專利名稱：一種核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種納米補鈣產品的制備方法，尤其是涉及一種核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法。
背景技術：
海藻酸是由古羅糖酸(G)和甘露糖醛酸(M)兩種單體組成的嵌段線性聚合物，可以與二價陽離子結合成膠。海藻酸鹽的生產原料是海帶等大型藻類，是我國海洋水產資源的重要組成部分，是我國大規模養殖的重要經濟藻類。海藻酸鹽可生物降解，而且降解產物無毒，可以作為緩釋制劑的骨架和微囊材料。海藻酸鹽作為囊材具有穩定性、親水性、溶解性、無毒、無刺激性和有合宜的釋藥速率等優點。目前，利用海藻酸鹽進行包埋藥物的方法很多，但是制備方法比較繁雜，大多不可避免地要在兩相中使用到乳化劑或者特殊的儀器，而且制備的膠囊尺寸較大，多在微米級。例如中國專利CN 1374338A公開的方法，以液體石蠟為分散介質，Span85為表面活性劑，以冰醋酸為凝膠引發劑，制備海藻酸鈣凝膠珠，尺寸在100 500 μ m ；中國專利CN 101239052A中，以食用植物油為分散介質，失水山梨醇單油酸酯為表面活性劑，制備海藻酸鈉/殼聚糖微囊；中國專利CN 1555784A中借助高壓靜電液滴發生裝置，制備海藻酸鈣/聚組氨酸藥物控釋微膠囊，粒徑范圍在200 1000 μ m;中國專利CN 101239052A中公開的方法是在醇類溶劑或芳香烴溶劑中制備海藻酸鈣微膠囊，粒徑大約是在1 40 μ m。中國專利 CN 1850058A公開了一種制備海藻酸鈉納米膠囊的方法，膠囊尺寸在100 lOOOnm，但是也須在水/油微乳化液中，和至少一種非離子表面活性劑才可以完成。

發明內容
本發明的目的是提供一種無需特殊設備，操作簡單的核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法。本發明包括以下步驟1)將可溶性海藻酸鹽溶于水中，得海藻酸鹽溶液，濃度為0. 1 2. Og/L ；2)配制可溶性二價陽離子水溶液A，濃度為0. 01 0. lmol/L ；3)配制膠原多肽螯合鈣水溶液，濃度為0. 01 0. lg/ml ；4)將膠原多肽螯合鈣水溶液加入到溶液A中，調節pH為5. 5 8. 0，得溶液B ；5)調節海藻酸鹽溶液的pH為5. 5 8. 0，再加入溶液B，攪拌，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子。在步驟1)中，所述可溶性海藻酸鹽可選自海藻酸鈉、海藻酸鉀等中的一種。在步驟2、中，所述可溶性二價陽離子水溶液可選自可溶性鈣離子水溶液、可溶性鋅離子水溶液、可溶性鋇離子水溶液等的一種。在步驟5)中，所述攪拌的時間可為30 60min ；所述海藻酸鹽可選自海藻酸鈣、
海藻酸鋅、海藻酸鋇等中的一種。
所制備的核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子為表面光潔的球形納米粒子，粒徑范圍為100 lOOOnm，可溶于水中。本發明利用海藻酸鹽對膠原多肽螯合鈣粒子進行包埋，延長膠原多肽螯合鈣的作用時間，起到緩釋的作用。利用膠原多肽螯合鈣粒子的表面帶電荷性，通過靜電作用吸引海藻酸和二價陽離子在其粒子表面交聯固化，形成一層較穩定的海藻酸鹽殼層。膠原多肽螯合鈣是一種新型補鈣劑。這類鈣無需離解成鈣離子再與鈣結合蛋白結合后被腸道吸收，而是鈣及其有機基團整個分子完整的被腸道吸收，進入血液不是立即解離成鈣離子和氨基酸，而是以螯合物的形式持續解離出鈣離子供機體利用，從而避免血清中鈣離子濃度過高出現高血鈣，保證了鈣元素的充分吸收和利用。利用海藻酸鹽在膠原多肽螯合鈣粒子的表面形成一層極薄的不溶性膜，可以克服膠原多肽螯合鈣較不穩定易酶解的缺點，延長作用時間，起到緩釋的效果。核殼結構的膠原多肽螯合鈣納米粒子的尺寸較小，人體較易吸收，比一般普通的補鈣產品有較大的優勢。本發明能在均相中使用簡單的方法對膠原多肽螯合鈣進行包埋，制備小于Iym 的核殼結構的膠原多肽螯合鈣納米粒子。


圖1為本發明實施例所制備的核核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的透射電鏡圖。在圖1中，標尺為500nm。
具體實施例方式實施例1取15ml0. 03g/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到7. 5ml 0. 018mol/L CaCl2水溶液中，攪拌均勻充分，調節PH 7.2，得到溶液々；取117.5!^ 0.63g/L海藻酸鈉溶液，調節 PH 7. 2，然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌30 60min，得到核殼結構海藻酸鈣/膠原多肽螯合鈣納米粒子。所制備的核殼結構海藻酸鈣/膠原多肽螯合鈣納米粒子為表面光潔的球形納米粒子，粒徑范圍在200 IOOOnm0圖1給出所制備的核核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的透射電鏡圖，圖中樣品粒子尺寸約為500nm，膠原多肽螯合鈣的粒子表面覆蓋有一層海藻酸鹽的殼層，粒子呈球形，且表面光潔。實施例2取15ml0. lg/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到7. 5ml 0. 072mol/L CaCl2水溶液中，攪拌均勻充分，調節PH 6. 0，得到溶液A ；取117. 5mL 0. 63g/L海藻酸鈉溶液，調節pH
6.0，然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌30 60min，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子，粒徑范圍在400 lOOOnm。實施例3取15ml0. 05g/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到IOml 0. 020mol/L BaCl2水溶液中，攪拌均勻充分，調節PH 7.5，得到溶液々；取117.5!^ 1.0g/L海藻酸鈉溶液，調節pH
