專利名稱：一種治療缺血性心臟病的藥物組合的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥藥物組合以及該組合的制備方法，特別涉及該組合可以顯著保護治療心肌缺血再灌注損傷性疾病，屬于醫藥技術領域。
背景技術：
缺血性心臟病包括粥樣硬化病變引致的冠狀動脈梗阻或狹窄。心肌梗死是臨床上的常見缺血性心臟病病，近年來隨著介入技術的發展，急性心肌梗死的治療也邁入了一個新的發展階段，介入治療急性心肌梗死是近年迅速發展起來的一個新技術，通過介入手術迅速貫通栓塞的冠狀動脈，重新恢復血流，以改善病人心肌供血供氧，挽救更多頻臨壞死的心肌，迅速改善病人的臨床癥狀及遠期療效，從而降低了急性心肌梗死患者的死亡率，在臨床上挽救了許多心肌梗死病人的生命，因而得到了廣泛的推廣。近來臨床實踐發現，部分患者行支架植入后，雖然冠脈血流得到了恢復，心肌缺血得到改善，但病人的臨床癥狀及預后并沒有明顯改善，甚至病情加重。缺血再灌注損傷(ischemia reperfusion injury, IRI) 是在組織器官缺血恢復血流后，其細胞代謝功能障礙及結構破壞反而加重的現象。據WHO 統計，到2020年急性冠狀動脈梗阻性疾病將是世界上的主要致死原因，心肌缺血再灌注損傷將會是一個重大的臨床問題，這已引起世界各國學者的廣泛關注和研究。復方丹參方是在中醫藥理論指導下治療心血管疾病的中藥基礎方劑，由丹參、 三七、冰片三種中藥制成的，有活血化瘀，理氣止痛功用，常用于治療冠心病、心絞痛等疾病。隨著心血管疾病的臨床深入，單純的復方丹參方雖適應多種心血管疾病的治療，但是效果不太明顯。丹參在我國醫療上應用歷史悠久，功效甚廣。傳統醫學記載，丹參性寒、味苦，歸心經、心包經，專走血分。丹參能通血脈，功擅活血化瘀，故俗稱“一味丹參抵四物。”常用的制劑有丹參片、復方丹參片、丹參心舒片、丹參注射液和復方丹參注射液。現代醫學研究和臨床實踐表明，丹參有擴張冠狀動脈，增加冠狀動脈血流量、減慢心率，改善心肌缺氧之功效， 常用于治療冠心病、心絞痛、胸悶、心悸等癥。可治療心肌梗塞、心肌炎，可改善急性癥狀和心電圖缺血性改變。三七總皂苷(panax notoginseng saponin，PNQ是五加科植物三七的主要活性成分，大量研究表明PNS在心血管系統具有廣泛的作用，包括減輕心肌缺血/再灌注損傷、抑制血管平滑肌細胞增殖、抑制血栓形成和動脈粥樣硬化、保護血管內皮細胞、抗心律失常和抗缺血性休克等。穿山龍(Dioscorea nipponica Makino)為薯蕷科薯蕷屬多年生藤本植物穿龍薯蕷的根莖，現代藥理學研究表明，穿山龍具改善心血管功能，鎮咳平喘，祛痰等多種藥理作用。穿山龍總皂苷可以改善心肌營養性血流量，保護缺血心肌，防治動脈硬化，其中以穿山龍水溶性皂苷活性最好。復方丹參方和穿山龍組合，即丹參、三七、冰片、穿山龍四味藥組合成復方，此組合及組合后的適應癥尚未在研究中報道過。CN 102526423 A

發明內容
本發明目的在于提供一種可以治療缺血性心臟病藥物組合，該組合是在復方丹參片方的基礎上加入穿山龍總皂苷的組合。組合物的制備，該組合由丹參提取物、三七總皂苷、冰片、穿山龍總皂苷，其中丹參提取物為150 600份，三七總皂苷50 200份，冰片8 10份，穿山龍總皂苷50 200份，通過優選成分之比，按300 100 10 50或=300 100 10 100或= 300 100 10 200比例混合而成，其中丹參提取物、三七總皂苷、穿山龍總皂苷均通過乙醇回流提取分離得到，丹參提取物，三七總皂苷里面所含指標性成分均達到《中國藥典》2010版規定，穿山龍總皂苷通過0.5%堿的乙醇提取，其中水溶性皂苷含量達到了 52. 16%。本實驗室通過模擬大鼠心肌缺血再灌注損傷模型來驗證該組合治療缺血性心臟病的療效，從心肌酶(超氧化物歧化酶S0D，乳酸脫氫酶LDH，肌酸激酶同工酶CK-MB)、缺血面積計算、病理HE染色、心肌細胞凋亡TUNEL染色多指標分析，組合物效果優于各組分以及復方丹參片，為以后此組合適應其他心血管疾和藥物制劑奠定了基礎，從而完成了本發明。本發明有以下優點1、發現了一種治療缺血性心臟病的中藥組合。2、改變了復方丹參方的藥物組合方式。3、該組合在保護治療心肌缺血再灌注損傷疾病效果突出，優于復方丹參片。


