專利名稱：：一種升高白細胞的中藥組合物及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及一種升高白細胞的中藥組合物及其制備方法和應用，屬于中藥領域。
背景技術：
：腫瘤放化療最常見的毒副反應是骨髓抑制，主要表現為造血干細胞的增殖抑制。由于白細胞的壽命較短，臨床表現常見白細胞減少。骨髓抑制限制了放化療的連貫性，從而影響放化療療效。近年來國內外研制和開發造血細胞因子，如G-CSF、GM-CSF，在化療中發揮較好的輔助作用。但這些造血因子價格昂貴，有反跳現象，可引起骨痛、發熱等副反應。中藥對防治放化療骨髓抑制有一定療效，但多數用于初治或骨髓抑制程度比較輕的患者。
發明內容本發明所要解決的技術問題是提供一種可升高白細胞，有效促進造血功能恢復的中藥組合物及其制備方法和應用。本發明的成藥通過促進脾細胞表達GM-CSF蛋白，增加內源性GM-CSF生成，升高GM-CSF活性，進而促進白細胞和骨髓細胞的分化增殖，可升高放化療患者的白細胞，防治放化療患者的骨髓抑制，改善和提高癌癥患者中醫癥候和生活質量；對于氣虛患者，通過益氣養陰，提高免疫力促進氣虛患者的恢復；且無毒副反應。本發明的中藥組合物主要是由下述重量配比的原料中藥材制得黃芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge)6-60份、黃精(PolygonatumsibiricumRed.)6-60份、天花粉(TrichosantheskirilowiiMaxim.)6-60份禾口淫羊藿(Epimediumbrevicor皿mMaxim.)3-30份。較佳的，所述的原料中藥材中還包括女貞子(LigustrumlucidumAit.)3_30份和骨碎補(Drynariafortunei(Kunze)J.Sm.)6_60份。本發明的中藥組合物更佳的主要是由下列重量份的原料中藥材制得黃芪10-40份，黃精10-40份，天花粉10-40份，女貞子5-20份，骨碎補10-40份和淫羊藿5-20份制備而成。最佳的，主要是由下列重量份的原料藥制得黃芪30份，黃精30份，天花粉30份，淫羊藿15份，女貞子15份和骨碎補30份。本發明的中藥組合物可采用中藥制劑的常規方法制成任何常規制劑，較佳的為口服液體制劑、顆粒劑、滴丸劑、散劑、片劑、膠囊劑(包括硬膠囊和軟膠囊)、脂質體、緩釋制劑、控釋制劑或注射劑(包括小針、輸液和凍干粉)，更佳的為口服液體制劑、顆粒劑、滴丸劑、片劑、膠囊劑或注射劑。本發明還進一步涉及本發明的藥物組合物的制備工藝可以將上述原料直接干燥粉碎或經本領域常規提取技術提取精制得到可升高白細胞、提高免疫力的藥物活性成分。較佳的三種制備方法為方法一按照所述的重量配比稱取原料中藥材；將上述中藥材干燥粉碎成細粉，得活性成分細粉。方法二按照所述的重量配比稱取原料中藥材；將黃芪、黃精和淫羊藿加水煎煮，過濾，取濾液，離心分離去除固體物質，取上清液濃縮成清膏，在將其余原料藥材干燥粉碎成粉，與上述清膏混合均勻，得活性成分清膏。方法三按照所述的重量配比稱取原料中藥材；加水煎煮，過濾，取濾液，離心分離去除固體物質，取上清液濃縮成清膏，即得活性成分清膏。上述方法二或三中，加水煎煮的步驟中，每次加水的量較佳的為生藥重量的8-16倍，煎煮的溫度較佳的為煎煮液沸騰的溫度，煎煮的時間較佳的為2-4小時，煎煮的次數較佳的為1-4次。