專利名稱：治療動脈粥樣硬化的藥物組合物及其制備方法
技術領域：
本發明涉及一種以中草藥或中草藥提取物為原料的藥物組合物，特別是一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，本發明還涉及該藥物組合物的制備方法。
背景技術：
動脈粥樣硬化(Ahterosclerosis，AS)是引發心腦血管疾病最重要的因素之一，是可致殘致死的全身性疾病，所致的心腦血管疾病是危害人類健康，引起死亡的主要疾病，動脈粥樣硬化如發生在心臟的冠狀動脈內則可發生冠心病，發生在腦動脈則可發生腦卒中。致病因素很多，且相互作用。動脈粥樣硬化現代醫學研究證明，動脈粥樣硬化主要病變特征為動脈某些部位的內膜下脂質沉積，并伴有平滑肌細胞和纖維基質成分的增殖，逐步發展形成動脈粥樣硬化斑塊。祖國傳統醫學發揮其獨有特色的診治方法，在動脈粥樣硬化的防治方面總結出了豐富的經驗，取得了顯著的臨床效果，且顯示出具有良好的挖掘潛力。

發明內容
本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提出一種新的療效顯著的治療動脈粥樣硬化的藥物組合物。
本發明還公開了該種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物的制備方法。
本發明所要解決的技術問題是通過以下的技術方案來實現的。本發明是一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，其特點是，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山楂、山楂葉或者山里紅，4-96％；(2)牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝，96-4％。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步。以上所述的藥物組合物，其特點是，其中各原料的重量百分比為，(1)山楂、山楂葉或者山里紅，30-20％；(2)牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝，70-80％。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步。本發明是一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，其特點是，它是由從原料山楂、山楂葉或者山里紅中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝中提取的丹皮酚或者丹皮酚經衍生化成丹皮酚磺酸鈉制成的藥劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為4-96％，丹皮酚或丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為96-4％。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步。以上所述的藥物組合物，其特點是，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為60-70％，丹皮酚或丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為40-30％。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步。本發明提供一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物的制備方法，其特點是，其步驟如下，(1)按下述方法提取山楂總黃酮粗提取物或山楂總黃酮精提取物、丹皮酚或丹皮酚磺酸鈉a、山楂總黃酮粗提取物；市售或采用下述方法提取取山楂或山楂葉或山里紅粗粉，以4-6倍量60％-85％乙醇回流提取2-4次，每次1-2小時，合并提取液，冷卻，濾過，回收乙醇至無醇味，以聚酰胺樹脂吸附6-10倍量柱體積的水沖柱，以2-4倍柱體積5-15％乙醇沖柱，最后以4-10倍柱體積70-95％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥即得山楂黃酮粗提取物；b、山楂總黃酮精提取物；取山楂總黃酮粗提取物，以水或者有機試劑溶解，加入活性炭攪拌吸附1-24小時，靜置，濾過，收集活性炭；用70-95％乙醇攪拌洗脫，收集洗脫液，過濾，回收乙醇，濃縮，干燥，即得山楂總黃酮精提取物；c、丹皮酚提取；取牡丹皮、根，或者徐長卿全草，或者桑葉、桑白皮或者桑枝粉碎成粗粉，加2-4份5-15％NaCl水溶液浸潤3-12小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，2-6℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，2-6℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；d、丹皮酚磺酸鈉制備；量取濃硫酸20-30份和發煙硫酸15-25份，混勻，向其中加入丹皮酚15-25份，置70-80℃水浴上繼續攪拌20-40分鐘，將反應液傾入800-1200份水中，濾過；濾液中加0.5％活性炭細粉煮沸脫色，趁熱濾過；濾液用醋酸乙酯40-100份萃取2-4次，取水層加入氯化鈉，2-6℃處放置至白色針晶完全析出，濾過，棄去濾液，結晶于60℃下干燥，即得丹皮酚磺酸鈉；(2)取山楂總黃酮粗提取物或精提取物、丹皮酚或者丹皮酚磺酸鈉，制成臨床所接受的劑型的藥劑。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步。以上所述的制備方法，其特點是，所述的有機試劑為丙二醇與水任意比的水溶液，或者乙醇與水任意比的水溶液，優選10-20％的丙二醇水溶液，或者10-20％的乙醇水溶液；所加入的活性炭為山楂總黃酮粗提取物的3-10倍；乙醇攪拌洗脫溫度為50℃-70℃；山楂總黃酮精提取物干燥品含總黃酮以無水蘆丁C27H30O16計，不低于75.0％。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步。以上所述的制備方法，其特點是，所述的藥劑劑型為注射劑，按下述方法制得取山楂總黃酮粗提取物或精提取物加水溶解，分級超濾，濾液中加入丹皮酚磺酸鈉，調PH值至PH6-9，加入注射用輔料，制成注射液；或加入支架劑、抗氧劑經凍干工序制成凍干粉針劑。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步。以上所述的制備方法，其特點是，所述的藥劑劑型為口服制劑，按下述方法制得取山楂總黃酮粗提取物或精提取物、丹皮酚或者丹皮酚磺酸鈉，充分混勻，加入藥用輔料，制口服制劑。
本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步。以上所述的制備方法，其特點是，所述的山楂總黃酮粗提取物或精提取物中含總黃酮以無水蘆丁計不低于80％。
本發明所說的山楂總黃酮從薔薇科植物山里紅(Crataegus pinnatifidaBge.var.major N.E.Br.)或山楂(Crataegus pinnatifida Bge.)的干燥葉或者果實中提取的黃酮類有效部位，其中包括槲皮素(Quercetin)、牡荊素(Vitexin)、異牡荊素(Isovitexin)、山楂納新(Cratenacin)及脫乙酰山楂納新(Deacetyl-cratenacin)、大波斯菊甙(Cosmosiin)、葡萄糖木犀草素(Glucoluteolin)、山柰酚(Kaempferol)及其衍生物、五子山楂甙(Glogoside)、天竺葵定(pelargonidine)、金絲桃甙(Hyperoside)、表兒茶精(Epicatechin)、蘆丁(Rutin)等；所說的丹皮酚從是常用蘿摩科植物徐長卿(Cynan chumpaniculatum Bge.)全草或者毛莨科植物牡丹(Paenia suffruticosa Andr.)的根、皮或者桑科植物(Morus alba)桑的桑葉、桑白皮或者桑枝中提取的丹皮酚(Paeonol)有效成分。