7.5，然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌30 60min，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子，粒徑范圍在200 800nm。實施例4取IOmlO. 03g/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到IOml 0. 036mol/L CaCl2水溶液中，攪拌均勻充分，調節PH 6.8，得到溶液4;取120!^ 0.5g/L海藻酸鈉溶液，調節pH 6. 8，然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌30 60min，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子，粒徑范圍在200 lOOOnm。實施例5取IOmlO. 01g/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到IOml 0. 018mol/L CaCl2水溶液中，攪拌均勻充分，調節PH 6.8，得到溶液4;取120!^ 0.2g/L海藻酸鈉溶液，調節pH 6. 8，然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌30 60min，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子，粒徑范圍在100 800nm。實施例6取IOmlO. 01g/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到IOml 0. 018mol/L Zn (CH3COO) 2水溶液中，攪拌均勻充分，調節pH 5. 5，得到溶液A ；取120mL 0. 2g/L海藻酸鈉溶液，調節PH 5. 5，然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌30 60min，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子，粒徑范圍在100 IOOOnm0實施例7取15ml0. lg/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到7. 5ml 0. lmol/L ZnCl2水溶液中，攪拌均勻充分，調節PH 6.0，得到溶液4;取120!^ 1.0g/L海藻酸鈉溶液，調節pH 6.0， 然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌 30 60min，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子，粒徑范圍在100 lOOOnm。實施例8取15ml0. 03g/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到7. 5ml 0. 02mol/L CaCl2水溶液中，攪拌均勻充分，調節PH 6.8，得到溶液々；取117.5!^ 0.5g/L海藻酸鉀溶液，調節pH 6. 8，然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌30 60min，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子，粒徑范圍在200 lOOOnm。實施例9取15ml0. 03g/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到7. 5ml 0. 02mol/L Ba(NO3)2 水溶液中，攪拌均勻充分，用氫氧化鈉水溶液調節pH 6.8，得到溶液4;取120!^ 0.5g/L海藻酸鉀溶液，用氫氧化鈉水溶液調節PH 6. 8，然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌30 60min，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子，粒徑范圍在200 lOOOnm。實施例10取15ml0. 01g/ml膠原多肽螯合鈣水溶液緩慢加入到7. 5ml 0. 02mol/L ZnCl2水溶液中，攪拌均勻充分，調節PH 5.5，得到溶液4;取120!^ 0.5g/L海藻酸鉀溶液，調節pH 5. 5，然后緩慢滴加溶液A，整個過程不斷攪拌使其反應充分。在溶液A加入完畢后，再繼續攪拌30 60min，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子，粒徑范圍在200 lOOOnm。
權利要求
1.一種核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法，其特征在于包括以下步驟1)將可溶性海藻酸鹽溶于水中，得海藻酸鹽溶液，濃度為0.1 2. Og/L ；2)配制可溶性二價陽離子水溶液A，濃度為0.01 0. lmol/L ；3)配制膠原多肽螯合鈣水溶液，濃度為0.01 0. lg/ml ；4)將膠原多肽螯合鈣水溶液加入到溶液A中，調節pH為5.5 8. 0，得溶液B ；5)調節海藻酸鹽溶液的pH為5.5 8. 0，再加入溶液B，攪拌，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子。
2.如權利要求1所述的一種核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法，其特征在于在步驟1)中，所述可溶性海藻酸鹽選自海藻酸鈉、海藻酸鉀中的一種。
3.如權利要求1所述的一種核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法，其特征在于在步驟2)中，所述可溶性二價陽離子水溶液選自可溶性鈣離子水溶液、可溶性鋅離子水溶液、可溶性鋇離子水溶液的一種。
4.如權利要求1所述的一種核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法，其特征在于在步驟5)中，所述攪拌的時間為30 60min。
5.如權利要求1所述的一種核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法，其特征在于在步驟幻中，所述海藻酸鹽選自海藻酸鈣、海藻酸鋅、海藻酸鋇中的一種。
6.如權利要求1所述的一種核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法，其特征在于所述核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的粒徑范圍為100 lOOOnm，可溶于水中。
全文摘要
一種核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法，涉及一種納米補鈣產品的制備方法。提供一種無需特殊設備，操作簡單的核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子的制備方法。將可溶性海藻酸鹽溶于水中，得海藻酸鹽溶液，濃度為0.1～2.0g/L；配制可溶性二價陽離子水溶液A，濃度為0.01～0.1mol/L；配制膠原多肽螯合鈣水溶液，濃度為0.01～0.1g/ml；將膠原多肽螯合鈣水溶液加入到溶液A中，調節pH為5.5～8.0，得溶液B；調節海藻酸鹽溶液的pH為5.5～8.0，再加入溶液B，攪拌，得到核殼結構膠原多肽螯合鈣納米粒子。
文檔編號A61K47/36GK102423298SQ20111036724
公開日2012年4月25日 申請日期2011年11月18日 優先權日2011年11月18日
發明者易瑞灶, 郭洪輝 申請人:國家海洋局第三海洋研究所