固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供一種固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，在現(xiàn)有的游離態(tài)復(fù)合酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣方法的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了改進(jìn)，將葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶加入海藻酸鈉和硅膠混合溶液，再滴入氯化鈣溶液中固定成型；將葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶進(jìn)行固定化，實(shí)現(xiàn)酶液分離，提高了葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶的重復(fù)利用率，降低了酶的使用成本，節(jié)約了生產(chǎn)成本，通過(guò)本法生產(chǎn)的葡萄糖酸鈣產(chǎn)品純度高，符合當(dāng)前國(guó)家對(duì)企業(yè)節(jié)能環(huán)保的要求。
【專(zhuān)利說(shuō)明】固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于葡萄糖酸鈣生產(chǎn)【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及用固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]葡萄糖酸鈣是一種用途極廣的多羥基有機(jī)酸鹽，由于其無(wú)毒，原料來(lái)源廣泛的特性，主要用作食品的鈣強(qiáng)化劑與營(yíng)養(yǎng)劑、緩沖劑、固化劑、鰲合劑，應(yīng)用前景十分廣闊。食品級(jí)葡萄糖酸鈣作為一種重要的食品添加劑，在食品中的應(yīng)用前景光明，可以作為營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ)劑、品質(zhì)改良劑等；醫(yī)藥級(jí)葡萄糖酸鈣，可以作為人體的鈣補(bǔ)充劑，鈣是體內(nèi)含量最大的無(wú)機(jī)物，為維持人體神經(jīng)，肌肉，骨骼系統(tǒng)，細(xì)胞膜和毛細(xì)血管通透性正常功能所必需。鈣離子是許多酶促反應(yīng)的重要激活劑，對(duì)許多生理過(guò)程是必需的，如神經(jīng)沖動(dòng)傳遞，平滑肌和骨骼肌的收縮，腎功能，呼吸和血液凝固等。可調(diào)節(jié)人體酸堿平衡，保證神經(jīng)肌肉的正常作用。葡萄糖酸鈣是一種多羥基羧酸鈣，英文名稱(chēng):Calcium Gluconate，化學(xué)名稱(chēng):五羥基已酸鈣，分子式=Ca(C6H11O7)2，分子量:430.40，本品為白色結(jié)晶性或顆粒性粉末，熔點(diǎn)201°C(分解)，無(wú)臭，無(wú)味，易溶于沸水(20g/100ml )，略溶于冷水(3g/100ml，20°C )，不溶于乙醇或乙醚等有機(jī)溶劑。水溶液顯中性(pH約6-7)。
[0003]目前葡萄糖酸鈣的生產(chǎn)方法主要有電解氧化法、溴化法、金屬催化合成法、發(fā)酵法等
[0004]黑曲霉發(fā)酵法生產(chǎn)葡萄 糖酸鈣，需要對(duì)糖質(zhì)原料進(jìn)行滅菌，因此會(huì)造成發(fā)酵液脫色困難。發(fā)酵配料需要添加多種營(yíng)養(yǎng)鹽，引入雜質(zhì)，會(huì)造成提純成本上升。而且所得葡萄糖酸鈣產(chǎn)品純度較低；電解氧化法在工業(yè)生產(chǎn)中能耗大，不易控制，工業(yè)化生產(chǎn)中很少采用；金屬催化合成法一般使用重金屬的催化劑，容易引起重金屬超標(biāo)，不適宜用于食品添加劑，葡萄糖酸鈣的使用范圍受到限制。
[0005]《食品與藥品》2011年第13卷第9期，杜嬋娟等，固定化酶法制備葡萄糖酸鈣的研究，提到了葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶共價(jià)固定到經(jīng)戊二醛預(yù)處理的殼聚糖上，用所得固定化酶催化葡萄糖轉(zhuǎn)化為葡萄糖酸鈣，結(jié)果固定化葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶的回收率分別為86.9%和54.3%。