利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉及其制備方法
【專利摘要】本發明涉及乳酸菌粉及其制備方法和包括該粉的產品。所述乳酸菌粉是利用食用瓊脂使得由蛋白質和多糖類構成的雙重涂布乳酸菌的矩陣結構（菌塊）更加堅固的乳酸菌粉。根據本發明，包含食用瓊脂的蛋白質和多糖類的雙重涂布乳酸菌粉顯示出了增強的耐酸性、耐膽汁性及加速試驗穩定性，可有效地用于制備多種含乳酸菌的產品。
【專利說明】利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及利用食用瓊脂(Agar)的雙重涂布乳酸菌粉(powder),更具體地,涉及一種利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉及其制備方法，所述利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，利用食用瓊脂用蛋白質和多糖類成分對發酵的乳酸菌進行雙重涂布，從而形成堅固的矩陣(matrix)(格子)形態的菌塊，從而顯示出了增強的耐酸性、耐膽汁性及加速穩定性。
【背景技術】
[0002]乳酸菌(lactic acid bacteria)又被稱為乳酸細菌或奶酸菌,其棲息在哺乳類的腸內，防止因雜菌引起的異常發酵，是被用作助消化劑的有用的細菌。例如，保加利亞乳桿菌(L.bulgaricus)是最早被大家知曉的乳酸菌,其用于制備酸奶,在制備奶酪或發酵乳油時，也被用作發酵劑。此外，好氧乳桿菌(L.acidophilus)存在于人及所有哺乳類動物，以及其余動物的腸中。也用于制備奶油或牛奶，以及治療腸內自體中毒。此外，乳酸乳球菌(L.1actis)生成DL-乳酸，常常存在于牛奶中，從而用于制備奶油或奶酪，在乳制品業是最重要的菌。與此同時還有雙歧乳桿菌，尤其是在食用母乳的嬰兒腸內最為多見，其數量隨著成人顯現出逐漸減少的趨勢，因此被認為對幼兒期的健康很重要。此外，同乳酸菌一樣，生成發酵產物的有機酸及抗菌活性物質在抑制腸內有害菌方面顯示出了效果，最近對于利用雙歧乳桿菌的乳酸菌發酵乳的研究、以及為了增強沒有食用母乳的幼兒的健康，將其加入到奶粉中的產品化等研究非常活躍。
[0003]如上所述，有用的乳酸菌停留在腸內，發揮著多種生理活性效果，如活化腸管運動、抑制有害菌、促進維生素及增強免疫物質等，但在人體的結構上，當人攝取乳酸菌時，乳酸菌會因胃酸或膽汁酸而死亡，從而存在很多時候乳酸菌不能發揮本來的生理活性功能的情況。
[0004]為了解決上述問題，開發出了用蛋白質和多糖類雙重涂布乳酸菌的技術等。
[0005]具體地，上述蛋白質和多糖類的乳酸菌雙重涂布技術，其特征為:在由糖成分和離子成分構成的培養基中，培養乳酸菌，在回收乳酸菌體時，在乳酸菌濃縮水溶液中包含冷凍保護劑，用蛋白質和多糖類進行涂布。上述現有的蛋白質和多糖類的乳酸菌雙重涂布技術，其通過將乳酸菌用蛋白質和多糖類涂布，使得乳酸菌不會暴露于空氣中，由此強化了乳酸菌的耐熱性、耐酸性及耐膽汁性，從而可預期活菌穩定性及加工穩定性得到改善的效果。
[0006]然而，上述改善了的現有的乳酸菌涂布技術，其雖然適合用于現有的粉末形態的乳酸菌制品，但在水分含量多的食品等方面，對于防止因水分引起的乳酸菌的死亡，不能顯示出充分的效果，因此，與眾多的食品種類相比，被指出仍然存在以下問題:其應用范圍只能是有限的。`
[0007]為此，本發明為了進一步增強蛋白質和多糖類的結合力，公開一種使用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，所述雙重涂布乳酸菌粉形成堅固的菌塊，所述菌塊由乳酸菌和蛋白質、多糖類、食用瓊脂構成。
