技術領域：
本發明屬于食品領域，具體涉及一種蛋白多肽粉及其制備與應用。
背景技術：
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目前，蛋白多肽粉廣泛地應用于食品保健等領域，其作為小分子多肽，具有比氨基酸更好的吸收性和生物利用度。其功用是補充基礎營養，改善血液品質，維護細胞活力，調整免疫功能，幫助轉運物質，維護胃腸微生態平衡，提高身體素質，促進疾病康復。對于體質虛弱、免疫力低下及營養不良人群具有廣泛的適用性。
作為基礎功能蛋白，能補充人體蛋白，提高細胞中各種免疫因子的活性和含量，促進各種抗體形成，使人體免疫力處于最佳狀態，抗病防病，提高體質。維持血漿膠體滲透壓，以保持身體內血液分布平衡和體液交換的正常進行。
蛋白多肽粉主要適用于蛋白質攝入不足者：如營養不良，消化吸收功能的慢性胃腸道疾患者。另外，如婦女妊娠后期，哺乳期，兒童，青少年發育期，大運動量，重體力勞動人群需要量增加，而攝入量相對不足者。另外，蛋白多肽粉亦適用于體質較弱，常患感冒，易疲勞者。
目前，有關蛋白多肽粉公開的專利較多。申請號為201210534641.6的發明專利，公開了“一種多肽蛋白粉的制備方法”，其特征在于，該多肽蛋白粉由精選大米為主要原料，淀粉酶為輔助材料，并通過浸泡、磨漿、初次調漿、一次液化、壓濾、洗渣、一級膠體磨、二級膠體磨、三級膠體磨、等共十八個工藝流程完成；該方法的原材料成本較低，有機地將酶轉化方式與水解方法結合，沉降池技術后使產品提純進一步提高，完成膠質淀粉與蛋白質粉的分離，肽蛋白粉純度較高，原材料利用率較高，廢水產生率較低。
申請號為200810029984.0的發明專利公開了“一種雙蛋白多肽豆漿粉固體飲料”，由下述配比的原料制成，按每生產100千克雙蛋白多肽豆漿粉固體飲料計，所用原料為：多肽豆漿按干重計50～60千克，全脂奶粉10～15千克，麥芽糖漿按干重計12～20千克，白糖8～10千克，大豆纖維素1～2千克，食用大豆油3～4千克，大豆低聚糖1.5～2.5千克，食用碳酸鈣1.0～1.5千克，維生素a600毫克，維生素d5毫克；其中多肽豆漿依照下述步驟制得：(1)利用大豆制造豆漿；(2)用蛋白酶將豆漿中的大豆蛋白質酶解為大豆多肽；(3)完成酶解后，進行滅酶，得到多肽豆漿。本發明含有植物蛋白和動物蛋白，并且含有大豆多肽，營養價值高，更有利于人體健康。
而隨著蛋白多肽粉領域中行業的競爭，其具備多功能性和多附加值成為目前蛋白多肽粉研發與生產的熱點。如申請號為201210241261.3的發明專利公開了“一種具有保肝和抗氧化作用的大豆乳清多肽的制備方法”，其特征在于提供了一種具有保肝和抗氧化作用的大豆乳清多肽的制備方法，步驟包括：將大豆乳清廢水進行絮凝處理除雜后，按每升乳清水加入0.5g-1.5g半胱氨酸，然后在ph2-3、溫度40℃-55℃條件下，以每克蛋白加入1000-2500活力單位的酸性蛋白酶，水解5h-7h；之后按1000-2500u/g加入胃蛋白酶，在35-45℃、ph2-3條件下，水解3h-5h；水解液經滅酶、離心、過濾、濃縮與干燥得到大豆乳清多肽。動物試驗證明，本發明大豆乳清多肽具很強的抗氧化和抗急性肝損傷作用。該多肽中，1000da以下的小分子低聚肽占80％以上。人群試食口感好，沒有副作用，可以作為普通營養和保健食品的原料。
申請號為201610845601.1的發明專利公開了“一種抗氧化沙棘多肽的制備方法”，其特征在于將沙棘籽清洗浸泡處理后，用胃蛋白酶酶解提取兩次，再經減壓濃縮干燥，得沙棘籽多肽。總抗氧化能力(aov)的測定表明，該多肽溶液在20mg/ml時，羥自由基清除率高達91.35％，超氧陰離子自由基清除率高達64.33％，具有很強抗氧化性，在抗氧化食品和化妝品方面具有廣闊的應用前景。
申請號為201410455199.7的發明專利公開了“胃腸模擬消化制備菜籽粕蛋白抗氧化肽液的方法”，其特征在于采用的制備工藝以菜籽榨油副產物高變性蛋白菜籽粕為原料，經粉碎、過篩等常規預處理后，采用模擬胃腸消化技術，由含胃蛋白酶、胰蛋白酶構建雙酶模擬胃腸消化體系，沸水浴、調節ph法集成2次離心手段制備菜籽粕蛋白抗氧化肽液。本發明的制備方法采用雙酶酶解反應體系，極大地提高菜籽粕蛋白水解效率，充分利用原料；模擬胃腸消化過程，未進行常規酶解的不斷添加naoh維持反應在最適ph進行，反應過程更加綠色，同時，由于模擬最完美的人體胃腸消化手段，在潛在食品安全方面，較微生物發酵更有優勢。
上述公開的相關蛋白多肽粉的專利雖營養豐富，但其功能性單一，營養及保健效果不盡理想。與此同時，公開的相關蛋白多肽粉由于具有高營養成分，而在蛋白質在代謝過程中會大量消耗維生素b族，從而會加大機體的消化負擔，不僅會影響機體對于蛋白良好的消化吸收，若攝入蛋白較多，不僅會導致人體消化不良，機體代謝不暢，而且會打亂人體的代謝平衡。
另一方面，西蘭花，又名綠菜花，為1-2年生草本植物，不僅含有蛋白質、碳水化合物、脂肪、膳食纖維、維生素、礦物質等人體所需的基礎營養物質，還含有大量有益人體健康的生物活性物質。其中，西蘭花葉色澤鮮艷、柔軟多汁，含有豐富的維生素等物質，但水分及有機質含量較高，將其堆放或填埋會產生大量的滲濾液，容易造成環境污染，因此，提高西蘭花葉的利用率對減少食品資源的浪費和避免環境污染具有重要意義；此外，對于西蘭花的根部，人們通常選擇丟棄，但是，西蘭花的根部也具有較高的膳食纖維和營養價值，對于腸道健康有很好的作用，有很好的利用價值；西蘭花種子芽苗因其豐富的營養及保健功能而受到人們的喜愛，日本、歐美等發達國家已有食用的習慣。研究表明，西蘭花芽苗中蘿卜硫苷和蘿硫素的含量是成熟西蘭花的10～100倍，蘿卜硫素是目前發現的抗癌活性最強的異硫氰酸酯，除了其顯著的抗癌功效外，還具有消炎，抑菌預防心血管疾病等功效。
除此之外，酵母菌具有的眾多生理功能，使其在發酵食品中得到廣泛的研究與應用，其作用機制總結如下：l)直接營養作用，促進動物生長發育。2)提高腸道消化酶活性。3)促進微生物繁殖和增強活性，調節胃腸道微生態平衡。4)提高機體對纖維素和礦物質的消化率。5)提高免疫力和抗應激能力，吸附致病因子，保障機體健康。
此外，酵母中包含某些抗氧化活性成分，例如谷胱甘肽，其主要功能有：(1)清除自由基、過氧化物、重金屬及黃曲霉毒素等毒物；(2)參與氨基酸(谷氨酰氨、半胱氨酸及其它中性氨基酸)的轉運；(3)利于鐵的吸收、硒的吸收、鈣的吸收，谷胱甘肽還可以使飼料中的過氧化脂肪酸在吸收時或吸收后恢復為正常的脂肪；(4)保護胃腸道黏膜上皮，防止因炎癥、局部缺血、氧化物質等對腸黏膜的損傷；(5)貯存并提供其組成氨基酸；(6)參與蛋白質和dna的合成；(7)作為還原物質，利于維生素e、維生素c的還原，維持巰基酶活性。