但是，該固定材料的價(jià)格成本較高，酶的固定化率和回收率較低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于，在現(xiàn)有的雙酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣方法的基礎(chǔ)上，提供了一種固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，將葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶加入海藻酸鈉和硅膠混合溶液，再滴入氯化鈣溶液中固定成型；將葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶進(jìn)行固定化，實(shí)現(xiàn)酶液分離，提高了葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶的重復(fù)利用率，降低酶的使用成本，節(jié)約了生產(chǎn)成本，通過(guò)本法生產(chǎn)的葡萄糖酸鈣產(chǎn)品純度高并符合當(dāng)前國(guó)家對(duì)企業(yè)節(jié)能環(huán)保的要求。
[0007]本發(fā)明的反應(yīng)原理為:2G.H；0 +CaCCh —? G: * Ca + 2H:0 + C0:f。
[0008]本發(fā)明的一種固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法技術(shù)方案為:包括以下步驟:
(1)將葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶加入已經(jīng)消毒冷卻的海藻酸鈉與硅膠混合溶液，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?br> (2)將混有葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶的海藻酸鈉與硅膠混合溶液滴入已經(jīng)消毒冷卻的氯化鈣溶液中固定成型，形成固定化酶；
(3)將葡萄糖配制成10-15%(W/V)的濃度，消毒冷卻后置于反應(yīng)罐內(nèi)，分批次加入碳酸鈣固體；
(4)反應(yīng)罐中加入成型的固定化酶，開(kāi)始反應(yīng)；反應(yīng)設(shè)置反應(yīng)條件為:通入無(wú)菌空氣，攪拌速度為200-300 r/min，酶反應(yīng)溫度為33_35°C ；
(5)反應(yīng)周期為18-36h，當(dāng)反應(yīng)液中還原糖濃度降至0.2%以下時(shí)，結(jié)束反應(yīng)，停通氣、攪拌，待反應(yīng)體系靜置分層；
(6)分層完畢，將上層反應(yīng)液放出，進(jìn)行脫色、濃縮結(jié)晶，然后經(jīng)分離、干燥得到成品葡萄糖酸鈣，固定化酶留在反應(yīng)罐中重復(fù)利用，繼續(xù)進(jìn)行下一批反應(yīng)。
[0009]步驟(1)中葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶質(zhì)量比例為1:3-1:4。
[0010]步驟(1)海藻酸鈉與硅膠混合溶液中，海藻酸鈉濃度為1.0%-1.5% ；以硅酸鈉計(jì)硅膠濃度為1.0%-2.0%。
[0011]步驟(2 )中，氯化鈣溶液濃度為3-6%。
[0012]步驟(2)中，形成的固定化酶靜止放置4-10小時(shí)，使固定強(qiáng)度更大。
[0013]步驟(3)中，碳酸鈣質(zhì)量為溶液中葡萄糖質(zhì)量的5/18-1/3。
[0014]步驟(4)中，碳酸鈣分批次加入反應(yīng)體系，反應(yīng)開(kāi)始加入所需碳酸鈣總量的1/3，反應(yīng)6-10小時(shí)后，反應(yīng)體系溶液比較澄清時(shí)加入剩余的碳酸鈣。
[0015]步驟(4)中，反應(yīng)罐壓力保持在0.1-0.2MPa。
[0016]步驟(6)中，分離、干燥得到成品葡萄糖酸鈣，是將葡萄糖酸鈣溶液濃縮至干物質(zhì)濃度為75%時(shí)，加入1%葡萄糖酸鈣晶種結(jié)晶。
[0017]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供一種固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，在現(xiàn)有的雙酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣方法的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了改進(jìn)，將葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶加入海藻酸鈉和硅膠混合溶液，再滴入氯化鈣溶液中固定成型；將葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶進(jìn)行固定化，實(shí)現(xiàn)酶液分離，提高了葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶的重復(fù)利用率，降低酶的使用成本，節(jié)約了生產(chǎn)成本，通過(guò)本法生產(chǎn)的葡萄糖酸鈣產(chǎn)品純度高并符合當(dāng)前國(guó)家對(duì)企業(yè)節(jié)能環(huán)保的要求。