【發明內容】

[0008]要解決的技術問題
[0009]本發明的目的在于，提供一種通過使用蛋白質和多糖類對乳酸菌進行雙重涂布，利用食用瓊脂(Agar)增強由蛋白質和多糖類、乳酸菌形成的菌塊的結合力，從而顯示出優異的耐酸性、耐膽汁性、加速穩定性的乳酸菌粉。
[0010]本發明的另一目的在于，提供一種包含上述食用瓊脂的、蛋白質和多糖類的雙重涂布乳酸菌粉的制備方法。
[0011]本發明的又一目的在于，提供一種包含上述食用瓊脂的、蛋白質和多糖類的雙重涂布乳酸菌粉的產品。
[0012]技術方案
[0013]作為一個實施方案，本發明涉及包含食用瓊脂、蛋白質及多糖類成分，并且由形成菌塊的涂布層進行涂布的乳酸菌粉。
[0014]這樣的本發明的雙重涂布乳酸菌粉，其優選由包含下述步驟的工序制備。在用于培養乳酸菌的培養基中加入食用瓊脂，然后發酵，形成乳酸菌濃縮水溶液；
[0015]往上述乳酸菌濃縮水溶液中加入蛋白質和多糖類成分；以及
[0016]對上述加入了食用瓊脂、蛋白質、多糖類成分的乳酸菌濃縮水溶液進行冷凍干燥。
[0017]下面，對本發明的構成進行詳細說明。
[0018]為了制備本發明的雙重涂布乳酸菌粉，首先實施在用于培養乳酸菌的培養基中加入食用瓊脂，然后發酵的工序。
[0019]作為適用于本發明的乳酸菌，例如可以使用鏈球菌屬(Streptococcus)、乳球菌屬(Lactococcus)、腸球菌屬(Enterococcus)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、片球菌屬(Pediococcus)、明串球菌屬(Leuconostoc)、魏斯氏菌屬(Weissella)及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)。
[0020]此外，用于培養乳酸菌的培養基中包含糖成分、離子成分、蛋白質成分及酵母提取物。可以利用葡萄糖、乳糖、果糖、蔗糖、麥芽糖等作為糖成分，可以利用檸檬酸銨、醋酸鈉、磷酸二鉀、硫酸鎂、硫酸錳、氯化鈉等作為離子成分，可以利用大米蛋白、大豆分離蛋白、酪蛋白胨(casein peptone)、大豆蛋白胨(soy peptone)、脫脂奶粉、乳清蛋白等作為蛋白成分，但不限于這些。
[0021]并且，在包含0.1%~5.0%范圍的食用瓊脂、0.1%~10%范圍的糖成分、0.1%~?0%范圍的酵母提取物、0.001%~2.0%范圍的離子成分、以及0.01%~20%范圍的蛋白成分的水溶液中發酵乳酸菌，從而制備乳酸菌發酵液。
[0022]食用瓊脂的加入量超過5.0%時，膠狀物的強度高，因此不能使用液體培養基培養乳酸菌。加入的量不足0.1%時，形成膠狀物微弱，不顯示效果。此外，糖成分的加入量超過10%時，產生滲透壓現象，因此培養不了乳酸菌，如果加入的量不足0.1%時，由于能量源的不足，會發生不能培養乳酸菌的問題。并且，酵母提取物的加入量超過10%時，也不會顯示出特異的效果，但不足0.1%時，會培養不了乳酸菌。并且，離子成分超過2%時，乳酸菌細胞內外輸送物質方面發生問題，從而培養不了乳酸菌，不足0.001%時，顯示不了加入離子成分的效果。并且，蛋白成分超過20%時，蛋白質的溶解度降低，會發生以不溶性狀態存在的蛋白質增多的問題，不足0.01%時,會顯示不出效果。[0023]此外，上述食用瓊脂(Agar )可以通過從石花菜或江蘺等紅藻類中，用高溫煮沸，將膠狀物質在水中化開，過濾，去除固態物質后，反復進行凝固、冷凍、脫水、干燥等過程獲得，通過這種方式形成的食用瓊脂的主要成分由瓊脂糖(Agarose)和瓊脂膠(Agaropectin)構成。然后，將食用瓊脂混合在酸度在PH5至pH7之間的溶液中，煮沸后，進行冷卻，在約40 V開始凝膠化(Gelification)，形成膠狀物，這樣的膠狀食用瓊脂在冷凍干燥時，隨著膠狀物內部的水成分被去除，具有形成薄膜的性質。
