專利名稱：：蟾毒它靈在制備治療肺部腫瘤藥物中的應用的制作方法
技術領域：
：本發明涉及蟾毒它靈的新用途，具體是涉及蟾毒它靈及其組合物在制備治療肺部腫瘤藥物中的應用。
背景技術：
：肺癌是最常見的肺原發性惡性腫瘤，絕大多數肺癌起源于支氣管粘膜上皮，故亦稱支氣管肺癌。近50多年來，世界各國特別是工業發達國家，肺癌的發病率和病死率均迅速上升，死于癌病的男性病人中肺癌已居首位。肺癌晚期可出現各個不同臟器的轉移，可引起相應的癥狀，常常給病人帶來極大的痛苦，甚至威脅到生命。臨床最常見肺癌轉移到腦、骨、肝及腎與腎上腺等部位。肺癌有以下兩種基本類型1)小細胞肺癌(SCLC)近20%的肺癌患者屬于這種類型；2)非小細胞肺癌(NSCLC)類，約80%的肺癌患者屬于這種類型。目前肺癌的治療有化療、放療及手術治療等，但是由于SCLC特有的生物學行為，且對化療敏感，所以化療全身治療很重要。許多化療藥如環磷酰胺(CTX)、異環磷酰胺(IF0)、長春花鹼(VLB)、長春新堿(VCR)、氮芥(HN2)、足葉乙甙(VP16)及其口服膠囊、蒽環類藥、卡鉑(CBP)等，其單藥的近期有效率在40%以上。非小細胞肺癌(NSCLC)，對放療或化療不甚敏感或不敏感，所以一經確診，首選手術切除治療，術后再根據情況予以補充治療。一方面切除率低，另一方面即使切除，術后復發、轉移的機率也高，所以對于NSCLC，需手術、放療、化療等綜合治療，才有可能改善生活質量，提高生存率。凡術前可能切除困難的、術后有潛在的復發轉移傾向的、術后出現復發轉移的、病期晚已失去手術切除機會的，均需化療治療。由于化療的進展及有效化療藥物的增多，提高了NSCLC化療的近期有效率，但達到CR的病例不多。但近年來，綜觀文獻報道，已在逐漸改變對轉移性NSCLC化療不能延長生存期的狀況，而出現部分病例通過化療可適當延長生存期，因之化療在NSCLC的綜合治療中，已成為不可缺少的手段。當然現有化療的毒性不容忽視，如腎毒性及胃腸道反應等。現有化療藥物的治療效果、毒性及病人對化療藥物的耐受性均對新的化療藥物的出現寄予極大期待。
發明內容本發明所要解決的技術問題是公開一致蟾毒它靈在制備治療肺部腫瘤藥物中的應用，以滿足臨床應用的需要。蟾毒它靈，是從中藥蟾酥或蟾皮以及蟾蜍分泌物中提取分離得到的一種化合物，其結構式為<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>所述蟾毒它靈可采用文獻報道的方法進行制備(楊秀偉等，華蟾毒精和羥基華蟾毒精的人腸內細菌代謝研究[J].北京大學學報(醫學版)，2001,33(3):199-204.;張英等.中華大蟾蜍皮的化學成分[J].沈陽藥科大學學報，2007，24(8):484-487.)，或者可采用商業化的產品，如J&KCHEMICALLTD.公司提供CAS號為471-95-4的產品。發明人發現，所述蟾毒它靈，具有優異的抑制腫瘤生長的功能，尤其是抑制肺部腫瘤生長的功能，可以用于治療肺部腫瘤。可以以組合物的形成，通過口服、靜脈注射或者是透皮滲透方式，施加于需要治療的患者，劑量一般為0.053mg/天/Kg，具體可根據病人的病情、年齡等，由醫師決定；所述組合物，包括治療有效量的蟾毒它靈和醫藥學上可接受的載體，所述載體包括稀釋齊U、賦形劑如水等，填充劑，如淀粉、蔗糖等，粘合劑，如纖維素衍生物明膠、聚乙烯吡咯烷酮等，潤滑劑，如滑石粉等。含有蟾毒它靈的組合物中，蟾毒它靈的重量含量為0.01%99.9%;優選的重量含量為0.1%99.0%。可采用本領域公知的方法，將含有蟾毒它靈的組合物，制備成為粉針劑、顆粒劑、膠囊、膏劑、霜劑、透皮貼劑或其他口服劑。經過蟾毒它靈體外抗腫瘤實驗，申請人發現，動物肺部藥物濃度均高于起效藥物濃度，蟾毒它靈對人非小細胞肺癌及其它肺部腫瘤細胞株具有較強的抑制活性，IG。在15200ng/ml，并且具有較好的量效關系。實驗結果顯示，蟾毒它靈的抑制腫瘤生長效果優于臨床現在應用的藥物，具有很大開發應用前景。具體實施例方式實施例1化合物蟾毒它靈的分離精制將蟾酥藥材敲碎后利用粉碎機打成細小顆粒，稱取300g置于5L圓底燒瓶中，加入3L體積濃度為95%的乙醇，水浴加熱回流6h，提取液過濾；藥渣再加5L體積濃度為95%乙醇同上操作，共提取3次，合并全部濾液，在55t:水浴旋轉濃縮至250ml時，轉移至大梨型瓶中再加入500ml純水，加入500ml氯仿，蓋塞振搖并超聲2h，放置過夜分層，分取氯仿層；剩余水層再加入氯仿同上操作，共萃取多次。