一種樹苔發酵提取物及其制備方法和應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種樹苔發酵提取物及其制備方法和應用。以樹苔為原料，用長孢洛德酵母進行發酵，再由發酵液中提取致香成分后制成。所述的長孢洛德酵母(Lodderomyces?elongisporus)保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏號為CGMCC?No.6645；保藏日期：2012年10月08日。產品中含有多種致香物質，如苯乙醇、苔黑酚單甲醚、阿蘭酚、β-苔黑酚酸甲酯、赤星衣酸甲酯、赤星衣酸乙酯、扁枝衣酸乙酯、柔扁枝衣酸甲酯等。加香評吸試驗結果表明，其能與煙香諧調，可明顯提調煙香、細膩醇和煙氣、降低刺激性、掩蓋雜氣、改善卷煙吸味，并產生一種清新的特殊香韻。
【專利說明】一種樹苔發酵提取物及其制備方法和應用

【技術領域】
[0001]本發明屬于煙用添加劑【技術領域】，具體是涉及一種由樹苔發酵物中提取致香成分得到的煙用香料。同時，本發明還涉及所述煙用香料的制備方法和在煙草加工中的具體應用。

【背景技術】
[0002]卷煙香氣是卷煙品質的核心內容。不論是國際還是國內，降低焦油量已成為卷煙生產的一個重要課題，而伴隨著焦油量的降低，煙味變淡，香氣減弱，又難以被消費者接受。在降低卷煙焦油的同時，通過添加香料添加劑增進和提高煙氣濃度和香味，是一種有效的彌補方式。
[0003]天然香精香料是高價值的精細化工產品，而原來從天然動、植物提取的天然香料，由于原料有限，提取成本高，遠遠滿足不了卷煙香料市場的需求。利用微生物發酵技術可以制備香料或進行香料的轉化，制備得到的香料為天然級產品，在提高香料產品質量的同時，節約能源、降低成本，實現了天然香料加工技術的革命。因此，人們對香料的生物合成越來越感興趣，生物技術將在天然香精香料研究和制備中發揮越來越大的作用。植物細胞中的某些多糖可以在產香酵母作用下轉化成苯乙醇等致香物質，因此，可篩選產苯乙醇等致香物質的酵母種類，以適當的天然植物材料為底物，利用現代微生物發酵技術，制備天然香料添加劑，用于卷煙加香。
[0004]樹苔(Evernia furfuracea(L.)Mann.)為松蘿科扁枝衣屬地衣植物,主要分布于云南、貴州等地，是一種重要的香料植物，其香氣特征為苔類的自然清香和濃郁的樹脂氣息，已作為橡苔的代用品，可調配素心蘭、熏衣草、百花、苔香等香精，有較好的定香作用。
[0005]在現有技術中，樹苔浸膏及凈油已被多家煙草公司用于賦予卷煙產品獨特的香氣風格，但以樹苔為底物，以產香酵母進行發酵，制備煙用香料添加劑的研究尚未見報道。