[0024]因此，本發明的構成如下，將上述食用瓊脂用作乳酸菌發酵培養基，在培養液狀態下，以食用瓊脂膠狀物形態構成乳酸菌發酵，使得之后用蛋白質和多糖類對包含乳酸菌和食用瓊脂膠狀物的乳酸菌濃縮液進行涂布。然后，冷凍干燥時，隨著食用瓊脂形成薄膜形態，使得蛋白質和多糖類的雙 重涂布矩陣(格子)形態更加堅固，從而抑制保濕水分，更加提高耐熱性、耐酸性、耐膽汁性，可以增強活菌穩定性及加速穩定性。
[0025]并且，對于包含食用瓊脂、糖成分及離子成分的水溶液，在120°C ~130°C范圍的溫度下滅菌后，進行冷卻時，隨著食用瓊脂從40°C開始凝膠化(Gelification)，形成食用瓊脂膠狀物，將這樣的食用瓊脂膠狀物與乳酸菌一同發酵，則形成包含食用瓊脂膠狀物的乳酸菌發酵液。此外，對于上述包含食用瓊脂、糖成分及離子成分的水溶液，在超過130°C的溫度下滅菌的情況下，發生碳化現象，從而會使乳酸菌培養產生問題，此外，在不足120°C下滅菌的情況下，滅菌效果降低，從而會產生微生物的污染問題。
[0026]然后，通過對上述乳酸菌發酵液實施分離及濃縮的工序，從而形成包含食用瓊脂膠狀物的乳酸菌濃縮水溶液。通過這樣的濃縮過程，將乳酸菌濃縮至101("l0nCFU/mL時，則隨著食用瓊脂膠狀物與乳酸菌一起沉淀，從而能夠誘導有效的涂布。例如，在乳酸菌發酵后，利用連續式離心分離機，對菌體進行分離及濃縮，則能夠獲得沉淀的食用瓊脂膠狀物和乳酸菌濃縮水溶液。
[0027]并且，在上述乳酸菌濃縮液中加入蛋白質成分來涂布菌體時，則能夠形成食用瓊脂及蛋白質涂布。這樣的食用瓊脂及蛋白質涂布會賦予乳酸菌耐熱性、耐酸性及耐膽汁性。
[0028]上述蛋白質成分的加入可以通過在沉淀的乳酸菌濃縮水溶液中加入蛋白質水溶液的方式來完成。上述蛋白質水溶液的蛋白質濃度可以在0.1%~20%的范圍內。作為蛋白質，可以單獨或混合使用大米蛋白、大豆分離蛋白、大豆蛋白胨、酪蛋白胨、脫脂奶粉、乳清蛋白，但并不限于這些。在此，上述蛋白質在水溶液中的蛋白質濃度超過20%時，蛋白質的溶解度降低，會使以不溶性狀態存在的蛋白質增多，如果不足0.1%時，會顯示不出涂布效果O
[0029]在上述加入了蛋白質成分的乳酸菌濃縮水溶液中加入多糖類成分。本發明中的上述多糖類成分的加入可以采用在乳酸菌和蛋白質混合水溶液中加入多糖類水溶液的方式完成。上述多糖類水溶液優選以多糖類濃度為0.1%~30%范圍加入。因為超過30%時，多糖類水溶液的粘度高，在滅菌時發生焦糖化反應，從而難以使用，不足0.1%時，顯示不出涂布效果。
[0030]這樣的多糖類可以單獨或混合使用卡拉膠(Carrageenan )、黃原膠(Xanthangum)、結冷膠(Gellan gum)、瓜爾膠(Guar gum)、熱凝膠多糖(Curdlan)、阿拉伯樹膠(Arabic gum)、褐藻膠(Algin)、刺梧桐膠(Karaya gum)、黃蓍膠(Tragacanth gum)、印度樹膠(Ghatti gum)、刺槐豆膠(Locust bean gum)、羅望子膠(Tamarind gum)、車前子膠(Psyllium seed gum)、普魯蘭多糖(Pullulan)、韋蘭膠(Welan)、鼠李膠(Rhamsan)、果膠(Pectin)、羧甲基纖維素鈉(CMC)、果聚糖(Levan)、山梨醇(Sorbitol)、木糖醇(Xy I itol)、肌醇(Inositol)、赤蘚糖醇(Erythritol)、甲基纖維素(Methyl cellulose)、麥芽糖糊精(Maltodextrin)、葡甘露聚糖(Glucomannan)、木質素(Iignin)等,但不限于這些。