圖1為藥物組合和各成分對缺血再灌注大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)含量的影響。圖2為藥物組合和各成分對缺血再灌注大鼠血清乳酸脫氫酶(LDH)含量的影響。圖3為藥物組合和各成分對缺血再灌注大鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量的影響。圖4為藥物組合和各成分對缺血再灌注大鼠心肌梗死范圍的影響圖5為藥物組合和各成分對缺血再灌注大鼠心肌梗死范圍TTC染色結果圖6為藥物組合和各成分對缺血再灌注大鼠心肌組織HE(X400)染色檢測結。圖7為藥物組合和各成分對缺血再灌注大鼠心肌細胞凋亡指數的影響。圖8為藥物組合和各成分對缺血再灌注大鼠心肌細胞凋亡TUNEL染色(X400)檢測。
具體實施例方式下面結合具體實例來說明本發明的完成。實施例一丹參提取物的制備依據《中國藥典》2010版，取丹參藥材Ikg碎成粗粉，用6倍量的80%乙醇回流提取1. 5h,濾過，藥渣加50%乙醇回流提取1. 5h,濾過，藥渣加水煎煮池，濾過，合并濾液后濃縮至適量，干燥，即得，依據藥典中含量測得方法，測得丹酚酸B含量為7.6%，丹參酮含量為0. 31%，符合規定復方丹參片的中丹參的質量控制。實施例二三七總皂苷的制備依據《中國納典》2010版，取三七藥材Ikg碎成粗粉，用6倍量的70%乙醇回流提取兩次，每次lh，合并提取液，濾過，濾液減壓濃縮，上樣與大孔吸附樹脂，80%乙醇洗脫，洗脫液脫色后減壓濃縮，精制，干燥，即得，經紫外檢測，總皂苷的含量為96. 49%，其中人參皂苷Rbl為32. 19%，人參皂苷Rgl為31. 06%，三七皂苷Rl為7. 49%。實施例三穿山龍總皂苷的的制備取穿山龍藥材Ikg碎成粗粉，用6倍量的70%乙醇含0. 5%堿溶液提取兩次，每次 Ih,合并提取液，濾過，酸調至中性，濾液減壓濃縮至浸膏，干燥，即得，依據《中國藥典》2005 版附錄VIC，精密取干燥品適量，過中性氧化鋁柱，測得穿山龍總皂苷里面水溶性皂苷的含量為 52. 16%。實施例四組合物的制備組合物各組合成分的重量比例為丹參提取物三七總皂苷冰片穿山龍皂苷 =300 100 10 50 或=300 100 10 100 或=300 100 10 200。精密稱取按以上方法提取分離得到的提取物，按以上配比比例組合，組合為固體混合物和液體混懇劑。實施例五復方丹參片購自與北京同仁堂科技發展股份有限公司(批號 9124525)，通心絡膠囊購自于石家莊以嶺藥業(批號100728)。實施例六藥物組合對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用1、實驗動物健康成年雄性SD大鼠70只，體重250 280g，由軍事醫學科學院動物實驗中心提供。大鼠飼養環境為SPF級實驗環境。2、模型制作大鼠用2%戊巴比妥鈉(按體重50mg/kg)腹腔注射麻醉，仰臥位固定于手術臺上，連接心電圖，記錄正常心電圖，將大鼠頸部及左胸部皮膚去毛，分別用碘伏和酒精依次消毒。頸部正中切開皮膚，鈍性分離肌肉暴露氣管，用眼科剪在氣管上剪一小口行氣管插管 (插管直徑為2mm塑料導管)，連接小動物呼吸機(潮氣量為70ml/kg，呼吸比為1. 5 1， 頻率為70次/分)于左緣胸骨中線處3 5肋間打開胸腔，暴露心臟，打開心包膜，在肺動脈圓錐左緣與左心耳下緣2mm處進針，用6-0無損傷縫線經淺層心肌穿出并活結結扎，使左冠狀動脈前降支位于其上，將心臟放回胸腔，迅速關閉胸腔心肌缺血的判斷標準為心電圖出現心肌梗死表現(ST段抬高或T波高尖)，心臟局部紫紺。缺血30min后，打開胸腔， 松開活結施行再灌注，并關閉胸腔，局部使用青霉素，縫合皮膚。再灌注他后，腹主動脈取血5ml，置于促凝管，3000r/min離心lOmin，取上清即為血清備用，打開胸腔，剪下心臟，減去心耳及血管，用冰冷的生理鹽水沖洗后置于-80°C備用。