專利名稱：一種由腫節風和白花蛇舌草制成的藥物組合物的制作方法
專利說明一種由腫節風和白花蛇舌草制成的藥物組合物 本發明涉及一種主要用于治療腫瘤的藥物組合物，具體涉及一種主要由腫節風或其提取物和白花蛇舌草或其提取物制成的藥物組合物及其制備方法，屬于醫藥技術領域。2000年全球新發癌癥病例約1000萬，死亡620萬，現患病例2200萬。癌癥正在成為新世紀人類的第一殺手。70年代以來，我國癌癥發病率及死亡率一直呈上升趨勢，至90年代的20年間，癌癥死亡率上升29.42％，年齡調整死亡率上升11.56％。2000年癌癥發病人數約180～200萬，死亡140～150萬，在城鎮居民中，癌癥已占死因的首位。目前現代醫學對癌癥的治療，主要是手術治療配合放療、化療。手術雖能去除原發病灶，但不能從根本上杜絕癌細胞的再生與繁殖，而這正是日后癌癥復發和轉移的根源；放、化療雖能殺滅癌細胞，但同時也使大量的正常組織細胞受到損害，誘發胃腸反應、骨髓抑制和肝腎、心臟功能損害，使病人的身體更加虛弱，難以接受進一步治療而中醫中藥治療癌癥更有悠久的歷史，經過歷代醫家反復實踐、潛心摸索，已形成了自身獨特的理論體系，并在數千年的臨床發展中形成了自己獨特的一些治療法則，如扶正祛邪、清熱解毒、活血化瘀等法則，特別是近年來經過眾多中醫、中西醫結合工作者的不斷努力、大膽實踐，也已證實中醫藥治療癌癥具有抗癌抑瘤，提高機體免疫功能，降低放化療毒副反應，調節機體陰陽平衡，對癌癥的治療起到了藥到病減或藥到病除的效果，提高帶癌生存率及生存質量的突出作用，特別是中醫藥對癌癥手術后的康復，以及對放化療的增效減毒方面發揮了重要的作用，深受患者的歡迎。
腫節風屬金粟蘭科草珊瑚屬植物草珊瑚Sarcandra glabra(Thunb.)Nakai的干燥全草，又名九節蘭、九節茶、節節行、草珊瑚、野靛青、驅骨風、接骨蓮，為常綠小灌木，分布在我國江南一帶。其味苦、辛，性平，歸心、肝經，具有清熱涼血，活血消斑之功效。對胰腺癌、肝癌、胃癌、食道癌、直腸癌、白血病、淋巴腫瘤等惡性腫瘤有顯著的效果。腫節風中的香豆素類、有機酸類為其抗腫瘤的主要有效成分。
白花蛇舌草Oldenlandia diffusa(Willd)Roxb始載于《廣西中藥志》，為茜草科植物白花蛇舌草的帶根全草。其葉形似蛇舌，開白花，故名。別名蛇舌草、矮腳白花蛇利草、目目生珠草、節節結蕊草等，廣泛分布于長江流域及以南，主產福建、廣東、廣西等地、其味苦、甘，性寒，入心、肝、脾三經，有清熱解毒，活血化瘀，消炎止痛等功效。現代藥理研究表明白花蛇舌草具有抗菌消炎、清熱解毒、活血化瘀、利水通淋及抗腫瘤等作用，可用于治療胃癌、食管癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、肺癌、肝癌、子宮頸癌、卵巢癌、膀胱癌等，臨床應用廣泛。白花蛇舌草中的三萜混合酸，香豆素類和多糖類為抗癌的有效成分。
目前，利用腫節風和白花蛇舌草的相互作用，配伍組方，制備用于抗腫瘤方面的藥物，尚未見報道。本發明的目的是提供一種具有抗腫瘤作用的新的藥物組合物，它主要由腫節風和白花蛇舌草制成，其重量比為腫節風∶白花蛇舌草1∶0.01～10，優選為腫節風∶白花蛇舌草1∶0.02～6，最優為腫節風∶白花蛇舌草1∶0.13。
本發明藥物組合物的制備方法為腫節風和白花蛇舌草用適宜的溶劑分別或混合經過提取加工得到其提取物，總提取物再和藥用輔料混合加工制成各種制劑。適宜的溶劑是指藥學上常用的溶劑，優選水或乙醇，提取方法可以用藥學上常規的方法進行提取，如浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法、連續提取法等。
上述藥物組合物中的腫節風可以通過水提酸沉、醇提、水提醇沉或水提過柱等多種方式制備，本發明對腫節風的提取工藝進行了優選，步驟如下取腫節風，加水煎煮二次，每次2小時，每次加水10倍量，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.33(70℃)，加乙醇沉淀二次，第一次使含醇量為70％，第二次含醇量為80％，每次冷藏48小時，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至每1ml含生藥10g，加入適量新配制的卵蛋白溶液，攪拌，使沉淀，冷藏48小時，濾過，濾液煮沸，使過量的卵蛋白凝固，濾過，濾液加乙醇，使含乙醇量為75％，放置沉淀，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，噴霧干燥，即得。
通過本工藝制備的腫節風提取物得率為1～5％，異秦皮啶含量不低于0.1％，反丁烯二酸含量不低于0.02％。
上述藥物組合物中的腫節風，還可以通過以下方法提取制備，但不應將此理解為上述藥物組合物中的腫節風僅限于通過上述或下列工藝提取制備工藝一取腫節風，加水煎煮三次，每次1小時，加水量為第一次10倍量，二、三次為8、8倍量，合并煎液，濾過，濾液加乙醇沉淀2次，第一次使含醇量為70％，第二次含醇量為80％，每次冷藏48小時，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至稠膏狀，噴霧干燥，即得。
通過本工藝制得的腫節風提取物得率為4～7％，異秦皮啶含量不低于0.05％，反丁烯二酸含量不低于0.012％。
工藝二取腫節風，加水煎煮三次，每次1小時，加水量為第一次10倍量，二、三次為8、8倍量，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀，85℃以下減壓干燥，即得。
通過本工藝制得的腫節風提取物得率為6～8％，異秦皮啶含量不低于0.04％，反丁烯二酸含量不低于0.01％。
上述藥物組合物中的白花蛇舌草的優選提取制備工藝具體如下取白花蛇舌草，粉碎成粗粉，照2005版藥典一部流浸膏劑與浸膏劑項下的滲漉法，用80％乙醇作溶劑，浸漬24小時，緩緩滲漉，漉液減壓濃縮至無醇味，加水稀釋成每1ml相當于1g原藥材的量，冷藏，靜置12小時，濾過，濾液加乙醇進行三次梯度醇沉，第一次使含醇量60％，第二次使含醇量70％，第三次使含醇量80％，每次均冷藏24小時，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度1.10～1.15，噴霧干燥，即得。
通過本工藝制備的白花蛇舌草提取物得率為0.5～1.5％，按干燥品計算，含總黃酮以蘆丁(C27H30O16)計，應不低于50％。
上述藥物組合物中的白花蛇舌還可通過以下方法提取制備，但不應將此理解為上述藥物組合物中的白花蛇舌草僅限于上述或下列工藝提取制備工藝一取白花蛇舌草，粉碎成粗粉，照藥典2005版一部流浸膏劑與浸膏劑項下的滲漉法，用75％乙醇作溶劑，浸漬12小時，緩緩滲漉，漉液減壓濃縮至無醇味，加水稀釋成每1ml相當于1g原藥材的量，冷藏，靜置12小時，濾過，濾液加到已處理好的聚酰胺樹脂上，先用2～3倍柱體積的水沖柱，再用10％乙醇沖柱，棄去洗滌液，最后用3～4倍柱體積的80％的乙醇洗脫，收集洗脫液。洗脫液減壓濃縮至相對密度1.10～1.15，噴霧干燥，即得。
