專利名稱：魚鱗衍生的組織修復結構的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種生物結構，特別是一種應用于生物體(比如人體)的組織修復結構。
背景技術：
全世界有數百萬人患有眼疾，有些是先天的，也有些是后天造成的，諸如化學性灼
傷......等。對于角膜受損的病患，輕微者施以藥物治療尚能維持正常的視力；然而對于
角膜受損嚴重的病患，則往往需要以手術的方式來治療。傳統的治療方式是利用角膜移植的方式來使患者視力恢復，但角膜來源受限是個極需被解決的問題。此因素也使得角膜取代物的研究與發展與日俱增。由于不同材料的性質，使得角膜取代物運用不同的原理而誕生。目前以合成性高分子為主流，配合中心與外圍技術(core and skirt technology)的使用，來設法使患者的視力恢復至正常。如美國專利第6，976，997號中是以聚甲基丙烯酸羥乙酯 (poly 2-hydroxyethyl methacrylate, pHEMA)為所述的裝置的中心(core)部分而對于外圍(skirt)的部分則以聚四氟乙烯(polytetrafluoroethylene，PTFE)或膨體聚四氟乙烯(expanded polytetrafluoroethylene, ePTFE)所衍伸的材質來作為角膜修補的材料。另外，中心(core)部分也有利用聚甲基丙烯酸甲酯(polymethyl methacrylate, PMMA)為材料所構成的人工角膜，如 Marshall G. Doane，et al.，“ Fabrication of a Keratoprosthesis", Cornea, 15 (2)，179-184 (1996)所述。然而上述這類高分子材料，均不為生物可分解性材質，因此植入患者眼睛里后，便持續存在于患者體內，倘若材質本身的透氧率不足或過高以及折射率的問題未能在植入生物體(比如人體)后持續維持良好狀態的話，對于患者眼睛本身依舊可能造成負擔。因此，一種利用組織工程技術來作為角膜手術方法即提供另一種治療的概念。組織工程技術乃提供一生物相容性以及生物可分解性材質作為支架，提供一個三維結構的立體空間，讓患者體內本身的細胞能夠進入所述的支架內生長；隨著時間的增長， 患者本身的細胞能在支架內具有良好的生長情況，并且支架所含的不同組成也會漸被體內的特定酵素所分解，待支架完全被分解完畢之后，患者自身角膜組織也已成長完畢，而可達到角膜修補以及視力回復的目的，并且此組織為患者本身所有，因此不會有任何的免疫排斥...等副作用產生，預后效果較好。現有一種支架材料取得方式，是直接自其他種(或同種)動物體內取得組織，并進行去細胞等適當步驟處理后，再依據材料的特性依實際需求使用于組織修復的應用上， 如美國專利第7，678，144號提到的去細胞小腸粘膜下層(small intestine submucosa, SIS)用于血管的移植物；美國專利第7087089號提到的去細胞的腎包膜(renal capsule tissue)應用于心導管支架的植入物以及美國專利第6，326，019號所述的去細胞羊膜運用于角膜組織修補。由于此種方式所制得的支架，其本身的機械強度較能符合人體植入物所需的限制，且支架的制備步驟較為簡便，與合成性高分子相比支架制程的穩定度較高。
然而選用動物組織作為組織工程的支架的使用上，倘若所選用的動物與人類有共通的傳染疾病時，則對于支架使用的安全性將是另一個需要被重視的議題。因此，如何能夠改善目前角膜修復材料的問題，開發出一種制程簡便又能兼具安全性以及有效性的組織修復裝置，是相關業者致力解決的目標。

發明內容
本發明的目的是提供一種組織修復結構，特別是應用于生物體(比如人體)受損組織修復的組織修復結構。本發明裝置包含提供一個特殊的微孔道(microcharmel)結構，且所述的特殊的微孔道(microcharmel)結構有利于細胞的貼附與增生。本發明的另一個目的是提供一種可取代現有用于組織修復的組織修復結構。本發明的另一個目的是提供一種組織修復結構，應用于受損角膜修補的組織修復結構。本發明的另一個目的是提供一種組織修復結構，應用于真皮層填充的組織修復結構。本發明的另一個目的是提供一種組織修復結構，應用于皮膚表面創傷敷料的組織修復結構。本發明的另一個目的是提供一種組織修復結構，應用于防止術后縫線疤痕產生的組織修復結構。本發明的另一個目的是提供一種組織修復結構，應用于骨頭缺損修補的組織修復結構，比如骨釘、骨板......