綜上，以大豆、核桃、西蘭花為原料，充分利用酵母菌與德式乳桿菌的發酵，從而促進機體對蛋白多肽的消化與吸收，制備一種功能性及溶解性強、營養及保健效果好、易于消化吸收、保質期長的蛋白多肽粉很有必要。
技術實現要素：
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本發明的目的在于克服上述蛋白多肽粉的缺陷，以大豆、核桃、西蘭花為原料，充分利用酵母菌、乳酸菌的發酵，從而大大提高了蛋白多肽粉的溶解度，有效促進機體對蛋白多肽的消化與吸收，不僅營養、保健效果好、易于消化吸收，而且具備護胃、抵抗機體氧化、改善腸道菌群、降低膽固醇等功能，具有良好的感官以及風味，而且無需添加任何防腐劑即可保證蛋白多肽粉貨架期的食品安全。
為了達到上述目的，本發明采用以下技術方案：
一種蛋白多肽粉，主要由以下重量份數的原料制備：
大豆蛋白粉5-10份，核桃蛋白粉3-7份，西蘭花葉混合粉3-7份，西蘭花根蛋白粉3-6份，西蘭花種子芽粉2-5份，酵母發酵混合蛋白粉1-4份。
優選地，所述一種蛋白多肽粉，主要由以下重量份數的原料制備：
大豆蛋白粉7-8份，核桃蛋白粉4-6份，西蘭花葉混合粉4-6份，西蘭花根蛋白粉4-5份，西蘭花種子芽粉3-4份，酵母發酵混合蛋白粉2-3份。
更優選地，所述一種蛋白多肽粉，主要由以下重量份數的原料制備：
大豆蛋白粉7.5份，核桃蛋白粉5份，西蘭花葉混合粉5份，西蘭花根蛋白粉4.5份，西蘭花種子芽粉3.5份，酵母發酵混合蛋白粉2.5份。
進一步地，所述大豆蛋白粉以全脂大豆為原料，按照申請號為95119835.1發明專利的制備方法制備。
進一步地，所述核桃蛋白粉按照申請號為201310497733.6發明專利的制備方法制備。
進一步地，所述西蘭花種子芽粉的制備，具體如下：
將西蘭花種子于功率100-300w，頻率20-30khz，室溫20-30℃超聲清洗1-4min，于室溫20-30℃，清水浸泡1-4h；將浸泡后的西蘭花種子進行低頻高壓脈沖，輸出頻率：0.1-20hz，脈沖電場的場強：50-150kv/m，脈寬20-70ms，處理時間0.1-2h；將經過低頻高壓脈沖處理后的西蘭花種子進行高壓靜電處理，脈沖電場場強：50-150kv/m，場強方向豎直向下，處理時間0.1-2h；將經過高壓靜電處理的西蘭花種子浸沒于清水中，浸泡1-2h，將浸泡后的西蘭花種子放置于鋪有濾紙的恒濕培養箱中，溫度28-35℃，進行led紅光照射1-4h，光照強度5-20w，通過調節光源高度，使各處理光量子通量密度均保持在80-90μmol·m-2·s-1，經紅光照射后在黑暗條件下培養發芽0.5-3d，得到西蘭花種子芽；將所述西蘭花種子芽利用粉碎機粉碎，得到西蘭花種子芽漿，將所述西蘭花種子芽漿于功率10-30w，紅外照射0.1-1min，垂直照射高度10-20cm；待處理后，將西蘭花種子芽漿放置于恒溫油浴溫度35-40℃，調整微波功率350-450w，微波提取0.1-1min后，按照西蘭花種子芽漿與蒸餾水體積比1:0.1-1加入蒸餾水，得到西蘭花種子芽混合液，向混合液中添加0.01-0.06％的復合酶，30-40℃，酶解10-25min，得到酶解液，將所述酶解液4000-5000rpm離心5-15min，去上清，減壓濃縮，冷凍干燥，超微粉碎，過80-100目篩即得花種子芽粉；
所述復合酶為纖維素酶、木聚糖酶按質量比2-5：1-3均勻混合。
進一步地，所述酵母發酵混合粉包括酵母蛋白粉以及發酵液粉。
進一步地，所述酵母發酵混合粉的制備，具體如下：
(1)搖瓶培養
取酵母斜面菌種一環，接入搖瓶中,150-200rpm,28-30℃培養20-25h得酵母種子液；
(2)發酵罐培養
將種子液按3-6％接種量，接入發酵罐中，28-30℃,通氣量5-7l/min,罐壓0.02-0.04mpa，200-300rpm，恒ph6.0-6.4條件下進行發酵培養，發酵至20-25h時，一次性添加終濃度為20-25mmol/l的l-半胱氨酸，繼續發酵25-30h；
所述最終發酵液中gsh終濃度達到2268-3308mg/l；
(3)發酵液處理
將發酵液4000-5000rpm離心5-15min，分離得到酵母菌體以及酵母發酵液；
(4)酵母蛋白粉的制備
將菌體在-20℃條件下預凍2-4h，置于真空機中抽真空1-50pa，再充注氮氣至大氣壓,預冷至0℃—-20℃,保持1-2h后,抽真空1-50pa,升溫至0℃—15℃,再降溫至0℃—-20℃，保持1-2h，升溫至20-30℃，并快速啟用高頻振蕩壁碎機對酵母進行破壁，破壁循環1-2次，獲得破壁酵母液，對破壁酵母液，在70-90℃條件下進行高溫自溶；高壓噴霧干燥，進風溫度：260-300℃，排風溫度：60-70℃，料液溫度：60℃，最終獲得酵母蛋白粉；
(5)發酵液蛋白粉的制備
將發酵液調ph值為8.5～10.0在50℃-60℃進行堿提，堿提同時進行超聲，所述超聲功率為180-200w，超聲時間10-20min，然后離心5-10min，轉速4000-5000rpm，取離心沉淀物調ph5.0-6.0，離心、洗滌后冷凍干燥、超微粉碎，得到發酵液蛋白粉；
(6)將酵母蛋白粉以及發酵液蛋白粉按照質量比(1-3)：(3-6)混合均勻，最終獲得酵母發酵混合粉；
所述搖瓶培養基以g/l計組成為：(nh4)2so46、葡萄糖35、k2hpo4·3h2o3、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1，余量為水，ph6.0；
所述發酵培養基以g/l計組成為：(nh4)2so410、葡萄糖100、k2hpo4·3h2o8、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1,余量為水，ph6.0；
所述酵母具體為釀酒酵母(saccharomycescerevisiae)tlj2016，該菌株已于2016年7月15日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為cgmccno.12789，保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101；