本發明中的藥物組合物原料(1)山楂、山楂葉或者山里紅，(2)牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝，以及原料山楂總黃酮提取物、丹皮酚、丹皮酚磺酸鈉的重量百分比均是指作為藥物有效成份的原料的重量百分比，而所選用的藥用輔料的重量則不計算在內。
本發明藥物組合物以及采用本發明方法制備的藥物組合物經實驗證明，在治療動脈粥樣硬化病變方面有確切的療效，可用于治療動脈粥樣硬化病癥，而且它還可應用在制備防治動脈粥樣硬化病變藥物上，所說的動脈粥樣硬化是發生在心臟的冠狀動脈內引發的冠心病，發生在腦動脈引發的腦卒中。
本發明藥物組合物的藥理作用還包括降低心肌耗氧量，一方面增加冠脈血流量，降低血液粘度，增加心肌營養性血液供應，對心肌缺血缺氧性心臟疾病有顯著的療效；可顯著增加腦血流量，改善血流變學特征，減少過氧化脂質的產生。對羥基、超氧陰離子、過氧亞硝基和脂類等自由基有很強的清除作用。改善腦缺血、缺氧，保護調節血管舒縮功能，保護血管免受損傷及擴張血管，改善微循環的作用。本發明藥物組合物配方少，療效高。
具體實施例方式
實施例1。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，
(1)山楂，4％；(2)牡丹皮，96％。
按常規方法提取其有效成份，制成片劑。
實施例2。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山楂葉，96％(2)牡丹根4％。
按常規方法提取其有效成份，制成膠囊劑。
實施例3。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山里紅，20％(2)徐長卿80％。
按常規方法提取其有效成份，制成口服液。
實施例4。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山楂，30％(2)桑葉70％。
按常規方法提取其有效成份，制成注射劑。
實施例5。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由從原料山楂中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料牡丹皮中提取的丹皮酚制成的片劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為4％，丹皮酚的重量百分比為96％。
實施例6。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由從原料山楂葉中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料牡丹根中提取的丹皮酚經衍生化成丹皮酚磺酸鈉制成的注射劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為96％，丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為4％。
實施例7。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由從原料山里紅中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料徐長卿中提取的丹皮酚制成的口服液，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為70％，丹皮酚的重量百分比為30％。
實施例8。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由從原料山楂中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料桑白皮中提取的丹皮酚經衍生化成丹皮酚磺酸鈉制成的片劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為60％，丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為40％，且所述的山楂總黃酮提取物中含有槲皮素Quercetin、牡荊素Vitexin、異牡荊素Isovitexin、山楂納新Cratenacin及脫乙酰山楂納新Deacetyl-cratenacin、大波斯菊甙Cosmosiin、葡萄糖木犀草素Glucoluteolin、山柰酚Kaempferol及其衍生物、五子山楂甙Glogoside、天竺葵定pelargonidine、金絲桃甙Hyperoside、表兒茶精Epicatechin和蘆丁Rutin。
實施例9。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物的制備方法，其步驟如下，(1)按下述方法取得山楂總黃酮粗提取物、丹皮酚a、山楂總黃酮粗提取物；市售；b、丹皮酚提取；取牡丹皮粉碎成粗粉，加3份10％NaCl水溶液浸潤8小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，4℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，4℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；(2)取山楂總黃酮粗提取物、丹皮酚，按常規工藝制成片劑。
實施例10。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物的制備方法，其步驟如下，(1)按下述方法提取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚磺酸鈉a、山楂總黃酮粗提取物；取山楂或山楂葉粗粉，以5倍量75％乙醇回流提取3次，每次1.5小時，合并提取液，冷卻，濾過，回收乙醇至無醇味，以聚酰胺樹脂吸附8倍量柱體積的水沖柱，以3倍柱體積10％乙醇沖柱，最后以6倍柱體積80％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥即得山楂黃酮粗提取物；b、山楂總黃酮精提取物；取山楂總黃酮粗提取物，以水溶解，加入活性炭攪拌吸附12小時，靜置，濾過，收集活性炭；用80％乙醇攪拌洗脫，收集洗脫液，過濾，回收乙醇，濃縮，干燥，即得山楂總黃酮精提取物；c、丹皮酚提取；取徐長卿全草粉碎成粗粉，加2份5％NaCl水溶液浸潤3小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，2℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，2℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；d、丹皮酚磺酸鈉制備；量取濃硫酸20份和發煙硫酸15份，混勻，向其中加入丹皮酚15份，置70℃水浴上繼續攪拌20分鐘，將反應液傾入800份水中，濾過；濾液中加0.5％活性炭細粉煮沸脫色，趁熱濾過；濾液用醋酸乙酯40份萃取2次，取水層加入氯化鈉，2℃處放置至白色針晶完全析出，濾過，棄去濾液，結晶于60℃下干燥，即得丹皮酚磺酸鈉；(2)取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚磺酸鈉，按常規工藝制成口服液。
實施例11。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物的制備方法，其步驟如下，