煎煮次數為2次以上時，每次煎煮后過濾，合并濾液，之后再進行離心分離去除固體物質，取上清液濃縮成清膏。所述的清膏的相對密度較佳的為0.81.5(溫度在6(TC以下)。進一步的，將方法一制得的活性成分細粉，或方法二或三制得的活性成分清膏，或由該清膏干燥，粉碎制成的活性成分細粉，與賦型劑按本領域常規方法制成各種藥學劑型，如散劑、口服液、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、片劑或注射劑等。其中，所述的賦型劑根據不同的劑型，按本領域常規知識選擇。本發明的中藥組合物的口服液體制劑的制備方法可為向前述方法制得的活性成分清膏中再加入甜味素和山梨酸鉀，用量可為常規量，加入常規用量的水，攪拌，調PH值至弱酸性，較佳的為P朋-7，可采用NaOH水溶液進行調節，之后過濾，灌裝，滅菌，即得。本劑型的優點是起效迅速，生物利用度高。本發明的中藥組合物的顆粒制劑的制備方法可為向前述方法制得的活性成分清膏中再加入糊精和甜味劑，糊精的用量較佳的為清膏質量的等量，甜味劑的用量可為常規量，一般為質量百分比10%以下；再經過干燥、制粒、整粒，即得顆粒劑。本發明的中藥組合物的膠囊劑的制備方法可為向前述方法制得的活性成分清膏中再加入常規量的淀粉混勻，制粒，過篩，干燥，整粒，灌裝，即得膠囊劑。本發明的中藥組合物的片劑的制備方法可為將前述方法制得的活性成分清膏干燥，粉碎，制粒，壓制成片；或者將前述方法制得的活性成分細粉制粒，壓制成片。本發明所用試劑及原料均市售可得。本發明的中藥組合物尤其適用治療白細胞減少癥；提高機體免疫功能；促進骨髓造血干/祖細胞增殖、保護造血微環境；修復放射線對骨髓造血組織的損壞和損傷；防治放化療的骨髓抑制；促進粒-單系造血祖細胞集落形成；改善和提高癌癥患者中醫癥候和生活質量；還適用促進氣陰兩虛患者的恢復。本發明的中藥組合物的治療劑量可為成人每日服用量相當于0.06-1.5克生藥/kg體重。本發明中，所述的"生藥"是指中藥材原料的質量。本發明的積極進步效果在于本發明的中藥組合物經臨床及動物試驗研究發現本發明的中藥組合物能夠升高癌癥患者白細胞，防治癌癥患者較重的骨髓抑制，改善和提高癌癥患者中醫癥候和生活質量。具體實施例方式下面通過實施例的方式進一步說明本發明，但并不因此將本發明限制在所述的實施例范圍之中。實施例1口服液體制劑的制備1、稱取原料中藥材黃芪6kg，黃精6kg，天花粉6kg，骨碎補6kg，女貞子3kg，淫羊藿3kg。2、將上述藥材加15倍質量的水煎煮，時間3小時，過濾，將濾渣加水重復煎煮一次，過濾，合并兩次的濾液，離心分離去除固體物質，取上清液濃縮制得清膏(相對密度0.8，溫度59°C)。3、加入lkg甜味素，2kg山梨酸鉀，攪拌加水30L，10wt%NaOH水溶液調pH值至6-7，濾過，灌裝，滅菌。實施例2顆粒劑的制備1、稱取原料中藥材黃芪30kg，黃精30kg，天花粉30kg，骨碎補30kg，女貞子15kg，淫羊藿15kg。2、將上述藥材加14倍質量的水煎煮，時間3小時，過濾，將濾渣加水重復煎煮一次，過濾，合并兩次的濾液，離心分離去固體物質，取上清液濃縮制得清膏(相對密度1.2，溫度59°C)。3、加入與清膏等質量的糊精和質量百分比5%的甜味劑，再經過干燥、制粒、整粒。