通過本工藝制得的白花蛇舌草提取物得率為0.5～1.5％，含總黃酮以蘆丁(C27H30O16)計，不低于45％。
工藝二取白花蛇舌草，粉碎成粗粉，80％乙醇回流提取二次，每次2小時，濾過，濾液減壓濃縮至無醇味，加水稀釋成每1ml相當于1g原藥材的量，冷藏，靜置12小時，濾過，濾液加乙醇進行二次梯度醇沉，第一次使含醇量60％，第二次使含醇量80％，每次均冷藏12小時，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度1.10～1.15，噴霧干燥，即得。
通過本工藝制得的白花蛇舌草提取物得率為0.5～1.5％，含總黃酮以蘆丁(C27H30O16)計，不低于40％。
本發明藥物組合物也可由腫節風提取物和白花蛇舌草提取物組成，按照提取物相對于藥材的得率計算(腫節風提取物得率為1～5％，白花蛇舌草提取物得率為0.5～1.5％)腫節風提取物和白花蛇舌草提取物的重量配比為1∶0.004～4，優選為1∶0.01～0.5，最優為1∶0.04～0.2。
上述藥物組合物中，腫節風提取物的主要有效成分為有機酸類和香豆素類，含量測定以異秦皮啶和反丁烯二酸為指標，其中含異秦皮啶最好不低于0.1％，含反丁烯二酸最好不低于0.02％；白花蛇舌草提取物的主要有效成分是黃酮類，含量以蘆丁(C27H30O16)計，最好不低于50％。
本發明藥物組合物中各組分的用量是經過發明人進行大量摸索總結得出的，各組分的用量在上述重量范圍內都有較好療效。上述組成，若以克為單位，可以制成100～10000次用量的制劑。如作為片劑，可以制成100～10000片，每次用量1～10片，每日1～5次。如作為注射劑，可以制成100～10000支，每次用量1～10支，每日1～3次。以上組成在生產時可按照相應比例增大或減小，如大規模生產可以以千克為原料，或以噸為單位，小規模生產也可以以克為單位，重量可以增大或者減小，但各組成之間重量配比不變。以上比例是經過科學篩選得到的，對于特殊病人，可以相應調整組成的比例，增加或者減少不超過100％。
本發明藥物組合物對S180實體瘤生長和對荷SRS-82肉瘤小鼠有顯著抑瘤作用，對小鼠肝癌(HePA)實體瘤生長有顯著抑瘤作用，可顯著延長艾氏腹水癌(EAC)小鼠的生命，對環磷酰胺、5氟尿嘧啶和60Co放療以及化療均有顯著增效作用，可用于胃癌、食管癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、肺癌、肝癌、子宮頸癌、卵巢癌、膀胱癌等惡性腫瘤的治療及輔助治療。
本發明藥物組合物可以與一種或多種藥學上可接受的載體混合制成任何一種臨床上或藥學上可接受的劑型，優選口服制劑或注射劑，以口服或腸胃外給藥的方式施用于需要這種治療的患者。
用于口服給藥時，可制成常規的固體制劑，如片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑等；也可制成口服液體制劑，如口服溶液劑、口服混懸劑、糖漿劑等。片劑系指藥物與適宜的輔料混勻壓制而成的圓片狀或異形片狀的固體制劑，以口服普通片為主，另有含片、舌下片、口腔貼片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡騰片、緩釋片、控釋片與腸溶片等。膠囊劑系指藥物或加有輔料充填于空心膠囊或密封于軟質囊材中的固體制劑，依據其溶解與釋放特性，可分為硬膠囊(通稱為膠囊)、軟膠囊(膠丸)、緩釋膠囊、控釋膠囊和腸溶膠囊等。丸劑系指藥物與適宜的輔料均勻混合，以適當方法制成的球狀或類球狀固體制劑，包括滴丸、糖丸、小丸等。顆粒劑系指藥物與適宜的輔料制成具有一定粒度的干燥顆粒狀制劑，可分為可溶顆粒(通稱為顆粒)、混懸顆粒、泡騰顆粒、腸溶顆粒、緩釋顆粒和控釋顆粒等。口服溶液劑系指藥物溶解于適宜溶劑中制成供口服的澄清液體制劑。口服混懸劑系指難溶性固體藥物，分散在液體介質中，制成供口服的混懸液體制劑，也包括干混懸劑或濃混懸液。糖漿劑系指含有藥物的濃蔗糖水溶液。
制成口服制劑時，可以加入適宜的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑等。常用填充劑包括淀粉、糖粉、磷酸鈣、硫酸鈣二水物、糊精、微晶纖維素、乳糖、預膠化淀粉、甘露醇等；常用粘合劑包括羧甲基纖維素鈉、PVP-K30、羥丙基纖維素、淀粉漿、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙甲纖維素、膠化淀粉等；常用崩解劑包括干淀粉、交聯聚維酮、交聯羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素等；常用潤滑劑包括硬脂酸鎂、滑石粉、十二烷基硫酸鈉、微粉硅膠等。
用于腸胃外給藥時，可制成注射劑。注射劑系指藥物制成的供注入體內的溶液、乳液或混懸液及供臨用前配制或稀釋成溶液或混懸液的粉末或濃溶液的無菌制劑，注射劑可分為注射液、注射用無菌粉末與注射用濃溶液。注射液系指藥物制成的供注射入體內用的無菌溶液型注射液、乳液型注射液或混懸型注射液，可用于肌內注射、靜脈注射、靜脈滴注等；其規格有1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，其中供靜脈滴注用的大體積(一般不小于100ml)注射液也稱靜脈輸液。注射用無菌粉末系指藥物制成的供臨用前用適宜的無菌溶液配制成澄清溶液或均勻混懸液的無菌粉末或無菌塊狀物，可用適宜的注射用溶劑配制后注射，也可用靜脈輸液配制后靜脈滴注；無菌粉末用溶媒結晶法、噴霧干燥法或冷凍干燥法等制得。注射用濃溶液系指藥物制成的供臨用前稀釋供靜脈滴注用的無菌濃溶液。
制成注射劑時，可選用水性溶劑或非水性溶劑，可根據藥物的性質加入適宜的附加劑。最常用的水性溶劑為注射用水，也可用0.9％氯化鈉溶液或其他適宜的水溶液；常用的非水性溶劑為植物油，主要為供注射用大豆油，其他還有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。常用的附加劑包括滲透壓調節劑、pH值調節劑、增溶劑、填充劑、抗氧劑、抑菌劑、乳化劑、助懸劑等。常用的滲透壓調節劑包括氯化鈉、葡萄糖、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、山梨醇等，優選氯化鈉或葡萄糖；常用的pH值調節劑包括醋酸-醋酸鈉、乳酸、枸櫞酸-枸櫞酸鈉、碳酸氫鈉-碳酸鈉等；常用的增溶劑包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的填充劑包括乳糖、甘露醇、山梨醇、右旋糖酐等；常用的抗氧劑有亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉等；常用抑菌劑為苯酚、甲酚、三氯叔丁醇等。注射劑常用容器有玻璃安瓿、玻璃瓶、塑料安瓿、塑料瓶等。
本發明的有益效果是(1)本發明提供了一種新的具有良好抗腫瘤作用的藥物組合物，滿足了臨床需要。