(1)按下述方法提取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚a、山楂總黃酮粗提取物；山里紅粗粉，以6倍量85％乙醇回流提取4次，每次2小時，合并提取液，冷卻，濾過，回收乙醇至無醇味，以聚酰胺樹脂吸附10倍量柱體積的水沖柱，以4倍柱體積15％乙醇沖柱，最后以10倍柱體積95％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥即得山楂黃酮粗提取物；b、山楂總黃酮精提取物；取山楂總黃酮粗提取物，以有機試劑溶解，加入活性炭攪拌吸附24小時，靜置，濾過，收集活性炭；用95％乙醇攪拌洗脫，收集洗脫液，過濾，回收乙醇，濃縮，干燥，即得山楂總黃酮精提取物；c、丹皮酚提取；取桑葉、桑白皮或者桑枝粉碎成粗粉，加4份15％NaCl水溶液浸潤12小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，6℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，6℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；(2)取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚按常規工藝制成膠囊。
實施例12。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物的制備方法，其步驟如下，(1)按下述方法提取山楂總黃酮粗提取物、丹皮酚磺酸鈉a、山楂總黃酮粗提取物；取山楂或山楂葉粗粉，以4倍量60％乙醇回流提取2次，每次1小時，合并提取液，冷卻，濾過，回收乙醇至無醇味，以聚酰胺樹脂吸附6倍量柱體積的水沖柱，以2倍柱體積5％乙醇沖柱，最后以4倍柱體積70％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥即得山楂黃酮粗提取物；
b、丹皮酚提取；取牡丹根粉碎成粗粉，加3份10％NaCl水溶液浸潤8小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，5℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，5℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；d、丹皮酚磺酸鈉制備；量取濃硫酸30份和發煙硫酸25份，混勻，向其中加入丹皮酚25份，置80℃水浴上繼續攪拌40分鐘，將反應液傾入1200份水中，濾過；濾液中加0.5％活性炭細粉煮沸脫色，趁熱濾過；濾液用醋酸乙酯100份萃取4次，取水層加入氯化鈉，6℃處放置至白色針晶完全析出，濾過，棄去濾液，結晶于60℃下干燥，即得丹皮酚磺酸鈉；(2)取山楂總黃酮粗提取物、丹皮酚磺酸鈉，按常規工藝制成注射液。
實施例13。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山里紅，10％；(2)桑葉，90％。
其制備方法步驟如下，(1)按下述方法提取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚磺酸鈉a、山楂總黃酮粗提取物；取山里紅粗粉，以5倍量70％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，冷卻，濾過，回收乙醇至無醇味，以聚酰胺樹脂吸附9倍量柱體積的水沖柱，以3倍柱體積5％乙醇沖柱，最后以8倍柱體積75％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥即得山楂黃酮粗提取物；b、山楂總黃酮精提取物；取山楂總黃酮粗提取物，以丙二醇水溶液溶解，加入山楂總黃酮粗提取物3倍的活性炭攪拌吸附12小時，靜置，濾過，收集活性炭；用90％乙醇在50℃下攪拌洗脫，收集洗脫液，過濾，回收乙醇，濃縮，干燥，即得山楂總黃酮精提取物，山楂總黃酮精提取物干燥品含總黃酮以無水蘆丁C27H30O16計，為75.0％。
c、丹皮酚提取；取桑葉粉碎成粗粉，加3份5％NaCl水溶液浸潤11小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，4℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，4℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；d、丹皮酚磺酸鈉制備；量取濃硫酸25份和發煙硫酸20份，混勻，向其中加入丹皮酚20份，置75℃水浴上繼續攪拌30分鐘，將反應液傾入1000份水中，濾過；濾液中加0.5％活性炭細粉煮沸脫色，趁熱濾過；濾液用醋酸乙酯80份萃取3次，取水層加入氯化鈉，4℃處放置至白色針晶完全析出，濾過，棄去濾液，結晶于60℃下干燥，即得丹皮酚磺酸鈉；(2)取山楂總黃酮精提取物加水溶解，分級超濾，濾液中加入丹皮酚磺酸鈉，調PH值至PH6，加入注射用輔料，制成注射液。
實施例14。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山里紅，40％；(2)桑白皮60％。
其制備方法步驟如下，(1)按下述方法提取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚a、山楂總黃酮粗提取物；取山里紅粗粉，以6倍量65％乙醇回流提取4次，每次1小時，合并提取液，冷卻，濾過，回收乙醇至無醇味，以聚酰胺樹脂吸附7倍量柱體積的水沖柱，以4倍柱體積6％乙醇沖柱，最后以5倍柱體積75％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥即得山楂黃酮粗提取物；b、山楂總黃酮精提取物；取山楂總黃酮粗提取物，乙醇水溶液溶解，加入山楂總黃酮粗提取物10倍的活性炭攪拌吸附18小時，靜置，濾過，收集活性炭；用95％乙醇在70℃下攪拌洗脫，收集洗脫液，過濾，回收乙醇，濃縮，干燥，即得山楂總黃酮精提取物，山楂總黃酮精提取物干燥品含總黃酮以無水蘆丁C27H30O16計，為80％。
c、丹皮酚提取；取桑白皮粉碎成粗粉，加4份5％NaCl水溶液浸潤4小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，3℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，3℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；(2)取山楂總黃酮精提取物加水溶解，分級超濾，濾液中加入丹皮酚，調PH值至PH9，加入支架劑、抗氧劑經凍干工序制成凍干粉針劑。
實施例15。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山楂，50％；(2)桑枝，50％。
其制備方法步驟如下，(1)按下述方法提取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚a、山楂總黃酮粗提取物；取山楂粗粉，以4倍量60％乙醇回流提取2次，每次2小時，合并提取液，冷卻，濾過，回收乙醇至無醇味，以聚酰胺樹脂吸附6倍量柱體積的水沖柱，以2倍柱體積5％乙醇沖柱，最后以4倍柱體積70％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥即得山楂黃酮粗提取物；b、山楂總黃酮精提取物；取山楂總黃酮粗提取物，以10％或20％丙二醇水溶液溶解，加入山楂總黃酮粗提取物的5倍的活性炭攪拌吸附6小時，靜置，濾過，收集活性炭；用70％乙醇60℃攪拌洗脫，收集洗脫液，過濾，回收乙醇，濃縮，干燥，即得山楂總黃酮精提取物，山楂總黃酮精提取物干燥品含總黃酮以無水蘆丁C27H30O16計，為85.0％。
