專利名稱：一種鹽酸千金藤素注射劑及其制法和檢測方法
技術領域：
本發明涉及一種鹽酸千金藤素注射劑及其制法和檢測方法，屬于醫藥制劑技術領域。
背景技術：
惡性腫瘤是人類三大主要死亡原因之一，是世界上所有國家面臨的一個重大的健康問題。據統計，當今世界每年癌癥的新發病人數已經超過1000萬，死亡人數超過700 萬，中國每年患病人數260萬，死亡超過170萬，且這個數字還在不斷增加。多少年來，醫學界、生物學界一直在尋找療效確切的癌癥治療方法，雖然取得一定進展，但始終沒有得到徹底解決。目前治療腫瘤一般采用手術、放療、化療等方法，放療、化療治療取得了良好的治療效果，但在治療過程中往往在殺傷腫瘤細胞的同時，又對人體正常組織細胞，尤其是對造血器官產生嚴重影響，使許多腫瘤治療病人伴隨有白細胞減少，從而影響治療的進程，甚至不得不中止治療，影響腫瘤疾病的根除。因此，在腫瘤疾病治療過程中，應用促進白細胞增生的藥物，是提高放療和化療療效，延長癌癥患者生命的關鍵所在。千金藤素是一種雙芐基異喹啉類生物堿，是日本近藤平三郎博士 1934年由防己科植物頭花千金藤素中提取分離出來的。千金藤素具有消炎、抑菌、調節免疫功能等作用。 近年來不少學者研究發現它還具有刺激網狀內皮系統、活化造血組織、促進骨髓組織增生等功能，在臨床上用于預防和治療腫瘤病人因放療或化療的白細胞減少癥，目前，已卓有成效。目前，國內臨床應用的千金藤素制劑，大多是口服藥物制劑，穩定性差，服用后存在著溶出度低、吸收較差、肝腸首過效應和生物利用度低等問題，從而影響藥效的發揮，最終影響治療的效果。鹽酸千金藤素注射劑可以克服上述千金藤素口服給藥的諸多不利因素，成為近年來千金藤素制劑應用的新領域。

發明內容
本發明的目的，在于提供一種以鹽酸千金藤素為原料，與藥劑學上可接受的輔料而制成的一種藥用注射劑，為治療腫瘤病人因放療化療引起的白細胞減少癥等疾病，提供一種生物利用度高、快速釋藥、快速起效的藥用制劑。本發明所述的鹽酸千金藤素原料藥可以是任何公知的方法制備而得的。本發明的一種鹽酸千金藤素注射劑，是由所述的鹽酸千金藤素與藥劑學上可接受的輔料而制成的一種注射劑。本發明的一種鹽酸千金藤素注射劑其處方規格為所述的鹽酸千金藤素10g，注射用水2000ml，與藥劑學上可接受的輔料而制成的1000支的注射劑，即規格為5mg/ml。本發明的一種鹽酸千金藤素注射劑的制備工藝為取IOOOml的新鮮注射用水，加熱至60°C，緩緩加入鹽酸千金藤素10g，邊加邊攪拌至完全溶解，加新鮮注射用水至 2000ml，混勻，即得。本發明的一種鹽酸千金藤素注射劑，其鑒別方法為
(1)本發明注射劑顯氯化物的鑒別反應；
(2)本發明注射劑在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品主峰的保留時間應與對照品主峰的保留時間一致。本發明的一種鹽酸千金藤素注射劑，其檢查方法為
(1)PH值取本發明注射劑，依中國藥典2005年版二部附錄VIH法測定，pH值應為 4. 0 6. 0 ；
(2)有關物質取本發明注射劑適量，加流動相制成每Iml中含千金藤素Img的溶液，作為供試品溶液；量取適量，加流動相制成每Iml中含15 μ g的溶液，作為對照溶液；取對照溶液20μ 1，注入液相色譜儀，調節儀器靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的10% ； 再精密量取供試品溶液和對照溶液各20 μ 1，分別注入液相色譜儀，記錄供試品溶液色譜圖至主成分峰保留時間的2倍；供試品溶液色譜圖中如顯雜質峰，除輔料峰外，各雜質峰面積的和，不得大于對照溶液主峰面積的1. 5倍，即含量為1. 5% ；
(3)無菌取本發明注射劑，照中國藥典2005年版二部附錄XIH方法檢查，應符合規
定；
(4)細菌內毒素取本發明注射劑，依中國藥典2005年版二部附錄XIE方法檢查，每 Img鹽酸千金藤素中內毒素的量應小于6. OEU ；
(5)其他應符合中國藥典2005年版二部附錄IB注射劑項下各項規定。本發明的一種鹽酸千金藤素注射劑，其含量測定方法為
用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-氨水=88 12 :0. 2為流動相，檢測波長為^3nm，理論板數按千金藤素峰計算應不低于3000 ；精密量取本發明注射劑aiil，置于 25ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ml，置于5ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取20 μ 1注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取千金藤素對照品適量，精密稱定，用流動相溶解并稀釋成每Iml含75 μ g的溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。本發明注射劑含千金藤素(C37H38N2O6)應為標示量的90. 0% 110. 0%。由于注射劑臨床應用的特殊性，我們還進行了鹽酸千金藤素注射液的藥效實驗， 以確保臨床使用的安全有效性，總結如下