[0018]本發(fā)明所采用的固定化材料價(jià)格低廉，葡萄糖氧化酶酶活固定化率高可達(dá)88.9%，過(guò)氧化氫酶酶活固定化率可達(dá)76.8%，可重復(fù)使用6次，相比現(xiàn)有技術(shù)，重復(fù)使用次數(shù)顯著提聞。
[0019]本發(fā)明采用硅膠與海藻酸鈣雜化凝膠對(duì)葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶復(fù)合酶系統(tǒng)進(jìn)行共固定化，硅膠在雜化凝膠中起到了骨架作用有利于底物分子的自由出入；海藻酸鈣濃度越高雜化凝膠越至密阻止了酶蛋白的泄漏，但同時(shí)也不利于底物分子的自由出入。本發(fā)明找到了海藻酸鈣與硅膠的最佳濃度配比，既能使底物分子自由出入又能有效固定化酶蛋白。硅藻土吸附法，酶分子容易脫落，酶蛋白固定化率低，單純海藻酸鈣包埋法，海藻酸鈣濃度過(guò)高不利于底物的自由出入，濃度過(guò)低酶蛋白容易泄漏。
[0020]通過(guò)本法生產(chǎn)的葡萄糖酸鈣成本低，但是純度等同游離雙酶法生產(chǎn)的葡萄糖酸鈣，固定化復(fù)合酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣方法符合工業(yè)化大生產(chǎn)的要求。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0021]圖1所示為實(shí)施例1所得產(chǎn)品的色譜分析圖；
圖2所示為葡萄糖酸鈣標(biāo)準(zhǔn)校正曲線(xiàn)。
【具體實(shí)施方式】
[0022]實(shí)施例1:
(I)、配制1500mL海藻酸鈉與硅膠混合溶液，海藻酸鈉濃度為1.0%-1.5%，硅膠濃度為
1.0%-2.0%(以硅酸鈉計(jì))，121°C高溫滅菌后冷卻，把相當(dāng)于反應(yīng)液中葡萄糖質(zhì)量2.5%。的葡萄糖氧化酶和7.5%。的過(guò)氧化氫酶加入其中加入其中，充分?jǐn)嚢杈鶆颍焕米⑸淦鳎瑢⒒煊衅咸烟茄趸负瓦^(guò)氧化氫酶的海藻酸鈉與硅膠混合溶液溶液滴入已經(jīng)消毒冷卻的6%氯化鈣溶液中固定成型，靜止放置4小時(shí)；使用無(wú)水葡萄糖，配制3.5L濃度為10%(W/V)的葡萄糖溶液，消毒冷卻后置于5L反應(yīng)罐內(nèi)，首先加入32.4g碳酸鈣固體；反應(yīng)罐中加入成型的固定化酶，設(shè)置反應(yīng)條件為:通入無(wú)菌空氣，攪拌速度為200-300 r/min，酶反應(yīng)溫度為35°C ；反應(yīng)8小時(shí)后加入剩余的65.1g碳酸鈣固體(碳酸鈣稍微過(guò)量),繼續(xù)反應(yīng)18-30小時(shí),反應(yīng)液中還原糖濃度降為0.2%以下后 ，結(jié)束反應(yīng)，停通氣、攪拌，待反應(yīng)體系靜置分層；將上層反應(yīng)液放出，按0.1%(W:V)加入活性炭于75 °C下脫色I(xiàn)小時(shí)，過(guò)濾得濾液，在真空度為
0.095MPa條件下，60°C蒸發(fā)，至干物質(zhì)量百分比為70%，加入1%葡萄糖酸鈣晶種結(jié)晶。用離心機(jī)分離得葡萄糖酸鈣晶體。所得晶體在80°C下，烘干4小時(shí)，得成品葡萄糖酸鈣。將母液真空濃縮至干物質(zhì)量百分比為75%進(jìn)行二次結(jié)晶，干燥后所得葡萄糖酸鈣。兩次結(jié)晶共制取葡萄糖酸鈣414.3g，基于原料中葡萄糖質(zhì)量的收率(收率定義為所得產(chǎn)品與投入葡萄糖的質(zhì)量比)為118.3 %，所得葡萄糖酸鈣純度為99.30%。
[0023](2)、反應(yīng)完第一批的固定化酶留在反應(yīng)罐中繼續(xù)進(jìn)行第二批反應(yīng)，葡萄糖溶液濃度、加入碳酸鈣固體的量以及反應(yīng)條件均不變，如此反復(fù)進(jìn)行反應(yīng)可重復(fù)反應(yīng)6次。平均反應(yīng)周期為32h，基于原料中葡萄糖質(zhì)量6次反應(yīng)的平均收率(收率定義為所得產(chǎn)品與投入葡萄糖的質(zhì)量比)為118.1%，根據(jù)線(xiàn)性方程計(jì)算所得，所生產(chǎn)葡萄糖酸鈣平均純度為99.61%。
[0024]將干燥所得產(chǎn)品進(jìn)行色譜分析，色譜分析圖如說(shuō)明書(shū)附圖圖1所示，證明產(chǎn)品為葡萄糖酸鈣。
[0025]實(shí)施例2:
(I)、配制16L海藻酸鈉與硅膠混合溶液，海藻酸鈉濃度為1.0%-1.5%，硅膠濃度為