實施例3膠囊制劑的制備1、稱取原料中藥材黃芪60kg，黃精60kg，天花粉60kg，骨碎補60kg，女貞子30kg，淫羊藿30kg。2、將上述藥材加15倍質量的水煎煮，時間3小時，過濾，將濾渣加水重復煎煮一次，過濾，合并兩次的濾液，離心分離去固體物質，取上清液濃縮制得清膏(相對密度1.5，溫度40°C)。3、加入8kg淀粉混勻，制粒，過篩，干燥，整粒，灌裝。實施例4片劑的制備1、稱取原料中藥材黃芪10kg，黃精10kg，天花粉10kg，骨碎補10kg，女貞子5kg，淫羊藿5kg。2、將上述藥材加15倍質量的水煎煮，時間3小時，過濾，將濾渣加水重復煎煮一次，過濾，合并兩次的濾液，離心分離去固體物質，取上清液濃縮制得清膏(相對密度1.1，溫度59°C)。3、干燥，粉碎，制粒，壓制成片。實施例5片劑的制備1、稱取原料中藥材黃芪40kg，黃精40kg，天花粉40kg，骨碎補40kg，女貞子20kg，淫羊藿20kg。2、將上述藥材加15倍質量的水煎煮，時間3小時，過濾，將濾渣加水重復煎煮一次，過濾，合并兩次的濾液。離心分離去固體物質，取上清液濃縮制得清膏(相對密度l.1，溫度50°C)。3、干燥，粉碎，制粒，壓制成片。實施例6片劑的制備1、稱取原料中藥材黃芪12kg，黃精12kg，天花粉12kg，骨碎補12kg，女貞子6kg，淫羊藿6kg。52、將上述藥材加15倍質量的水煎煮，時間3小時，過濾，將濾渣加水重復煎煮一次，過濾，合并兩次的濾液。離心分離去固體物質，取上清液濃縮制得清膏(相對密度1.2，溫度50°C)。3、干燥，粉碎，制粒，壓制成片。實施例7活性成分清膏的制備1、稱取原料中藥材黃芪6kg，黃精6kg，天花粉6kg，淫羊藿3kg。2、將黃芪、黃精和淫羊藿加15倍質量的水煎煮，時間3小時，過濾，將濾渣加水重復煎煮一次，過濾，合并兩次的濾液，離心分離去固體物質，取上清液濃縮制得清膏(相對密度0.8，溫度50°C)。將天花粉干燥粉碎成粉，與上述清膏混合均勻，得活性成分清膏。實施例8活性成分清膏的制備1、稱取原料中藥材。黃芪60kg，黃精60kg，天花粉60kg，淫羊藿30kg。2、將上述藥材加8倍質量的水煎煮，時間2小時，過濾，將濾渣加水重復煎煮3次，過濾，合并兩次的濾液。離心分離去固體物質，取上清液濃縮制得清膏(相對密度1.2，溫度50°C)。實施例9片劑的制備1、稱取原料中藥材。黃芪20kg，黃精20kg，天花粉20kg，淫羊藿10kg。2、將上述藥材加16倍質量的水煎煮，時間4小時，過濾，將濾液離心分離去固體物質，取上清液濃縮制得清膏(相對密度1.4，溫度59°C)。3、干燥，粉碎，制粒，壓制成片。實施例1041活性成分細粉的制備按表1的配方稱取原料中藥材；將上述中藥材干燥粉碎成細粉，得實施例1041的活性成分細粉。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>效果實施例1—、臨床資料1.l病例收集標準凡經X線、CT、細胞學、病理學等確診為肺癌及乳腺癌、胃癌、腸癌，中醫辨證為氣陰(血)兩虛、氣虛；年齡^18歲，性別不限；Karnofsky氏評分標準在50分以上，預計可完成全程治療并同意接受化療的患者。排除1)化療期間應用其它升白藥物者；2)合并嚴重心、肝、腎、血液系統計病患者；3)感染患者及妊娠患者；4)有藥物及食物過敏史者。1.2病例選擇觀察112例惡性腫瘤患者，95.5%為復治患者。