等。本發明提供的一種組織修復結構，包含一經適當步驟處理過的魚鱗構成的生物可分解性以及生物相容性的基材。為實現上述目的，本發明采用的技術方案是一種組織修復結構，其特征在于包含至少一個具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗。較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗來自于硬骨魚類，其中所述的硬骨魚類的魚鱗選自圓鱗或櫛鱗。較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗的LAL值小于 lOOOEu/ml。較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗結構為纖維狀。較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗含有膠原蛋白(collagen)ο較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗更包含有磷酸鈣鹽類。較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗具有一層與層之間交錯排列的纖維狀復數層結構。較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗為圓管柱狀(tubular form)。較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗為平板狀 (plate form)0較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗為粉末狀 (powder form)0較佳的技術方案中，所述的具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗為螺絲釘狀 (screw form)0與現有技術相比較，采用上述技術方案的本發明具有的優點在于由于本發明提供的一種組織修復結構的構造特殊，因此本發明的一項優點為可依照所欲植入的部位的機械強度要求進行材料制程處理，以提供一個具有足夠機械強度的組織修復結構，并且此處理步驟較為簡便。


圖1為本發明組織修復結構的圓管柱(tubular form)狀型態的示意圖；圖2為本發明組織修復結構的平板狀(plate form)型態的示意圖；圖3為本發明組織修復結構的粉末狀(powder form)型態示意圖；圖4A為經適當步驟處理過的魚鱗顯微結構的掃描式電子顯微鏡(scanning electron microscopy, SEM)圖(35X)；圖4B為經適當步驟處理過的魚鱗顯微結構的掃描式電子顯微鏡(scanning electron microscopy, SEM)圖(600X)；圖4C為經適當步驟處理過的魚鱗內部纖維結構的掃描式電子顯微鏡(scanning electron microscopy, SEM)圖(3000X)；圖5A為兔子角膜細胞培養在經適當步驟處理過的魚鱗材料的掃描式電子顯微鏡 (scanning electron microscopy, SEM)圖(培養時間1 天)；圖5B為兔子角膜細胞培養在經適當步驟處理過的魚鱗材料的掃描式電子顯微鏡 (scanning electron microscopy, SEM)圖(培養時間2 天)；圖5C為兔子角膜細胞培養在經適當步驟處理過的魚鱗材料的掃描式電子顯微鏡 (scanning electron microscopy, SEM)圖(培養時間7 天)；圖6A為兔子角膜細胞培養在經適當步驟處理過的魚鱗材料的共軛焦顯微鏡 (confocal microscopy)暗場(dark field)螢光圖(培養時間1 天)；圖6B為兔子角膜細胞培養在經適當步驟處理過的魚鱗材料的共軛焦顯微鏡 (confocal microscopy)暗場(dark field)螢光圖(培養時間2 天)；圖6C為兔子角膜細胞培養在經適當步驟處理過的魚鱗材料的共軛焦顯微鏡 (confocal microscopy)暗場(dark field)螢光圖(培養時間3 天)；圖6D為兔子角膜細胞培養在經適當步驟處理過的魚鱗材料的共軛焦顯微鏡 (confocal microscopy)暗場(dark field)螢光圖(培養時間7 天)。附圖標記說明1-圓管柱(tubular form)狀的組織修復結構；11-圓管柱(tubular form)狀的組織修復結構的內部微孔道(microcharmel)顯微構造；2-平板狀(plate form)狀的組織修復結構；21-平板狀(plate form)狀的組織修復結構的內部微孔道(microcharmel)顯微構造；3-粉末狀(powder form)狀的組織修復結構；31-粉末狀(powder form)狀的組織修復結構的內部微孔道(microcharmel)顯微構造。