(2)首次通過藥理學實驗研究證明，本發明藥物組合物與單用腫節風或白花蛇舌草相比，對S180實體瘤生長和對荷SRS-82肉瘤小鼠有顯著抑瘤作用，對小鼠肝癌(HePA)實體瘤生長有顯著抑瘤作用，可顯著延長艾氏腹水癌(EAC)小鼠的生命，對環磷酰胺、5氟尿嘧啶和60Co放療以及化療均有顯著增效作用，而且其最佳配比的療效與陽性對照藥康萊特注射液、環磷酰胺的療效相當、毒性小，這是本領域普通技術人員所意想不到的。
(3)本發明通過藥效學實驗得出了腫節風與白花蛇舌草的發揮抗腫瘤療效的最佳配比。
(4)在本發明藥物組合物制備中，提取制得的腫節風提取物和白花蛇舌草提取物有效成分含量高，使藥品純度更高，雜質少，安全性更高，藥品質量更均勻穩定。
(5)通過特殊安全性試驗和穩定性實驗證實，本發明藥物組合物注射劑安全穩定。
(6)腫節風與白花蛇舌草合并用藥呈協同作用，且用藥劑量相對減小，具有廣泛的應用前景。
以下通過實驗例來進一步闡述本發明所述藥物的有益效果，這些實驗例包括本發明藥物組合物的藥效學實驗。以下實驗例中所用的腫節風提取物均參照實施例1制得；白花蛇舌草提取物均參照實施例2制得。
實驗例1本發明藥物組合物對荷SRS-82肉瘤小鼠的抑瘤作用實驗動物ICR種小鼠，體重18～25g，雌雄各半。
瘤種小鼠SRS-82細胞株供試品陽性對照組康萊特注射液，浙江康萊特藥業有限公司；腫節風提取物組腫節風提取物注射液，自制；白花蛇舌草提取物組白花蛇舌草提取物注射液，自制；本發明藥物組合物組組合物注射液，自制，不同配比。
實驗方法取ICR種小鼠210只，隨機分為21組，每組10只，分別為空白對照組，陽性對照組，腫節風提取物組，白花蛇舌草提取物組，本發明藥物組合物不同配比組腫節風提取物+白花蛇舌草提取物，200mg+10mg、200mg+30mg、200mg+60mg、200mg+130mg、300mg+10mg、300mg+20mg、300mg+30mg、300mg+60mg、300mg+130mg、300mg+150mg、400mg+10mg、400mg+30mg、400mg+130mg、1000mg+10mg、1000mg+20mg、1000mg+60mg、1000mg+130mg。
腫瘤接種分別將培養的SRS-82細胞接種昆明小鼠后第8天，自4只小鼠腹腔中抽取腹水約15ml，用生理鹽水稀釋成細胞數為1.0×107/ml后(共30ml)，每只小鼠左腹股溝皮下注射0.2ml(2.0×106/只)。
給藥方式及時間每只小鼠腹腔注射(ip)給藥(各提取物組給藥劑量140mg/kg)，康萊特注射液不稀釋直接ip給藥(給藥劑量10ml/kg)，于接種腫瘤后的第2天開始給藥，1次/天，共10天。
抑瘤率于接種后的第12天，脫頸椎處死各組小鼠，剝離腫瘤塊，稱取腫瘤重量，并按以下公式計算抑瘤率抑瘤率＝(模型組平均腫瘤重量-給藥組平均腫瘤重量)/模型組平均腫瘤重量×100％。
表1本發明組合物對荷SRS-82肉瘤小鼠的抑瘤率比較(X±SD)
注與空白對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01；與腫節風組比較，#p＜0.05，##p＜0.01；與白花蛇舌草組比較，△p＜0.05，△△p＜0.01。
實驗結果與結論實驗結果見表1。
與空白對照組比較，各給藥組對荷SRS-82瘤小鼠腫瘤有明顯抑制作用(p＜0.05，p＜0.01)，其中本發明藥物組合物(腫節風提取物∶白花蛇舌草提取物＝1∶0.01～0.5)組與單用腫節風提取物組或白花蛇舌草提取物組相比較，其療效均優于單用腫節風提取物組和白花蛇舌草提取物組(p＜0.05，p＜0.01)，且與陽性對照藥物康萊特注射液療效相近，提示腫節風和白花蛇舌草兩藥配伍有協同增效作用。其中以腫節風提取物∶白花蛇舌草提取物＝1∶0.07配比組療效最為顯著(p＜0.01)，療效與康萊特注射液相當，提示其在最優配比范圍內。
實驗例2本發明藥物組合物合并用藥對S180實體瘤生長的影響受試動物ICR種小鼠，體重18～22g，雄性。
瘤種S180瘤液。
供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；陽性對照組環磷酰胺片，南通精華制藥有限公司；腫節風組腫節風片劑，自制；白花蛇舌草組白花蛇舌草片劑，自制；本發明藥物組合物組本發明藥物組合物片劑，自制。
實驗方法取ICR種小鼠210只，隨機分為21組，每組10只，分別為空白對照組，陽性對照組，腫節風組，白花蛇舌草組，本發明藥物組合物不同配比組(腫節風+白花蛇舌草，50g+1g、50g+2g、50g+5g、50g+30g、50g+60g、20g+1g、20g+2g、20g+5g、20g+30g、20g+60g、15g+1g、15g+2g、15g+5g、15g+30g、15g+60g、10g+2g、10g+60g)。各給藥組均為用生理鹽水配制成混懸液后灌胃給藥。
取ICR小鼠，均皮下接種S180瘤液(2×107/ml)0.2ml/只，次日稱體重。灌胃給藥，給藥劑量見表2，每天給藥一次，共10天，停藥次日稱體重，處死小鼠并剝離皮下瘤塊，稱瘤重，并計算抑瘤率。
表2本發明藥物組合物對S180實體瘤生長的影響(X±SD)
注*p＜0.05，**p＜0.01，與空白對照組相比；#p＜0.05，與腫節風組相比；△p＜0.05，與白花蛇舌草組相比。
實驗結果與結論實驗結果見表2。
各給藥組都具有明顯的抑制S180腫瘤生長作用(p＜0.05、p＜0.01)。其中本發明藥物組合物組(腫節風∶白花蛇舌草＝1∶0.02～6)作用都明顯強于單用腫節風或白花蛇舌草(p＜0.05)，抑瘤率為52.27％～68.54％。證明腫節風和白花蛇舌草配伍有很好的抑制腫瘤生長的作用，且與組合物的配比有關，其中以腫節風∶白花蛇舌草＝1∶0.13作用最好，提示其可能為最佳配比。
實驗例3本發明藥物組合物對小鼠肝癌(HePA)生長的影響實驗動物ICR種小鼠，體重18～25g，雌雄各半。
供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；陽性對照組注射用環磷酰胺，江蘇恒瑞醫藥股份有限公司；腫節風組腫節風注射液，自制；白花蛇舌草組白花蛇舌草注射液，自制；本發明藥物組合物組本發明藥物組合物注射液(腫節風+白花蛇舌草＝15g+2g)，自制。
制備方法參見實施例3。
實驗方法取小鼠均皮下接種肝癌(HePA)瘤液(2×107/ml)0.2ml/只，次日分組，分別為空白對照組、陽性對照組、腫節風組、白花蛇舌草組、本發明藥物組合物高、中、低劑量組，稱體重。接種瘤小鼠次日開始腹腔注射給藥，每天給藥一次，共10天，停藥次日稱體重，處死小鼠并剝離皮下瘤塊，稱瘤重，并計算抑瘤率。
表3本發明藥物組合物對小鼠肝癌(HePA)實體瘤生長的影響
注與空白對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01；與腫節風組比較，#p＜0.05，##p＜0.01；與白花蛇舌草組比較，△p＜0.05，△△p＜0.01。
實驗結果與結論實驗結果見表3。
表3中的結果表明，與空白對照組比較，腫節風、白花蛇舌草、本發明藥物組合物、環磷酰胺均對小鼠肝癌(HePA)瘤生長(p＜0.05，p＜0.01)。其中組合物療效優于單用腫節風和白花蛇舌草，高劑量組療效與陽性對照藥物環磷酰胺療效相近，提示合用腫節風和白花蛇舌草，有協同增效作用，且與劑量有關，高劑量效果較優。