所述釀酒酵母tlj2016具有以下特性：1)對葡萄糖的耐受能力達到300g/l，利于其在高濃度葡萄糖條件下生產gsh；2)在5l發酵罐中發酵生產gsh終濃度達到3308mg/l；3)耐受l-半胱氨酸的能力特強，在5mmol/ll-半胱氨酸作用下仍能緩慢生長，在40mmol/ll-半胱氨酸作用下仍能保持gsh大量合成；4)耐鹽能力達到18％，有利于擴展其應用領域。
進一步地，所述西蘭花葉混合粉的制備，具體如下：
所述西蘭花葉混合粉由西蘭花葉一階段提取物以及西蘭花二階段提取物按照質量比3-6:1-2組成；
西蘭花葉一階段提取物的制備：
(1)將西蘭花葉置于超聲波清洗機中于功率200-400w，頻率20-30khz，室溫20-30℃超聲清洗3-5min，漂洗，瀝干，按照料液質量比0.6-1：1向西蘭花葉中加入自來水，并粉碎，獲得西蘭花葉漿，并用3-6層濾布過濾，獲得西蘭花葉過濾液；向西蘭花葉過濾液中加入酵母發酵液，所述西蘭花葉過濾液與酵母發酵液體積比為1：1.5-3，攪拌靜置后，獲得混合酸溶液；
(2)將所述混合酸溶液置于玻璃平板中，平板中溶液高度為0.5-1.5cm，靜置于45-50℃恒溫油浴條件下靜置1min后，于恒溫45-50℃，功率200-300w，微波提取0.5-1min后，通過紅外光源進行紅外提取0.5-1min，所述紅外光源功率為15-30w；待紅外提取后，調整恒溫油浴溫度35-40℃，調整微波功率350-450w，微波提取0.5-1min后，再進行紅外提取，功率：15-30w，時間：0.5-1min；最后，在35-40℃恒溫油浴條件下，調整微波功率500-600w，微波提取0.5-1min，用離心機以3000-4000r/min的轉速離心5-10min，獲得沉淀以及上清液，將所述沉淀經蒸餾水洗滌后，冷凍干燥、超微粉碎，得到西蘭花葉一階段提取物；
西蘭花葉二階段提取物的制備：
將上述步驟(1)過濾獲得的殘渣與步驟(2)離心獲得的上清液混合，獲得二階段混合漿，向其中加入質量5-15倍的75％-85％的乙醇溶液，均勻混合，首先于恒溫油浴65-75℃，功率400-500w，微波提取5-10min；然后升溫至75-85℃，調整功率為500-600w，微波提取5-10min，微波提取的全程同時伴隨功率15-30w進行紅外輔助提取后，3-6層濾布過濾，得到二階段過濾液；將所述二階段過濾液加熱回流，溫度100℃，時間10-15min，得到回流液，將所述回流液經冷凍干燥、超微粉碎，得到西蘭花葉二階段提取物；
將所述一次提取物和二次提取物均勻混合即得西蘭花葉混合粉；
所述紅外光源的波長為0.6μm-10μm，所述紅外光源功率為15-30w，所述紅外光源的輻射高度為0.5-1m。
進一步地，所述西蘭花根蛋白粉的制備方法包括如下步驟：
將西蘭花根切成0.5-1cm3的正方體，經超高壓處理，加壓方式：升壓速度90-120mpa/min，壓箱內溫度20-30℃，加壓介質為蒸餾水；在250-300mpa的壓力下，保壓2-4min，待保壓結束，在10-20s內瞬時放壓；
將經超高壓處理的西蘭花根經冷凍干燥，超微粉碎，得到一階段微粉；
將所述一階段微粉以料液比1∶10-15添加蒸餾水溶解，并將混合液進行脈沖電場處理，脈沖寬度3-8μs，脈沖場強20-45kv/cm、樣品流速30-50ml/min、、脈沖時間300-600μs，將脈沖電場處理后的混合液經過8000rpm下離心20-30min得到上清液，將上清液調節ph至4.0-5.0,攪拌靜置，6000-8000rpm離心20-40min分離得到沉淀,將沉淀反復水洗和離心分離，冷凍干燥，超微粉碎，得到西蘭花根蛋白粉。
本發明的另一目的是提供一種蛋白多肽粉的制備方法，包括如下步驟：(1)混合：按照配方，依次將大豆蛋白粉，核桃蛋白粉，西蘭花葉混合粉，西蘭花根蛋白粉，酵母發酵混合蛋白粉加入v型混合罐，并加入混合蛋白粉質量體積百分比70-85％(m/v)的純凈水，均勻混合10-20min，攪拌轉速50-100rpm，加熱至85度，保溫25min，得到混合乳液；
(2)膠磨；將所述混合乳液經過三次膠磨處理，每次膠磨時間20-30min；
(3)過濾：將經膠磨后混合乳液，利用管道式過濾機過濾雜質，壓力設置0.2-0.6mpa；
(4)均質：利用高壓均質機，在40-50mpa條件下，將經過濾后的混合乳液進行均質細化，均質時間20-40min；
(5)酶解：調整經均質后的混合乳液ph至8.0-8.5，添加質量體積千分比為2-6‰(m/v)堿性蛋白酶，攪拌，每10分鐘檢測一次ph，當ph下降到7.3后，繼續向其中添加質量體積千分比為2-6‰(m/v)木瓜蛋白酶、2-6‰(m/v)風味蛋白酶，全程控溫55℃，30-80rpm攪拌，酶解時間：20-40min；
(6)滅酶滅菌：升溫至100℃保溫5-10min；
(7)發酵：向經滅酶滅菌的混合乳液中添加質量百分比為1-4％(m/v)葡萄糖，
0.1-0.4％(m/v)的營養鹽，0.1-0.5％(m/v)乳酸菌粉，30-37℃靜置培養8-12h后，按接種量1-5％(v/v)接入酵母種子液，轉速為100-150rpm，繼續培養8-10h，發酵結束，得到發酵混合乳液；
(8)濃縮：在40-50℃條件下，低溫真空濃縮發酵混合乳液至固含量為30％(m/v)，得到發酵混合濃縮乳液。
(9)調配：按質量百分比，向所述發酵混合濃縮乳液中加入0.004％～0.1％甜味劑，0.01％～0.1％香料，0.3％～1.0％麥芽糊精。
(10)噴霧干燥：設置進風溫度150-160℃，出風溫度70-80℃，維持物料溫度小于60℃。
(11)灌裝：無菌灌裝、密封、包裝即得蛋白多肽粉。
所述乳酸菌為保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、雙歧桿菌、奶酪乳桿菌、瑞士乳桿菌、植物乳桿菌、鼠李糖乳桿菌中的一種或幾種的混合物。
所述酵母為釀酒酵母tlj2016，保藏編號為cgmccno.12789；
所述酵母種子液與酵母發酵混合蛋白粉制備方法中的種子液相同；
所述營養鹽為三聚磷酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸鉀、六偏磷酸鈉和焦磷酸鈉中的一種或多種。
所述甜味劑為甜菊糖、安賽蜜、阿斯巴甜、蔗糖中的一種或幾種。
所述香料為檸檬香精、柑橘香精、菠蘿香精、蘋果香精、芒果香精、百香果香精中的一種或幾種的混合物。
有益效果：
1、高溶解性、高消化吸收率：實驗表明，本發明蛋白多肽粉的氮溶指數和蛋白多肽粉水解度顯著高于對照組，其溶解性較高，從而說明其蛋白質水化作用較為顯著，有利于機體的消化吸收。實驗表明：機體對本發明蛋白多肽粉的消化吸收率明顯高于對照組a和對照組b，達到92.25％，而對照組a普通蛋白多肽粉的消化吸收率卻僅有56.75％，對照組b添加有益生菌，其消化吸收率有所提高，為72.5％，由此，表明本發明的蛋白多肽粉不僅含有大量生物活性物質、消化酶和益生因子，可促進營養物質的消化和吸收。