采用拆信封的方法隨機分為4組。本發明的中藥組合物治療組分為治療1組和治療2組，對照組也分為對照1組和對照2組。治療1組28例患者，男19例，女9例。年齡41癌8例。治療2組27例患者，男17例，女10例。年齡42癌3例。對照1組33例患者，男21例，女12例。年齡37癌10例。對照2組24例患者，男13例，女11例。年齡38癌4例。兩組患者平均化療療程，治療組為2.54個療程，對照組2.86個療程。兩組資料性別、年齡、病種、化療療程無統計學差異，具有可比性。2、治療方法化療方案隨病種和病理分型而不同，均為有效，且對骨髓抑制作用明顯的化療方案。非小細胞肺癌用MVP方案；胃癌采用L-MFP方案；乳腺癌用NV方案；腸癌同胃癌方案。治療1組化療的同時服用采用實施例2的方法制得的顆粒劑，日服2次，每次2袋(0.40.8g生藥/kg體重/次)23周1個療程。治療2組化療后WBC<4.OX109/L開始服用實施例2方法制得的顆粒劑，每日2次，每次2袋(0.40.8g生藥/kg體重/次)，2周一療程。對照1組化療的同時服用茜草雙酯，每次4片，每日3次，23周1個療程。77歲。其中肺癌20例，其他75歲。其中肺癌24例，其他77歲。其中肺癌23例，其他76歲。其中肺癌20例，其他8對照2組化療后WBC<4.0X109/L開始服用茜草雙酯，每次4片，每日3次，2周一療程。觀察期間不得輸血，不能用其他任何對白細胞有影響的藥物。3、觀察項目臨床升白療效，臨床癥候、癥狀改善情況，外周血白細胞計數，治療前后尿、糞常規檢查，X線，心電圖、肝功能、腎功能、并進行肝脾超聲波檢查。4、療效標準4.l中醫療效標準中醫癥狀分級按無、輕、中、重分別用(_)、(+)、(++)、(+++)表示。評分方法無(_)為0分；輕(+)為1分沖(++)為2分；重(+++)為3分。療效標準治療后臨床癥候積分值下降^2/3為明顯改善；治療后臨床癥候積分值下降^1/3，但<2/3為部分改善；治療后臨床癥候積分值下降<1/3為無改善。4.2西醫療效標準根據國家衛生部制訂的《藥物臨床研究指導原則》中升高白細胞(WBC)療效標準顯效WBC總數>4.OX107L，并在療程中能維持療效直至停藥1周，臨床癥狀顯著減輕或消失；有效WBC總數〈4.0X107L，但比治療前上升(0.51.0X109/U并在療程中能維持療效直至停藥1周，臨床癥狀好轉；無效WBC總數增高<0.5X107L，臨床癥狀無好轉。二、研究結果1.1中醫療效治療前后治療組與對照組癥候變化情況治療組明顯改善25例，部分改善19例，無改善11例，總有效率80%;對照組明顯改善10例，部分改善19例，無改善28例，總有效率50.88%;治療組與對照組在改善癥候方面有顯著差異。2.1西醫療效治療1組顯效17例，有效4例，無效7例，總有效率75.00%;治療2組顯效9例，有效15例，無效3例，總有效率88.89%;對照1組顯效9例，有效9例，無效15例，總有效率54.55%;對照2組顯效1例，有效13例，無效10例，總有效率58.33%;治療1組與對照1組比較，治療2組與對照2組比較，差異均有顯著性。1.2兩組患者治療前后WBC變化情況見表2。治療后3周WBC差值治療組與對照組差異有顯著性(P<=0.0239<0.05)。治療組WBC的回升明顯高于對照組。