本發明屬于養殖業
技術領域：
，涉及一種應用酶解和發酵生產魚粉的方法。
背景技術：
：魚粉是動物飼料中重要的蛋白來源。但隨著養殖業的不斷發展，我國魚粉供應存在巨大的缺口，需要大量進口。另外，技術和資金等原因也導致國產魚粉質量參差不齊，與國外進口高檔魚粉相比，我國自產魚粉普遍存在蛋白質含量相對較低、脂肪含量較高、灰分較高以及顏色較深等缺點。魚粉中魚蛋白和魚脂肪的含量是決定魚粉質量的關鍵因素，魚蛋白含量越高脂肪殘留量越少，魚粉的質量就越好。鮮魚具有水分、油脂和大分子蛋白含量高的特點，而目前魚粉生產多采用直接對鮮魚進行加工的方式，雖然這種工藝比較簡單且易于操作，但也嚴重影響了魚粉的質量。另外，水分、油脂和大分子蛋白含量高容易導致魚粉變質等現象的發生，也不利于魚粉營養成分的吸收。技術實現要素：本發明的目的在于根據現有技術中的不足，提供了一種應用酶解和發酵生產魚粉的方法。本發明上述目的通過以下技術方案實現：本發明提供了一種應用酶解和發酵生產魚粉的方法，包括如下步驟：S1.將去油的魚肉加入復合酶，進行酶解；S2.將S1中經過酶解后的物質加入復合菌體進行半固態混合發酵；S1中，所述復合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠蘿蛋白酶；S2中，所述復合菌體為分別將嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母菌培養成種子液，再依次離心，分別將離心所獲得的菌體混合后所得；所述復合酶的加入量為0.5~3%，酶解工藝為調節pH為5~6，酶解溫度為45~55℃，酶解時間為40~180min。本發明利用酶解處理和微生物發酵處理能使大分子的動物蛋白成分轉變為小分子的氨基酸和肽，這些成分具有很高的利用價值，能有效提高魚粉的附加價值。優選地，S1中酶解條件為調節pH至5~6，酶解溫度45~55℃，酶解時間55~65mim。優選地，S2中半固態發酵含水量為55~70%，復合菌體的接種量為3~10%，半固態發酵溫度為25~35℃。更優選地，S2中半固態發酵至pH為4.5~5。優選地，按單酶酶活量計，S1中木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠蘿蛋白酶的混合比為3:2:1。優選地，按離心后所獲得的菌體濕重計，S2中嗜酸乳桿菌菌體、枯草芽孢桿菌菌體和釀酒酵母菌菌體的混合比為1:1:1。優選地，將嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母菌分別進行活化，待上述3種菌體的菌數達到108以上，再依次離心，混合離心后的菌體，得到混合菌體。更優選地，所述復合菌體采用如下步驟制備：S1.分別將嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母菌接入培養基中制成一級種子液；S2.取一級種子液繼續培養，制成二級種子液；S3.分別取二級種子液，在3000-4000r/min離心5~15分鐘，收集活菌體，按質量比1:1:1混合嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母菌獲得混合發酵用復合菌。根據本發明提供的方法得到魚粉，其小肽含量≥35%、胃蛋白酶消化率≥97%、魚粉中益生菌數目≥108。與現有技術相比，本發明具有以下優點及有益效果：本發明應用本發明生產生物轉化魚粉，工藝簡單，并且魚粉中小肽含量高，蛋白質利用率高。同時，發酵處理可使產品含有大量有益微生物以及復雜的代謝產物，有效提高了魚粉的品質。具體實施方式以下結合具體實施例來進一步說明本發明，但實施例并不對本發明做任何形式的限定。除非特別說明，本發明采用的試劑、方法和設備為本
技術領域：
常規試劑、方法和設備。除非特別說明，本發明所用試劑和材料均為市購。實施例1：本實施例提供的方法如下：預處理——蒸煮——壓榨——分離——酶解處理——濃縮——發酵處理——干燥粉碎。具體包括如下步驟：（1）將原料魚進行清洗，去除石頭、沙子等異物后，送入切碎機切成魚塊；（2）將魚塊送入蒸煮設備，通入高溫蒸汽進行蒸煮30分鐘；（3）將蒸煮后的魚塊送入壓榨機中進行壓榨，分離魚油和魚肉，壓榨餅經撕碎機撕碎后與去除魚油的蒸煮液混合；（4）調節pH至5.5，溫度至50℃，按質量百分比為2%加入復合酶粉（復合酶粉由木瓜蛋白酶粉、中性蛋白酶粉和菠蘿蛋白酶粉復配所得），酶解60分鐘；（5）調節含水量為60%，按接種量5%接入經過活化培養的混合菌體（混合菌體為嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母菌發酵，離心，混合所得），在30℃條件下半固態混合發酵至pH為4.5；（6）將發酵后的魚塊進行干燥粉碎裝袋，獲得生物轉化魚粉成品。