具體實施例方式本發明的組織修復裝置主要在提供一個具有足夠機械強度的生物體(比如人體) 的組織修復結構，其是由魚鱗經洗凈，僅保留魚鱗的部分作為組織修復結構，并在使用前， 將所述的組織修復結構洗凈到可以通過LAL鑒定(limulus amebocyte lysate,LAL test), 其是一種分析細菌所含內毒素的含量的檢驗方式，而處理過后的組織修復結構在LAL鑒定中的檢驗值必須小于1000Eu/ml，其較佳實施例的LAL檢驗值小于200Eu/ml ；至于在一實施例中，若要作為某些特殊的醫療器材使用時，則必須使LAL檢驗值小于50Eu/ml。其中所述的組織修復結構的處理步驟可依照實際應用情況來做不同制程的處理，至少可包含去細胞、脫鈣...等步驟，且所述的組織修復結構特別是來自于硬骨魚的魚鱗，其中，可包含圓鱗以及櫛鱗。請參照圖4A、B、C以及圖5A、B、C，其中，圖4A、B、C顯示的為魚鱗顯微結構的掃描式電子顯微鏡(scanning electron microscopy, SEM)圖；而圖5A、B、C顯示的是將自兔子眼睛中取出的眼角膜細胞培養在魚鱗后，所得的角膜細胞在魚鱗材料上生長情況的掃描式電子顯微鏡(scanning electron microscopy, SEM)圖。魚鱗表面的顯微結構具有一特殊的微孔道(microcharmel)部分，且其微孔道(microcharmel)的寬度至少為10 μ m，在一較佳實施例中，微孔道(microcharmel)的寬度為10-50 μ m，而其微孔道的高度至少為1 μ m， 在一較佳實施例中，微孔道(microcharmel)的高度為1_30 μ m，請參照圖4A。憑借此特殊的微孔道(microcharmel)顯微結構，將有利于細胞在經適當步驟(比如去細胞、脫鈣...等) 處理過的魚鱗材料上面，沿著微孔道(microcharmel)的突起墻(即細胞將沿著圖4A的箭頭的方向)進行貼附以及增生，請參照圖5A。此處所謂的微孔道(microcharmel)顯微結構指的是在掃描式電子顯微鏡(scanning electron microscopy, SEM)下所觀測到的表面型態；而所謂的微孔道(microcharmel)寬度指的是突起墻與墻之間的距離，請參照圖4A箭頭處；至于微孔道(microcharmel)高度指的是突起墻的高度。魚鱗結構的另一特色為其表面形貌是由中心往外放射的同心圓的結構，此一表面形貌將有助于引導細胞生長，請參照圖4B以及圖5A。至于魚鱗的材料在經過脫鈣...等步驟的處理過后，其魚鱗內部本身的細胞外間質(extracellular matrix,ECM)結構不會受到破壞，因此所述的具有細胞外間質的魚鱗材料，將不僅有利于細胞的貼附以及增生，也由于其結構并未受制程處理過程中的破壞，而得以維持其原先的三維(3-D)結構，有利于細胞在不失去其型態以及功能的情況下，穩定的存在并持續在所述的脫鈣魚鱗結構中增生，請參照圖4C以及圖5B、圖5C。此外，過去文獻指出，魚鱗的內部結構為由層狀結構所構成的復數層結構且每層的結構為纖維狀結構，并趨向于以順向排列而成。再者，相臨的層與層之間的順向纖維狀結構排列大約相差90度。形成一交錯排列的修復填充結構。因此，此一魚鱗的復數層交錯排列的纖維狀結構，提供良好的機械性質，也能在植入生物體(比如人體)內后維持一足夠的機械強度，以提供一穩定的支架環境，讓細胞生長。另外，也可依據應用的組織修復的不同， 改變制程來制造一適當的機械強度供植入生物體(比如人體)內的細胞生長。而魚鱗的層狀結構中的纖維狀構造為膠原蛋白(collagen)，其中所述的膠原蛋白 (collagen)又以第一型膠原蛋白(collagen type-I)為主要，因此對于組織修復以及防止疤痕產生也有正面的幫助。