本發明涉及酵素粉制備領域，尤其涉及一種白刺果酵素的制備方法。

背景技術：

酵素是日本和臺灣地區的說法，通常稱作“酶”，其是催化特定化學反應的蛋白質、rna或其復合體，也有專家認為酵素是由多種氨基酸、維生素及礦物質構成的活性物質，被稱為“活性的物質”和“掌握所有生命活動的物質”。眾所周知，營養素必須在酵素的作用下分解到15μm左右的小分子，才能穿過腸壁上皮細胞，被毛細血管吸收，在口腔有淀粉酵素，胃里有胃蛋白酶，肝臟則分泌脂肪酵素，而脾臟則分泌各種綜合酵素，這些酵素通過對營養素的分解促進其吸收，從而達到全面調理的綜合作用。由此可知，酵素的作用至關重要。

傳統酵素加工過程花色苷易被分解，營養損失嚴重，并且發酵周期較長，至少數月至一年。發酵周期過長，效率低，成本高。

技術實現要素：

本發明所要解決的技術問題是提供一種成本低廉、周期短的白刺果酵素的制備方法。

為解決上述問題，本發明所述的一種白刺果酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將白刺干果經超微粉碎至粒徑小于40μm，得到白刺果粉；

⑵所述白刺果粉中按1：1的重量比加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱25~30分鐘，經自然冷卻至室溫，得到白刺果原液；

⑶在所述白刺果原液中先加入預先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于50~60℃酶解3~4小時，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于40~50℃酶解2~4小時，得到酶解液；

⑷所述酶解液中按其重量依次接種1.5~2%酵母菌、4~5%乳酸菌和0.5~1%醋酸菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發酵培養1~3天，經過濾去除殘渣后得到上清液，該上清液中按10g/l加入蔗糖，得到白刺果酵素液；

⑸所述白刺果酵素液經冷凍干燥、粉碎至500~1000目后即得白刺果酵素粉。

所述步驟⑶中果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶的添加量按每噸所述白刺果原液中加入12~15g。

所述果膠酶-纖維素復合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：0.5~1的重量比混合而成。

所述步驟⑶中果膠酶是指聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶和果膠酯酶中的任意一種或組合。

所述步驟⑶中蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶的添加量按每噸所述白刺果原液中加入14~15g；所述蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶是指將蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶按1：1：1的重量比混合而成。

所述步驟⑷中酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。

所述步驟⑷中乳酸菌為嗜熱鏈球菌、植物乳桿菌、雙歧桿菌的任意組合。

所述步驟⑸中冷凍干燥的條件是指溫度為-40℃~-80℃，真空度為10~40pa。

本發明與現有技術相比具有以下優點：

1、本發明首次以青藏高原特色漿果白刺果為原料制備酵素，將白刺干果的保健活性功能與酵素生物活性功能相結合。

2、本發明采用冷凍干燥技術，花色苷活性不被破壞，營養得到最大保留，更加天然健康。

3、本發明采用酵母、乳酸菌和醋酸菌組合而成的純種混合發酵技術，實現發酵過程的全程精準控制，所得產品品質穩定，質量安全可控，且大大縮短酵素制備周期（從傳統工藝的數月至一年縮短至數周）。且比傳統方法制備的酵素營養價值更高（生物活性酶含量高）。

4、將實施例1~3的白刺果酵素分別按照gb/t23527-2009蛋白酶制劑中蛋白酶測定方法；gb/t24401-2009a-淀粉酶制劑中淀粉酶測定方法；gb/t23535-2009脂肪酶制劑中脂肪酶的測定方法和gb/t5009.171-2003保健食品中超氧化物歧化酶(sod)活性的測定方法分別測量蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶以及sod活性，取白刺果原液作為對比例。結果如表1所示：

表1

結果顯示，本發明的白刺果酵素包含豐富的生物酶活性成分，較白刺果汁具有顯著提高，取得了顯著的技術效果，是一種非常優異的保健產品。

具體實施方式

實施例1一種白刺果酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將白刺干果經超微粉碎至粒徑小于40μm，得到白刺果粉。