實驗例4本發明藥物組合物對艾氏腹水癌(EAC)小鼠生命延長率的影響實驗動物ICR種小鼠，體重18～25g，雌雄各半。
供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；陽性對照組注射用環磷酰胺，江蘇恒瑞醫藥股份有限公司；腫節風組腫節風注射液，自制；白花蛇舌草組白花蛇舌草注射液，自制；本發明藥物組合物組本發明藥物組合物注射液(腫節風提取物+白花蛇舌草提取物＝300mg+20mg)，自制。
制備方法參見實施例3。
實驗方法無菌抽取EAC腹水，以生理鹽水1∶2倍稀釋，每鼠腹腔接種0.2ml，24小時后分組，分別為空白對照組、陽性對照組、腫節風組、白花蛇舌草組、本發明藥物組合物不同劑量組，稱體重并給藥，接種瘤小鼠次日開始腹腔注射給藥，每天給藥一次，共10天，此后觀察小鼠的死亡時間，結果用平均存活天數和生命延長率表示。
表4本發明藥物組合物對EAC腹水癌小鼠生命延長率的影響
注與空白對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01；與腫節風組比較，#p＜0.05，##p＜0.01；與白花蛇舌草組比較，△p＜0.05，△△p＜0.01。
實驗結果與結論實驗結果見表4。
表4中的結果表明，與空白對照組比較，腫節風、白花蛇舌草、本發明藥物組合物、環磷酰胺均可延長小鼠EAC艾氏腹水癌小鼠的存活時間(p＜0.05，p＜0.01)。其中組合物療效優于單用腫節風和白花蛇舌草，高劑量組療效與陽性對照藥物環磷酰胺療效相近，提示合用腫節風和白花蛇舌草，有協同增效作用。
實驗例5本發明藥物組合物與氟尿嘧啶(Fu)合用的增效作用實驗動物ICR種小鼠，體重18～25g，雌雄各半。
供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；氟尿嘧啶組氟尿嘧啶注射液，北京紫竹藥業有限公司；Fu+腫節風組腫節風注射液，自制，每1ml相當于腫節風藥材5g；Fu+白花蛇舌草組白花蛇舌草注射液，自制，每1ml相當于白花蛇舌草藥材1g；Fu+本發明藥物組合物組Fu+本發明藥物組合物注射液，自制，每5ml含腫節風提取物+白花蛇舌草提取物300mg+20mg(相當于腫節風15g，白花蛇舌草2g)。
實驗方法小鼠皮下接種S180瘤液(2×107/ml)0.2ml/只，次日分組，分為7組，每組10只，分別為空白對照組、Fu+腫節風組、Fu+白花蛇舌草組、Fu+本發明藥物組合物高、中、低劑量組、5-氟尿嘧啶組(5-Fu)，稱體重。除空白對照組外，其余各組均腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-Fu)60mg/kg。接種瘤小鼠次日開始腹腔注射給藥，每天給藥一次共10天。停藥次日稱體重，處死小鼠剝離皮下瘤塊，稱瘤重，計算抑瘤率和增效率。
表5本發明藥物組合物與氟尿嘧啶抗S180腫瘤的增效作用
注與Fu組比較，*p＜0.05，**p＜0.01；與5-Fu+腫節風組比較，#p＜0.05，##p＜0.01；與5-Fu+白花蛇舌草組比較，△p＜0.05，△△p＜0.01。
實驗結果與結論實驗結果見表5。
表5中的結果表明，與空白對照組比較，腫節風、白花蛇舌草、本發明藥物組合物均與氟尿嘧啶有協同增效作用(p＜0.05，p＜0.01)，其中組合物增效作用強于單用腫節風和白花蛇舌草，高劑量組增效作用最強(p＜0.01)。
實驗例6本發明藥物組合物對放療的增效作用實驗動物ICR種小鼠，體重18～25g，雌雄各半。
供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；60Co+腫節風組腫節風注射液，自制，每1ml相當于腫節風藥材5g；60Co+白花蛇舌草組白花蛇舌草注射液，自制，每1ml相當于白花蛇舌草藥材1g；60Co+本發明藥物組合物組60Co+本發明藥物組合物注射液，自制，每5ml含腫節風提取物+白花蛇舌草提取物300mg+20mg(相當于腫節風15g，白花蛇舌草2g)。
實驗方法取小鼠，均皮下接種S180瘤液(2×107/ml)0.2ml/只，次日分組，分為7組，每組10只，分別為空白對照組、60Co+腫節風組、60Co+白花蛇舌草組、60Co+本發明藥物組合物高、中、低劑量組、60Co組，稱體重。除空白對照組外，其余各組均在接種后第3、第6天用60Co全身照射，照射劑量為0.05Gy。接種瘤小鼠次日開始腹腔注射給藥，每天給藥一次，共給藥10天，停藥次日稱體重，處死動物。剝離皮下瘤塊，稱瘤重，計算抑瘤率和增效率。
表6本發明藥物組合物對放療的增效作用
注與60Co組比較，*p＜0.05，**p＜0.01；與60Co+腫節風組比較，#p＜0.05，##p＜0.01；與60Co+白花蛇舌草組比較，△p＜0.05，△△p＜0.01。
實驗結果與結論實驗結果見表6。
表6中的結果表明，與空白對照組比較，腫節風、白花蛇舌草、本發明藥物組合物均與60Co放療有協同增效作用(p＜0.05，p＜0.01)，其中組合物增效作用強于單用腫節風和白花蛇舌草，高劑量組增效作用最強(p＜0.01)。
實驗例7本發明藥物組合物對化療的增效作用和減毒的作用受試動物健康小鼠，70只，體重20～25g，雌雄兼用，隨機分為7組，每組10只。
供試品空白對照組0.9％生理鹽水注射液，自制；
陽性對照組環磷酰胺(CTX)片劑，南通精華制藥有限公司；CTX+腫節風組CTX+腫節風片劑，自制；CTX+白花蛇舌草組CTX+白花蛇舌草片劑，自制；CTX+本發明藥物組合物組CTX+組合物片劑(腫節風+白花蛇舌草＝15g+2g)分為高、中、低三個劑量組，自制。
制備方法參見實施例7。
各給藥組均為用生理鹽水配制成混懸液后灌胃給藥。
瘤株小鼠肝癌H22。
實驗方法每只小鼠左前肢腋下皮下接種H22瘤株細胞懸液(懸液濃度0.3g/ml，接種量0.01ml/g)。接種次日，小鼠隨機分組，稱量體重，灌胃給藥，給藥劑量見表4，隔日1次，連續10天。每天稱量體重，觀察荷瘤鼠體重變化，末次給藥后24h眼眶采血，計數外周白細胞(WBC)數目；隨即處死，剝離皮下瘤塊，稱取瘤體重量，計算抑瘤率及增效率。
增效率＝(化療組平均瘤重-化療與組合物膠囊劑聯合治療組平均瘤重)/化療組平均瘤重×100％；解剖分離胸腺、脾臟及靶器官，稱重并計算臟器指數。
表7本發明藥物組合物對化療的增效和減毒的作用(X±SD)
注*p＜0.05，**p＜0.01，與空白對照組相比較；#p＜0.05，##p＜0.01，與陽性對照組相比較，&p＜0.05，與腫節風相比較；$p＜0.05，與白花蛇舌草組相比較。
實驗結果與結論結果見表7。
(1)化療的增效作用
①與空白對照組相比較，環磷酰胺單獨用藥對小鼠肝癌H22有顯著的抑制作用(p＜0.05)；②與環磷酰胺單獨用藥相比較，環磷酰胺與腫節風或環磷酰胺與白花蛇舌草合并用藥對小鼠肝癌H22有顯著的抑制作用(p＜0.05)；③與環磷酰胺單獨用藥相比較，環磷酰胺與中、低劑量組合物膠囊劑聯合用藥對小鼠肝癌H22的抑制作用顯著增強(p＜0.05)，環磷酰胺與高劑量組合物膠囊劑聯合用藥對小鼠肝癌H22的抑制作用極顯著增強(p＜0.01)。
