使用蘆薈液制備蘆薈注射液針劑的方法
【專利摘要】本發明公開了一種使用蘆薈液制備蘆薈注射液針劑的方法，包括下述步驟：首先取蘆薈液100重量份加蒸餾水2000重量份進行稀釋，將稀釋液攪拌均勻后進行分離、過濾澄清；加鹽酸調節pH值至6.3-6.5，加熱到115℃后高溫滅菌30分鐘，自然冷卻；用鹽酸將冷卻液的pH調至4.2-4.5，經超濾膜超濾，截留獲得分子量不大于10000Da的含藥溶液；然后藥液分裝入瓶，115℃-118℃滅菌30分鐘即可。本發明的優點在于突破了傳統的將蘆薈當做排毒養顏通便產品的使用范圍，運用現代醫藥學手段，將蘆薈制成蘆薈注射液，使其藥用領域拓寬到了對腫瘤等疾病的防治方面，試驗證明，本發明制備的蘆薈注射液治療效果突出且無毒副作用。
【專利說明】使用蘆薈液制備蘆薈注射液針劑的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及蘆薈產品，尤其是涉及一種使用蘆薈液制備蘆薈注射液針劑的方法。【背景技術】
[0002]蘆薈(Aloe)是一種多年生百合科肉質的草本植物，是一種具有食用、美容、保健、醫藥以及觀賞等功能的植物。蘆薈化學成分復雜，已發現的成分超過160多種，主要有多糖、蒽醌類化合物、有機酸、氨基酸、酶和多肽、維生素、留族化合物、礦物質、微量元素等有效活性成分。不同品種蘆薈的活性成分含量有明顯差別，即使是同一品種，不同產地、不同生長期，不同采收季節，不同的加工方法，蘆薈的活性成分含量也有明顯差異。為了便于終端產品加工、使用、運輸和銷售，通常將蘆薈鮮葉進行全葉榨汁或去皮榨汁，蘆薈液是蘆薈行業最常見的原料之一。
[0003]目前蘆薈行業只有蘆薈罐頭(蘆薈丁)、蘆薈粉劑、蘆薈液等基礎原料，可以制造成蘆薈膠、蘆薈膠囊、蘆薈片劑、蘆薈口服液等蘆薈產品。口服蘆薈制品具有排毒養顏，潤通腸胃，增強免疫功能等作用，但實際效果主要集中在通便功能上，對其他人體疾病沒有明顯改善和治療作用。該發明(使用蘆薈液制備蘆薈注射液針劑的方法)可以使蘆薈的應用擴大到醫學領域，對腫瘤的抑制有很好的作用。

【發明內容】

[0004]本發明的目的在于提供一種使用蘆薈液制備蘆薈注射液針劑的方法，該蘆薈注射液針劑對多種腫瘤疾病具有較好的治療作用。
[0005]為實現上述目的，本發明可采取下述技術方案:
本發明所述的使用蘆薈液 制備蘆薈注射液針劑的方法，包括下述步驟:
第一步，取蘆薈液100重量份加蒸餾水2000重量份進行稀釋，得稀釋液；
第二步，將稀釋液攪拌均勻后靜置過夜進行分離；
第三步，將第二步分離后的上清液過濾澄清；
第四步，將第三步得到的濾液加鹽酸調節PH值至6.3-6.5，加熱到115°C后高溫滅菌30分鐘，然后自然冷卻；
第五步，用鹽酸將第四步得到的冷卻液的PH調至4.2-4.5，經超濾膜超濾，截留獲得分子量不大于IOOOODa的含藥溶液；
第六步，將第五步得到的藥液分裝入瓶，115°C _118°C滅菌30分鐘即可。
[0006]所述蘆薈液的制備方法為:
第一步，將新鮮蘆薈葉浸泡30-60分鐘，清洗干凈后粉碎成蘆薈漿汁；
第二步，將蘆薈漿汁倒入加熱反應罐中導入蒸汽加熱至15_20°C，同時按蘆薈漿汁總重量的0.125%加入果膠酶或蛋白酶，50-60分鐘后，將溫度升至75-80°C，并保溫3_5小時進行滅活處理；
第三步，將第二步滅活處理后的汁液過濾，制成蘆薈液成品。[0007]本發明的優點在于突破了傳統的將蘆薈當做排毒養顏通便產品的使用范圍，運用現代醫藥學手段，將蘆薈制成蘆薈注射液，使其藥用領域拓寬到了對腫瘤等疾病的防治方面，試驗證明，本發明制備的蘆薈注射液治療效果突出且無毒副作用。
【具體實施方式】
[0008]本發明所述的使用蘆薈液制備蘆薈注射液針劑的方法，包括下述步驟:
第一步，將新鮮蘆薈葉浸泡30-60分鐘，清洗干凈后去皮或連皮用食用不銹鋼破碎機粉碎成蘆薈漿汁；
第二步，將蘆薈漿汁倒入加熱反應罐中導入蒸汽加熱至15-20°C，時間不超過60分鐘，同時按蘆薈漿汁總重量的0.125%加入果膠酶或蛋白酶，以促進蘆薈的降解，60分鐘后，將溫度升至75-80°C，并保溫3-5個小時，進行滅活處理；
第三步，將第二步滅活處理后的汁液過濾，制成蘆薈液成品；
第四步，取上述蘆薈液100重量份加蒸餾水2000重量份進行稀釋，得稀釋液；
第五步，將稀釋液攪拌均勻(或超聲均質15分鐘)后靜置過夜進行分離；
第六步，將分離后的上清液過濾澄清；
第七步，將濾液用37%的鹽酸調節pH值至6.3-6.5，加熱到115°C后滅菌30分鐘，然后自然冷卻；
第八步，用37%的鹽酸將冷卻液的pH調至4.2-4.5，經超濾膜超濾，截留獲得分子量不大于IOOOODa的含藥溶液；