【發明內容】

[0006]本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種對改善卷煙吸味有益的樹苔發酵提取物。
[0007]本發明的另一目的是提供一種制備所述樹苔發酵提取物的方法。
[0008]本發明的目的還在于提供所述的樹苔發酵提取物在卷煙生產中的應用。
[0009]本發明的目的通過下述技術方案予以實現
[0010]*除非另有說明，本發明所采用的百分數均為質量百分數。
[0011]一種樹苔發酵提取物，其特征在于:以樹苔為原料，用長孢洛德酵母進行發酵，再由發酵液中提取致香成分即得產品；所述的長孢洛德酵母(Lodderomyces elongisporus)保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏號為CGMCC N0.6645 ;保藏日期:2012年10月08日。
[0012]制備所述樹苔發酵提取物的方法，包括以下步驟:
[0013](I)取長孢洛德酵母CGMCC 6645活化培養，得到長孢洛德酵母活化菌液；菌種活化培養條件為28°C~30°C、160~180r/min振蕩培養，培養時間為12~24小時；
[0014](2)將干燥樹苔粉碎，過40目篩，加入15~22倍蒸餾水，滅菌；
[0015](3)將活化菌液接種于樹苔物料中，接種量為1.5%~2.5% ;接種后的發酵培養條件同活化培養條件；培養時間為12~24小時；
[0016](4)發酵液過濾后8000r/min離心10分鐘，取上清液，減壓濃縮成浸膏，即為所需的樹苔發酵提取物。
[0017]步驟(4)中所述的減壓濃縮的溫度優選為45°C~65 °C。
[0018]所述的樹苔發酵提取物在卷煙生產中的應用，具體為:將樹苔發酵提取物均勻地噴灑在煙絲上，添加量為8~12g/箱煙絲。
[0019]本發明獲得的樹苔發酵提取物中含有多種揮發性成分，含量較高的致香物質主要有苯乙醇、苔黑酚單甲醚、阿蘭酚、β-苔黑酚酸甲酯、赤星衣酸甲酯、赤星衣酸乙酯、扁枝衣酸乙酯、柔扁枝衣酸甲酯等。加香評吸試驗結果表明，該樹苔發酵提取物能與煙香諧調，可明顯提調煙香、細膩醇和煙氣、降低刺激性、掩蓋雜氣、改善卷煙吸味，并產生一種清新的特殊香韻。
[0020]與現有技術相比，本發明具有以下有益效果:
[0021](I)采用現代微生物發酵技術，制備純天然香料添加劑；所用菌株易于保存，易于活化和發酵；
[0022](2)所用原料價格低廉，來源豐富；
[0023](3)生產工藝簡單、操作性、規范性及可控性強，便于實現大規模工業化生產，具有良好的開發應用前景。
[0024]保藏生物材料的說明
[0025]本發明的菌株是從烤煙葉面上分離得到，鑒定結果表明該酵母菌屬于長孢洛德酵母，該菌株命名為Lodderomyces elongisporus。該菌株已經保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；地址:中國.北京市朝陽區大屯路，中國科學院微生物研究所；保藏日期:2012年10月08日；保藏號為CGMCC N0.6645。長孢洛德酵母能轉化細胞中的多糖生成苯乙醇等致香成分。