④與環磷酰胺與單獨腫節風或白花蛇舌草合并用藥相比較，環磷酰胺與高、中、低劑量組合物膠囊劑聯合用藥對小鼠肝癌H22的抑制作用顯著增強(p＜0.05)。
(2)對化療的減毒作用①與空白對照組相比較，環磷酰胺單獨用藥對小鼠的外周白細胞數、脾指數均顯著降低(p＜0.05)。
②與環磷酰胺單獨用藥相比較，環磷酰胺與腫節風或環磷酰胺與白花蛇舌草合并用藥對小鼠的外周白細胞數、脾指數均顯著降低(p＜0.05)。
③與環磷酰胺單獨用藥相比較，環磷酰胺與中、低劑量組合物膠囊劑聯合用藥對小鼠的外周白細胞數、脾指數均顯著降低(p＜0.05)，環磷酰胺與高劑量組合物膠囊劑聯合用藥對小鼠的外周白細胞數、脾指數均極顯著降低(p＜0.01)。
④與環磷酰胺與單獨腫節風或白花蛇舌草合并用藥相比較，環磷酰胺與高、中、低劑量組合物膠囊劑聯合用藥對小鼠的外周白細胞數、脾指數均顯著降低(p＜0.05)。
上述實驗結果表明，本發明藥物組合物可以顯著增強環磷酰胺在化療中的療效，且降低環磷酰胺的毒性，提示組合物在化療中的增效和減毒作用，另外腫節風和白花蛇舌草合并用藥具有協同增效作用，且與劑量有關，高劑量時效果較好。
實驗例8本發明藥物組合物水針劑特殊安全性實驗1、過敏性實驗實驗動物豚鼠，18只，體重280～310g，雌雄兼用，隨機分為供試藥組、陰性對照和陽性對照三組，每大組6只。
供試品本發明藥物組合物注射液自制，每5ml含腫節風提取物+白花蛇舌草提取物300mg+20mg(相當于腫節風15g，白花蛇舌草2g)；使用時取本發明藥物組合物注射液1支溶于100ml0.9％氯化鈉注射液中，配成供試液。
陰性對照氯化鈉注射液，山東華信制藥有限公司。
陽性對照藥5％卵白蛋白生理鹽水溶液(自制)。
給藥劑量致敏劑量0.5ml/只；致敏次數隔日腹腔注射1次，連續3次；攻擊劑量1ml/只，靜脈注射。
實驗方法按上述分組分別給豚鼠隔日腹腔注射上述藥液0.5ml，共注射三次。然后將每大組豚鼠再分成兩小組，每小組3只。第一小組豚鼠于第一次致敏后14天，第二小組于第一次致敏后14天進行抗原攻擊，每只豚鼠均靜脈注射上述藥液1ml。觀察并記錄攻擊后15min內豚鼠的表現。
實驗結果及結論供試藥組和陰性對照藥組豚鼠均未發現過敏反應，而卵白蛋白組產生過敏反應并死亡。表明，本發明藥物組合物注射液無明顯致敏作用。
2、溶血性實驗實驗動物雄性家兔，1只，體重2.5kg。
供試品本發明藥物組合物注射液(自制，每5ml含腫節風提取物+白花蛇舌草提取物300mg+20mg)，使用時取組合物注射液1支溶于100ml0.9％氯化鈉注射液中，配成供試液。
實驗方法制備2％紅細胞生理鹽水混懸液備用。取潔凈試管7支，編號并排列在試管架上，按下表順序操作，混勻后置37℃水浴中溫育，觀察記錄15min、30min、45min、1h、2h、3h的結果。
實驗結果及結論供試品0.1～0.5ml各管在15min、30min、45min、1h、2h、3h均未出現溶血和紅細胞凝集現象。表明，本發明藥物組合物注射液無明顯溶血性。
3、血管刺激性實驗實驗動物家兔，體重2.1～2.3kg，雌雄兼用。
供試品本發明藥物組合物注射液(自制，每5ml含腫節風提取物+白花蛇舌草提取物300mg+20mg)，使用時取組合物注射液1支溶于100ml0.9％氯化鈉注射液中，配成供試液。
對照藥氯化鈉注射液，山東華信制藥有限公司。
給藥劑量家兔靜滴給藥劑量為100ml/kg。
實驗方法取健康家兔6只，隨機分為供試藥組和0.9％氯化鈉注射液對照組，每組3只，劑量均為20ml/kg。給藥前將兔置固定箱中，于耳緣靜脈按上述分組分別滴注供試藥和0.9％氯化鈉注射液，滴速為1ml/min(20滴/min)，觀察給藥后24h注射局部有無充血、水腫、出血、壞死。連續給藥3天，于末次給藥后24h在遠離注射部位1cm的向心端取兔耳用10％福爾馬林固定，做病理學檢查。
實驗結果及結論肉眼觀察及病理檢查表明，給藥組與對照組無明顯差別，用藥部位的血管及周圍組織均未見充血、水腫、出血、壞死，病理檢查無異常。表明，本發明藥物組合物注射液靜脈靜滴對血管無刺激性。
實驗例9本發明藥物組合物注射液穩定性實驗樣品本發明藥物組合物注射液自制，每5ml含腫節風提取物+白花蛇舌草提取物300mg+20mg(相當于腫節風15g，白花蛇舌草2g)。
考察項目性狀、pH值、澄明度、有關物質、標示含量；并在加速實驗6個月和長期實驗期末增加無菌和熱原檢查。
1、影響因素實驗強光照射實驗取供試品，置照度為4500Lx的光照箱內放置10天。
高溫實驗取供試品，分別置于40℃、60℃條件下放置10天。
低溫實驗取供試品，在4℃冰箱中放置10天。
上述實驗，分別于第5、10天取樣測定。比較性狀后測試各項指標，并將結果與0天比較。
結果光照4500Lx條件下放置10天，除有關物質略有升高外，其它各項指標均無明顯變化。高溫60℃條件下放置10天，外觀變為淡黃色澄明液體，標示含量下降，有關物質略有升高。高溫40℃、低溫4℃條件下放置10天，各項指標無明顯變化。
2、加速實驗方法置溫度40℃±2℃、相對濕度75％±5％的條件下放置6個月。在實驗期間分別于第1個月、2個月、3個月、6個月末取樣，比較外觀后，測試各項指標，將結果與0個月比較；并在6個月末增加無菌和熱原檢查。
結果溫度40℃±2℃、相對濕度75％±5％的條件下放置6個月，除有關物質略有增加，標示含量略有下降外，其它各項指標均無明顯變化，加速實驗6個月末，熱原、無菌檢查均符合規定。
3、長期實驗方法置溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置18個月。分別于第3個月、6個月、9個月、12個月、18個月，比較外觀后，測試各項指標，將結果與0個月比較；并在18個月末增加無菌和熱原檢查。
結果溫度25℃±2℃、相對濕度60％±10％的條件下放置18個月，各項指標均無明顯變化，長期實驗18個月末，熱原、無菌檢查均符合規定。
結論由上述考察結果得出結論，各項實驗中，本發明藥物組合物注射液比較穩定。以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發明的上述內容作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發明上述內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。以下實施例中各劑型的輔料可以用藥學上可接受的輔料替換，或者減少、增加。
實施例1腫節風提取物的制備制備方法取腫節風，加水煎煮二次，每次2小時，每次加水10倍量，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.33(70℃)，加乙醇沉淀二次，第一次使含醇量為70％，第二次含醇量為80％，每次冷藏48小時，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至每1ml含生藥10g，加入適量新配制的卵蛋白溶液，攪拌，使沉淀，冷藏48小時，濾過，濾液煮沸，使過量的卵蛋白凝固，濾過，濾液加乙醇，使含乙醇量為75％，放置沉淀，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，噴霧干燥即得腫節風提取物。