表2兩組患者治療前后WBC變化情況(X107U<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>效果實施例2動物實驗研究1、實驗動物及分組C57BL/6J純系小鼠，雌性，體重1820g，810周齡，144只隨機分成4組，每組36只，分別為本發明的中藥組合物組、茜草雙酯組、生理鹽水組、正常組。2、給藥方法中藥組合物組用實施例2方法所制的顆粒劑配制成液體，每天每只小鼠胃飼給藥0.4ml(相當于生藥40g/kg);茜草雙酯組每天每只小鼠飼胃給藥0.4ml，相當于生藥100mg/kg;生理鹽水組每天每只小鼠胃飼給藥0.4ml生理鹽水；正常組不做任何處理。3、實驗方法分別于給藥的第2、4、6、8天，每組各取9只小鼠脫頸椎處死，鈍性分離肌肉，取出股骨，迅速浸泡于2.5%戊二醛內，充分固定后，用1%鋨酸后固定1.5小時，丙酮逐級脫水，EPON812環氧樹脂包埋，切片，染色，電鏡下觀察各組小鼠第2、4、6、8天超微結構變化。4、結果:電鏡下正常組小鼠骨髓可見各個不同分化階段的粒系、紅系造血島，細胞排列整齊，邊界清晰，易見早期未分化型細胞。實驗第4天，各用藥組小鼠骨髓細胞明顯減少，粒系受損嚴重，鏡下可見少量紅系造血島。中藥組合物組細胞膜完整，胞漿中線粒體略有腫脹，核內染色體無較大變化；茜草雙酯組細胞膜較完整，線粒體亦腫脹；生理鹽水組鏡下一片荒蕪，很少見到骨髓粒細胞，只見少量紅系早期造血細胞。實驗第6天，中藥組合物組鏡下見骨髓細胞密集，邊界清晰，并可見各個不同階段的血細胞，細胞膜規整，胞漿中內器豐富，內質網略有擴張，線粒體腫脹。茜草雙酯組見少量骨髓血細胞，細胞膜破裂，染色質外瀉，血竇內皮細胞胞漿扭曲斷裂，線粒體腫脹；生理鹽水組骨髓內血細胞數量少，細胞膜不規整，核內異染色體凝集成塊狀。實驗第8天，中藥組合物組內線粒體腫脹程度減輕；茜草雙酯組鏡下見造血細胞較前增多，胞漿內質網擴張明顯，甚則呈囊狀，有的細胞核膜不完整，以染色體凝集成斑塊狀，常染色體分布不均勻；生理鹽水組骨髓內血細胞較前增多，細胞膜不規整，胞漿內質網擴張，線粒體腫脹明顯。5、總結化療是治療癌癥的主要手段之一，但一些化療藥物對骨髓抑制比較嚴重，導致化療中斷，亦有并發重度感染而死亡。近年來國內外腫瘤學者及廠家紛紛研制造血細胞因子，如G-CSF，GM-CSF，在腫瘤治療中發揮較好的輔助作用，但這些造血細胞因子價格比較貴，且有反跳現象?？梢鸸峭?、發熱等副反應。近年來，中醫中藥在對腫瘤化療患者升白作用俄臨床研究中取得了一些進展，本發明的中藥組合物不僅升高白細胞療效明顯，提高機體免疫力，而且還能改善中醫癥候和癥狀，是造血因子雖不具備的?；熁颊叽蠖鄶当憩F為乏力、口干、腰膝酸軟、食欲不振、脈象虛軟等氣陰兩虛證，本發明的中藥組合物其組方原則為益氣養陰，扶正培本，調整腫瘤患者機體內在的陰陽平衡、氣血平衡。中醫學認為氣血來源于臟腑，兩者相互滋生，相互依附，不可分離。其中有血，血中有氣，氣以生血養血，血以養氣載氣，氣無血則不生，血無氣則不長。補氣則能生血，陰血同源，生血也能生陰。所以本發明的中藥組合物在臨床上同樣適用于氣虛患者，并取得了較滿意的效果。動物實驗表明，本實驗的第4天，電鏡下觀察，茜草雙酯組、生理鹽水組小鼠骨髓的血竇遭到嚴重破壞，內皮細胞扭曲破裂，第6天，仍沒有恢復正常，相反，本發明的中藥組合物組造血功能恢復較快；保護和改善了骨髓造血微環境；升高白細胞，提高機體免疫力。