⑵白刺果粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱25分鐘，經自然冷卻至室溫，得到白刺果原液。

⑶在白刺果原液中先加入預先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶（37℃溫水溶解酶，并保溫20min將酶活化），攪拌均勻后，于50℃酶解3小時，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于40℃酶解2小時，得到酶解液。

其中：果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入12g。果膠酶-纖維素復合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：0.5的重量比（kg/kg）混合而成。果膠酶是指聚半乳糖醛酸酶、果膠裂解酶和果膠酯酶中的任意一種或組合。

蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入14g；蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶是指將蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶按1：1：1的重量比（kg/kg）混合而成。

⑷酶解液中按其重量依次接種1.5%酵母菌、4%乳酸菌和0.5%醋酸菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發酵培養1天，經過濾去除殘渣后得到上清液，該上清液中按10g/l加入蔗糖，得到白刺果酵素液。

其中：酵母菌是指酒精酵母或生香酵母。

乳酸菌為嗜熱鏈球菌、植物乳桿菌、雙歧桿菌的任意組合。

⑸白刺果酵素液在溫度為-40℃、真空度為10pa的條件下經冷凍干燥、粉碎至500目后即得白刺果酵素粉。

實施例2一種白刺果酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將白刺干果經超微粉碎至粒徑小于40μm，得到白刺果粉。

⑵白刺果粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱30分鐘，經自然冷卻至室溫，得到白刺果原液。

⑶在白刺果原液中先加入預先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶（37℃溫水溶解酶，并保溫20min將酶活化），攪拌均勻后，于60℃酶解4小時，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于50℃酶解4小時，得到酶解液。

其中：果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入15g。果膠酶-纖維素復合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：1的重量比（kg/kg）混合而成。果膠酶同實施例1。

蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入15g；蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶同實施例1。

⑷酶解液中按其重量依次接種2%酵母菌、5%乳酸菌和1%醋酸菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發酵培養3天，經過濾去除殘渣后得到上清液，該上清液中按10g/l加入蔗糖，得到白刺果酵素液。

其中：酵母菌、乳酸菌同實施例1。

⑸白刺果酵素液在溫度為-80℃、真空度為40pa的條件下經冷凍干燥、粉碎至1000目后即得白刺果酵素粉。

實施例3一種白刺果酵素的制備方法，包括以下步驟：

⑴將白刺干果經超微粉碎至粒徑小于40μm，得到白刺果粉。

⑵白刺果粉中按1：1的重量比（kg/kg）加入純水，攪拌混勻后，按每l混合液依次加入1g殼聚糖、1gvc、1g檸檬酸，并于70℃加熱28分鐘，經自然冷卻至室溫，得到白刺果原液。

⑶在白刺果原液中先加入預先活化的果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶（37℃溫水溶解酶，并保溫20min將酶活化），攪拌均勻后，于55℃酶解3.5小時，然后加入蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶，攪拌均勻后，于45℃酶解3小時，得到酶解液。

其中：果膠酶或纖維素酶或果膠酶-纖維素復合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入13g。果膠酶-纖維素復合酶是指將果膠酶與纖維素酶按1：0.8的重量比（kg/kg）混合而成。果膠酶是同實施例1。

蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶的添加量按每噸白刺果原液中加入14.5g；蛋白酶-淀粉酶-纖維素復合酶同實施例1。

⑷酶解液中按其重量依次接種1.8%酵母菌、4.5%乳酸菌和0.8%醋酸菌，攪拌均勻后密閉，于30℃發酵培養2天，經過濾去除殘渣后得到上清液，該上清液中按10g/l加入蔗糖，得到白刺果酵素液。

其中：酵母菌、乳酸菌同實施例1。

⑸白刺果酵素液在溫度為-60℃、真空度為25pa的條件下經冷凍干燥、粉碎至800目后即得白刺果酵素粉。