共制備4批，每批50kg，得率及含量測定見表8。
鑒別(1)取本品50mg，置試管中，加鋅粉少量及0.1％氯化銨溶液1滴，微火加熱至干。在試管口蓋上用5％對二甲氨基苯甲醛-20％三氯醋酸的苯溶液潤濕的濾紙，繼續微火加熱，濾紙顯粉紅色或紫色。
(2)取本品50mg，加乙醇0.5ml，置水浴中微熱，攪拌，取上清液少許點于濾紙上，干燥，在紫外光燈(365nm)下觀察，顯亮藍綠色熒光。用氨氣熏后，顯黃色斑點，熒光增強。
異秦皮啶含量測定高效液相色譜法色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.1％磷酸溶液(20∶80)為流動相；檢測波長為344nm。理論板數按異秦皮啶峰計算應不低于2000。
對照品溶液的制備取經五氧化二磷干燥24小時的異秦皮啶對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含4μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取腫節風提取物50mg，精密稱定，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理(功率300W，頻率25kHz)40分鐘，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
反丁烯二酸含量測定照高效液相色譜法(2005版藥典一部附錄VID)。
系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，0.16mol/L磷酸二氫鉀溶液(用磷酸調節pH值為2.80)為流動相，檢測波長為210nm；理論板數按反丁烯二酸計算，應不低于5000。
對照品溶液的制備精密稱取經105℃干燥至恒重的反丁烯二酸對照品10mg，置25ml量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取2ml，置100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml中含反丁烯二酸8μg)。
供試品溶液的制備精密稱取本品50mg，置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5～10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
表84批腫節風提取物得率及含量測定
以下實施例中所用的腫節風提取物，均為本實施例中制備。
實施例2白花蛇舌草提取物的制備制備方法取白花蛇舌草，粉碎成粗粉，照2005版藥典一部流浸膏劑與浸膏劑項下的滲漉法，用80％乙醇作溶劑，浸漬24小時，緩緩滲漉，漉液減壓濃縮至無醇味，加水稀釋成每1ml相當于1g原藥材的量，冷藏，靜置12小時，濾過，濾液加乙醇進行三次梯度醇沉，第一次使含醇量60％，第二次使含醇量70％，第三次使含醇量80％，每次均冷藏24小時，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度1.10～1.15，噴霧干燥，即得。
共制備4批，每批10kg，得率及含量測定見表9。
含量測定對照品溶液的制備精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品10mg，置50ml量瓶中，加適量70％乙醇，置水浴上微熱使溶解，放冷，加70％乙醇至刻度，搖勻，即得(每1ml中含無水蘆丁0.2mg)。
標準曲線的制備精密量取對照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0與6.0ml，分別置25ml量瓶中，各加70％乙醇至6ml，加5％亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加10％硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加氫氧化鈉試液10ml，再加乙醇至刻度，搖勻，放置15分鐘，照分光光度法(2005版藥典一部附錄VA)，在507nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標、濃度為橫坐標，繪制標準曲。
測定法精密量取本品適量，加于已處理好的聚酰胺柱(50目，2g，內徑12～15mm，濕法裝柱)上，用50ml水洗脫，棄去洗脫液，用70％乙醇洗脫，收集洗脫液約25ml，置25ml量瓶中，加70％的乙醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取5ml，置甲、乙兩個25ml量瓶中，甲瓶中加5％亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，加10％硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6分鐘，在甲、乙兩瓶中各加氫氧化鈉試液10ml，再加乙醇稀釋至刻度，搖勻，放置15分鐘，照分光光度法(2005版藥典一部附錄VA)，以乙瓶為空白，在507nm的波長處測定吸收度，從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的量，計算，即得。
4批提取物的得率及含量測定數據見下表。
表94批白花蛇舌草提取物得率及含量測定
以下實施例中所用的白花蛇舌草提取物，均為本實施例中制備。
實施例3本發明藥物組合物水針劑的制備處方一腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 20g聚山梨酯-80100ml注射用水 加至5000ml共制備 1000支處方二腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 30g聚山梨酯-80 110ml注射用水 加至5000ml共制備 1000支處方三腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 60g聚山梨酯-80 150ml注射用水 加至5000ml共制備 1000支制備工藝1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量80％的注射用水，加入聚山梨酯-80攪拌加熱溶解，然后加入處方量的腫節風提取物和白花蛇舌草提取物，加熱攪拌溶解完全。
3)補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經砂濾棒過濾脫炭。測定并調節溶液的pH值。
6)經0.45μm的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)將溶液熔封于玻璃安瓿中。