c、丹皮酚提取；取桑枝粉碎成粗粉，加2份5％NaCl水溶液浸潤8小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，5℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，4℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；(2)取取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚，充分混勻，加入藥用輔料，制口服制劑。
實施例16。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山楂，80％；(2)徐長卿20％。
其制備方法步驟如下，(1)按下述方法提取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚磺酸鈉a、山楂總黃酮粗提取物；山楂粗粉，以5倍量70％乙醇回流提取3次，每次2小時，合并提取液，冷卻，濾過，回收乙醇至無醇味，以聚酰胺樹脂吸附9倍量柱體積的水沖柱，以3倍柱體積15％乙醇沖柱，最后以9倍柱體積95％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥即得山楂黃酮粗提取物；
b、山楂總黃酮精提取物；取山楂總黃酮粗提取物，以10％或20％乙醇水溶液溶解，加入山楂總黃酮粗提取物的8倍的活性炭攪拌吸附20小時，靜置，濾過，收集活性炭；用85％乙醇80℃攪拌洗脫，收集洗脫液，過濾，回收乙醇，濃縮，干燥，即得山楂總黃酮精提取物，山楂總黃酮精提取物干燥品含總黃酮以無水蘆丁C27H30O16計，為90.0％。
c、丹皮酚提取；取徐長卿全草粉碎成粗粉，加3份12％NaCl水溶液浸潤8小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，4℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，4℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；d、丹皮酚磺酸鈉制備；量取濃硫酸23份和發煙硫酸18份，混勻，向其中加入丹皮酚18份，置70℃水浴上繼續攪拌35分鐘，將反應液傾入1100份水中，濾過；濾液中加0.5％活性炭細粉煮沸脫色，趁熱濾過；濾液用醋酸乙酯50份萃取4次，取水層加入氯化鈉，3℃處放置至白色針晶完全析出，濾過，棄去濾液，結晶于60℃下干燥，即得丹皮酚磺酸鈉；(2)取山楂總黃酮精提取物、丹皮酚磺酸鈉，充分混勻，加入藥用輔料，制口服制劑。
實施例17。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由從原料山楂、山楂葉或者山里紅中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝中提取的丹皮酚經衍生化成丹皮酚磺酸鈉制成的注射劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為30％，丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為70％。其制備方法步驟如下，取山楂總黃酮提取物加水溶解，分級超濾，濾液中加入丹皮酚磺酸鈉，調PH值至PH8，加入注射用輔料，制成注射液；或加入支架劑、抗氧劑經凍干工序制成凍干粉針劑。
實施例18。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由從原料山楂、山楂葉或者山里紅中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝中提取的丹皮酚制成的注射劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為10％，丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為90％。其制備方法步驟如下，取山楂總黃酮提取物加水溶解，分級超濾，濾液中加入丹皮酚，調PH值至PH7，加入注射用輔料，制成注射液；或加入支架劑、抗氧劑經凍干工序制成凍干粉針劑。
實施例19。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由從原料山楂、山楂葉或者山里紅中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝中提取的丹皮酚經衍生化成丹皮酚磺酸鈉制成的注射劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為80％，丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為20％。其制備方法步驟如下，取山楂總黃酮提取物加水溶解，分級超濾，濾液中加入丹皮酚磺酸鈉，調PH值至PH6，加入注射用輔料，制成注射液；或加入支架劑、抗氧劑經凍干工序制成凍干粉針劑。
實施例20。一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，它是由從原料山楂、山楂葉或者山里紅中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝中提取的丹皮酚經衍生化成丹皮酚磺酸鈉制成的口服制劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為50％，丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為50％。其制備方法步驟如下，(1)按下述方法取得山楂總黃酮粗提取物、丹皮酚磺酸鈉a、山楂總黃酮粗提取物；市售；b、丹皮酚提取；取牡丹皮、根，或者徐長卿全草，或者桑葉、桑白皮或者桑枝粉碎成粗粉，加3份10％NaCl水溶液浸潤6小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，4℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，4℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；c、丹皮酚磺酸鈉制備；量取濃硫酸28份和發煙硫酸23份，混勻，向其中加入丹皮酚18份，置80℃水浴上繼續攪拌40分鐘，將反應液傾入900份水中，濾過；濾液中加0.5％活性炭細粉煮沸脫色，趁熱濾過；濾液用醋酸乙酯90份萃取4次，取水層加入氯化鈉，4℃處放置至白色針晶完全析出，濾過，棄去濾液，結晶于60℃下干燥，即得丹皮酚磺酸鈉；(2)取山楂總黃酮粗提取物、丹皮酚磺酸鈉，充分混勻，加入藥用輔料，制口服制劑。
實施例21。實施例19制備的注射劑對冠心病大鼠的保護作用實驗。
實驗目的探討藥物對冠心病大鼠心電圖及血脂的影響，評價治療冠心病的藥物療效。
實驗方法wistar雄性大鼠隨機分成以下各組給藥，每組10只。正常對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，模型對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，參麥注射液組(5ml.kg-1，iv.)，注射劑小劑量組(2.5ml.kg-1，iv.)，注射劑中劑量組(5ml.kg-1，iv.)，注射劑大劑量組(10.0ml.kg-1，iv.)。正常組喂食基礎飼料，其余各組喂食高脂飼料，各組皆自由飲水。各組共喂飼11d，造模組及給藥組在第4d及第10d，給予垂體后葉素(pie)(10U·kg-1·d-1)皮下注射。于第12天，測試各組大鼠心電圖，經頸主A采血，作血脂測定。參照徐氏標準，進行心電圖觀察，具備下列條件之；者判斷為心肌缺血陽性①ST段水平向下或者向上偏移≥0.1mv。②T波高聳，超過同導聯R波的1/2。③T波高聳伴ST段移位。陰性判斷指標①ST段斜形偏移，或水平偏移＜0.1mv；②T波低平或雙向倒置。
實驗結果注射劑能明顯減少心肌缺血陽性發生率，降低模型血脂，從而對冠心病大鼠起明顯的保護作用，結果見表1、2。
表1 對冠心病大鼠心電圖的影響(X±S)

