Ssr引物組及其利用該引物組鑒定辣椒品種的方法
【專利摘要】本發明涉及分子生物【技術領域】,具體來說是一種SSR引物組及其利用該引物鑒定辣椒品種的方法;該SSR引物組由20條引物組成;鑒定步驟包括(1)辣椒葉片DNA提取;(2)PCR擴增;(3)電泳檢測;(4)數據記錄;(5)結果判定。本發明引物特異性高,擴增效率好,能快速鑒定辣椒的不同品種,具有周期短,成本低,結果可靠,節約人力、物力及土地資源特點。
【專利說明】SSR引物組及其利用該引物組鑒定辣椒品種的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及分子生物【技術領域】,具體來說是一種引物及其利用該引物鑒定辣椒品種的方法。
【背景技術】
[0002]品種鑒定是農業生產、作物育種和種子檢驗上的重要方法,也是保護作物品種、防止假冒偽劣品種進入市場的重要手段。傳統的種子質量檢驗方法有田間性狀鑒定和籽粒形態鑒定等,但是,田間性狀鑒定所需周期長,耗費大量人力、物力和財力。辣椒種子質量監控是辣椒生產的重要環節。在辣椒生產中,地方品種混雜現象嚴重,常規鑒別耗時較長,田間鑒別難度較大,隨著分子生物學技術的飛速發展,分子標記技術不斷成熟,給作物從品種基因組水平上的鑒定開辟了途徑。
【發明內容】
[0003]為實現上述辣椒品種鑒定中出現的問題,本發明的目的在于,提出辣椒品種鑒定的分子檢測方法,該方法利用分子標記技術,在苗期實現辣椒品種鑒定,具有周期短,成本低,結果可靠,節約人力,物力及土地資源,大大提高了品種鑒定的準確性。
[0004]為了實現上述目的,本發明采用的技術方案是:一種SSR引物組,該SSR引物組序 列如下:
[0005]
Hpmsl-139 F: CCAACAGTAGGACCCGAAAATCC
R: ATGAAGGCTACTGCTGCGATCC
CA514621F: GTCGAACAAA/\T(;G(;(;TTTG
R: GCTGGAGAGTGCTGGTGG
[0006]
【權利要求】
1.SSR引物組,其特征是,該SSR引物組序列如下:
2.一種利用SSR引物組鑒定辣椒品種的方法,其特征是,包括如下步驟: (1)辣椒葉片DNA提取; (2)PCR 擴增; (3)電泳檢測; (4)數據記錄; (5)結果判定。
3.根據權利要求2所述利用SSR引物組鑒定辣椒品種的方法,其特征是,所述步驟(2)中PCR擴增程序為94°C預變性5min ;94°C變性45s,60°C復性45s,72°C延伸lmin,35個循環;最后72°C延伸10min,4°C保存。
4.根據權利要求3所述利用SSR引物組鑒定辣椒品種的方法,其特征是,所述步驟(2)中 PCR 擴增體系包括包括 20ng 模板 DNA,2.5mmol/L Mg2+,0.2mmol/L dNTPs, IU TaqDNA 聚合酶,每條引物 400nmol/L, lOXBuffer。
5.根據權利要求2所述利用SSR引物組鑒定辣椒品種的方法,其特征是,所述步驟(5)結果判定時,如果 兩個品種在兩個或兩個以上SSR標記位點具有不同等位,則判定為不同品種。
【文檔編號】C12N15/11GK103525813SQ201310516095
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月28日 優先權日:2013年10月28日
【發明者】何建文, 蘇丹, 姜虹, 韓世玉, 劉永翔, 劉作易 申請人:貴州省辣椒研究所