9)100℃流通蒸汽滅菌30分鐘。
10)趁熱將樣品放入0.01％的亞甲藍溶液中檢漏。
11)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例4本發明藥物組合物粉針劑的制備處方一腫節風提取物 400g白花蛇舌草提取物 20g聚山梨酯-80110ml甘露醇 320g無菌注射用水 加至5000ml共制備 1000支處方二腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 20g聚山梨酯-80 100ml甘露醇 300g無菌注射用水 加至5000ml共制備 1000支處方三腫節風提取物 400g白花蛇舌草提取物 30g聚山梨酯-80 120ml甘露醇 330g無菌注射用水 加至5000ml共制備 1000支處方四腫節風提取物 400g白花蛇舌草提取物 60g聚山梨酯-80 150ml甘露醇 350g無菌注射用水 加至5000ml共制備 1000支制備工藝1)首先將配液用的容器具及抗生素玻璃瓶，膠塞等進行無菌處理。
2)按照處方量稱取原輔料。
3)取配液量80％的無菌注射用水，加入聚山梨酯-80攪拌加熱溶解，然后將腫節風提取物和白花蛇舌草提取物加入加熱攪拌溶解完全。再加入甘露醇加熱攪拌溶解完全，補加無菌注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經砂濾棒過濾脫炭。測定并調節溶液的pH值。
6)經0.22μm的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)分裝于抗生素玻璃瓶中，半壓塞。將樣品放入凍干機中冷凍干燥。預凍-45℃5小時，低溫真空干燥-45℃～0℃20小時，然后升溫至25℃真空干燥3小時。
9)凍干結束，壓塞，軋蓋。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例5本發明藥物組合物氯化鈉輸液的制備處方一腫節風提取物 200g白花蛇舌草提取物 20g聚山梨酯-80 80ml氯化鈉900g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶處方二腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 20g聚山梨酯-80 100ml氯化鈉900g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶處方三腫節風提取物 400g白花蛇舌草提取物 20g聚山梨酯-80 120ml氯化鈉900g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶制備工藝1)前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量20％的注射用水加入聚山梨酯-80攪拌加熱溶解，然后將腫節風提取物和白花蛇舌草提取物加入加熱攪拌溶解完全。將氯化鈉用配液量40％的注射用水溶解完全。
3)合并兩溶液，補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經砂濾棒過濾脫炭。測定并調節溶液的pH值。
6)經0.45μm的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)灌裝于100ml的輸液瓶中。
9)115℃熱壓滅菌30分鐘。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例6本發明藥物組合物葡萄糖輸液的制備處方一腫節風提取物 200g白花蛇舌草提取物 30g聚山梨酯-80 220ml葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶處方二腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 20g聚山梨酯-80 250ml葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶處方三腫節風提取物 1000g白花蛇舌草提取物 30g聚山梨酯-80 300ml葡萄糖5000g注射用水 加至100000ml共制備1000瓶制備工藝1)提前一天處理配液用的管道及容器等，臨用前再用新鮮的注射用水沖洗。
2)取配液量20％的注射用水加入聚山梨酯-80攪拌加熱溶解，然后將腫節風提取物和白花蛇舌草提取物加入加熱攪拌溶解完全。將葡萄糖用配液量40％的注射用水溶解完全。
3)合并兩溶液，補加注射用水至全量。
4)加入配液量0.1％的針用活性炭，加熱攪拌15分鐘。
5)經砂濾棒過濾脫炭。測定并調節溶液的pH值。
6)經0.45μm的微孔濾膜精濾。
7)檢查溶液的澄明度，半成品化驗。
8)灌裝于100ml的輸液瓶中。
9)115℃熱壓滅菌30分鐘。
10)燈檢，成品全檢，包裝入庫。
實施例7本發明藥物組合物片劑的制備處方一腫節風15kg白花蛇舌草2kg淀粉 120.0g微晶纖維素40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 2.0g羧甲淀粉鈉4.0g共制備1000片處方二腫節風提取物 300g(相當于腫節風15kg)白花蛇舌草提取物 20g(相當于白花蛇舌草2kg)淀粉 120.0g微晶纖維素40.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 2.0g羧甲淀粉鈉4.0g共制備1000片制備工藝原料中的腫節風和白花蛇舌草參照實施例1、2中的制備方法制成提取物。
1)將腫節風提取物和白花蛇舌草提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將腫節風提取物、白花蛇舌草提取物、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂和羧甲淀粉鈉，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按照化驗確定的片重壓片。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例8本發明藥物組合物膠囊劑的制備處方一腫節風提取物 200g白花蛇舌草提取物 10g淀粉 50.0g微晶纖維素15.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 1.0g共制備1000粒處方二腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 20g淀粉 60.0g微晶纖維素20.0g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 1.0g共制備1000粒處方三腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 60g淀粉 80g微晶纖維素30g2％HPMC水溶液 適量硬脂酸鎂 2.0g共制備1000粒制備工藝1)將腫節風提取物和白花蛇舌草提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原輔料。