2、高抗氧化活性：本發明的蛋白多肽粉對羥自由基的清除能力顯著。且隨著蛋白多肽粉濃度的增加而增大。當濃度為16mg/ml時，對羥自由基清除率可達到98.67％，較市售的蛋白多肽粉的清除率顯著提高了38.92％；對超氧陰離子清除率可達到87.67％，較市售的蛋白多肽粉的清除率顯著提高了37.22％，故本發明的蛋白多肽粉具有很強的抗氧化功能，從而可達到延緩機體衰老等功效。
3、有效降低膽固醇特性：本發明的蛋白多肽粉具有有效降低膽固醇的特性。實驗表明：灌胃樣品不同的蛋白多肽粉比較，高脂實驗組即食用本發明實施例4中的蛋白多肽粉過程中，血清中tc含量有明顯的降低，降幅為38.31％，顯著性差異明顯(p＜0.01)。
4、有效延緩疲勞
本發明的蛋白多肽粉可有效緩解機體疲勞，促進機體產生乳酸脫氫酶(ldh)，誘導因機體運動所致肌肉中堆積的乳酸轉變成為丙酮酸，減少乳酸在肌肉中的堆積。實驗證明，在將蛋白多肽粉連續灌胃小鼠15d后，可以看出，小鼠游泳后，喂食本發明的蛋白多肽粉組對應的乳酸脫氫酶活力較實驗對照對照組，提高了34.30％，明顯高于喂食普通市售的蛋白多肽粉的酶活力，從而食用本發明的多肽粉可以加速肌肉中過多乳酸的清除代謝過程，延緩疲勞或加速疲勞的消除，能更有效提高乳酸脫氫酶活力。
5、有效延長貨架期的特性：
本發明的蛋白多肽粉在不添加任何防腐劑的前提條件下可有效延長蛋白多肽粉的貨架期。實驗表明：，在蛋白多肽粉放置第60天時，對照組的大腸桿菌的mpn值已經超過了國家標準，而實驗組的大腸桿菌mpn值為14.67，依然維持在較低的范圍內，未超出國標范圍。在放置100天后，更可以明顯地看出，對照組的大腸桿菌的mpn值為73.24，已經遠遠超出了國家標準的范圍，而實驗組mpn值為26.56，始終維持在國家標準大腸菌mpn值的范圍之內。
6、良好的感官以及風味：
本發明制備的蛋白多肽粉從外觀、質地、風味和口感任何一方面都要明顯優于市售蛋白多肽粉，特別是外觀、風味和口感極好，同時也適合不同年齡段、不同消費層次的消費者食用。
具體技術原理如下：
通過加入酵母發酵混合西蘭花葉過濾液，可在酸化促進提取過程的同時，防止西蘭花葉蛋白以及其他活性有機成分的氧化，進而對其起到保護作用，接下來通過紅外輔助微波提取西蘭花葉中的蛋白以及其活性成分，從而有效提高了其溶解效率。
通過超高壓處理以及脈沖電場處理西蘭花根，均可避免高溫提取方式導致其活性成分的損失，與此同時，有效提高其溶解度，進而有效提高消化吸收效率。
蛋白多肽粉混合后，通過膠磨、均質后，通過酵母菌以及乳酸菌的發酵作用，可有效利用發酵過程中，生物活性物質以及菌體對蛋白的分解作用，使其細化為小分子多肽，從而有效提高其溶解度，特別針對于消化系統薄弱人群，可減輕胃部負擔，不僅做到護胃養胃，且可有效提高機體對其的消化吸收效率；與此同時，該菌體進入腸道過程中，也可有效改善腸道微生物環境，從而促進新陳代謝。
綜上，以大豆、核桃、西蘭花為原料，充分利用酵母菌、乳酸菌的發酵，從而大大提高了蛋白多肽粉的溶解度，有效促進機體對蛋白多肽的消化與吸收，不僅營養、保健效果好、易于消化吸收，而且具備護胃、抵抗機體氧化、改善腸道菌群等功能，具有良好的感官以及風味，而且無需添加任何防腐劑即可保證蛋白多肽粉貨架期的食品安全。
需要說明的是本發明蛋白多肽粉的技術效果是各組分相互協同、相互作用的結果，并非簡單的原料功能的疊加，各原料組分的科學復配和提取，產生的效果遠遠超過各單一組份功能和效果的疊加，具有較好的先進性和實用性。
具體實施方式：
下面通過具體的實施方案敘述本發明。除非特別說明，本發明中所用的技術手段均為本領域技術人員所公知的方法。另外，實施方案應理解為說明性的，而非限制本發明的范圍，本發明的實質和范圍僅由權利要求書所限定。對于本領域技術人員而言，在不背離本發明實質和范圍的前提下，對這些實施方案中的物料成分和用量進行的各種改變或改動也屬于本發明的保護范圍。
實施例1西蘭花種子芽粉的制備
將西蘭花種子于功率200w，頻率25khz，室溫25℃超聲清洗2.5min，于室溫25℃，清水浸泡2.5h；將浸泡后的西蘭花種子進行低頻高壓脈沖，輸出頻率：10hz，脈沖電場的場強：110kv/m，脈寬45ms，處理時間1h；將經過低頻高壓脈沖處理后的西蘭花種子進行高壓靜電處理，脈沖電場場強：100kv/m，場強方向豎直向下，處理時間1h；將經過高壓靜電處理的西蘭花種子浸沒于清水中，浸泡1h，將浸泡后的西蘭花種子放置于鋪有濾紙的恒濕培養箱中，溫度30℃，進行led紅光照射2h，光照強度15w，通過調節光源高度，使各處理光量子通量密度均保持在85μmol·m-2·s-1，經紅光照射后在黑暗條件下培養發芽2d，得到西蘭花種子芽；將所述西蘭花種子芽利用粉碎機粉碎，得到西蘭花種子芽漿，將所述西蘭花種子芽漿于功率20w，紅外照射0.5min，垂直照射高度15cm；待處理后，將西蘭花種子芽漿放置于恒溫油浴溫度35℃，調整微波功率400w，微波提取1min后，按照西蘭花種子芽漿與蒸餾水體積比1:0.5加入蒸餾水，得到西蘭花種子芽混合液，向混合液中添加0.03％的復合酶，35℃，酶解20min，得到酶解液，將所述酶解液4500rpm離心10min，去上清，減壓濃縮，冷凍干燥，超微粉碎，過100目篩即得花種子芽粉；
所述復合酶為纖維素酶、木聚糖酶按質量比3.5：2均勻混合。
實施例2西蘭花葉混合粉的制備方法
所述西蘭花葉混合粉由西蘭花葉一階段提取物以及西蘭花二階段提取物按照質量比5:2組成；西蘭花葉混合粉的制備方法包括如下步驟：
西蘭花葉一階段提取物的制備：
(1)將西蘭花葉置于超聲波清洗機中于功率300w，頻率25khz，室溫20-30℃超聲清洗3-5min，漂洗，瀝干，按照料液質量比0.6-1：1向西蘭花葉中加入自來水，并粉碎，獲得西蘭花葉漿，并用3-6層濾布過濾，獲得西蘭花葉過濾液；向西蘭花葉過濾液中加入酵母發酵液，所述西蘭花葉過濾液與酵母發酵液體積比為1：2，攪拌靜置后，獲得混合酸溶液；
(2)將所述混合酸溶液置于玻璃平板中，平板中溶液高度為1cm，靜置于45℃恒溫油浴條件下靜置1min后，于恒溫45℃，功率250w，微波提取0.6min后，，通過紅外光源進行紅外輔助提取0.5min，紅外光源功率位20w；調整恒溫油浴溫度40℃，調整微波功率400w，微波提取0.6min后，再進行紅外提取，功率：20w，時間：0.6min；最后，在40℃恒溫油浴條件下，調整微波功率550w，微波提取0.6min，用離心機以4000r/min的轉速離心7min，獲得沉淀以及上清液，將所述沉淀經蒸餾水洗滌后，冷凍干燥、超微粉碎，得到西蘭花葉一階段提取物。