第九步，將得到的藥液分別裝入250毫升的玻璃瓶中，充氮加熱到115°C_118°C滅菌30分鐘，即可得到注射液針劑成品。
[0009]本發明注射液的臨床使用效果試驗如下:
一、體外抗腫瘤作用
1.實驗材料
1.1樣品:本發明制備的注射液，呈淡棕色，澄清透明，規格:250ml瓶裝，含蘆薈有效成分8g。可按實驗濃度直接加入培養體系。
[0010]1.2 試劑:RPM1-1640, DMEM (Gibco)，小牛血清(維森特，20130118)，
Trypsin (Amresco), MTT (Sigma) ,DMSO(Sigma)0
[0011]1.3細胞株:MDA-MB-231 (人乳腺癌細胞)，HPEG2 (人肝癌細胞)，B16F10 (黑色素瘤細胞)，A549 (人肺癌細胞)，MCF-7 (人乳腺癌細胞)，本實驗室保存。
[0012]1.4儀器:GS_15R臺式冷凍離心機(Beckman) ；BP310s電子天平 (sartorius) ;Microfuge微量離心機(Beckman) ;DK_8D電熱恒溫水浴槽(上海精宏實驗設備有限公司)；MS1 Minishaker(IKA);層流架(蘇凈集團安泰公司)；C02培養箱(Formascientific) ；Pureplus純水器(U.S.A) ;SW_CJ-1FD凈化工作臺(蘇凈集團安泰公司)；Biotek Synerge 2 酶標儀(Biotek) ; Zeiss AVIVO 型倒置顯微鏡(Zeiss);
2.實驗方法
2.1接種細胞:用0.25%胰蛋白酶消化處于對數生長期的腫瘤細胞，用含10%
胎牛血清的RPMI1640培養液配成單個細胞懸液，以每孔2 X IO4個細胞接種于96孔板中，將培養板移入CO2孵箱中，在37°C、5%C02及飽和濕度條件下培養24小時后加藥。[0013]2.2加藥:終濃度每個濃度平行6孔，用培養基稀釋后加入(空白對照孔:
不加細胞，只加培養液；陰性對照孔:除不加藥物外，其余操作相同)，細胞繼續培養24小時。
[0014]2.3呈色:棄上清，每孔加200μ1新鮮配制的含0.4mg ml-1 MTT的無血清培 養基，繼續培養4h，然后棄上清加200μ1 DMSO溶解MTT甲簪沉淀，用微型振蕩器振蕩混勻。
[0015]2.4比色:酶標儀測定490nm處光密度值(以空白對照孔調零)，按下式計 算腫瘤細胞抑制率，
2.5細胞抑制率(%)=(對照組OD值一試驗組OD值)/對照組OD值X 100%,
并計算預測IC50值(半數抑制濃度)。
[0016]3.實驗結果
從結果可以看出，MDA-MB-231、HPEG2、MCF-7細胞對受試樣品較為敏感，其IC50值分別% 70.6 μ g/ml,275.3 μ g/ml 和 224.6 μ g/ml ;而 B16F10 和 A549 細胞的敏感性則較低，其 IC50 值分別為 1857.2 μ g/ml 和 965.4 μ g/ml。
[0017]總得來看，在體外培養體系中對部分腫瘤細胞(如HPEG2、MCF-7)顯示較強的抑制作用，而對B16F10和A549則表現的抑制作用較低。
[0018]
【權利要求】
1.一種使用蘆薈液制備蘆薈注射液針劑的方法，其特征在于:包括下述步驟: 第一步，取蘆薈液100重量份加蒸餾水2000重量份進行稀釋，得稀釋液； 第二步，將稀釋液攪拌均勻后靜置過夜進行分離； 第三步，將第二步分離后的上清液過濾澄清； 第四步，將第三步得到的濾液加鹽酸調節PH值至6.3-6.5，加熱到115°C后高溫滅菌30分鐘，然后自然冷卻； 第五步，用鹽酸將第四步得到的冷卻液的PH調至4.2-4.5，經超濾膜超濾，截留獲得分子量不大于IOOOODa的含藥溶液； 第六步，將第五步得到的藥液分裝入瓶，115°C _118°C滅菌30分鐘即可。
2.根據權利要求1所述的使用蘆薈液制備蘆薈注射液針劑的方法，其特征在于:所述蘆薈液的制備方法為: 第一步，將新鮮蘆薈葉浸泡30-60分鐘，清洗干凈后粉碎成蘆薈漿汁； 第二步，將蘆薈漿汁倒入加熱反應罐中導入蒸汽加熱至15_20°C，同時按蘆薈漿汁總重量的0.125%加入果膠酶或蛋白酶，50-60分鐘后，將溫度升至75-80°C，并保溫3_5小時進行滅活處理； 第三步，將第二步滅活處理后的汁液過濾，制成蘆薈液成品。
【文檔編號】A61K9/08GK103463378SQ201310405920
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月9日 優先權日:2013年9月9日
【發明者】張冰, 陸大杰 申請人:開封九福來生物技術有限公司