合并全部氯仿層減壓濃縮至干，得固體。取氯仿萃取物，用氯仿溶解后，加薄層層析硅膠G拌樣，用硅膠H上柱，用石油醚和乙酸乙脂梯度洗脫層析分離，得到多個流份。將含有蟾毒它靈的流份，以體積濃度為45%的甲醇為流動相進行分離收集相應組分并濃縮至干，即可獲得蟾毒它靈純品。實施例2配制蟾毒它靈注射液配方(以重量比例計)蟾毒它靈i-io份，藥用級乙醇5100份CremophorEL5100份.維生素C0.0012份.采用公知的方法，配制成為注射液。實施例3片劑(以重j淀粉羥丙甲纖維素微粉硅膠硬脂酸鎂:比例計)i-io份5-100份0.1-10份0.01-0.5份0.01-0.5份采用公知的方法，制備成為片劑。實施例4蟾毒它靈對人非小細胞肺癌A549的抑制作用采用文獻(黃銀久，等〃SRB法和MTT法抗腫瘤藥物篩選結果相關性研究.〃生物學雜志(04):13-16.)報道相同的SRB法，對人非小細胞肺癌A549進行體外抑制活性測試。人非小細胞肺癌A549由中國科學院上海細胞庫提供。試驗藥物將蟾毒它靈溶解在甲醇或匿SO中配制成不同濃度的溶液，其中，蟾毒它靈由J&KCHEMICALLTD提供。將不同濃度的藥物分別加樣測其對人非小細胞肺癌A549細胞生長的抑制活性，加樣量不超過1%。試驗結果見表1。l，對人非小細胞肺癌A549細胞生長的抑制率％濃度(Hg/ml)0.10.050.0250.01250.00630.00310.00160.00078ic50(嗎/ml)蟾毒它靈80.475.362.749.321.80.017實驗結果顯示蟾毒它靈對人非小細胞肺癌A549具有較強的抑制作用，呈現了較好的量效關系，其IC5。在0.018iig/ml。實施例5蟾毒它靈在肺內藥物濃度測定采用HPLC分析方法，采用C185iim250X4.6mm色譜柱，以0.5%KH2P04_乙腈(用磷酸調pH值至3.0)(60:40)作為流動相，流速1.Oml/min，檢測波長UV296nm，柱溫:40°C。5將蟾毒它靈配制成lmg/ml的注射液，取小鼠，準確稱重后，以每28分鐘輸入4mg/kg的劑量進行小鼠尾靜脈恒速注射。注射結束后，迅速脫臼處死小鼠，取出肺組織，純水洗后吸干，用剪刀剪碎后放入10ml具塞玻璃離心管中并精密稱定重量，加入乙酸乙脂3.0ml，渦旋振蕩2min，超聲20min，3000R/min離心10min，頃出上層(其中血漿放入_201:冰箱，待下部結冰固化后再頃出上層)吹干后，各加入100y1甲醇溶解，靜置，取上清液20ii1進行HPLC分析。分析結果見表2。表2恒速輸注小鼠(4mg/kg28min)肺組織中蟾毒它靈分布結果(單位Pg/g)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>由表2可見，小鼠肺內組織藥物濃度可以達到0.872±0.3165iig/g，遠遠高于藥物起效的有效濃度，顯示了蟾毒它靈可以很好的分布到肺組織。蟾毒它靈及含有蟾毒它靈的組合物可以很好的分布到肺組織，，并能在穩態狀況下達到有效藥物濃度之上，而且具有很高的對肺部腫瘤組織的生長抑制活性，因此具有很大的開發成治療肺部腫瘤藥物的前景。權利要求蟾毒它靈在制備治療肺部腫瘤藥物中的應用。2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述藥物包括治療有效量的蟾毒它靈和藥學上可接受的載體。3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述藥物為注射劑、粉針劑、顆粒劑、膠囊、膏劑、霜劑、透皮貼劑或其他口服劑。4.根據權利要求1、2或3所述的應用，其特征在于，所述肺部腫瘤為人非小細胞肺癌。全文摘要本發明公開了蟾毒它靈在制備治療肺部腫瘤藥物中的應用，蟾毒它靈體外抗腫瘤實驗證明，動物肺部藥物濃度均高于起效藥物濃度，蟾毒它靈對人非小細胞肺癌及其它肺部腫瘤細胞株具有較強的抑制活性，IC50在15～200ng/ml，并且具有較好的量效關系。實驗結果顯示，蟾毒它靈的抑制腫瘤生長效果優于臨床現在應用的藥物，具有很大開發應用前景。文檔編號A61K31/585GK101785777SQ201010136070公開日2010年7月28日申請日期2010年3月30日優先權日2010年3月30日發明者于垂亮,侯惠民申請人:上海現代藥物制劑工程研究中心有限公司