3、分組及給藥70只大鼠按體重隨機分10組，每組7只1組假手術組(生理鹽水lml/100g)， II組模型組，(生理鹽水lml/100g)，III組丹參提取物組(300mg/kg)，IV組三七總皂苷(100mg/kg)，V穿山龍總皂苷組(100mg/kg)，VI VIII組組合組(丹參提取物 +三七總皂苷+冰片+穿山龍總皂苷)3個劑量組VI組合1(300+100+10+50)mg/kg，組合 2 (300+100+10+100)mg/kg，VIII 組合 3 (300+100+10+200)mg/kg，IX 組復方丹參片組 (300mg/kg)、X組為陽性藥組通心絡膠囊組(300mg/kg)，以上各組均以灌胃方式給藥(按體重lml/100g)，連續給藥7天，每天1次，末次給藥Ih后造模，除假手術組開胸后只穿線不接扎左冠狀動脈前降支外，其余II X組，均以以上方法造模。上述藥物均精密稱定后，用滅菌后的蒸餾水溶解配置為混懸液。4、實驗結果采用SPSS 12.0統計軟件分析數據，計量資料用表示，多組間比較用方差分析，兩兩比較用q檢驗，P < 0. 05為差異有顯著性，P <0.01為差異具有極顯著性。(1)血清中心肌酶SOD、LDH、CK-MB的含量測定如表1、圖1、2、3所示，與假手術組比較，模型組的LDH和CK-MB均顯著升高，SOD 值顯著下降，表明冠脈結扎再灌注后損傷了大鼠的心肌細胞膜，LDH及CK-MB從細胞中外漏，使其在細胞中活性降低，而在血漿中活性明顯升高。各藥物組合后，SOD含量明顯升高， LDH和CK-MB含量明顯降低，說明組合的效果均優于各組合成分，而且優于復方丹參片和通心絡膠囊，證明該組合提高了機體內源性抗氧化系統的活性，抑制了缺血過程中自由基的生成，顯著的起到了對心肌缺血再灌注損傷的保護作用。表1藥物組合和各成分對缺血再灌注大鼠血清中S0D、LDH及CK-MB活力的影響( χ士 s, η = 7)
權利要求
1.一種中藥組合物，其特征在于，該組合藥物組成為丹參提取物、三七總皂苷、冰片、 穿山龍總皂苷。
2.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于，該組合具治療缺血性心臟病的作用。
3.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于，所述的的藥物組合是在復方丹參方組合的基礎上加入穿山龍總皂苷。
4.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于，按照重量組分計算，組成該組合的各成分為丹參提取物150 600份，三七總皂苷50 200份，冰片8 10份，穿山龍總皂苷 50 200份。
5.根據權利要求1所述的組合物，其特征在于，該組合各成分的重量比例為丹參提取物三七總皂苷冰片穿山龍總皂苷=300 100 10 50或=300 100 10 100 或=300 100 10 200。
6.根據權利要求1所述的組合物，丹參提取物、三七總皂苷、穿山龍總皂苷均為乙醇或者其他適宜溶劑提取得到。
7.根據權利要求2所述的缺血性心臟病，其特征在于，所述的缺血性心臟病包括冠心病，心肌缺血再灌注損傷，心肌梗死，心肌炎以及由心肌缺血導致的其他心臟病。
8.根據權利要求1-5中任何一項所述的組合物，其特征在于，所述的組合物以口服制劑類型使用。
9.根據權利要求7中所述的口服制劑類型包括片劑，丸劑，膠囊劑，軟膠囊劑，顆粒齊U，混懸劑，滴丸的任何一種。
全文摘要
本發明屬于醫藥技術領域，提供了一種治療缺血性心臟病的中藥組合物。該組合物由丹參提取物、三七總皂苷、冰片和穿山龍水溶性總皂苷組成，是在復方丹參方的基礎上加入穿山龍總皂苷得到的。通過大鼠心肌缺血再灌注損傷動物實驗驗證，該組合在治療缺血性心臟病的效果顯著優于復方丹參片，且藥物制備經濟，簡單，為復方丹參片的二次開發和心血管中藥新復方的研究提供了實驗依據。
文檔編號A61P9/10GK102526423SQ20121000293
公開日2012年7月4日 申請日期2012年1月6日 優先權日2012年1月6日
發明者孔祥娟, 洪婷, 潘從澤, 王云飛, 王升啟, 鄭冰清 申請人:中國人民解放軍軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所