專利名稱:Dss誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā) 明涉及生物技術(shù),特別涉及ー種DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法。
背景技術(shù):
潰瘍性腸炎(ulcerative colitis, UC),具有反復(fù)發(fā)作的特性,發(fā)作時(shí),病人腸道有潰瘍性病變,會(huì)出現(xiàn)腹痛、腹瀉或便血。現(xiàn)有的治療手段并不能有效地應(yīng)用于所有的病人,約20%的病人最終需要腸道切除。在新藥研發(fā)的過(guò)程中,潰瘍性腸炎的動(dòng)物模型是必需的工具。葡聚糖硫酸鈉(Dextran Sulfate Sodium,DSS)誘發(fā)的小鼠模型是應(yīng)用最為廣泛的動(dòng)物模型,這是ー個(gè)急性的潰瘍性腸炎模型,讓小鼠飲用溶解有葡聚糖硫酸鈉的飲用水六天,再換正常飲用水飲用四天。小鼠會(huì)有腸道有潰瘍性病變,包括水腫、腹瀉和便血。在這個(gè)模型中,因?yàn)槠暇厶橇蛩徕c的毒性,動(dòng)物的病變非常嚴(yán)重,表現(xiàn)為體重的急劇下降,在很多的情況下,會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物死亡。死亡率可達(dá)20%到40%,從而使這ー模型極不穩(wěn)定。降低葡聚糖硫酸鈉的濃度可以避免動(dòng)物死亡,但是病理反應(yīng)同時(shí)減弱,使模型的應(yīng)用受到限制。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的,在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷,提供ー種DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法,通過(guò)該方法建立小鼠模型,可使動(dòng)物的死亡率降低為零,但小鼠模型的病理表現(xiàn)相同。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的ー種DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法,包括以下步驟A、動(dòng)物選擇選擇19-21克體重的雌性C57BL/6小鼠作為建立小鼠模型的對(duì)象;B、制備葡聚糖硫酸鈉溶液將葡聚糖硫酸鈉溶于消毒過(guò)的飲用水,配制成重量百分濃度為2%的葡聚糖硫酸鈉溶液,置于水瓶避光保護(hù),現(xiàn)配現(xiàn)用;C、模型的建立將選擇的C57BL/6小鼠飼養(yǎng)在SPF級(jí)動(dòng)物房,讓它先飲用步驟B所制備的葡聚糖硫酸鈉溶液六天,再飲用正常飲用水四天,則所選擇的C57BL/6小鼠成為DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型。上述DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法,其中,所述的置于水瓶避光保護(hù)是將水瓶包鋁箔紙避光。本發(fā)明DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法與現(xiàn)有技術(shù)相比,本方法使動(dòng)物的死亡率降低為零,但病理表現(xiàn)相同,從而使模型變得穩(wěn)定而可靠,并具有可重復(fù)性。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法,包括以下步驟A、動(dòng)物選擇選擇19-21克體重的雌性C57BL/6小鼠作為建立小鼠模型的對(duì)象;B、制備葡聚糖硫酸鈉溶液將葡聚糖硫酸鈉溶于消毒過(guò)的飲用水,配制成重量百分濃度為2%的葡聚糖硫酸鈉溶液,置于水瓶避光保護(hù),現(xiàn)配現(xiàn)用;C、模型的建立將選擇的C57BL/6小鼠飼養(yǎng)在SPF級(jí)動(dòng)物房,讓它先飲用步驟B所制備的葡聚糖硫酸鈉溶液六天,再飲用正常飲用水四天,則所選擇的C57BL/6小鼠成為DSS誘導(dǎo)腸炎的小 鼠模型。實(shí)施例I用背景技術(shù)中所提到的現(xiàn)有技術(shù)的方法建立小鼠模型,每隔ー或兩天,更換新鮮配制的葡聚糖硫酸鈉溶液讓小鼠飲用六天,并且葡聚糖硫酸鈉溶液沒有避光保護(hù),再換正常飲用水飲用四天。用本發(fā)明的方法,讓小鼠飲用一次性配制的重量百分濃度為2%的葡聚糖硫酸鈉溶液六天,葡聚糖硫酸鈉的飲水有避光保護(hù),再換正常飲用水飲用四天。用三組小鼠(C57BL/6,來(lái)源于SLACK),每組10只,第一組為對(duì)照組,不飲用葡聚糖硫酸鈉溶液;第二組用背景技術(shù)中所提到的現(xiàn)有技術(shù)的方法;第三組用本發(fā)明的方法。10天實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,小鼠的死亡率分別是0、40%和O。這說(shuō)明采用本方法建立的小鼠模型使動(dòng)物的死亡率降低為零。實(shí)施例2用本發(fā)明的方法,讓小鼠飲用不同重量百分濃度的葡聚糖硫酸鈉溶液,分別是
I.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明重量百分濃度為3%和4%的葡聚糖硫酸鈉溶液引起小鼠超過(guò)20%體重的降低,表明毒性過(guò)高。而重量百分濃度為I. 5%的葡聚糖硫酸鈉溶液引起的腸炎病理表現(xiàn)過(guò)于輕微。重量百分濃度為2%的葡聚糖硫酸鈉溶液引起的體重降低少于10%,腸切片的病理評(píng)分高于其他組,腸水腫程度也高于其他組。這說(shuō)明,重量百分濃度為2%的葡聚糖硫酸鈉溶液引起的腸炎病理表現(xiàn)是最適合的。
權(quán)利要求
1.一種DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法,其特征在于,包括以下步驟 A、動(dòng)物選擇 選擇19-21克體重的雌性C57BL/6小鼠作為建立小鼠模型的對(duì)象; B、制備葡聚糖硫酸鈉溶液 將葡聚糖硫酸鈉溶于消毒過(guò)的飲用水,配制成重量百分濃度為2%的葡聚糖硫酸鈉溶液,置于水瓶避光保護(hù),現(xiàn)配現(xiàn)用; C、模型的建立 將選擇的C57BL/6小鼠飼養(yǎng)在SPF級(jí)動(dòng)物房,讓它先飲用步驟B所制備的葡聚糖硫酸鈉溶液六天,再飲用正常飲用水四天,則所選擇的C57BL/6小鼠成為DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法,其特征在于所述的置于水瓶避光保護(hù)是將水瓶包鋁箔紙避光。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法,它包括以下步驟A、選擇19-21克體重的雌性C57BL/6小鼠作為建立小鼠模型的對(duì)象;B、將葡聚糖硫酸鈉溶于消毒過(guò)的飲用水,配制成重量百分濃度為2%的葡聚糖硫酸鈉溶液,置于水瓶避光保護(hù),現(xiàn)配現(xiàn)用;C、將選擇的C57BL/6小鼠飼養(yǎng)在SPF級(jí)動(dòng)物房,讓它先飲用步驟B所制備的葡聚糖硫酸鈉溶液六天,再飲用正常飲用水四天,則所選擇的C57BL/6小鼠成為DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型。本發(fā)明DSS誘導(dǎo)腸炎的小鼠模型的建立方法使動(dòng)物的死亡率降低為零,但病理表現(xiàn)相同,從而使模型變得穩(wěn)定而可靠,并具有可重復(fù)性。
文檔編號(hào)A61K31/727GK102813671SQ20121032625
公開日2012年12月12日 申請(qǐng)日期2012年9月5日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月5日
發(fā)明者王立新 申請(qǐng)人:輝源生物科技(上海)有限公司