1.對造血細胞放射線損害的恢復作用隔天給照射損傷的鼠注射鹽酸千金藤素，到了第10天每骨髓單位細胞的CFU-S，是對照組的大約2倍；體外培養試驗結果表明，鹽酸千金藤素注射液(簡稱CE)對淋巴細胞的T細胞有作用，由于這種T細胞的增加不是由CE對T細胞直接作用產生的，本實驗結果認為CE的作用機理在造血系統組織的上皮性細胞的作用， 試驗顯示CE作為細胞因子誘導物質，對造血系統組織的上皮性細胞起作用，通過產生的細胞因子的生理活性恢復造血系統的細胞增殖分化。鹽酸千金藤素注射液能使受到放射線傷害的白細胞、淋巴細胞的數量增加，從而恢復免疫力。2.對小鼠免疫功能的影響試驗中用環磷酰胺30mg/kg造成小鼠免疫抑制狀態下，注射鹽酸千金藤素150mg/kg/d也能使腹腔巨噬細胞的吞噬功能，綿羊紅細胞所致特異性抗體的產生能力以及脾臟系數提高至接近正常水平。表明，鹽酸千金藤素注射液對小鼠的非特異性及特異性免疫功能有明顯的增強作用。此外，為了保證本發明用藥安全，根據鹽酸千金藤素注射液臨床應用特點，我們還進行了該注射液的溶血性試驗、全身主動性過敏試驗、血管刺激性和肌肉刺激性試驗。結果表明本發明所述的鹽酸千金藤素注射劑對家兔紅細胞無明顯的體外溶血及致凝集作用；對豚鼠無明顯致敏作用；對新西蘭兔耳緣靜脈無明顯刺激作用；對家兔股四頭肌無明顯刺激作用。本發明所述的鹽酸千金藤素注射液，其制備工藝簡單可行、安全有效、穩定可靠， 能夠顯著提高惡性腫瘤患者化療放療所引起的白細胞減少癥，增強患者的免疫力有著光明的應用前景。
具體實施例方式實施例1
取IOOOml的新鮮注射用水，加熱至60°C左右，緩緩加入所述的鹽酸千金藤素10g，邊加邊攪拌至完全溶解，加新鮮注射用水至2000ml，混勻，得中間體；測定中間體的pH值為4. 0 時，過0. 22 μ m的微孔濾膜過濾，密封，115°C滅菌30分鐘，檢驗，即得。
權利要求
1.一種鹽酸千金藤素注射劑，其特征在于該注射劑規格為5mg鹽酸千金藤素/ml注射用水。
2.如權利要求1所述的一種鹽酸千金藤素注射液的制備工藝，其特征在于取IOOOml 的新鮮注射用水，加熱至60°C，緩緩加入鹽酸千金藤素10g，邊加邊攪拌至完全溶解，加新鮮注射用水至2000ml，混勻，即得。
3.如權利要求1所述的一種鹽酸千金藤素注射劑的鑒別方法，其特征在于(1)本發明注射劑顯氯化物的鑒別反應；(2)本發明注射劑在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品主峰的保留時間應與對照品主峰的保留時間一致。
4.如權利要求1所述的一種鹽酸千金藤素注射劑的檢查方法，其特征在于(1)PH值取本發明注射劑，依中國藥典2005年版二部附錄VIH法測定，pH值應為 4. 0 6. 0 ；(2)有關物質取本發明注射劑1支，加流動相制成每Iml中含千金藤素Img的溶液， 作為供試品溶液；量取供試品溶液，加流動相制成每Iml中含15 μ g的溶液，作為對照溶液； 精密移取供試品溶液和對照溶液各20 μ 1，分別注入液相色譜儀，記錄供試品溶液色譜圖至主成分峰保留時間的2倍；供試品溶液色譜圖中如顯雜質峰，除輔料峰外，各雜質峰面積的和，不得大于對照溶液主峰面積的1. 5倍，即含量為1. 5% ；(3)無菌取本發明注射劑，照中國藥典2005年版二部附錄XIH方法檢查，應符合規定；(4)細菌內毒素取本發明注射劑，依中國藥典2005年版二部附錄XIE方法檢查，每 Img鹽酸千金藤素中內毒素的量應小于6. OEU ；(5)其他應符合中國藥典2005年版二部附錄IB注射劑項下各項規定。
5.如權利要求1所述的一種鹽酸千金藤素注射劑的含量測定方法，其特征在于 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-氨水=88 12 0. 2為流動相，檢測波長為^3nm，理論板數按千金藤素峰計算應不低于3000 ；精密量取本發明注射劑^iil，置于 25ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取Iml，置于5ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取20 μ 1注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取千金藤素對照品，精密稱定，用流動相溶解并稀釋成每Iml含75μ g的溶液，測定，按外標法以峰面積計算，即得。
全文摘要
本發明涉及一種鹽酸千金藤素注射劑及其制法和檢測方法，公開了以鹽酸千金藤素為原料，與藥劑學上可接受的輔料而制成的一種注射劑，同時還公開本發明注射劑的檢測方法和臨床用途。本發明所述的鹽酸千金藤素注射劑其制備工藝簡單可行、安全有效、生物利用度高，能夠顯著提高惡性腫瘤患者化療放療所引起的白細胞減少癥，具有很好的應用前景。
文檔編號A61K31/4741GK102475680SQ20101055651
公開日2012年5月30日 申請日期2010年11月24日 優先權日2010年11月24日
發明者趙濤 申請人:菏澤步長制藥有限公司