另外，生物體(比如人體)內的許多組織，特別是人體，諸如角膜、皮膚、骨頭...等，其細胞外間質(extracellular matrix)的主要成分的其中一項即為第一型膠原蛋白(collagen type-I)，因此魚鱗的主要成分恰好能夠完全符合生物體(比如人體)組織修復的應用。再者，魚鱗的纖維狀膠原蛋白(collagen)結構之間也有磷酸鈣鹽類的無機分子， 比如氫氧基磷灰石(hydroxyapatite，HAP)、磷酸三鈣(tricalcium phosphate, TCP)...等夾雜在其中，彼此緊密結合于一起，形成一特殊完美的交錯結構，因而提供一良好的拉伸強度至少為0. 5MPa，其中較佳實施例為0. 5 50MPa，倘若將處理過的魚鱗應用于組織工程的支架時，可提供足夠的機械強度而能在植入生物體(比如人體)內后，不至于使支架崩解而失去功能。魚鱗本身具備有良好的機械性質以及類似生物體(比如人體)成分，因而為一良好的生物性仿生材料。另外，直至今日為止，魚類與人類也尚未有共通的傳染病，因此將魚鱗使用于人體內部或與體表接觸時，可排除材料對人體可能產生的傳染病問題的疑慮。魚鱗衍生的組織修復結構可依據應用層面的不同而運用不同的方式進行材料型態的制備，請參照圖1，其描述的是圓管柱狀(tubular form)型態的組織修復結構；而圖2 描述的則是平板狀(Plate form)型態的組織修復結構以及圖3描述的為粉末狀(powder form)的組織修復結構，其中圓管柱狀(tubular form)或平板狀(plate form)形式的材料可依據特定模具的使用來得到特定形狀。此外，魚鱗衍生的組織修復結構型態亦可為螺絲釘狀(screw form)的組織修復結構，詳細情形述在底下的各實施例中實施例一制備去細胞魚鱗取得約兩百克魚鱗后，立即用二次去離子水清洗至少三次直至干凈。接著再將清洗干凈的魚鱗進行去細胞的步驟，其中去細胞步驟可采用低滲透壓來造成細胞脹破的方法 (hypotonic)、清潔劑(detergent)、Triton X-100、鈉十二燒基硫酸鈉(sodium dodecyl sulfate, SDS)、蛋白質酵素抑制物(protease inhibitor)、去氧核醣核酸酶(DNase)以及核醣核酸酶(RNase)等方法來處理，接著為了增加孔隙度以及孔隙率，因此再利用醋酸處理經過上述步驟的魚鱗。處理完后的材料利用無菌的磷酸鹽緩沖液沖洗至少三次后，浸泡在磷酸鹽緩沖液中，此即為去細胞的魚鱗。實施例二制備脫鈣的魚鱗在室溫下，將魚鱗放置在5%硝酸溶液中反應6-16小時，來降低魚鱗內部的磷酸鈣鹽類等無機成分，如氫氧基磷灰石(hydroxyapatite，HAP)、磷酸三鈣(tricalciumphosphate, TCP)...等。接著再將上述材料在4°C下，浸泡在A溶液(10% EDTA，2%硝酸) 中二至三天的時間，其間并持續更換A溶液，則隨浸泡時間的漸增，上述材料將更近一步降低所含的的磷酸鈣鹽類等的無機成分，比如氫氧基磷灰石(hydroxyapatite，HAP)、磷酸三
鈣(tricalcium phosphate, TCP)......等。經過上述步驟處理過的材料浸泡在70%酒精，
并保存在4°C下。實施例三經去細胞脫鈣魚鱗的透氧率測量經過去細胞以及脫鈣處理過的魚鱗的透氧率(Dk)可利用透氧儀(Oxygen Permeometer Model 201T ；Createch Inc.，Albany, CA, USA)在絕對濕度 100% 以及溫度35°C的環境下進行測定，其材料的透氧率在磷酸鹽緩沖液中的數值為48. 15X ΙΟ"11 (cm2 χ ml O2)/(sec χ ml χ mmHg)，其中所述的組織修復結構的透氧率較佳的實施例為30 130 (cm2 χ ml O2) / (sec χ ml χ mmHg)。實施例四在一實施例中，此來自于經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗組織修復的結構可作為組織工程中的支架材料，并應用于生物體(比如人體)受損角膜的修復。將去細胞脫鈣的魚鱗裁切成適當大小，其大小為適合患者損傷部位的大小，一般而言大小為 4-20mm。在植入生物體(比如人體)之前，所述的組織修復結構須洗凈至可以通過LAL鑒定(limulus amebocyte lysate, LAL test)，其是一種分析細菌所含內毒素的含量的檢驗方式，而洗凈后的組織修復結構在LAL鑒定中的檢驗值必須小于lOOOEu/ml，其較佳實施例的LAL檢驗值小于200Eu/ml。