步驟4中所用復合酶粉中復合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠蘿蛋白酶，根據單酶酶活力單位進行復配，比例為3:2:1。步驟5中所述的混合菌種發酵方法，其制種包括如下步驟：（1）分別將活化好的嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母菌按5%的接種量接入MRS培養基、牛肉膏蛋白胨培養基和YPD培養基中制成一級種子液；（2）取一級種子液按5%接種量分別接入MRS培養基、牛肉膏蛋白胨培養基和YPD培養基中，待上述3種菌體的菌數達到108以上，制成二級種子液；（3）分別取二級種子液，4000r/min離心10分鐘，收集活菌體，按菌體濕重計，質量比1:1:1混合嗜酸乳桿菌種子液、枯草芽孢桿菌種子液和釀酒酵母菌種子液獲得混合發酵用菌體。所述的按上述技術方法生產的生物轉化魚粉，其小肽含量為35.4%、胃蛋白酶消化率為98.6%、魚粉中益生菌數目≥108。實施例2一種應用酶解和發酵技術生產生物轉化魚粉的方法，包括如下步驟：（1）將原料魚進行清洗，去除石頭、沙子等異物后，送入切碎機切成魚塊；（2）將魚塊送入蒸煮設備，通入高溫蒸汽進行蒸煮20分鐘；（3）將蒸煮后的魚塊送入壓榨機中進行壓榨，分離魚油和魚肉，壓榨餅經撕碎機撕碎后與去除魚油的蒸煮液混合；（4）調節pH至5.5，溫度至50℃，按添加量0.5%加入復合酶粉（復合酶粉由木瓜蛋白酶粉、中性蛋白酶粉和菠蘿蛋白酶粉復配所得），酶解180分鐘；（5）調節含水量為70%，按接種量10%接入經過活化培養的混合菌體（混合菌體為嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母菌發酵，離心，混合所得），在30℃條件下半固態混合發酵至pH為5；（6）將發酵后的魚塊進行干燥粉碎裝袋，獲得生物轉化魚粉成品。步驟4中所用復合酶粉中復合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠蘿蛋白酶，并分別根據單酶酶活力單位進行復配，比例為3:2:1。步驟5中所述的混合菌種發酵方法，其制種包括如下步驟：（1）分別將活化好的按5%的接種量接入MRS培養基、牛肉膏蛋白胨培養基和YPD培養基中制成一級種子液；（2）取一級種子液按5%接種量分別接入MRS培養基、牛肉膏蛋白胨培養基和YPD培養基中，待上述3種菌體的菌數達到108以上，制成二級種子液；（3）分別取二級種子液，3000r/min離心15分鐘，收集活菌體，按菌體濕重計，質量比1:1:1混合嗜酸乳桿菌種子液、枯草芽孢桿菌種子液和釀酒酵母菌種子液獲得混合發酵用菌種。所述的按上述技術方法生產的生物轉化魚粉，其小肽含量為35.1%、胃蛋白酶消化率為98.3%、魚粉中益生菌數目≥108。應用本發明生產生物轉化魚粉，工藝簡單，并且魚粉中小肽含量高，蛋白質利用率高。同時，發酵處理可使產品含有大量有益微生物以及復雜的代謝產物，有效提高了魚粉的品質。對比例1方法同實施例1，不同的是不采用復合菌種，僅采用釀酒酵母菌進行發酵，其他均同實施例1進行處理。對比例2方法同實施例1，不同的是不采用復合酶，僅采用木瓜蛋白酶進行酶解處理，其他均同實施例1進行處理。對比例3方法同實施例1，不同的是復合酶為木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶，其他均同實施例1進行處理。對比例4方法同實施例1，不同的是混合菌種中加入的菌種為為嗜酸乳桿菌和釀酒酵母菌，其他均同實施例1進行處理。表1為對比例1~4的方法對魚粉指標的影響：表1對比例編號對比例1對比例2對比例3對比例4胃蛋白酶消化率（%）90.2%92.8%93.5%91.3%小肽含量（%）13.8%26.6%27.3%14.5%益生菌數目106108108106從表1中對比例得出的數據來看，只有采用復合酶為木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠蘿蛋白酶，混合菌種為嗜酸乳桿菌、枯草芽孢桿菌和釀酒酵母菌的組合才能實現最佳的處理效果，不僅小肽含量突出，且消化率高，益生菌產生數目多。以上所述，僅為本發明的具體實施方式，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本
技術領域：
的技術人員在本發明揭露的技術范圍內，可輕易想到變化或替換，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。因此，本發明的保護范圍應所述以權利要求的保護范圍為準。當前第1頁1 2 3