效果實施例3動物實驗研究1、實驗動物、給藥方法及分組ICR小鼠，雄性，體重1822g。取小鼠78只，隨機分為6組，每組13只，除正常對照組外，均接受Se-137放射源照射，照射后1天(ld)檢測WBC，再據WBC隨機分組，分別為(l)正常對照組(蒸餾水20ml/kg/d);(2)白細胞較少正模型組(蒸餾水20ml/kg/d);(3)利可君組(20mg利可君/kg/d);(4)中藥組合物大劑量組(9.2g生藥/kg/d);(5)中藥組合物中劑量組(4.6g生藥/kg/d);(6)中藥組合物小劑量組(2.3g生藥/kg/d)，分組后灌胃給藥，每日一次。2、白細胞減少癥模型組小鼠接受Se-137放射源照射，劑量率為0.87Gy/min，總劑量為4Gy，照射后1天(ld)檢測白細胞，白細胞降至4X109/L為白細胞減少癥模型。3、實驗方法3.l外周血象檢測給藥第4，7，10日，各組小鼠尾靜脈取血，血細胞分析儀上進行白細胞、紅細胞、血小板和血紅蛋白含量測定。3.2骨髓有核細胞計數(BMNC)給藥第IO日，各組動物稱重后脫臼處死，取右側完整股骨，用3X醋酸液10ML沖出全部骨髓，使成單細胞懸液，顯微鏡下計數BMNC。3.3脾結節計數(CFU-S)給藥第IO日，脫臼處死各組小鼠，脾臟稱重后如Bouin液保存，第2日計數脾凸面結節數，即為內源性脾結節數。3.4胸腺、脾臟指數稱重各組小鼠胸腺、脾臟，其與體重之比即為胸腺、脾臟指數。3.5含藥血清制備方法正常ICR小鼠隨機分為3組，分別灌胃中藥組合物、利可君或等體積生理鹽水(NS)，每日給藥2次，連續3日，末次給藥或NS1.5小時后摘取小鼠眼球取血，存放于1.5ml離心管中，室溫靜置3小時，3000r/min離心10min，分離血清，56。C滅活30min，備用。3.6骨髓細胞增殖實驗(MTT法)取ICR小鼠6只，接受Se-137放射源照射，總劑量為3.5Gy，照射后第2日，無菌取小鼠雙側股骨，用RP-MI1640液沖出骨髓，過4號針頭，使成單細胞懸液，洗細胞2次，棄上清，調細胞含量5X107ml，于96孔培養板中每孔加入細胞懸液100iU，再加入含藥或空白血清，每孔30iil，其中，中藥組合物中、小劑量組每孔分別加含藥血清20，10ia，并用空白血清不足體積至30iU，置5%C02，37°C飽和濕度培養箱中培養24h后，每孔加入0.5%(5mg/ml)MTT20ii1，繼續培養4h，1000r/min離心15分鐘，棄上清，每孔加入二甲亞砜(匿S0)200ia，充分混勻，靜置數分鐘，置酶標儀于波長570mm處檢測吸光度(A)值，以此值代表骨髓細胞增殖程度。3.7造血祖細胞集落培養脫臼處死小鼠(照射模型6只)。在75X乙醇中浸泡3min，取完整股骨，用消毒紗布包裹，剔取肌肉，用注射器吸取RPMI1640液沖出骨髓細胞，通過4號針頭過濾，使成單細胞懸液。無菌條件下，取容量10ml的離心管，加入3-4ml淋巴細胞分離液，將骨髓細胞加載分層液上，2000r/min離心15min，取出中間黃色的界面層，置于另一離心管，加含10%小牛血清的培養液洗滌23次，通過4號針頭過濾，計數有核細胞，使其含量為2X107ml，每個培養皿加入0.9ml此骨髓細胞懸液(每鼠細胞懸液重復2皿)，各個皿中再分別加入藥物血清100iU。