**p＜0.01與模型組比較；△△p＜0.01與正常對照組比較。
表2 對冠心病大鼠血脂的影響(X±S)

**p＜0.01與模型組比較；△△p＜0.01與正常對照組比較。
實施例22。實施例19制備的注射劑對動脈粥樣硬化家兔血管內皮的保護作用實驗。
實驗目的探討藥物保護血管內皮、防治動脈粥樣硬化的療效以及作用機制。
實驗方法42只家兔單籠飼養，自由攝食、飲水1周后，隨機分成以下各組，每組7只。分別為正常對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，模型對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，參麥注射液組(2.5ml.kg-1，iv.)，注射劑小劑量組(1.25ml.kg-1，iv.)，注射劑中劑量組(2.5ml.kg-1，iv.)，注射劑大劑量組(5ml.kg-1，iv.)。除正常組喂食基礎飼料外，其余各組持續膽固醇量1g/d的高膽固醇飼料給予，食完后自由食動物油飼料，各組皆自由飲水。并于造模的第1天，一次性以250mg/kg的劑量耳緣靜脈注射牛血清白蛋白(牛血清白蛋白Sigma公司生產，批號020806)。各組按上述劑量每日給藥1次，并于每月抽血1次，檢測血中一氧化氮(NO)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的變化，3月后結束實驗。
實驗結果注射劑能明顯抑制血中NO含量的降低，能在一定程度上升高6-keto-PGF1α含量。因此注射劑能調節血管舒縮功能，保護血管免受損傷，從而起到抗動脈粥樣硬化作用，結果見表3、4。
表3 對家兔血中NO的影響(X±S，n＝7，umol/L)


