本發(fā)明屬于抗氧化制劑及發(fā)酵工程領(lǐng)域，具體涉及一種抗氧化保健酵素及其制備方法。

背景技術(shù)：

抗氧化性是保健產(chǎn)品重要的性能之一，具有良好的抗氧化性的保健產(chǎn)品可以降低自氧化速率，減少脂肪過氧化氫含量，減少自由基的生成，利于生命體保持健康狀態(tài)。

申請?zhí)枮?01410393636.7的中國發(fā)明公布了一種具有抗氧化力及美白功效的酵素產(chǎn)物及其制造方法；申請?zhí)枮?01210387842.8的中國專利公布了一種人參酵素；申請?zhí)枮?01610285846.3的中國專利公布了一種強抗氧化活性酵素產(chǎn)品及其制備方法。上述酵素產(chǎn)品要么原料過于復(fù)雜，要么抗氧化性能較差。

辣椒是人們喜愛的食材，也具有較高的抗氧化性能(《水溶性辣椒皮渣提取物抗氧化性的研究》)。然而，由于其具有辛辣味，不宜于所有人群的食用。一般而言，對食物進行發(fā)酵可以一定程度的改善食材原有不良味道。不過，在發(fā)明人的預(yù)研究中，對辣椒發(fā)酵后，所得發(fā)酵液的抗氧化性十分的低。

因此，如何利用辣椒為原料制備抗氧化性能高的酵素制劑是本領(lǐng)域關(guān)注的研究課題。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)的缺點，本發(fā)明的目的之一在于提供一種抗氧化保健酵素的制備方法，該方法包括如下步驟：

(1)按重量份計，將30-35份地瓜、10-15份紅辣椒和2-5份紅蘿卜混合，加入60-80份水；

(2)將活化了的植物乳桿菌接種于步驟(1)所得物中，接種量為5-8％；

(3)設(shè)置發(fā)酵溫度為34-35℃，pH為4-5，發(fā)酵8-12小時；之后于24-25℃，pH＝3-4條件下，發(fā)酵24-36小時；取發(fā)酵液，即得。

辣椒本身具有較強的抗氧化性，然而，如對辣椒進行油炒等處理，容易造成其中酶的失活。發(fā)明人對辣椒單獨進行發(fā)酵后，其抗氧化性能急劇下降，對于羥基自由基的清除率僅為4.9％。地瓜本身具有的抗氧化能力較弱，其總黃酮對于DPPH的抗氧化性低于維生素C。

然而，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，當(dāng)將地瓜、辣椒和紅蘿卜混合后進行發(fā)酵，所得發(fā)酵液具有十分優(yōu)異的抗氧化性能。發(fā)酵原液對DPPH的清除率高達95％以上，對于羥基自由基的清除率高達98％以上。

優(yōu)選的，步驟(1)中，按重量份計，將30-35份地瓜、10-15份辣椒和2-5份紅蘿卜混合，加入60-80份水。

優(yōu)選的，步驟(2)所述接種量為6％。

優(yōu)選的，步驟(3)中，當(dāng)發(fā)酵溫度為34-35℃，pH為4-5時，發(fā)酵時間為10小時。

優(yōu)選的，步驟(3)中，當(dāng)發(fā)酵溫度為24-25℃，pH＝3-4時，發(fā)酵時間為30小時。

本發(fā)明的另一個目的在于提供由上述方法制備得到的抗氧化保健酵素。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明所得酵素具有十分優(yōu)秀的抗氧化性能，經(jīng)過發(fā)酵后，辣椒的辛辣味得到了大幅的減弱，所得酵素制劑具有良好的口感，易于服用。

具體實施方式

下面通過實施例對本發(fā)明進行具體描述，有必要在此指出的是以下實施例只是用于對本發(fā)明進行進一步的說明，不能理解為對本發(fā)明保護范圍的限制，該領(lǐng)域的技術(shù)熟練人員根據(jù)上述發(fā)明內(nèi)容所做出的一些非本質(zhì)的改進和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明的保護范圍。

實施例1

(1)按重量份計，將30份地瓜、10份紅辣椒和2份紅蘿卜混合，加入60份水；

(2)將活化了的植物乳桿菌接種于步驟(1)所得物中，接種量為5-8％；

(3)設(shè)置發(fā)酵溫度為34-35℃，pH為4-5，發(fā)酵8小時；之后于24-25℃，pH＝3-4條件下，發(fā)酵24小時；取發(fā)酵液，即得。

實施例2

(1)按重量份計，將35份地瓜、15份紅辣椒和5份紅蘿卜混合，加入80份水；

(2)將活化了的植物乳桿菌接種于步驟(1)所得物中，接種量為5-8％；

(3)設(shè)置發(fā)酵溫度為34-35℃，pH為4-5，發(fā)酵12小時；之后于24-25℃，pH＝3-4條件下，發(fā)酵36小時；取發(fā)酵液，即得。

實施例3

(1)按重量份計，將32份地瓜、12份紅辣椒和4份紅蘿卜混合，加入70份水；

(2)將活化了的植物乳桿菌接種于步驟(1)所得物中，接種量為5-8％；

(3)設(shè)置發(fā)酵溫度為34-35℃，pH為4-5，發(fā)酵10小時；之后于24-25℃，pH＝3-4條件下，發(fā)酵30小時；取發(fā)酵液，即得。

實驗例

對實施例1-3所得發(fā)酵液進行抗氧化性能的測試。

取2mL不同濃度的發(fā)酵液，加入2mL 0.1mmol/L DPPH溶液(DPPH溶于無水乙醇中)，混合均勻后在室溫下避光反應(yīng)20min，在波長517nm處測吸光值A(chǔ)_i。空白組為2mL無水乙醇代替DPPH溶液，加入2mL發(fā)酵液，混合均勻后反應(yīng)20min，在波長517nm處測定吸光值A(chǔ)_j。對照組為2mL DPPH溶液加入2mL無水乙醇，在波長517nm處測定吸光值A(chǔ)_o。

計算公式：清除率＝[1-(A_i-A_j)/A_o]*100％

取1mL 1.865mmol/L鄰二氮菲溶液(稱取0.0369g鄰二氮菲溶解于10mL無水乙醇中中，并定容于100mL容量瓶中)和2mL發(fā)酵液液，充分混合均勻后加入1mL 1.865mmol/L的FeSO₄(取0.0129g FeSO₄.7H₂O溶解于蒸餾水中，并與25mL容量瓶中定容)，混合均勻后加入1mL 0.03％(V/V)H₂O₂,混合溶液在37℃水浴60min后，536nm下測其吸光值為A_樣。以去離子水代替發(fā)酵液來重復(fù)以上操作，在536nm測得吸光度A_損；以去離子水代替發(fā)酵液和H₂O₂溶液重復(fù)上述操作，在536nm測其吸光值為A_未損。

清除率(％)＝(A_樣–A_損)/(A_未損–A_損)×100％。式中：A樣為樣品組的吸光值；A_損為損傷管的吸光值；A_未損為未損傷管的吸光值。

表1