西蘭花葉二階段提取物的制備：
將上述步驟(1)過濾獲得的殘渣與步驟(2)離心獲得的上清液混合，獲得二階段混合漿，向其中加入質量5倍的80％的乙醇溶液，均勻混合，首先于恒溫油浴70℃，功率450w，微波提取7min；然后升溫至80℃，調整功率為550w，微波提取7min，微波提取的全程同時伴隨功率20w進行紅外輔助提取后，6層濾布過濾，得到二階段過濾液；將所述二階段過濾液加熱回流，溫度100℃，時間10-15min，得到回流液，將所述回流液經冷凍干燥、超微粉碎，得到西蘭花葉二階段提取物；
所述紅外光源的波長為1.5μm，所述紅外光源功率為25w，所述紅外光源的輻射高度為0.75m。
將所述一次提取物和二次提取物均勻混合即得西蘭花葉提取物。
實施例3西蘭花根蛋白粉的制備方法
將西蘭花根切成0.5cm3的正方體，經超高壓處理，加壓方式：升壓速度100mpa/min，壓箱內溫度25℃，加壓介質為蒸餾水；在260mpa的壓力下，保壓3min，待保壓結束，在15s內瞬時放壓；
將經超高壓處理的西蘭花根經冷凍干燥，超微粉碎，得到一階段微粉；
將所述一階段微粉以料液比1∶13添加蒸餾水溶解，并將混合液進行脈沖電場處理，脈沖寬度5μs，脈沖場強30kv/cm、樣品流速40ml/min、、脈沖時間400μs，將脈沖電場處理后的混合液經過8000rpm下離心25min得到上清液，將上清液調節ph至4.5,攪拌靜置，7000rpm離心30min分離得到沉淀,將沉淀反復水洗和離心分離，冷凍干燥，超微粉碎，得到西蘭花根蛋白粉。
實施例4：酵母發酵混合粉的制備
酵母發酵混合粉包括酵母蛋白粉以及發酵液粉，所述酵母發酵混合粉的制備，具體如下：
(1)搖瓶培養
取酵母斜面菌種一環，接入搖瓶中,190rpm,28℃培養25h得酵母種子液；
(2)發酵罐培養
將種子液按5％接種量，接入發酵罐中，28℃,通氣量6l/min,罐壓0.03mpa，250rpm，恒ph6.3條件下進行發酵培養，發酵至20h時，一次性添加終濃度為20-25mmol/l的l-半胱氨酸，繼續發酵26h；
所述最終發酵液中gsh終濃度達到3308mg/l；
(3)發酵液處理
將發酵液4000rpm離心10min，分離得到酵母菌體以及酵母發酵液；
(4)酵母蛋白粉的制備
將菌體在-20℃條件下預凍3h，置于真空機中抽真空10pa，再充注氮氣至大氣壓,預冷至-10℃,保持1h后,抽真空10pa,升溫至5℃,再降溫至-10℃，保持1h，升溫至20℃，并快速啟用高頻振蕩壁碎機對酵母進行破壁，破壁循環2次，獲得破壁酵母液，對破壁酵母液，在70℃條件下進行高溫自溶；高壓噴霧干燥，進風溫度：260℃，排風溫度：60℃，料液溫度：60℃；
(5)發酵液蛋白粉的制備
將發酵液調ph值為8.5～10.0在50℃-60℃進行堿提，堿提同時進行超聲，所述超聲功率為180-200w，超聲時間10-20min，然后離心5-10min，轉速4000-5000rpm，取離心沉淀物調ph5.0-6.0，離心、洗滌后冷凍干燥、超微粉碎，得到發酵液蛋白粉；
(6)將酵母蛋白粉以及發酵液蛋白粉按照質量比2：5混合均勻，最終獲得酵母發酵混合粉；
所述搖瓶培養基以g/l計組成為：(nh4)2so46、葡萄糖35、k2hpo4·3h2o3、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1，余量為水，ph6.0；
所述發酵培養基以g/l計組成為：(nh4)2so410、葡萄糖100、k2hpo4·3h2o8、kh2po40.5、酵母粉11、mnso40.1、kcl0.1、feso40.1、mgso4·7h2o0.1,余量為水，ph6.0。
實施例5護胃蛋白多肽粉的制備
依次將大豆蛋白粉7.5份，核桃蛋白粉5份，西蘭花葉混合粉5份，西蘭花根蛋白粉4.5份，西蘭花種子芽粉3.5份，釀酒酵母tlj2016發酵液混合蛋白粉2.5份加入v型混合罐，并加入混合蛋白粉質量體積百分比77％(m/v)的純凈水，均勻混合15min，攪拌轉速75rpm，加熱至85℃，保溫25min，得到混合乳液；
膠磨；將所述混合乳液經過三次膠磨處理，每次膠磨時間25min；
過濾：將經膠磨后混合乳液，利用管道式過濾機過濾雜質，壓力設置0.4mpa；
均質：利用高壓均質機，在45mpa條件下，將經過濾后的混合乳液進行均質細化，均質時間30min；
酶解：調整經均質后的混合乳液ph至8.2，添加質量體積千分比為4‰(m/v)堿性蛋白酶，攪拌，每10分鐘檢測一次ph，當ph下降到7.3后，繼續向其中添加質量體積千分比為4‰(m/v)木瓜蛋白酶、4‰(m/v)風味蛋白酶，全程控溫55℃，55rpm攪拌，酶解時間：30min；
滅酶滅菌：升溫至100℃保溫7min；
發酵：向經滅酶滅菌的混合乳液中添加質量百分比為2.5％(m/v)葡萄糖，0.25％(m/v)的營養鹽，0.3％(m/v)乳酸菌粉，35℃靜置培養10h后，按接種量3％(v/v)接入釀酒酵母tlj2016種子液，轉速為225rpm，繼續培養9h，發酵結束，得到發酵混合乳液；
濃縮：在45℃條件下，低溫真空濃縮發酵混合乳液至固含量為30％(m/v)，得到發酵混合濃縮乳液。
調配：按質量百分比，向所述發酵混合濃縮乳液中加入0.05％甜味劑，0.05％香料，0.6％麥芽糊精。
噴霧干燥：設置進風溫度155℃，出風溫度75℃，維持物料溫度小于60℃。
灌裝：無菌灌裝、密封、包裝即得蛋白多肽粉。
所述乳酸菌為保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、瑞士乳桿菌，質量比為1:1:0.5。
所述酵母為釀酒酵母tlj2016，保藏編號為cgmccno.12789；
所述酵母種子液與酵母發酵混合蛋白粉制備方法中的種子液相同；
所述營養鹽為檸檬酸鈉、檸檬酸鉀，質量比為1:2。
所述甜味劑為阿斯巴甜、蔗糖，質量比1:0.4。
所述香料為百香果香精。
實施例6護胃蛋白多肽粉的制備
將大豆蛋白粉5份，核桃蛋白粉3份，西蘭花葉混合粉3份，西蘭花根蛋白粉3份，西蘭花種子芽粉2份，釀酒酵母tlj2016發酵液混合蛋白粉1份混合，并加入混合蛋白粉質量體積百分比70％(m/v)的純凈水，均勻混合10min，攪拌轉速50rpm，加熱至85℃，保溫25min，得到混合乳液；