**p＜0.01與正常對照組比較；△p＜0.05，△△p＜0.01與模型對照組比較。
表4 對家兔血中6-keto-PGF1α的影響(X±S，n＝7，pg/mL)

**p＜0.01與正常對照組比較；△p＜0.05，△△p＜0.01與模型對照組比較。
實施例23。實施例19制備的注射劑對麻醉犬血流動力學的影響實驗。
實驗目的探討藥物對麻醉犬血流動力學的影響，評價藥物療效。
實驗方法犬30只，分為5組，每組6只。將犬以戊巴比妥鈉30mg/kg靜脈注射麻醉，背位，切開頸部皮膚，分離氣管，插管，接呼吸機。分離股靜脈插入靜脈插管，緩慢恒速輸入生理鹽水(約1ml/min)；分離股動脈插入動脈插管(管內充滿500u/ml的肝素生理鹽水)，并測量動脈壓。人工呼吸下，于第四肋間開胸，剪開心包膜，縫于胸壁，分離升主動脈根部和左冠狀動脈前降支，放置適宜內徑的電磁血流量計探頭，連接于電磁血流量計上測量心輸出量和冠狀動脈血流量。將左心室插管(管內充滿500u/ml的肝素生理鹽水)經左心室心尖部創口插入左心室內，測量左心室內壓和左室舒張末期壓；將針狀電極插入犬四肢皮下記錄心電圖。待穩定后，用恒流泵經股靜脈給藥(1ml/min)，直接記錄動脈收縮壓、舒張壓、平均動脈壓、心率、心輸出量和冠狀動脈血流量，并于八導生理記錄儀上描記心電圖、左室內壓、左室舒張末期壓、動脈壓曲線。測量并計算給藥前后各時間段麻醉犬的動脈壓、心率、心輸出量、冠狀動脈血流量、左室內壓、左室舒張末期壓、心肌舒張參數、心肌收縮參數、左室開始收縮至左室左室內壓上升速率達峰值的時間、每搏輸出量、心指數、心搏指數、左室做功指數、總耗氧指數及總外周血管阻力等。實驗共分5組，正常對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，模型對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，參麥注射液組(1ml.kg-1，iv.)，注射劑小劑量組(0.5ml.kg-1，iv.)，注射劑中劑量組(1ml.kg-1，iv.)，注射劑大劑量組(2ml.kg-1，iv.)。術畢，待觀察指標穩定后記錄藥前值，靜脈給藥，于藥后30、45、60、90、120、150、180min記錄，將各項觀測指標進行統計學處理。
實驗結果(一)對麻醉犬總外周血管阻力的影響藥物注射劑三個劑量組能明顯降低麻醉犬總外周血管阻力(與用藥前比較，p＜0.05)。結果見表5。
表5 對麻醉犬總外周血管阻力的影響(X±S)(n＝6)

注與給藥前(即0min)比較，*p＜0.05**p＜0.01。
(二)對麻醉犬左室舒張末期壓的影響藥物注射劑三個劑量組均能明顯降低麻醉犬左室舒張末期壓(與用藥前比較，p＜0.05，p＜0.01)。結果見表6。
表6 對麻醉犬左室舒張末期壓的影響(X±S)(n＝6)

注與給藥前(即0min)比較，*p＜0.05**p＜0.01。
(三)對麻醉犬冠狀動脈血流量的影響藥物注射劑三個劑量組能明顯增加麻醉犬冠狀動脈血流量(與用藥前比較，p＜0.05，p＜0.01)。結果見表7。
表7 對麻醉犬冠狀動脈血流量的影響(X±S)(n＝6)

注與給藥前(即0min)比較，*p＜0.05。
(四)對麻醉犬左室射血時間的影響藥物注射劑三個劑量組能明顯縮短麻醉犬左室射血時間(與用藥前比較，p＜0.05)。結果見表8。
表8 對麻醉犬左室射血時間的影響(X±S)(n＝6)

注與給藥前(即0min)比較，*p＜0.05。
(五)對麻醉犬總耗氧指數的影響藥物注射劑三個劑量組能明顯縮短麻醉犬總耗氧指數(與用藥前比較，p＜0.05，p＜0.01)。結果見表9。
表9 對麻醉犬總耗氧指數的影響(X±S)(n＝6)