[0031]此外，所述多糖類可以按照包含食用瓊脂和蛋白質成分的乳酸菌濃縮水溶液總重量的0.001%~10%的重量加入。多糖類的加入量超過10%時，產生不能夠均勻涂布的問題，不足0.1%時，會顯示不出涂布效果，因此優選在上述范圍內加入到乳酸菌濃縮水溶液中。
[0032]如上所述，通過多糖類使乳酸菌被涂布，通過多糖類具有的強結合力，產生菌體之間的結合，從而能夠形成結構非常致密的菌塊。尤其是當多糖類為水溶液狀態時，在酸性的條件下溶解度極低，在中性以上的PH下容易離解及溶出，因此在酸性條件下能夠增強乳酸菌的穩定性及腸內固定性。
[0033]并且，本發明中對上述乳酸菌進行冷凍干燥，從而能夠進一步提高保存穩定性，為此，在包含了食用瓊脂的乳酸菌濃縮水溶液中除了加入用于形成雙重涂布的蛋白質及多糖類成分之外，進一步加入冷凍保護劑。此時，所述冷凍保護劑可以在加入了用于形成雙重涂布的蛋白質及多糖類成分全部加入之后加入，或者是將雙重涂布成分與冷凍保護劑一同加入，但優選在乳酸菌濃縮水溶液中先加入冷凍保護劑后再加入雙重涂布成分。
[0034]這樣加入了冷凍保護劑后，采用通常的方法實施冷凍干燥過程，則乳酸菌在冷凍干燥過程中不會死亡。上述冷凍保護劑可以使用海藻糖、麥芽糖糊精、甘露醇、山梨醇等多糖，可以使用葡萄糖、果糖、麥芽糖、蔗糖等單糖。此外，也可以使用乳清粉末、淀粉及脫脂奶粉。
[0035]此外，由于冷凍保護劑原料的溶解度不超過50%，因此如果冷凍保護劑的加入量使濃度超過50%時，會以不溶性狀態存在，不足0.1%時，顯示不出冷凍保護劑的效果，因此冷凍保護劑的濃度優選采用1-50%范圍的水溶液狀態。
[0036]此外，所述冷凍保護劑也可以以相對于乳酸菌濃縮水溶液總重量的f 50%的加入量加入使用。相對于乳酸菌濃縮水溶液冷凍保護劑的加入量超過50%時，會不能夠均勻地混合，不會顯示冷凍保護效果，按照不足1%進行加入的情況下，會顯示不出冷凍保護劑的效果。
[0037]作為另一個實施方案，本發明提供一種具有包含上述食用瓊脂的包含蛋白質和多糖類成分的菌塊結構的涂布層的乳酸菌粉的制備方法。上述制備方法的特征為包括以下步驟:(a)在用于培養乳酸菌的培養基中加入食用瓊脂，然后發酵，形成乳酸菌濃縮水溶液；
(b)往上述乳酸菌濃縮水溶液中加入蛋白質和多糖類成分；(C)對上述加入了食用瓊脂、蛋白質、多糖類成分的乳酸菌濃縮水溶液進行冷凍干燥。
[0038]在此，步驟(a)中的用于乳酸菌培養的培養基中可以包含糖成分、離子成分、蛋白質成分及酵母提取物等。并且，所述步驟(b)中，蛋白質與多糖類成分可以按照一定的順序加入，或者可以同時加入。
[0039]此外，根據本發明的制備方法，在所述步驟(b)中，乳酸菌濃縮水溶液中還可以加入冷凍保護劑成分。
[0040]作為又一個實施方案，本發明可以適用于利用上述制備方法制得的乳酸菌粉的產品，這些產品包括發酵乳、加工乳、醬類發酵食品、泡菜發酵食品、功能性飲料、功能性食品、一般食品、醫藥品及化妝品等。
[0041]本發明的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，其耐酸性、耐膽汁性、耐熱性優異，并且加速穩定性高，在被人體攝取時，因胃酸、膽汁酸引起的乳酸菌死亡程度低，從而具有能夠長時間維持乳酸菌本來的生理活性功能的特征，因此可以有效地應用于以乳酸菌活性作為必需的多種食品中。
[0042]發明的效果
[0043]根據本發明的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，其具有耐酸性、耐膽汁性高，在極限環境下的加速試驗穩定性高的優點。此外，在攝取乳酸菌時，不會因胃酸、膽汁酸而死亡，具有不會喪失乳酸菌本來的生理活性功能的特點。