在一實施例中，利用從兔子取出角膜細胞，并放置在經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗組織修復結構中，利用共軛焦顯微鏡(confocal microscopy)分別觀察第一、 二、三、七天的角膜細胞貼附以及增生行為。在觀察前，為了能觀察此組織修復結構上的細胞貼附型態，因此必須先利用細胞固定劑，在不破壞細胞型態的情形下，將細胞固定在所述的組織修復結構上，其中在此一實施例中，所選用的細胞固定步驟為在室溫下利用3. 7%戊二醛(formaldehyde)反應15分鐘。此一細胞固定劑也可選用其他能提供相同功能的化學試劑來達到所述的一目的，如甲酸(formaldehyde)。接著，為了能使染劑順利進入細胞表面達到欲染到的部位，所以必須在細胞膜上產生孔洞，在本實施例中，所選用的化學試劑來達到穿孔目的者為TritonX-100，反應五分鐘。之后為了降低非專一性的結合，因此在本實施例中乃利用10%正常羊血清 (normal goat serum)禾口 5%牛血清白蛋白(bovine serum albumin)在室溫下，反應一小時來進行阻斷(blocking)的步驟。最后，為了利于共軛焦顯微鏡(confocal microscopy)觀察，在本實施例中， 將分別利用Hoechst 33342反應20分鐘來染細胞內的細胞核的部分；而用AlexaFluor 488-phalloidin來染F-肌動蛋白(F-actin)，其結果如圖6所示。請參照圖6A、6B、6C以及6D，圖中紅色的螢光為有被染到的F-肌動蛋白(F-actin)，而綠色的螢光為染到細胞核的部分，此結果證實脫鈣的魚鱗結構確實有利于細胞的貼附伸展以及增生，并且隨著陪養時間的增長，在經適當步驟處理過的魚鱗材料上的細胞數目也隨之增加。實施例五在一實施例中，可將經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗運用于創傷敷料的應用，例如外部傷口的處理上，此外部傷口可能是手術后縫線留下的創傷、青春痘造成的創傷...等，運用所述的經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗做為創傷敷料不僅能有效隔絕外部傷口的感染。另外，魚鱗由膠原蛋白(collagen)所構成，其中所指的膠原蛋白(collagen)以第一型膠原蛋白(collagen type-I)為主要，魚鱗的此一主要成分正好與皮膚中的膠原蛋白的成分相同，因此也能防止傷口因結痂所留下的疤痕造成不美觀的情況產生。更重要的是，魚鱗的特殊結構，能夠在傷口愈合的過程中，提供一足夠的拉伸強度至少為0.5MPa。在使用前，所述的組織修復結構須經洗凈至可以通過LAL鑒定(limulus amebocyte lysate, LAL test)，其是一種分析細菌所含內毒素的含量的檢驗方式，而洗凈后的組織修復結構在LAL鑒定中的檢驗值必須小于lOOOEu/ml，其較佳實施例的LAL檢驗值小于 200Eu/ml。實施例六在一實施例中，可將經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗運用于保護以及修復眼睛受損部位的應用，例如鞏膜鏡片(scleral lenses)、隱形眼鏡鏡片(contact lenses)、目艮內鏡片(intraocular lenses)以及角膜繃帶鏡片(corneal bandage lenses)...等，在眼睛手術后配戴的隱形眼鏡、雷射手術后配戴的隱形眼鏡保護層或是針對隱形眼鏡配戴過程中所造成的角膜損傷...等，都可利用此一經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗組織修復結構來保護與修復，且所述的裝置可利于上皮細胞的增生、防止
結痂的產生......等用途。然而所述的魚鱗的使用，并不限于必需全部以魚鱗做為眼睛的