GM-CSF10ng，并加入3X瓊脂100yl，輕輕搖晃，使其充分鋪平，送入5%C02，37t:飽和濕度培養箱中培養7d，在倒置顯微鏡下計數集落數，以多于40個細胞的克隆單位為1個集落。3.8CD34+細胞檢測照射模型小鼠照射后第2日隨機分組，給藥，給藥第7日，用含牛血清白細胞濃度為0.2%的磷酸鹽緩沖液(PBS)沖出小鼠股骨骨髓細胞，取lX10e個細胞加入30ia正常小鼠血清以封閉非特異結合位點，加入10iUFITC標記的大鼠抗小鼠CD34抗體，對照管加入相應的對照抗體，4t:避光反應30min，加入2ml紅細胞裂解液，作用5min，洗細胞2次，加入終濃度為3iig/ml(微克/毫升)的碘化丙啶(PI)染液，上流式細胞儀檢測，記錄綠色熒光。4、結果4.1對小鼠WBC的影響照射可使小鼠WBC下降，與正常組比較差異有顯著性，中藥組合物灌胃可明顯升高模型小鼠WBC，在給藥第4日4.6g/kg/d劑量組小鼠WBC與模型組比較有顯著性差異(P<0.05)，在給藥第7和10日，中藥組合物各劑量組WBC與模型組比較均有增加，有顯著性差異(表3)。表3中藥組合物對小鼠WBC的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>4.2對小鼠脾結節計數和骨髓有核細胞數的影響給與中藥組合物可以升高模型小鼠CFU-S及B麗C，與模型組比較差異有顯著性(表4)。表4中藥組合物對小鼠脾結節、骨髓有核細胞數、胸腺指數和脾臟指數的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>4.3對小鼠骨髓細胞增殖的影響實驗結果顯示，中藥組合物血清對照模型小鼠骨髓細胞增殖具促進作用(表5)。表5藥物血清對小鼠骨髓細胞增殖的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>4.4藥物血清對粒_單系造血祖細胞集落(CFU-GM)形成的影響中藥組合物血清能夠促進小鼠CFU-GM增殖，與對照組比較差異有顯著性(P<0.001)，表明中藥組合物對粒-單系造血祖細胞集落增殖具促進作用(表6)。表6藥物血清對粒單系造血祖細胞集落(CFU-GM)形成的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>4.5對小鼠CD34+細胞的影響CD34造血細胞包含造血干細胞和造血祖細胞，小鼠骨髓中CD34+細胞的比例，可反映骨髓中造血干祖細胞的數量，本實驗結果顯示，藥物能增加照射模型小鼠中CD34+細胞的比例，提示藥物有促進骨髓造血干/祖細胞增殖的作用(表7)。表7藥物對小鼠骨髓CD34+細胞的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>結論本發明的中藥組合物可明顯升高模型小鼠的白細胞(WBC);可升高模型小鼠的骨髓有核細胞計數并促進骨髓細胞增殖；可升高脾結節計數，提高粒單系集落形成單位產率，提高骨髓CD34細胞比例，對造血干/祖細胞增殖具有促進作用；具有保護模型小鼠骨髓造血微環境作用；可升高模型動物胸腺指數，具有一定的免疫增強作用。權利要求一種可升高白細胞的中藥組合物，其特征在于其主要是由下述重量配比的原料中藥材制得黃芪6-60份、黃精6-60份、天花粉6-60份和淫羊藿3-30份。2.