[0044]因此，根據本發明的雙重涂布乳酸菌粉可以有效地應用于以乳酸菌活性作為必需的發酵乳、加工乳、醬類發酵食品、泡菜發酵食品、功能性飲料、功能性食品、一般食品及化妝品等的制備中。
【具體實施方式】
[0045]下面，通過本發明的優選實施例對本發明的構成及作用更加詳細地進行說明。但是，下述實施例只是為了有助于理解本發明，本發明的范圍并不僅限于下列實施例。在此沒有記載的內容，對于本領域技術人員來說，完全能夠進行技術推定，因此省略對該部分內容的說明。
[0046]實施例1利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉的制備
[0047]首先，為了生產用蛋白質單獨涂布的干酪乳桿菌(Lactobacillus casei CBT-LC)乳酸菌，進行了以下實驗。
[0048]具體地，加入5%葡萄糖作`為糖成分，2%酵母提取物，3%大豆蛋白胨，0.1%食用瓊月旨，0.2%磷酸二氫鉀、0.2%檸檬酸銨、0.2%醋酸鈉、0.01%硫酸鎂作為離子成分，然后使它們溶解，轉移到200L容量的厭氧性發酵管中，在121°C下進行15分鐘滅菌，接種2L菌種，用氨維持pH，發酵12小時。在上述發酵之后，以60L/hr的流速將發酵液轉移到連續式離心分離器中，使菌體和食用瓊脂膠狀物沉淀，從而形成了乳酸菌濃縮水溶液。在上述乳酸菌濃縮水溶液中加入0.5%大豆分離蛋白作為蛋白質成分，從而生成了用食用瓊脂及蛋白質成分涂布的干釀乳桿菌(Lactobacillus casei CBT-LC)乳酸菌。
[0049]然后，將用于乳酸菌冷凍干燥的冷凍保護劑加入到上述涂布了所述蛋白質的乳酸菌水溶液中進行混合。具體地，將30%的海藻糖、20%的山梨醇冷凍保護劑水溶液進行加壓滅菌，在上述制得的乳酸菌濃縮水溶液中加入冷凍保護劑，在攪拌機中以5，OOOrpm的速度進行攪拌，進行均質化處理。
[0050]然后，為了生產用蛋白質及多糖類進行雙重涂布的干酪乳桿菌(Lactobacilluscasei CBT-LC)乳酸菌，進一步進行了以下實驗。
[0051]對混合1%黃原膠、1%羧甲基纖維素鈉、1%山梨醇并進行溶解的3L多糖類水溶液實施加壓滅菌，從而制得多糖類水溶液，然后在上述乳酸菌濃縮水溶液中混合多糖類水溶液，然后在攪拌機中以5，OOOrpm的速度進行攪拌，進行均質化處理，從而生產出用食用瓊脂膠狀物、蛋白質、多糖類成分雙重涂布了的乳酸菌濃縮水溶液。
[0052]然后，對雙重涂布的乳酸菌濃縮水溶液實施了冷凍干燥工序，具體地，將進行均質化處理了的雙重涂布乳酸菌濃縮水溶液在_55°C的冰箱中急速冷凍后，在0°C~40°C下進行了冷凍干燥。
[0053]實施例2用包含食用瓊脂的蛋白質與多糖類進行雙重涂布的乳酸菌的制備
[0054]首先，為了生產用食用瓊脂和蛋白質進行涂布的乳雙歧桿菌(Bifidobacteriumlactis CBT-BL)乳酸菌，進行了以下實驗。
[0055]具體地，加入5%葡萄糖作為糖成分，3%酵母提取物，2%大豆分離蛋白作為蛋白成分，0.3%食用瓊脂，0.2%磷酸二氫鉀、0.2%檸檬酸銨、0.2%醋酸鈉、0.01%硫酸鎂作為離子成分，然后使它們溶解，轉移到200L容量的厭氧性發酵管中，在121°C下進行15分鐘滅菌，接種2L菌種，用氨維持pH，發酵15小時。在上述發酵之后，以60L/hr的流速將發酵液轉移到連續式離心分離器中，使菌體和食用瓊脂膠狀物沉淀，從而形成了乳酸菌濃縮水溶液。在上述乳酸菌濃縮水溶液中加入3%大豆分離蛋白作為蛋白質成分，從而生成了用食用瓊脂及蛋白質成分涂布的乳雙歧桿菌(Bifidobacterium lactis CBT-BL)乳酸菌。