膠磨；將所述混合乳液經過三次膠磨處理，每次膠磨時間20min；
過濾：將經膠磨后混合乳液，利用管道式過濾機過濾雜質，壓力設置0.2mpa；
均質：利用高壓均質機，在40mpa條件下，將經過濾后的混合乳液進行均質細化，均質時間20min；
酶解：調整經均質后的混合乳液ph至8.0，添加質量體積千分比為2‰(m/v)堿性蛋白酶，攪拌，每10分鐘檢測一次ph，當ph下降到7.3后，繼續向其中添加質量體積千分比為2‰(m/v)木瓜蛋白酶、2‰(m/v)風味蛋白酶，全程控溫55℃，30rpm攪拌，酶解時間：20min；
滅酶滅菌：升溫至100℃保溫5min；
發酵：向經滅酶滅菌的混合乳液中添加質量百分比為2％(m/v)葡萄糖，0.1％(m/v)的營養鹽，0.1％(m/v)乳酸菌粉，30℃靜置培養8h后，按接種量1％(v/v)接入釀酒酵母tlj2016種子液，轉速為100rpm，繼續培養8h，發酵結束，得到發酵混合乳液；
濃縮：在40℃條件下，低溫真空濃縮發酵混合乳液至固含量為30％(m/v)，得到發酵混合濃縮乳液。
調配：按質量百分比，向所述發酵混合濃縮乳液中加入0.004％甜味劑，0.01％香料，0.3％麥芽糊精。
噴霧干燥：設置進風溫度150℃，出風溫度70℃，維持物料溫度小于60℃。
灌裝：無菌灌裝、密封、包裝即得蛋白多肽粉。
乳酸菌為保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、雙歧桿菌，質量比為1:1:1；
酵母種子液與酵母發酵混合蛋白粉制備方法中的種子液相同；
營養鹽為的三聚磷酸鈉、檸檬酸鈉按，質量比為1:2。
甜味劑為甜菊糖。
香料為檸檬香精。
實施例7護胃蛋白多肽粉的制備
依次將大豆蛋白粉10份，核桃蛋白粉7份，西蘭花葉混合粉7份，西蘭花根蛋白粉6份，西蘭花種子芽粉5份，釀酒酵母tlj2016發酵液混合蛋白粉4份加入v型混合罐，并加入混合蛋白粉質量體積百分比85％(m/v)的純凈水，均勻混合20min，攪拌轉速100rpm，加熱至85度，保溫25min，得到混合乳液；
膠磨；將所述混合乳液經過三次膠磨處理，每次膠磨時間30min；
過濾：將經膠磨后混合乳液，利用管道式過濾機過濾雜質，壓力設置0.6mpa；
均質：利用高壓均質機，在50mpa條件下，將經過濾后的混合乳液進行均質細化，均質時間40min；
酶解：調整經均質后的混合乳液ph至8.5，添加質量體積千分比為6‰(m/v)堿性蛋白酶，攪拌，每10分鐘檢測一次ph，當ph下降到7.3后，繼續向其中添加質量體積千分比為6‰(m/v)木瓜蛋白酶、6‰(m/v)風味蛋白酶，全程控溫55℃，80rpm攪拌，酶解時間：40min；
滅酶滅菌：升溫至100℃保溫10min；
發酵：向經滅酶滅菌的混合乳液中添加質量百分比為4％(m/v)葡萄糖，0.4％(m/v)的營養鹽，0.5％(m/v)乳酸菌粉，37℃靜置培養12h后，按接種量5％(v/v)接入釀酒酵母tlj2016種子液，轉速為150rpm，繼續培養10h，發酵結束，得到發酵混合乳液；
濃縮：在50℃條件下，低溫真空濃縮發酵混合乳液至固含量為30％(m/v)，得到發酵混合濃縮乳液。
調配：按質量百分比，向所述發酵混合濃縮乳液中加入0.1％甜味劑，0.1％香料，1.0％麥芽糊精。
噴霧干燥：設置進風溫度160℃，出風溫度80℃，維持物料溫度小于60℃。
灌裝：無菌灌裝、密封、包裝即得蛋白多肽粉。
所述乳酸菌為保加利亞乳桿菌、雙歧桿菌、奶酪乳桿菌、瑞士乳桿菌，質量比為1:1:2:1。
酵母種子液與酵母發酵混合蛋白粉制備方法中的種子液相同；
營養鹽為檸檬酸鉀、六偏磷酸鈉，質量比1:2。
甜味劑為安賽蜜、阿斯巴甜，質量比2:3。
香料為菠蘿香精、芒果香精，質量比2:1。
實施例8護胃蛋白多肽粉的制備
所述一種蛋白多肽粉，主要由以下重量份數的原料制備：
依次將大豆蛋白粉7份，核桃蛋白粉4份，西蘭花葉混合粉4份，西蘭花根蛋白粉4份，西蘭花種子芽粉3份，釀酒酵母tlj2016發酵液混合蛋白粉2份加入v型混合罐，并加入混合蛋白粉質量體積百分比75％(m/v)的純凈水，均勻混合12min，攪拌轉速70rpm，加熱至85℃，保溫25min，得到混合乳液；
膠磨；將所述混合乳液經過三次膠磨處理，每次膠磨時間22min；
過濾：將經膠磨后混合乳液，利用管道式過濾機過濾雜質，壓力設置0.3mpa；
均質：利用高壓均質機，在43mpa條件下，將經過濾后的混合乳液進行均質細化，均質時間25min；
酶解：調整經均質后的混合乳液ph至8.2，添加質量體積千分比為4‰(m/v)堿性蛋白酶，攪拌，每10分鐘檢測一次ph，當ph下降到7.3后，繼續向其中添加質量體積千分比為3‰(m/v)木瓜蛋白酶、4‰(m/v)風味蛋白酶，全程控溫55℃，45rpm攪拌，酶解時間：40min；
滅酶滅菌：升溫至100℃保溫6min；
發酵：向經滅酶滅菌的混合乳液中添加質量百分比為2％(m/v)葡萄糖，0.2％(m/v)的營養鹽，0.2％(m/v)乳酸菌粉，33℃靜置培養9h后，按接種量2％(v/v)接入釀酒酵母tlj2016種子液，轉速為120rpm，繼續培養8h，發酵結束，得到發酵混合乳液；
濃縮：在43℃條件下，低溫真空濃縮發酵混合乳液至固含量為30％(m/v)，得到發酵混合濃縮乳液。
調配：按質量百分比，向所述發酵混合濃縮乳液中加入0.03％甜味劑，0.03％香料，0.4％麥芽糊精。
噴霧干燥：設置進風溫度153℃，出風溫度73℃，維持物料溫度小于60℃。
灌裝：無菌灌裝、密封、包裝即得蛋白多肽粉。
乳酸菌為雙歧桿菌、奶酪乳桿菌、瑞士乳桿菌，質量比1:2:1。
酵母種子液與酵母發酵混合蛋白粉制備方法中的種子液相同；
營養鹽為三聚磷酸鈉、焦磷酸鈉，質量比1:2。
甜味劑為阿斯巴甜。
香料為檸檬香精、柑橘香精、菠蘿香精，質量比2:1:1。
實施例9護胃蛋白多肽粉的制備
依次將大豆蛋白粉8份，核桃蛋白粉6份，西蘭花葉混合粉6份，西蘭花根蛋白粉5份，西蘭花種子芽粉4份，酵母發酵混合蛋白粉3份加入v型混合罐，并加入混合蛋白粉質量體積百分比80％(m/v)的純凈水，均勻混合18min，攪拌轉速80rpm，加熱至85度，保溫25min，得到混合乳液；
膠磨；將所述混合乳液經過三次膠磨處理，每次膠磨時間28min；
過濾：將經膠磨后混合乳液，利用管道式過濾機過濾雜質，壓力設置0.5mpa；
均質：利用高壓均質機，在48mpa條件下，將經過濾后的混合乳液進行均質細化，均質時間35min；