3)將羥丙甲纖維素溶于水中制成2％的水溶液備用。
4)將腫節風提取物、白花蛇舌草提取物、淀粉、微晶纖維素混合均勻，加入2％HPMC水溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材。
5)過20目篩制顆粒。
6)顆粒在60℃的條件下烘干。
7)干燥好的顆粒加入硬脂酸鎂，過18目篩整粒，混合均勻。
8)取樣，半成品化驗。
9)按照化驗確定的裝量裝入膠囊。
10)成品全檢，包裝入庫。
實施例9本發明藥物組合物顆粒劑的制備處方一腫節風提取物 200g白花蛇舌草提取物 60g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液適量共制備 1000包處方二腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 20g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液適量共制備 1000包處方三腫節風提取物 200g白花蛇舌草提取物 130g糖粉 2000.0g2％HPMC50％乙醇溶液適量共制備 1000包制備工藝1)將蔗糖粉碎過100目篩備用。將腫節風提取物和白花蛇舌草提取物粉碎過100目篩備用。
2)按照處方量稱取原輔料。
3)將腫節風提取物、白花蛇舌草提取物與糖粉以等量遞加的方法混合均勻，加入2％HPMC50％乙醇溶液適量，攪拌均勻，制成適宜軟材，4)過20目篩制顆粒。
5)顆粒在60℃的條件下烘干。
6)干顆粒過18目篩整粒。
7)取樣，半成品化驗顆粒中主藥的含量，確定裝量。
8)包裝，成品全檢，包裝入庫。
實施例10本發明藥物組合物軟膠囊劑的制備處方一腫節風提取物 400g白花蛇舌草提取物 130g大豆油 550.0g大豆磷脂 60g蜂蠟 55g共制備 2000粒處方二腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 20g大豆油 500.0g大豆磷脂 50g蜂蠟 50g共制備 2000粒處方三腫節風提取物 1000g白花蛇舌草提取物 10g大豆油 700.0g大豆磷脂 65g蜂蠟 70g共制備 2000粒制備工藝將腫節風提取物和白花蛇舌草提取物分別粉碎過100目篩，備用。將處方量的大豆油和大豆磷脂、蜂蠟加熱熔融，混勻，放冷，加入腫節風提取物和白花蛇舌草提取物研勻，壓制成軟膠囊即可。
實施例11本發明藥物組合物滴丸劑的制備處方一腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 130g聚乙二醇6000 650g共制備 1000粒處方二腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 20g聚乙二醇6000 600g共制備 1000粒處方三腫節風提取物 1000g白花蛇舌草提取物 60g聚乙二醇6000 700g共制備 1000粒制備工藝將聚乙二醇6000在水浴中加熱熔融，待全部熔融后加入腫節風提取物和白花蛇舌草提取物，攪拌溶解，60目篩過濾，保持60℃滴入冷至10℃以下的液體石蠟中制成丸。
實施例12本發明藥物組合物口服液體劑的制備處方一腫節風 15kg白花蛇舌草 2kg苯甲酸鈉 15g甜蜜素 10g水 加至10000ml共制備 1000支處方二腫節風提取物 300g白花蛇舌草提取物 20g苯甲酸鈉 15g甜蜜素 10g水 加至10000ml共制備 1000支制備工藝原料中的腫節風和白花蛇舌草參照實施例1、2中的制備方法制成提取物。
1)先將腫節風提取物和白花蛇舌草提取物加入配液量60％的水中，加熱攪拌溶解完全。
2)將苯甲酸鈉和甜蜜素用配液量20％的水溶解完全。
3)合并上述兩個溶液，補加水至全量。
4)過0.8μm的微孔濾膜過濾。
5)半成品化驗。
6)灌裝。成品全檢，包裝入庫。
權利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物主要由腫節風和白花蛇舌草制成，二者的重量配比為1∶0.01～10。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，腫節風和白花蛇舌草的重量配比為1∶0.02～6。
3.根據權利要求2所述的藥物組合物，其特征在于，腫節風和白花蛇舌草的重量配比為1∶0.13。
4.根據權利要求1～3所述的任一藥物組合物的制備方法，其特征在于，所述的腫節風和白花蛇舌草可以用適宜的溶劑分別或混合經過提取加工得到其提取物，總提取物再和藥用輔料混合加工制成任何一種制劑，所得總提取物的主要有效成分為有機酸類、香豆素類和黃酮類。
5.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，該藥物還可以由腫節風提取物、白花蛇舌草提取物制成，二者的重量配比為1∶0.004～4。
6.根據權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，腫節風提取物和白花蛇舌草提取物的重量配比為1∶0.01～0.5。
7.根據權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，腫節風提取物和白花蛇舌草提取物的重量配比為1∶0.04～0.2。
8.根據權利要求5～7所述的任一藥物組合物，其特征在于，所述腫節風提取物的主要有效成分為有機酸類和香豆素類，含異秦皮啶不低于0.1％，含反丁烯二酸不低于0.02％；白花蛇舌草提取物的主要有效成分為白花蛇舌草總黃酮，含量不低于50％。
9.根據權利要求1～3、5～7所述的任一藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物可以與任一藥學上可接受的輔料結合制成任何一種臨床上或藥學上可接受的劑型。
10.根據權利要求9所述的藥物組合物，其特征在于，所述的臨床上或藥學上可接受的劑型為口服制劑或注射劑。
全文摘要
本發明屬于醫藥技術領域，公開了一種藥物組合物及其制備方法，以及含有該藥物組合物的制劑，該藥物組合物主要由腫節風和白花蛇舌草制成，其重量比為1∶0.01～10；也可由腫節風提取物和白花蛇舌草提取物制成，其重量比為1∶0.004～4。該藥物組合物可以制成任何一種臨床上或藥學上可接受的劑型。該藥物組合物具有抗腫瘤作用，可用于胃癌、食管癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、肺癌、肝癌、子宮頸癌、卵巢癌、膀胱癌等惡性腫瘤。
文檔編號A61P35/00GK1954870SQ20061014263
公開日2007年5月2日 申請日期2006年10月25日 優先權日2005年10月26日
發明者黃振華 申請人:黃振華