【具體實施方式】
[0026]為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下通過實施例對本發明作進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明的保護范圍。
[0027]實施例1
[0028]1.培養基和培養條件
[0029]將實驗所用的長孢洛德酵母CGMCC 6645接種于50mL的YPD液體培養基中，28 °C、160r/min培養24小時，獲得活化的液體菌種。
[0030]2.樹苔樣品的制備
[0031]樹苔充分干燥后，粉碎，過40目篩。稱取樹苔粉末20g，加入400mL蒸餾水(20體積倍)，滅菌，備用。
[0032]3.樹苔的產香酵母菌發酵處理
[0033]將I中制備的長孢洛德酵母活化菌液8mL接種于2中準備好的樹苔樣品中(接種量為2% )，28°C、160r/min振蕩培養24小時，用于下一步實驗。
[0034]4.香料添加劑的提取
[0035]將上述發酵液過濾后8000r/min離心10分鐘，取上清液，50°C減壓濃縮至浸膏狀，即得所需的樹苔發酵提取物，保存待用。
[0036]5.產品特征及理化性質
[0037]本產品為紅棕色膏體，不澄清。產品的理化性質見表1.
[0038]表1.香料添加劑的理化性質
[0039]
檢測項目煙草浸膏
外觀及澄清度紅棕色膏體，不澄清
相對密度 d20200.942 + 0.008
折光指數 nD200.721 + 0.008
乙醇中的溶混度(25? )可溶于水，不溶于50% ~ 95%乙醇溶液
酸值27.9 ±2.4
揮發性成分總量％ (m/m)52 ±5
砷含量(以As計，mg/kg)<1.0
鉛含量(以Pb計，mg/kg)<5.0
[0040]6.卷煙加香試驗
[0041]將制備得到的香料添加劑均勻地噴灑到煙絲上，添加量為1g/箱(40kg煙絲/箱)，并以不加添加劑的煙葉作為對照。
[0042]7.評吸試驗
[0043]將處理組和對照組的煙絲放入恒溫恒濕箱內平衡24h后，制成卷煙，樣品和對照均隨機編號，由評吸專家組成的評吸小組進行感官評吸。
[0044]8.香料添加劑致香成分檢測和應用效果評價
[0045]致香成分檢測結果表明:香料添加劑含有近48種揮發性成分，其中含量較高的致香成分主要有苯乙醇、苔黑酚單甲醚、阿蘭酚、苔黑酚酸甲酯、赤星衣酸甲酯、赤星衣酸乙酯、扁枝衣酸乙酯、柔扁枝衣酸甲酯等。
[0046]加香評吸試驗結果表明，該香料添加劑與煙香較為諧調，可明顯提高煙香、細膩醇和煙氣、降低刺激性、掩蓋雜氣、改善卷煙吸味，并產生一種清新的特殊香韻。
[0047]實施例2
[0048]重復實施例1，有以下不同點:
[0049]菌種長孢洛德酵母CGMCC 6645的活化培養條件為28°C、160r/min振蕩培養，培養時間為24小時；樹苔粉碎后加22倍蒸餾水，滅菌；活化菌液接種于樹苔材料的接種量為2.5%;接種后發酵培養時間為24小時；發酵液上清減壓濃縮溫度為55°C;將制備得到的香料添加劑均勻地噴灑到煙絲上，添加量為12g/箱。
[0050]加香評吸試驗結果表明，該香料添加劑能與煙香諧調，提高香氣質，增加香氣量，改善余味，掩蓋雜氣，并具有一種清新的特殊香韻。
[0051]實施例3
[0052]重復實施例1，有以下不同點:
[0053]菌種長孢洛德酵母CGMCC 6645的活化培養條件為30°C、180r/min振蕩培養，培養時間為12小時；樹苔粉碎后加15倍蒸餾水，滅菌；活化菌液接種于樹苔材料的接種量為
1.5% ;接種后發酵培養時間為12小時；發酵液上清減壓濃縮溫度為45°C ;將制備得到的香料添加劑均勻地噴灑到煙絲上，添加量為Sg/箱。
[0054]加香評吸試驗結果表明，該香料添加劑能與煙香諧調，提高香氣質，增加香氣量，改善余味，掩蓋雜氣，并具有一種清新的特殊香韻。
[0055]實施例4
[0056]重復實施例1 ，有以下不同點:
[0057]菌種長孢洛德酵母CGMCC 6645的活化培養條件為30°C、180r/min振蕩培養，培養時間為12小時；樹苔粉碎后加22倍蒸餾水，滅菌；活化菌液接種于樹苔材料的接種量為
2.5% ;接種后發酵培養時間為12小時；發酵液上清減壓濃縮溫度為65°C ;將制備得到的香料添加劑均勻地噴灑到煙絲上，添加量為Sg/箱。
[0058]加香評吸試驗結果表明，該香料添加劑能與煙香諧調，提高香氣質，增加香氣量，改善余味，掩蓋雜氣，并具有一種清新的特殊香韻。
【權利要求】
1.一種樹苔發酵提取物，其特征在于:以樹苔為原料，用長孢洛德酵母進行發酵，再由發酵液中提取致香成分即得產品；所述的長孢洛德酵母Lodderomyces elongisporus保存在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏號為CGMCC N0.6645 ;保藏日期:2012年10月08日。
2.制備權利要求1所述樹苔發酵提取物的方法，包括以下步驟: (1)取長孢洛德酵母CGMCC6645活化培養，得到長孢洛德酵母活化菌液；菌種活化培養條件為28°C~30°C、160~180r/min振蕩培養，培養時間為12~24小時； (2)將干燥樹苔莖葉粉碎，過40目篩，加入15~22倍蒸餾水，滅菌； (3)將活化菌液接種于樹苔物料中，接種量為1.5%~2.5% ;接種后的發酵培養條件同活化培養條件；培養時間為12~24小時； (4)發酵液過濾后8000r/min離心10分鐘，取上清液，減壓濃縮成浸膏，即為所需的樹苔發酵提取物。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于:步驟(4)中所述的減壓濃縮的溫度優選為45°C~65 °C。
4.權利要求1所述的樹苔發酵提取物在卷煙生產中的應用，具體為:將樹苔發酵提取物均勻地噴灑在煙絲上，添加量為8~12g/箱煙絲。
【文檔編號】A24B3/12GK104178522SQ201410409129
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年8月19日 優先權日:2014年8月19日
【發明者】陳微, 王明鋒, 段焰青, 何雪峰, 吳俊 , 劉娟, 曾熠程, 張翼鵬 申請人:云南中煙工業有限責任公司