酶解：調整經均質后的混合乳液ph至8.4，添加質量體積千分比為5‰(m/v)堿性蛋白酶，攪拌，每10分鐘檢測一次ph，當ph下降到7.3后，繼續向其中添加質量體積千分比為5‰(m/v)木瓜蛋白酶、5‰(m/v)風味蛋白酶，全程控溫55℃，70rpm攪拌，酶解時間：50min；
滅酶滅菌：升溫至100℃保溫8min；
發酵：向經滅酶滅菌的混合乳液中添加質量百分比為3％(m/v)葡萄糖，0.3％(m/v)的營養鹽，0.4％(m/v)乳酸菌粉，35℃靜置培養11h后，按接種量4％(v/v)接入釀酒酵母tlj2016種子液，轉速為140rpm，繼續培養9h，發酵結束，得到發酵混合乳液；
濃縮：在48℃條件下，低溫真空濃縮發酵混合乳液至固含量為30％(m/v)，得到發酵混合濃縮乳液。
調配：按質量百分比，向所述發酵混合濃縮乳液中加入0.08％甜味劑，0.08％香料，0.8％麥芽糊精。
噴霧干燥：設置進風溫度157℃，出風溫度78℃，維持物料溫度小于60℃。
灌裝：無菌灌裝、密封、包裝即得蛋白多肽粉。
所述乳酸菌為瑞士乳桿菌。
酵母種子液與酵母發酵混合蛋白粉制備方法中的種子液相同；
營養鹽為三聚磷酸鈉、檸檬酸鈉，質量比1:1。
甜味劑為安賽蜜。
香料為蘋果香精。
實施例10蛋白多肽粉溶解性測定
測定方法：可溶性氮的測定：利用凱氏定氮法測定；水解度的測定：鄰苯二甲醛(opa)法測定。
對照組為市售普通蛋白多肽粉，實驗組1-5分別對應本發明實施例5-9。
根據凱氏定氮法和鄰苯二甲醛(opa)法測定由實施例4-8獲得的蛋白多肽粉以及對照組市售普通蛋白多肽粉的相關參數的比較數值如下表1：
表1蛋白多肽粉溶解性測定
由表1可以看出，對照組于本發明的實驗組在蛋白含量上基本持平，但在氮溶指數和蛋白多肽粉水解度具有顯著差異，實驗組氮溶指數和蛋白多肽粉水解度顯著高于對照組，其溶解性較高，從而說明其蛋白質水化作用較為顯著，有利于機體的消化吸收。
實施例11護胃蛋白多肽粉抗氧化性能測試
(一)護胃蛋白多肽粉對羥自由基的清除作用：
實驗采用fenton反應體系。在試管中加入6mmol/lfeso42ml，不同濃度vc或待測溶液2ml，6mmol/lh2o2溶液2ml，搖勻，靜置10min，再加入6mmol/l水楊酸-乙醇2ml反應，37℃溫浴30min，于510nm測吸光值。
清除率s＝[a0-(ai-aio)]/a0×100％
式中：a0為對照,不加蛋白多肽粉；ai為某濃度時的吸光值；aio為無顯色劑時的該濃度的本底值。
表2為對照品vc，市售蛋白多肽粉以及本發明實施例5制備的蛋白多肽粉沖液對羥自由基的清除率的對照表
表2羥自由基的清除率的對照表
數據表明，本發明的蛋白多肽粉對羥自由基的清除能力顯著。且隨著蛋白多肽粉濃度的增加而增大。當濃度為16mg/ml時，對羥自由基清除率可達到98.67％，較市售的蛋白多肽粉的清除率顯著提高了38.92％，故本發明的蛋白多肽粉具有很強的抗氧化功能。這加大了蛋白多肽粉的食用和藥用價值，更為今后蛋白多肽粉的深加工指明了方向，并提供了可靠的參考。
(二)護胃蛋白多肽粉對超氧陰離子(o2-)的清除作用
參照文章“孟麗媛,王鳳舞.西蘭花多酚提取工藝及其抗氧化活性研究[j].中國食品學報,2013,13(5):62-68”關于測定樣品對超氧陰離子(o2-)的清除作用的方法：蛋白多肽樣品對超氧陰離子(o2-)的清除作用選取1、2、4、8、16mg/ml蛋白多肽樣品溶解液，測定其對超氧陰離子的清除率。
表3超氧陰離子的清除率的對照表
需要說明的是：本發明實施例6-9制備的蛋白多肽粉同樣具有上述實驗效果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
實施例12蛋白多肽粉的消化吸收率以及增重的性能試驗
選擇45日齡的雄性，平均體重為21g昆明種小鼠，隨機分為實驗組、對照組a、對照組b和氯化鈉對照組。實驗組為本發明實施例5制備的蛋白多肽粉；對照組a為市售普通蛋白多肽粉(不添加益生菌)；對照組b為市售普通蛋白多肽粉(添加益生菌)；
小鼠每組10只。各組動物均用代謝籠單籠詞養。實驗小鼠于第1天9：00開始禁食不禁水，12h后進行灌胃，正常對照組和實驗組動物分別用配好的濃度為0.1g/ml的蛋白多肽粉，每次1ml，每8h灌胃一次，連續4次。氯化鈉對照組小鼠每次只給予相同劑量的氯化鈉。收集各組小鼠類便并稱量濕重和干重，計算糞便含水量和食物消化吸收率。
計算食物消化吸收率：
實驗組、對照組a和對照組b樣品濃度為0.1g/ml，每次灌胃1ml，共灌胃4次，每只小鼠的樣品攝入量為0.4g。
按以下公式計算樣品吸收率：
表4空腹小鼠對蛋白多肽粉的吸收率
由本次實驗空腹小鼠對蛋白多肽粉的消化吸收率檢測結果可見，實驗組、對照組a和對照組b的小鼠攝入樣品的量是相同的，實驗組小鼠的消化吸收率明顯高于對照組a和對照組b，達到92.25％，而對照組a普通蛋白多肽粉的消化吸收率卻僅有56.75％，對照組b添加有益生菌，其消化吸收率有所提高，為72.5％，由此，表明本發明的蛋白多肽粉不僅含有大量生物活性物質、消化酶和益生因子，可促進營養物質的消化和吸收。
表5小鼠增重情況
從體重更可以看出，較對照組a和b，實驗組的小鼠體重有明顯的升高，與初始體重21.03g相比提高了4.40g，平均增長率為20.92％。
較對照組a以及對照組b，實驗組的增長率分別提高了12.21％以及11.35％，說明本發明制備的蛋白多肽粉不僅易于小鼠的消化吸收，而且含有豐富的營養和保健物質，可以促進機體的快速生長。
需要說明的是：本發明實施例6-9制備的蛋白多肽粉同樣具有上述實驗效果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
實施例13食用蛋白多肽粉總膽固醇的變化
選擇50日齡的雄性昆明種小鼠，實驗小鼠在實驗環境下經6d適應性喂飼后，分成6組用于降血脂實驗，每組6只，組間體重經t檢驗無顯著差異。
空白對照組，即自然生長組，只喂普通基礎飼料。
高脂模型對照組分為：
高脂飼料組：只喂高脂飼料；
高脂藥物組：喂食高脂飼料以及0.01g血脂康/kg·d；
高脂對照組：喂食高脂飼料以及0.5g市售蛋白多肽粉/kg·d；
高脂實驗組：喂食高脂飼料以及0.5g本實驗實施例5制備蛋白多肽粉/kg·d。
實驗開始前，先對空白對照組小鼠喂飼基礎飼料10天，與此同時，對高脂模型對照組喂飼高脂飼料10天，以此建立高脂小鼠動物模型后，實驗開始。高脂藥物組每天早晨經口灌胃血脂康膠囊(配制成懸液)，高脂對照組和高脂實驗組分別灌胃兩種蛋白多肽粉懸液。30d后每組各取體重均勻的3只小鼠摘眼球取血，采用全自動生化分析儀測定小鼠血清總膽固醇(tc)、甘油三酯(tg)、高密度脂蛋白膽固醇(hdl－c)含量。
