，則乙酰膽堿的興奮作用相對增強。兩者失衡的結果便出現(xiàn)了“震顫麻痹”。最新資料表明，中國有I 7 O萬帕金森病患者，其中5 5歲以上的人群中每I O O人就有I個帕金森病人，估計每年新增帕金森病人約I Q萬人。老年性癡呆和帕金森病對患者、家庭和社會都帶來巨大的壓力，使得全世界對其給予眾多的關注，老年癡呆和帕金森病等神經(jīng)退行性疾病的治療藥物研究成為老年醫(yī)學領域中的一個重要課題。
[0003]海洋是地球上所占面積最大的區(qū)域，因此開發(fā)海洋藥物越來越受到重視，而海洋物質提取在制備和開發(fā)抗帕 金森藥物及在神經(jīng)保護方面有著不可估計的社會和經(jīng)濟效益。
[0004]海盤車，屬于棘皮動物門，海星綱，生活在潮間帶和近岸的平靜海域，以吞食各種貝類、軟體動物、海膽等為食。海盤車作為中藥已有幾千年的歷史，具有鎮(zhèn)驚安神、和胃止痛、厚腸止瀉，清熱解毒等功效，主治胃酸過多、胃潰瘍、腹瀉、癲癇等癥。近年來，海盤車體內(nèi)的活性成分相繼被發(fā)現(xiàn)，如留類糖苷，留醇，蛋白酶，氨基酸，多肽，蛋白多糖，脂類，生物堿等。但是以往的研究傾向于海盤車提取物中留類糖苷化合物的藥理學活性及其作用機理。而對海盤車多糖的研究卻不多。少量的文獻報道了海盤車酸性粘多糖具有抗凝血，抑制紅細胞凝聚及血栓形成等作用，但海盤車中其他多糖及生物活性卻鮮有報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種海盤車多糖在預防和治療神經(jīng)退行性疾病包括帕金森病和老年性癡呆疾病中的應用。
[0006]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)一種海盤車多糖在治療和預防神經(jīng)退行性疾病包括帕金森病和老年性癡呆疾病中的應用。
[0007]并進一步提供所述海盤車多糖的制備方法:首先采用異丙醇和乙醇分別處理海盤車脫脂，然后將脫脂后的海盤車采用稀酸提取法提取，過濾，提取液用堿調PH至接近中性，透析脫鹽，濃縮透析袋內(nèi)溶液，將濃縮液噴霧干燥、冷凍干燥或乙醇沉淀法制得海盤車多糖。
[0008]其中，所述的海盤車多糖主要組成單糖為甘露糖和葡萄糖，兩者的比例為1:3-1:10，硫酸基含量為5%-20%。
[0009]優(yōu)選的，所述的海盤車多糖來源于海星綱鉗棘目海盤車科海盤車屬羅氏海盤車{Asterias roBesiofli)或多棘海盤車(A amurensis')。
[0010]優(yōu)選的，所述的海盤車多糖分子量為IKD~1000KD。
[0011]神經(jīng)細胞凋亡在神經(jīng)細胞損傷中起十分重要的作用，藥物可通過干預凋亡過程阻止其進一步 發(fā)展，對神經(jīng)細胞起到保護作用。SH-SY5Y細胞來源于人的神經(jīng)母細胞瘤，其形態(tài)和生理功能與正常神經(jīng)元相似，呈錐形，且具有明顯的軸突，是目前國際上研究神經(jīng)細胞功能較好的一種細胞。SY5Y細胞和MES23.5多巴胺能細胞分別是研究阿爾茨海默病和帕金森病常用的神經(jīng)細胞模型，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)海盤車多糖分別對神經(jīng)毒素損傷兩種細胞系具有明顯的修復作用，表明它們可以用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病如帕金森病和老年性癡呆的治療藥物和保健品的制備。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0012]圖1海盤車多糖SF-1對6-OHDA損傷的多巴胺能神經(jīng)細胞的保護作用。其結果以平均值土SD表示。** (P<0.01)與6-OHDA進行對比，具有統(tǒng)計學意義；