注與給藥前(即0min)比較，*p＜0.05**p＜0.01。
(六)對其它血流動力學參數的影響藥物注射劑三個劑量組對動脈收縮壓、舒張壓、平均動脈壓、心率、心電圖、左室內壓、心肌收縮參數、心肌舒張參數、左室開始收縮至左室左室內壓上升速率達峰值的時間等均無明顯影響。
實施例24。實施例19制備的注射劑對麻醉犬急性心肌缺血的影響實驗。
實驗目的探討藥物對麻醉犬急性心肌缺血的影響，評價藥物療效。
實驗方法手術方法與前相似，術后在心臟表面縫置多點固定式心外膜電極，連接多道生理記錄儀，描記心外膜電圖，結扎冠脈15min后，記錄各項指標，然后給藥，并記錄30、60、120、180min的心外膜電圖，計算心肌缺血程度(∑-ST)及心肌缺血范圍(N-ST)，藥后3h，取心稱重，在-4～-8℃冰凍30～50min，在心臟結扎線以下，平行冠狀溝將心室橫斷切成5片，置于硝基四唑蘭(N-BT)染色15min，用落點法(24點/cm)測量每片心肌雙側梗塞區(N-BT染區)，每片心肌稱重，計算梗塞面積及梗塞百分比。
實驗結果(一)對心肌缺血心外膜電圖的影響1.對心肌缺血程度(∑-ST)的影響藥物注射劑三個劑量組均有明顯減輕心肌缺血程度(∑-ST)的作用(與用藥前比較，p＜0.05，p＜0.01)。結果見表10。
表10 對心肌缺血程度(∑-ST)的影響(X±S)(n＝6)


注與給藥前(即0min)比較，*p＜0.05**p＜0.01。
2.對心肌缺血范圍(N-ST)的影響藥物注射劑三個劑量組均有不同程度減小心肌缺血范圍(N-ST)的趨勢。結果見表11。
表11 對心肌缺血范圍(N-ST)的影響(X±S)(n＝6)

注與給藥前(即0min)比較。
(二)對急性心肌梗塞范圍的定量組織學測量用N-BT染色顯示心肌梗塞范圍與心外膜電圖所測定的結果一致，具有明顯減小心肌梗塞范圍的效應，結果見表12。
表12 對急性心肌梗塞范圍的影響(N-BT染色定量組織學測定)(X±S)


注與對照組比較，**p＜0.01。
實施例25。實施例13制備的注射劑對小鼠耳廓微循環的影響實驗。
實驗目的探討藥物對小鼠耳廓微循環的影響，評價藥物療效。
實驗方法取ICR小鼠，雌雄各半，體重20-22g，隨機分為5組。即正常對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，模型對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，參麥注射液組(10ml.kg-1，iv.)，注射劑小劑量組(5ml.kg-1，iv.)，注射劑中劑量組(10ml.kg-1，iv.)，注射劑大劑量組(20ml.kg-1，iv.)。小鼠腹腔注射25％烏來糖2.5g/kg麻醉。待小鼠麻醉后按10ml/kg靜脈注射各組藥物，并立即按方法和文獻將小鼠固定在觀察臺上(耳托上和耳廓表面滴加少許香柏油)(整個操作過程在2min內完成)，用顯微系統觀察小鼠耳廓微循環，同時腹腔注射鹽酸腎上腺素注射劑1mg/kg，記錄注射腎上腺素前和注射后5、10、20、30min小鼠微循環細靜脈、細動脈的管徑和血流速度。
實驗結果實驗結果顯示注射劑低、中、高三個劑量組對血流速度無明顯影響，但均能對抗腎上腺素引起的微血管收縮，擴張小鼠微血管細靜脈和細動脈，與空白對照組比較差異顯著(p＜0.05或p＜0.01)，且呈劑量依賴性。表明藥物具有改善微循環的作用。結果見表13、14、15。
表13 注射劑對小鼠耳廓微循環血流速度的影響(X+S)(n＝12)


表14 注射劑對小鼠耳廓微靜脈管徑的影響(X+S)(n＝12)

注與空白對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01。
表15 注射劑對小鼠耳廓微動脈管徑的影響(X+S)(n＝12)

注與空白對照組比較，**p＜0.01。
實施例26。實施例19制備的注射劑對大鼠腦缺血缺氧的影響實驗。
實驗目的探討藥物對大鼠腦缺血缺氧的影響，評價藥物療效。
實驗方法取體重180-220g健康大鼠，隨機均分成5組即正常對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，模型對照組(生理鹽水10ml.kg-1，iv.)，參麥注射液組(5ml.kg-1，iv.)，注射劑小劑量組(2.5ml.kg-1，iv.)，注射劑中劑量組(5.0ml.kg-1，iv.)，注射劑大劑量組(10ml.kg-1，iv.)。各組均采用口服給藥，連續10d，末次藥后30min，ig45mg·kg-1戊巴比妥麻醉，手術結扎大鼠雙側頸總動脈，準確記錄結扎完畢至動物死亡時間。
實驗結果實驗結果顯示，受試藥能明顯延長雙側頸動脈結扎的腦缺血大鼠的存活時間，與空白對照組比較差異顯著(p＜0.05或p＜0.01)，且呈劑量依賴性。表明藥物具有改善大鼠腦缺血的作用。結果見表16。
表16 對大鼠腦缺血缺氧的影響(X+S)