1.0%-2.0%(以硅酸鈉計(jì))，121°C高溫滅菌后冷卻，把相當(dāng)于反應(yīng)液中葡萄糖質(zhì)量2.5%。的葡萄糖氧化酶和1%的過(guò)氧化氫酶加入其中，充分?jǐn)嚢杈鶆颍焕脦в卸鄠€(gè)注射器針頭的蠕動(dòng)泵，將混有葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶的海藻酸鈉與硅膠混合溶液滴入已經(jīng)消毒冷卻的5%氯化鈣溶液中固定成型，靜止放置6小時(shí)；使用無(wú)水葡萄糖，配制70L濃度為10%(W/V)的葡萄糖溶液，消毒冷卻后置于IOOL反應(yīng)罐內(nèi)，首先加入640g碳酸鈣固體；反應(yīng)罐中加入成型的固定化酶，設(shè)置反應(yīng)條件為:通入無(wú)菌空氣，攪拌速度為200-300 r/min，酶反應(yīng)溫度為350C ;反應(yīng)8小時(shí)后加入剩余的1300g碳酸鈣固體(碳酸鈣稍微過(guò)量)，繼續(xù)反應(yīng)18-30小時(shí)，反應(yīng)液中還原糖濃度降為0.2%以下后，結(jié)束反應(yīng)，停通氣、攪拌，待反應(yīng)體系靜置分層；將上層反應(yīng)液放出，按0.1%(W:V)加入活性炭于75 °C下脫色I(xiàn)小時(shí)，過(guò)濾得濾液，在真空度為0.095MPa條件下，60°C蒸發(fā)，至干物質(zhì)量百分比為70%，加入1%葡萄糖酸鈣晶種結(jié)晶。用離心機(jī)分離得葡萄糖酸鈣晶體。所得晶體在80°C下，烘干5小時(shí)，得成品葡萄糖酸鈣。把母液真空濃縮至干物質(zhì)量百分比為75%進(jìn)行二次結(jié)晶，干燥后得葡萄糖酸鈣產(chǎn)品。兩次結(jié)晶共制取葡萄糖酸鈣8298g。
[0026]固定化葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶繼續(xù)進(jìn)行重復(fù)反應(yīng)，反應(yīng)7批以后反應(yīng)周期延長(zhǎng)，失去實(shí)際生產(chǎn)的意義，因此，固定化復(fù)合酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣反應(yīng)7批后即停止反應(yīng)。平均反應(yīng)周期為33h，六批反應(yīng)平均收率為:118.5%，葡萄糖酸鈣純度為:99.2%達(dá)到食品級(jí)要求。
[0027]實(shí)施例3
做對(duì)比實(shí)施例如下:
使用無(wú)水葡萄糖，配制70L濃度為10%(W/V)的葡萄糖溶液，消毒冷卻后置于100L反應(yīng)罐內(nèi)，加入葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化酶，先加入640g碳酸鈣固體；設(shè)置反應(yīng)條件為:通入無(wú)菌空氣，攪拌速度為200-300 r/min，酶反應(yīng)溫度為33°C ;反應(yīng)6小時(shí)后加入剩余的1300g碳酸鈣固體(碳酸鈣稍微過(guò)量)，繼續(xù)反應(yīng)20小時(shí)，反應(yīng)液中還原糖濃度降為0.2%以下后，結(jié)束反應(yīng)，停通氣、攪拌，取出反應(yīng)液，按0.7%(ff:V)加入活性炭于75 °C下脫色I(xiàn)小時(shí)，過(guò)濾得濾液，在真空度為0.095MPa條件下，60°C蒸發(fā)，至干物質(zhì)量百分比為70%，加入1%葡萄糖酸鈣晶種結(jié)晶。用離心機(jī)分離得 葡萄糖酸鈣晶體。所得晶體在80°C下，烘干6小時(shí)，得成品葡萄糖酸鈣。把母液真空濃縮至干物質(zhì)量百分比為75%進(jìn)行二次結(jié)晶，干燥后得葡萄糖酸鈣產(chǎn)品。兩次結(jié)晶共制取葡萄糖酸鈣8295.8g ;反應(yīng)周期為26h，產(chǎn)品收率為118.5%，葡萄糖酸鈣純度為99.6%。
[0028]固定化復(fù)合酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣與游離態(tài)復(fù)合酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣對(duì)比分析
(I)從反應(yīng)節(jié)約用電計(jì)算
固定化復(fù)合酶法產(chǎn)酸鈣平均反應(yīng)周期為33h，游離態(tài)酶法反應(yīng)周期為26h以生產(chǎn)6批
計(jì)算
游離態(tài)酶法可節(jié)約用電 6*7*0.5=21 (kw)合人民幣 11.55 元。
[0029](2)從固定化載體費(fèi)用計(jì)算 硅酸鈉成本:16 X 2% X0.65=0.21元 海藻酸鈉成本:16X1.5% X 25=6元 氯化鈣成本:15 X 6% X 9=8.1元
氧化鈣可重復(fù)使用3次因此實(shí)際成本為 8.1 + 3=2.7
(3)從脫色過(guò)程活性炭用量比較計(jì)算
固定化復(fù)合酶法比游離態(tài)復(fù)合酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣節(jié)約活性炭成本為:70X(0.7-0.1)%X3=1.26 元
(4)從所用酶的成本計(jì)算