[0056]然后，將用于乳酸菌冷凍干燥的冷凍保護劑加入到上述乳酸菌濃縮水溶液中進行混合。具體地，將由30%的海藻糖、20%的山梨醇組成的冷凍保護劑水溶液進行加壓滅菌，在上述制得的乳酸菌濃縮水溶液中加入冷凍保護劑，在攪拌機中以5，OOOrpm的速度進行攪拌，進行均質化處理。
[0057]然后，為了生產用食用瓊脂膠狀物、蛋白質及多糖類進行雙重涂布的乳雙歧桿菌(Bifidobacterium lactis CBT-BL)乳酸菌,進一步進行了以下實驗。對混合1%黃原膠、1%羧甲基纖維素鈉(CMC)、10%山梨醇進行溶解的3L多糖類水溶液實施加壓滅菌，從而制得多糖類水溶液，然后在上述乳酸菌濃縮水溶液中混合上述制得的多糖類水溶液，然后在攪拌機中以5，OOOrpm的速度進行攪拌，進行均質化處理，從而生產出用食用瓊脂膠狀物、蛋白質、多糖類成分雙重涂布了的乳酸菌濃縮水溶液。
[0058]然后，對包含食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌濃縮水溶液實施了冷凍干燥工序，具體地，將均質化處理了的雙重涂布乳酸菌濃縮水溶液在-55°C的冰箱中急速冷凍后，在(TC~40°C下進行了冷凍干燥。
[0059]實驗例I利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉的耐酸性比較
[0060]測定上述實施例1和實施例2中制得的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉的耐酸性后，將其結構示于表1中。
[0061]將上述實施例1和實施例2中制得的乳酸菌粉在pH2.1的人造胃液中分別反應.30、60、90及120分鐘,使用生理鹽水或磷酸緩沖溶液(Phosphate-buffer)稀釋水,通過十進制稀釋法進行稀釋后，涂布到固體培養基(agar plate)上，對乳酸菌進行計數。
[0062]表1
【權利要求】
1.一種利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，其特征在于，其包含:涂布層，包含食用瓊脂、蛋白質、多糖類成分并形成菌塊； 乳酸菌，由所述涂布層涂布。
2.根據權利要求1所述的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，其特征在于，所述食用瓊脂涂布層形成薄膜形態。
3.根據權利要求1所述的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，其特征在于，所述涂布層由下述步驟形成:在包含食用瓊脂成分的乳酸菌濃縮水溶液中加入蛋白質及多糖類成分，然后冷凍干燥。
4.根據權利要求1所述的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，其特征在于，所述乳酸菌為選自鏈球菌屬(Streptococcus)、乳球菌屬(Lactococcus )、腸球菌屬(Enterococcus)、乳桿菌屬(Lactobacillus)、片球菌屬(Pediococcus)、明串球菌屬(Leuconostoc)、魏斯氏菌屬(Weissella)及雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)中的一種以上的菌株。
5.根據權利要求1所述的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，其特征在于，所述食用瓊脂的主要成分由瓊脂糖(Agarose)和瓊脂膠(Agaropectin)構成,混合到pH為5~7之間的溶液中煮沸，然后冷卻并形成為膠狀，冷凍干燥時，所述食用瓊脂膠狀物內部的水分被去除，形成薄膜。