注與空白對照組比較，**p＜0.01。
權利要求
1.一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，其特征在于，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山楂、山楂葉或者山里紅，4-96％；(2)牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝，96-4％。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，其中各原料的重量百分比為，(1)山楂、山楂葉或者山里紅，30-20％；(2)牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝，70-80％。
3.一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，其特征在于，它是由從原料山楂、山楂葉或者山里紅中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝中提取的丹皮酚或者丹皮酚經衍生化成丹皮酚磺酸鈉制成的藥劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為4-96％，丹皮酚或丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為96-4％。
4.根據權利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為60-70％，丹皮酚或丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為40-30％。
5.一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物的制備方法，其特征在于，其步驟如下，(1)按下述方法提取山楂總黃酮粗提取物或山楂總黃酮精提取物、丹皮酚或丹皮酚磺酸鈉a、山楂總黃酮粗提取物；市售或采用下述方法提取取山楂或山楂葉或山里紅粗粉，以4-6倍量60％-85％乙醇回流提取2-4次，每次1-2小時，合并提取液，冷卻，濾過，回收乙醇至無醇味，以聚酰胺樹脂吸附，3倍量以上柱體積的水沖柱，以2倍以上柱體積5-15％乙醇沖柱，最后以3-10倍柱體積70-95％乙醇洗脫，回收乙醇，干燥即得山楂黃酮粗提取物；b、山楂總黃酮精提取物；取山楂總黃酮粗提取物，以水或者有機溶劑溶解，加入活性炭攪拌吸附1-24小時，靜置，濾過，收集活性炭；用70-95％乙醇攪拌洗脫，收集洗脫液，過濾，回收乙醇，濃縮，干燥，即得山楂總黃酮精提取物；c、丹皮酚提取；取牡丹皮、根，或者徐長卿全草，或者桑葉、桑白皮或者桑枝粉碎成粗粉，加2-4份5-15％NaCl水溶液浸潤3-12小時，通水蒸汽進行蒸餾，收集蒸餾液，2-10℃放置12小時以上，至白色結晶完全析出，濾過，得丹皮酚粗晶，加乙醇使溶解，再加適量蒸餾水至溶液略顯乳白色，2-10℃放置12小時以上，至針晶完全析出，濾過，結晶于25℃下真空干燥，即得丹皮酚針晶；d、丹皮酚磺酸鈉制備；量取濃硫酸20-30份和發煙硫酸15-25份，混勻，向其中加入丹皮酚15-25份，置70-80℃水浴上繼續攪拌20-40分鐘，將反應液傾入800-1200份水中，濾過；濾液中加0.5％活性炭細粉煮沸脫色，趁熱濾過；濾液用醋酸乙酯40-100份萃取2-4次，取水層加入氯化鈉，2-6℃處放置至白色針晶完全析出，濾過，棄去濾液，結晶于60℃下干燥，即得丹皮酚磺酸鈉；(2)取山楂總黃酮粗提取物或精提取物、丹皮酚或者丹皮酚磺酸鈉，制成臨床所接受的劑型的藥劑。
6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的有機溶劑為丙二醇與水任意比的水溶液，或者乙醇與水任意比的水溶液；所加入的活性炭為山楂總黃酮粗提取物的3-10倍；乙醇攪拌洗脫溫度為50℃-70℃；山楂總黃酮精提取物干燥品含總黃酮以無水蘆丁(C27H30O16)計，不低于80.0％。
7.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的有機溶劑為10-20％的丙二醇水溶液，或者10-20％的乙醇水溶液。
8.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的藥劑劑型為注射劑，按下述方法制得取山楂總黃酮粗提取物或精提取物加水溶解，分級超濾，濾液中加入丹皮酚磺酸鈉，調PH值至PH6-9，加入注射用輔料，制成注射液；或加入支架劑、抗氧劑等經凍干工序制成凍干粉針劑。
9.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的藥劑劑型為口服制劑，按下述方法制得取山楂總黃酮粗提取物或精提取物、丹皮酚或者丹皮酚磺酸鈉，充分混勻，加入藥用輔料，制口服制劑。
10.根據權利要求8或9所述的制備方法，其特征在于，所述的山楂總黃酮粗提取物或精提取物中含總黃酮以無水蘆丁計不低于80％。
全文摘要
本發明是一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，其特征在于，它是由以下重量百分比的原料制成的藥劑，(1)山楂、山楂葉或者山里紅，9－91％；(2)牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝，91－9％。本發明還提供了另一種治療動脈粥樣硬化的藥物組合物，其特征在于，它是由從原料山楂、山楂葉或者山里紅中提取的山楂總黃酮提取物，以及從原料牡丹皮、根或者徐長卿或者桑葉、桑白皮、桑枝中提取的丹皮酚或者丹皮酚磺酸鈉制成的藥劑，其中，山楂總黃酮提取物的重量百分比為9－91％，丹皮酚或丹皮酚磺酸鈉的重量百分比為91－9％。本發明還提供了上述藥物組合物的制備方法。其配方簡單、在治療動脈粥樣硬化病變方面有確切的療效。
文檔編號A61P9/00GK1883585SQ20051004077
公開日2006年12月27日 申請日期2005年6月24日 優先權日2005年6月24日
發明者肖偉, 戴翔翎, 凌婭, 李明慧, 丁崗 申請人:江蘇康緣藥業股份有限公司