覆蓋物，也可結合其他運用于隱形眼鏡的材質，保留中央主要視力區；僅將魚鱗放置在中央視力區以外的區域，以防止其他不必要的問題的產生。在使用前，所述的組織修復結構須經洗凈至可以通過LAL鑒定(limulus amebocyte lysate, LAL test)，其是一種分析細菌所含內毒素的含量的檢驗方式，而洗凈后的組織修復結構在LAL鑒定中的檢驗值必須小于 1000Eu/ml，其較佳實施例的LAL檢驗值小于200Eu/ml。實施例七在一實施例中，可將經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗應用于軟組織缺陷的植入材料，如臉部的抬頭紋、魚尾紋...等。皮下注射的材料在配制成液態時，其溶液的特性必須具有一定的特性。例如材料必須具有一定的粘稠度，才不會將材料植入生物體 (比如人體)的軟組織下之后，因為粘稠度不夠而立刻擴散開來，如此便無法作為定點修復組織的功能。一般而言，所述的經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗配制成溶液時， 其粘度經由毛細管流變儀測量的結果，較佳的粘度約為20-2000泊(poise)，且最高不得超過10000泊(poise)。另外，由于最終植入的經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗，其較佳使用方式是使用針筒注射，因此經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗須先經過研磨器具研磨至大小適合經由針頭注射的使用目的。另外，值得注意的是，在植入生物體(比如人體)之前，所述的組織修復結構須經洗凈至可以通過LAL鑒定(limulus amebocyte lysate, LAL test)，其是一種分析細菌所含內毒素的含量的檢驗方式，而洗凈后的組織修復結構在LAL鑒定中的檢驗值必須小于1000Eu/ml，其較佳實施例的LAL檢驗值小于200Eu/mlο實施例八在一實施例中，所述的經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗也可使用于骨頭補綴物的應用上，例如骨釘、骨板或骨頭填充物，且該骨釘的形狀為螺絲釘狀(screw form) 的組織修復結構。作為骨頭補綴物的幾個關鍵因素為植入物必須具有足夠的機械強度與硬度，以適合骨頭的強度，避免因為機械強度相差懸殊而導致應力集中，造成植入物或患者本身骨頭的損壞。另外，植入物是否能誘導骨母細胞的生長，也扮演著相當重要的角色。倘若植入物本身無法利于患者本身的組織再生，則患者受損部位將很難完全康復。因此一較佳的骨頭補綴物，如骨釘、骨板。將魚鱗以冷凍擠壓層積成型法(frozen compressed deposit manufacturing, FCDM)或力口熱擠壓層禾只成型法(heated compressed deposit manufacturing, HCDM)的方式進行骨頭補綴物的制備，并可配合不同的模具的使用，而產生不同形狀的骨釘、骨板，以符合患者受損部位的需求。選用魚鱗進行骨頭補綴物的好處在于魚鱗本身即含有膠原蛋白(collagen)、磷酸鈣鹽類(比如氫氧基磷灰石 (hydroxyapatite，HAP)、磷酸三鈣(tricalcium phosphate, TCP)...等)等的組成生物體 (比如人體)骨頭的成分，因此制程將較為簡便。此外，魚鱗本身優良的機械強度也將在經冷凍擠壓層積成型法或加熱擠壓層積成型法...等制備步驟處理后，依舊能提供良好的機械強度應用于骨頭補綴物的使用上。并且膠原蛋白(collagen)能夠誘導骨母細胞的產生， 因此隨著患者本身的骨母細胞在受損部位的逐漸再生，而形成一健全的組織；在此時，植入的魚鱗構成的骨釘、骨板，也已隨時間而逐漸在體內被特定酵素所分解。因此等到患者組織生長情形良好后，也不需再經二次手術取出植入物，如此可降低手術感染的風險，也能降低患者在進行手術后的不適感。值得注意的是，在植入生物體(比如人體)之前，所述的組織修復結構須經洗凈到可以通過LAL鑒定(limulus amebocyte lysate, LAL test)，其是一種分析細菌所含內毒素的含量的檢驗方式，而洗凈后的組織修復結構在LAL鑒定中的檢驗值必須小于lOOOEu/ml， 其較佳實施例的LAL檢驗值小于200Eu/ml。實施例九在一實施例中，所述的經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗的組織修復結構也可憑借物理性交聯劑的使用，來增強組織修復結構的機械強度以及穩定性。其中，所指的物理性交聯劑是指利用紫外光(ultraviolet light,UV light)、熱...