每生產(chǎn)I公斤葡萄糖酸鈣約需要酶的成本為I元(酶制劑廠(chǎng)家提供)
游離態(tài)復(fù)合酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣復(fù)合酶的成本為 8.29X6X1=49.74 元
固定化復(fù)合酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣復(fù)合酶的成本為 8.29X1.3X1=10.78 元
(5)總合上述4項(xiàng)進(jìn)行計(jì)算
固定化復(fù)合酶法比游離態(tài)復(fù)合酶法生產(chǎn)葡萄糖酸鈣節(jié)約成本為 49.74+1.26-11.55-0.21-6-2.7-10.78=19.76 元 而且游離態(tài)酶法由于酶不容易與反應(yīng)液分離，要用較多的活性炭進(jìn)行脫色除蛋白，產(chǎn)生較多的廢炭適成環(huán)境污染 。
【權(quán)利要求】
1.一種固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: (1)將葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶加入已經(jīng)消毒冷卻的海藻酸鈉與硅膠混合溶液，充分?jǐn)嚢杈鶆颍? (2)將混有葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶的海藻酸鈉與硅膠混合溶液滴入已經(jīng)消毒冷卻的氯化鈣溶液中固定成型，形成固定化酶； (3)將葡萄糖配制成10-15%的濃度，消毒冷卻后置于反應(yīng)罐內(nèi)，分批次加入碳酸鈣固體； (4)反應(yīng)罐中加入成型的固定化酶，開(kāi)始反應(yīng)；反應(yīng)設(shè)置反應(yīng)條件為:通入無(wú)菌空氣，攪拌速度為200-300 r/min，酶反應(yīng)溫度為33_35°C ； (5)反應(yīng)周期為18-36h，當(dāng)反應(yīng)液中還原糖濃度降至0.2%以下時(shí)，結(jié)束反應(yīng)，停通氣、攪拌，待反應(yīng)體系靜置分層； (6)分層完畢，將上層反應(yīng)液放出，進(jìn)行脫色、濃縮結(jié)晶，然后經(jīng)分離、干燥得到成品葡萄糖酸鈣，固定化酶留在反應(yīng)罐中重復(fù)利用，繼續(xù)進(jìn)行下一批反應(yīng)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，其特征在于，步驟(1)中葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶質(zhì)量比例為1:3_1:4。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，其特征在于，步驟(O海藻酸鈉與硅膠混合溶液中，海藻酸鈉濃度為1.0%-1.5%;以硅酸鈉計(jì)硅膠濃度為1.0%-2.0%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，其特征在于，步驟(2)中，氯化鈣溶液濃度為3-6%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，其特征在于，步驟(2)中，形成的固定化酶靜止放置4-10小時(shí)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，其特征在于，步驟(3)中，碳酸鈣質(zhì)量為溶液中葡萄糖質(zhì)量的5/18-1/3。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，其特征在于，步驟(4)中，碳酸?丐分批次加入反應(yīng)體系，反應(yīng)開(kāi)始加入所需碳酸?丐總量的1/3,反應(yīng)6-10h后,加入剩余的碳酸鈣。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，其特征在于，步驟(4)中，反應(yīng)罐壓力保持在0.1-0.2MPa。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的固定化復(fù)合酶制取葡萄糖酸鈣的方法，其特征在于，步驟(6)中，分離、干燥得到成品葡萄糖酸鈣，是將葡萄糖酸鈣溶液濃縮至干物質(zhì)濃度為75%時(shí)，加A 1%匍萄糖酸鈣晶種結(jié)晶。
【文檔編號(hào)】C12N11/10GK103602710SQ201310457583
【公開(kāi)日】2014年2月26日 申請(qǐng)日期:2013年9月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月30日
【發(fā)明者】王棣, 李偉, 王一, 王居亮, 孫學(xué)謙, 李秋紅, 夏穎穎, 鄧智, 王茜, 李樹(shù), 謝登玉 申請(qǐng)人:山東西王糖業(yè)有限公司