6.根據權利要求1所述的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，其特征在于，所述蛋白質成分選自大米蛋白、大豆分離蛋白、大豆蛋白胨、酪蛋白胨、脫脂奶粉、乳清蛋白中的一種或它們的混合物。
7.根據權利要求1所述的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉，其特征在于，所述多糖類成分選自卡拉膠(Carrageenan)、黃原膠(Xanthan gum)、結冷膠(Gellan gum)、瓜爾膠(Guar gum)、熱凝膠多糖(Curdlan)、阿拉伯樹膠(Arabic gum)、褐藻膠(Algin)、刺梧桐膠(Karaya gum)、黃蓍膠(Tragacanth gum)、印度樹膠(Ghatti gum)、刺槐豆膠(Locust bean gum)、羅望子膠(Tamarind gum)、車前子膠(Psyllium seed gum)、普魯蘭多糖(Pullulan)、韋蘭膠(Welan)、鼠李膠(Rhamsan)、果膠(Pectin)、羧甲基纖維素鈉(CMC)、果聚糖(Levan)、山梨醇(Sorbitol)、木糖醇(XyIitol)、肌醇(Inos itol)、赤蘚糖醇(Erythritol)、甲基纖維素(Methyl celIulose)、麥芽糖糊精(Maltodextrin)、葡甘露聚糖(Glucomannan)、木質素(Iignin)中的一種或它們的混合物。
8.一種利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉的制備方法，其特征在于，其包括以下步驟: (a)在用于培養乳酸菌的培養基中加入食用瓊脂，然后發酵，形成乳酸菌濃縮水溶液； (b)往上述乳酸菌濃縮水溶液中加入蛋白質和多糖類成分； (C)對上述加入了食用瓊脂、蛋白質、多糖類成分的乳酸菌濃縮水溶液進行冷凍干燥。
9.根據權利要求8所述的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉的制備方法，其特征在于，所述步驟(a)是在包含0.1%~5.0%范圍的食用瓊脂、0.1%~10%范圍的糖成分、0.1%~?Ο%范圍的酵母提取物、0.01%~2.0%范圍的離子成分、以及0.01%~20%范圍的蛋白成分的水溶液中發酵乳酸菌。
10.根據權利要求8所述的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉的制備方法，其特征在于，所述步驟(a)包括以下步驟: 對包含了食用瓊脂、糖成分、酵母提取物、離子成分及蛋白成分的水溶液，以1200C~130°C范圍的溫度進行滅菌,然后冷卻，從而形成食用瓊脂膠狀物； 將上述食用瓊脂膠狀物和乳酸菌一起發酵，形成乳酸菌發酵液； 對上述乳酸菌發酵液實施分離及濃縮的工序，從而形成包含食用瓊脂膠狀物的乳酸菌濃縮水溶液。
11.根據權利要求8所述的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉的制備方法，其特征在于，在所述步驟(b)中，在加入多糖類及食用乳脂成分之前，或者在所述步驟(C)中，在冷凍干燥之前，在乳酸菌濃縮水溶液中加入冷凍保護劑。
12.包含權利要求1中的利用食用瓊脂的雙重涂布乳酸菌粉的產品。
13.根據權利要求12所述的產品，其特征在于，所述產品選自發酵乳、加工乳、醬類發酵食品、泡菜發酵食 品、功能性飲料、功能性食品、一般食品、醫藥品及化妝品。
【文檔編號】A61K8/99GK103571767SQ201210262911
【公開日】2014年2月12日 申請日期:2012年7月26日 優先權日:2012年7月26日
【發明者】鄭明俊 申請人:細胞生物技術公司