表6為灌胃30d后小鼠的血清中血脂情況
高血脂是指血中膽固醇(tc)或甘油三酯(tg)過高或高密度脂蛋白膽固醇(hdl－c)過低。從表6可以看出，灌胃樣品不同的蛋白多肽粉比較，高脂實驗組即食用本發明實施例4中的蛋白多肽粉過程中，血清中tc含量有明顯的降低，降幅為38.31％，顯著性差異明顯(p＜0.01)。
需要說明的是：本發明實施例6-9制備的蛋白多肽粉同樣具有上述實驗效果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
實施例14蛋白多肽粉抗疲勞實驗
選擇50日齡的雄性昆明種小鼠，分為7組，正常飼料喂食時間為早8:00，晚6:00；蛋白粉喂食時間為早8:00。空白對照組為僅喂食正常飼料組；實驗對照組為喂食市售普通蛋白多肽粉以及普通飼料；實驗組1-5分別對應喂食本實驗發明實施例5、6、7、8、9的蛋白多肽粉以及普通飼料。連續灌胃15d后，測定蛋白多肽粉對小鼠乳酸脫氫酶活力的影響。
采用小鼠于-2～2℃水中游泳40min的方式造成疲勞。游泳停止后30min左右，每組取3只體重均勻的小鼠，采血測定乳酸脫氫酶(ldh)活力和血尿素氮(bun)。
乳酸脫氫酶(ldh)活力測定采用吸光度比色法。參考劉勝輝，臧小平，魏長賓.番石榴中vc的高效液相色譜分析[j].食品科學，2007，28(4):292－296。
血尿素氮(bun)含量的測定采用酰一肟2硫氨脲法。參考王希希，胡燕，孫軼卓，等.反相高效液相色譜法同時測定血清中5種水溶性維生素[j].四川大學學報:醫學版，2010，41(1):158－161。
不同蛋白多肽樣品對小鼠乳酸脫氫酶(ldh)活力的影響乳酸積累是導致疲勞的重要原因之一。運動過程中產生的乳酸主要是通過在肝臟中轉變成丙酮酸進行代謝的。乳酸脫氫酶(ldh)存在于組織細胞內，其功能是將運動所致肌肉中堆積的乳酸轉變成為丙酮酸，減少乳酸在肌肉中的堆積。乳酸脫氫酶是機體運動時代謝調節的重要指標之一。
表7是連續灌胃15d后，蛋白多肽粉對小鼠乳酸脫氫酶活力的影響。可以看出，小鼠游泳后，喂食本發明的蛋白多肽粉組對應的乳酸脫氫酶活力較實驗對照對照組，提高了34.30％，明顯高于喂食普通市售的蛋白多肽粉的酶活力，從而食用本發明的多肽粉可以加速肌肉中過多乳酸的清除代謝過程，延緩疲勞或加速疲勞的消除，能更有效提高乳酸脫氫酶活力。
表7蛋白多肽粉對小鼠乳酸脫氫酶活力的影響
實施例15蛋白多肽粉貯藏實驗
分別將對照組和實驗組的蛋白多肽粉密封放置于37℃恒溫箱，分別在放置第30、60、90、120天時，測定其中大腸桿菌的mpn值，測定方法參照國家標準：“gb/t4789.3-2003，食品衛生微生物學檢驗大腸菌群測定”。
對照組為市售普通蛋白多肽粉(不含防腐劑)；實驗組為由實施例5制備的蛋白多肽粉。
由表7可以看出，在蛋白多肽粉放置第60天時，對照組的大腸桿菌的mpn值已經超過了國家標準，而實驗組的大腸桿菌mpn值為14.67，依然維持在較低的范圍內，未超出國標范圍。在放置100天后，更可以明顯地看出，對照組的大腸桿菌的mpn值為73.24，已經遠遠超出了國家標準的范圍，而實驗組mpn值為26.56，始終維持在國家標準大腸菌mpn值的范圍之內。
表8不同儲藏時間下的mpn值
需要說明的是：本發明實施例6-9制備的蛋白多肽粉同樣具有上述實驗效果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
實施例16蛋白多肽粉的感官品評試驗
邀請50名人員對本發明蛋白多肽粉與市售兩種同類相同生產日期的蛋白多肽粉進行品評，感官打分，其中專業和非專業人員各25名，男女各半；打分包括外觀(20分)、質地(25分)、風味(30分)、口感(25分)四個方面，打分人員獨立進行，互不影響，以保證品評結果準確。對品評結果進行了統計，均分值取近似值，保留整數，本發明組為由實施例5制備的蛋白多肽粉，具體見表9：
表9感官品評統計結果
注：同一行內標不同小寫字母表示差異顯著(p＜0.05)，標不同大寫字母表示差異極顯著(p＜0.01)，標有相同字母表示差異不顯著(p＞0.05)。
以上結果表明，本發明制備的蛋白多肽粉從外觀、質地、風味和口感任何一方面都要明顯優于市售蛋白多肽粉，特別是外觀、風味和口感極好，同時也適合不同年齡段、不同消費層次的消費者食用。
需要說明的是：本發明實施例6-9制備的蛋白多肽粉同樣具有上述實驗效果，各實施例之間及與上述實驗效果差異性不大。
實施例17西蘭花種子芽粉成分的測定
分別測定實驗組以及對照組西蘭花種子芽粉中的抗壞血酸、花色苷以及蘿卜硫素的含量。實驗組為按照實施例1制備的西蘭花種子芽粉，對照組1為取相同的西蘭花種子于室溫25℃，清水浸泡2.5h；于25℃條件下發芽，16h光照/8h黑暗，催芽1d后，以后每6h噴去離子水1次，與實施例1采取同樣發芽天數：2d后，將西蘭花打漿，同樣按照實施例1中，按照西蘭花種子芽漿與蒸餾水體積比1:0.5加入蒸餾水，得到西蘭花種子芽混合液，向混合液中添加0.03％的復合酶，35℃，酶解20min，得到酶解液，將所述酶解液4500rpm離心10min，去上清，減壓濃縮，冷凍干燥，超微粉碎，過100目篩即得花種子芽粉；所述復合酶為纖維素酶、木聚糖酶按質量比3.5：2均勻混合。對照組2為市售的西蘭花種子芽粉。
表10西蘭花種子芽粉成分測定
抗壞血酸、花色苷作為重要活性物質，具有天然的抗氧化性，由表10可知，實驗組的抗壞血酸以及花色苷含量顯著高于對照組1以及對照組2，實驗組抗壞血酸較對照組分別提高了17.00％以及23.51％；實驗組花色苷含量較對照組分別提高了3.63mg·(100gfw)-1以及3.43mg·(100gfw)-1。與此同時，蘿卜硫素是目前發現的抗癌活性最強的異硫氰酸酯，除了其顯著的抗癌功效外，還具有消炎，抑菌，預防心血管疾病等功效，利用本發明方法萌發制備的西蘭花種子芽粉中的蘿卜硫苷以及蘿卜硫素含量顯著高于對照組，實驗組蘿卜硫苷含量較對照組分別提高了20mg·(100gfw)-1以及25mg·(100gfw)-1，實驗組蘿卜硫苷較對照組分別顯著提高了140mg·(100gfw)-1以及170mg·(100gfw)-1。由此可知，由本發明的西蘭花種子芽粉具有全面且顯著的抗氧化性兼具抗癌、抗疲勞等性能。利用本發明方法萌發制備的西蘭花種子芽粉，可全面激發了種子在發芽過程中的有效成分的合成以及后期提取過程中的有效提取。