圖2海盤車多糖SF-2對6-OHDA損傷的多巴胺能神經(jīng)細胞的保護作用。其結果以平均值土SD表示。* (P〈0.05)，與6-OHDA進行對比，具有統(tǒng)計學意義。
【具體實施方式】
[0013]下面結合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發(fā)明的內(nèi)容之后，本領域技術人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附后權利要求書限定的范圍。
[0014]本發(fā)明指出一種海盤車多糖，可在制備治療或預防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應用。所述葡聚糖的制備方法如下:
實施例1:羅氏海盤車多糖的制備
(I)將200g干羅氏海盤車粉碎，分別用3倍體積的異丙醇處理兩次，過濾，棄去異丙醇，然后將海盤車繼續(xù)用3倍體積的乙醇處理兩次，過濾，棄去乙醇,將海盤車干燥。得率為80%。
[0015](2)將脫脂的海盤車160g，用3倍體積的0.1 M HCl溶液提取2h，過濾，提取液用堿調PH至5-8，濃縮，用截留分子量為3500Da透析袋透析2天，濃縮透析袋內(nèi)溶液，凍干得海盤車多糖(以SF-1表示)18.02g，得率為9.01%。
[0016]羅氏海盤車多糖的化學組分分析，單糖比例分析，硫酸根含量，分子量測定結果見表1。IR譜圖結果表明SF-1為硫酸多糖，在1240 cm-1和840 cm-1左右出現(xiàn)硫酸基特征吸收峰。
[0017]實施例2:多棘海盤車多糖的制備
(I)將200g干多棘海盤車粉碎，分別用3倍體積的異丙醇處理兩次，過濾，棄去異丙醇，然后將海盤車繼續(xù)用3倍體積的乙醇處理兩次，過濾，棄去乙醇,將海盤車干燥。得率為84%。
[0018](2)將脫脂的海盤車168g，用3倍體積的0.01 M HCl溶液提取3h，過濾，提取液用堿調pH至5-8,濃縮,用截留分子量為3500Da透析袋透析2天,濃縮透析袋內(nèi)溶液,加至食用乙醇中至乙醇終濃度為75%，得白色沉淀，將沉淀以95%乙醇洗滌，減壓干燥后得海盤車多糖(以SF-2表示)20.3g，得率為10.15%。
[0019]多棘海盤車多糖的化學組分分析，單糖比例分析，硫酸根含量，分子量分析結果見表1。IR譜圖結果表明SF-2為硫酸多糖，在1240 cm-1和840 cm-1左右出現(xiàn)硫酸基特征吸收峰。
[0020]表1海盤車多糖及其分級樣品的化學分析
【權利要求】
1.一種海盤車多糖的應用，其特征在于，所述海盤車多糖可在制備治療或預防帕金森病和老年性癡呆藥物或保健品中應用。
2.根據(jù)權利要求1所述海盤車多糖的應用，其特征在于，所述海盤車多糖按照以下方法制備:首先采用異丙醇和乙醇分別處理海盤車脫脂，然后將脫脂后的海盤車采用稀酸提取法提取，過濾，將提取液中和，透析脫鹽，將透析截留液濃縮，將濃縮液噴霧干燥、冷凍干燥或乙醇沉淀法制得海盤車多糖。
3.根據(jù)權利要求1所述海盤車多糖的應用，所述的海盤車多糖主要組成單糖為甘露糖和葡萄糖，兩者的摩爾比例為(1-3):10，硫酸基含量為5%-25%。
4.根據(jù)權利要求1所述海盤車多糖的應用，其特征在于:所述的海盤車多糖來源于海星綱鉗棘目海盤車科海盤車屬羅氏海盤車(Asieria1S roIIestoni )或多棘海盤車(Aamurensis)。
5.根據(jù)權利要求1所述海盤車多糖的應用，其特征在于:所述的海盤車多糖分子量范圍為 1-1OOkD。
【文檔編號】A23L1/29GK103919801SQ201310010387
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2013年1月11日 優(yōu)先權日:2013年1月11日
【發(fā)明者】張全斌, 張文靜, 王晶, 金維華 申請人:南通中國科學院海洋研究所海洋科學與技術研究發(fā)展中心, 中國科學院海洋研究所