等來進行交聯的方式。其中若選用加熱來進行交聯的話，其加熱溫度不得超過150°C，以避免溫度造成生物分子的破壞，一般而言，較佳的實施溫度為70 140°C。實施例十在一實施例中，經前述部分步驟或全部步驟處理過的魚鱗的組織修復結構也可憑借化學性交聯劑的使用，來增強組織修復結構的機械強度以及穩定性。其中所指的化學交聯劑可選自戊二醛(glutaraldehyde)、碳二亞胺(carbodiimide)、胺基硅烷(aminosilane)、綠桅子素(genipin)、六甲烯基二異氰酸鹽(hexamethylene diisocyanate，HMDI)、甲酸(formaldehyde)、酰迭氮(acyl azide)...等。當然，其也可使用其他等效的化學性交聯劑，來達到化學交聯的目的。在一較佳實施例中，使用的化學性交聯劑可選擇戊二醛，并且，戊二醛的較佳使用濃度約為0.001% 3. 000%。而在另一較佳實施例中，使用的化學性交聯劑可選擇1- (3- 二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1-e thyl-3- (3-dimethylaminopropyl) -carbodiimide hydrochloride, EDC)(碳二亞胺的一禾中化合物)，并且其較佳使用濃度約為1 300mM。 以上說明對本發明而言只是說明性的，而非限制性的，本領域普通技術人員理解， 在不脫離權利要求所限定的精神和范圍的情況下，可作出許多修改、變化或等效，但都將落入本發明的保護范圍之內。
權利要求
1.一種組織修復結構，其特征在于包含至少一個具有微孔道(microcharmel)結構的魚鱗。
2.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗來自于硬骨魚類，其中所述的硬骨魚類的魚鱗選自圓鱗或櫛麟。
3.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗的LAL值小于1000Eu/ml。
4.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗結構為纖維狀。
5.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗含有膠原蛋白(collagen)。
6.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗更包含有磷酸鈣鹽類。
7.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗具有一層與層之間交錯排列的纖維狀復數層結構。
8.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗為圓管柱狀(tubular form)。
9.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗為平板狀(plate form)。
10.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗為粉末狀(powder form)。
11.根據權利要求1所述的組織修復結構，其特征在于所述的具有微孔道 (microchannel)結構的魚鱗為螺絲釘狀(screw form)。
全文摘要
本發明是一種魚鱗衍生的組織修復結構，本發明裝置包含提供一個生物相容性佳以及生物可分解性的經適當步驟處理過魚鱗以及其特殊的微孔道(microchannel)結構，且所述的特殊的微孔道(microchannel)結構有利于細胞的貼附與增生。在使用至生物體(比如人體)之前，所述的組織修復結構必須先使所含的LAL鑒定(limulus amebocyte lysate，LAL test)的值小于1000Eu/ml，其較佳實施例的LAL檢驗值小于200Eu/ml。若要作為某些特殊的醫療器材使用時，則必須使LAL檢驗值小于50Eu/ml。
文檔編號A61L27/36GK102327646SQ201010229738
公開日2012年1月25日 申請日期2010年7月13日 優先權日2010年7月13日
發明者張毓忠, 林尚明, 林峰輝, 林建成, 賴弘基 申請人:柏登生醫股份有限公司