如權利要求1所述的中藥組合物，其特征在于所述的重量配比的原料中藥材中還包括女貞子3-30份和骨碎補6-60份。3.如權利要求2所述的中藥組合物，其特征在于所述的中藥組合物主要是由下列重量配比的原料中藥材制得黃芪10-40份，黃精10-40份，天花粉10-40份，女貞子5-20份，骨碎補10-40份和淫羊藿5-20份。4.如權利要求3所述的中藥組合物，其特征在于所述的中藥組合物主要是由下列重量配比的原料中藥材制得黃芪30份，黃精30份，天花粉30份，淫羊藿15份，女貞子15份和骨碎補30份。5.如權利要求14中任一項所述的中藥組合物，其特征在于所述的中藥組合物的劑型為口服液體制劑、顆粒劑、滴丸劑、散劑、片劑、膠囊劑、脂質體、緩釋制劑、控釋制劑或注射劑。6.—種如權利要求14中任一項所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于選自下述三種方法中的任一種方法一(1)按照所述的重量配比稱取原料中藥材；(2)將上述原料中藥材干燥粉碎成細粉，得活性成分細粉；方法二(1)按照所述的重量配比稱取原料中藥材；(2)將黃芪、黃精和淫羊藿加水煎煮，過濾，取濾液，離心分離去除固體物質，取上清液濃縮成清膏，在將其余原料中藥材干燥粉碎成粉，與上述清膏混合均勻，得活性成分清膏；方法三(1)按照所述的重量配比稱取原料中藥材；(2)將上述原料中藥材加水煎煮，過濾，取濾液，離心分離去除固體物質，取上清液濃縮成清膏，得活性成分清膏。7.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于方法二或三中，所述的加水煎煮的步驟中，每次加水的量為生藥重量的8-16倍，煎煮的溫度為煎煮液沸騰的溫度，煎煮的時間為2-4小時，煎煮的次數為1-4次；所述的取上清液濃縮成清膏的步驟中，清膏的相對密度為0.81.5。8.如權利要求6所述的制備方法，其特征在于將所述的方法一制得的活性成分細粉，或所述的方法二或三制得的活性成分清膏，或由該清膏干燥，粉碎制成的活性成分細粉，與賦型劑按本領域常規方法制成常規劑型。9.如權利要求8所述的制備方法，其特征在于所述的常規劑型為口服液體制劑、顆粒劑、滴丸劑、散劑、片劑、膠囊劑、脂質體、緩釋制劑、控釋制劑或注射劑。10.如權利要求14中任一項所述的中藥組合物在制備治療白細胞減少癥；提高機體免疫功能；促進骨髓造血干/祖細胞增殖、保護造血微環境；修復放射線對骨髓造血組織的損壞和損傷；防治放化療的骨髓抑制；促進粒-單系造血祖細胞集落形成；改善和提高癌癥患者中醫癥候和生活質量；或促進氣陰兩虛患者的恢復的藥物中的應用。全文摘要本發明公開了一種升高白細胞的中藥組合物，其主要由下述原料藥按重量配比制得黃芪6-60份、黃精6-60份、天花粉6-60份和淫羊藿3-30份。本發明還公開了本發明的中藥組合物的制備方法以及其在制備治療白細胞減少癥；提高機體免疫功能；促進骨髓造血干/祖細胞增殖、保護造血微環境；修復放射線對骨髓造血組織的損壞和損傷；防治放化療的骨髓抑制；促進粒-單系造血祖細胞集落形成；改善和提高癌癥患者中醫癥候和生活質量；或促進氣陰兩虛患者的恢復的藥物中的應用。文檔編號A61K36/88GK101721612SQ20081020204公開日2010年6月9日申請日期2008年10月31日優先權日2008年10月31日發明者徐振曄申請人:上海潤知生物科技有限公司