一種高含量棗環磷酸腺苷提取物及其制備方法
【專利摘要】本發明提供了一種高含量棗環磷酸腺苷提取物及其制備方法，所述提取物中環磷酸腺苷的濃度為每100g大于15mg，采用棗的固體或半固體原料，經高壓差連續式低溫提取器提取，提取液濃縮后，真空干燥，粉碎得棗的粗提物；采用超臨界萃取技術萃取粗提物，得到棗環磷酸腺苷提取物；所述棗環磷酸腺苷提取物抗缺氧，抗疲勞，改善生活質量方面效果突出，其制備方法具有以下明顯優點：（1）提取轉移率高；（2）生產效率高；（3）質量可控性高；（4）操作可控程度高；（5）資源綜合利用率高；（6）綜合運行成本低；（7）自動化程度高；（8）環境污染低。
【專利說明】一種高含量棗環磷酸腺苷提取物及其制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物有效成分的提取和富集生產領域，尤其是一種高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法。
【背景技術】
[0002]環憐酸腺苷(cyclicademodsine monophosphate,簡稱 cAMP)是一種蛋白激酶制活劑，廣泛存在于生物體的組織與細胞內。其受神經內分泌系統的控制，作為肽類激素、兒茶酚胺和前列腺素等激素的第二信使發揮生物效應。基礎醫學與臨床醫學研究證明，cAMP可以通過促進腦細胞代謝、修復衰老和疲勞腦細胞，阻止腦細胞衰老，從而改善睡眠與記憶力；對機體淋巴細胞轉化、抗體的形成與釋放、細胞免疫等生理功能有重要的調節作用，從而增強免疫力、選擇性抑制機體免疫反應，改善過敏性皮炎、麻疹、哮喘等免疫功能；抑制細胞增殖、促進細胞分化，起到抗腫瘤的作用；通過營養心肌、正性肌力、舒張血管等途徑改善心血管功能；調節神經遞質合成，促進激素分泌，維持正常的人體生理活動。
[0003]1991年，劉孟軍等借助蛋白結合法對14種園藝植物的cAMP含量進行了測定，發現大棗中cAMP的含量最高，其成熟果肉中cAMP的含量為一般動植物材料的數千至數萬倍，范圍在60-800 μ g/g，其中，被譽為“中華金絲小棗第一縣”的無棣縣盛產的金絲小棗中cAMP的含量較高；韓利文等人報道，山東沂蒙山大雪棗中cAMP與金絲小棗含量相當。
[0004]目前，環磷酸腺苷制劑的制備方法主要包括化學合成法、微生物發酵法和傳統提取工藝合并柱層析純化。其中，化學合成法例如申艷紅等(2003)以腺苷為原料，三氯氧磷為磷酰化試劑，用磷酸三乙酯作溶劑，低溫下生成腺苷的5’位二氯磷酸酯，將此中間體與反應體系分離，融入適當的溶劑，于攪拌下慢慢加入到Κ0Η的水和乙腈溶液中，強堿環化得到3’，5’ -環磷酸腺苷，從乙醇和水中重結晶后純度可達到98.5%，總收率58% ；微生物發酵法例如日本研究者(Kok·ai Tokyyo Koho，1997)采用基因重組的手段獲得了菌種Escherichiacoli K_ll,可發酵生產cAMP,米用搖床在28°C培養14h,培養基為葡萄糖0.5%, KH2P041.4%, (NH4) 2S040.2%, MgS04.7H20 0.02%,蛋白胨 0.4%,酵母粉 0.02%,培養液中cAMP的濃度為3.9%mg/150mL ；CN 100425620C公開了一種從棗中提取環磷酸腺苷的工藝，采用浸泡-超聲提取紅棗，得到澄清棗汁，棗汁通過陰離子交換柱，甲酸水溶液洗脫，氨水溶液調節pH值，再過陰離子交換柱，收集的洗脫液通過層析柱(硅膠型，或者大孔樹脂型，或者聚酰胺型)，再用水或乙醇水溶液洗脫，洗脫液濃縮后加入無水乙醇結晶，得到高純度環磷酸腺苷粉。
[0005]然而，上述化學合成法所用的試劑有一定毒性，污染環境；且技術復雜，價格昂貴，難以實現大規模生產；由于合成過程中的副產物原因，適用范圍很小，主要用于心絞痛、心肌梗死、心肌炎及心源性休克等心血管疾病的治療，使用過量會有毒副作用。柱層析法在分離過程中使用了一些刺激性的試劑，對層析柱填料的安全性要求也很高。微生物發酵法由于受到菌種限制且難以分離，使用起來也有一定的局限性。常用的提取方法采用的設備大部分是單元批次式，難以形成連續化生產的規模，影響提取過程標準化進程。[0006]可見，針對現有技術中存在的溶劑消耗量大、周期長、自動化水平低，化學合成過程中副產物多等技術問題，尋求一種新的環磷酸腺苷的生產工藝具有非常重要的生產實踐意義。

【發明內容】
[0007]本發明所要解決的技術問題在于提供一種高含量棗環磷酸腺苷提取物。
[0008]本發明所要解決的另一技術問題在于提供上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法。
[0009]為解決上述技術問題，本發明的技術方案是:
[0010]一種高含量棗環磷酸腺苷提取物，所述提取物中環磷酸腺苷的濃度為每15mg/100g以上，環磷酸腺苷自原料的轉利率達90%以上，該提取物是由下述方法得到的:采用棗的固體或半固體原料，經高壓差連續式低溫提取器提取，提取液濃縮后，真空干燥，粉碎得棗的粗提物；采用超臨界萃取技術萃取粗提物，得到棗環磷酸腺苷提取物。
[0011]一種高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，采用棗的固體或半固體原料，經高壓差連續式低溫提取器提取，提取液濃縮后，真空干燥，粉碎得棗的粗提物；采用超臨界萃取技術萃取粗提物，得到高含量棗環磷酸腺苷提取物。
[0012]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，具體步驟如下:
[0013](1)放置物料:選取含水量在5-30%的棗為原料，粉碎原料，使粒徑為180-850 μ m(80-24 目)；
[0014](2)抽真空:在反應系統溫度-10-0°C條件下，在高壓差連續式低溫提取器內形成真空，真空度保持在-100—20pa，加入水或5-70% (v/v)乙醇水溶液，保持5_30min，其中，所述原料與水或5-70% (v/v)乙醇水溶液的重量比為1:6-20 ；
[0015](3)減真空:通入凈化壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力升至OMpa，保持 Ι-lOmin ；
[0016](4)加壓:繼續通入壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力達到8-12Mpa，保持 l-20min ；
[0017](5)減壓:停止加壓，抽真空，使高壓差連續式低溫提取器中的壓力降至OMpa ；
[0018](6)循環提取:將步驟(2)- (5)進行循環，循環10次；
[0019](7)分離:通過過濾、離心，使固液分離，收集提取液；
[0020](8)干燥:將步驟(7)所得提取液濃縮，真空干燥，粉碎過20-80目篩，得粗提物粉末；
[0021](9)超臨界萃取:以5-99% (v/v)乙醇作夾帶劑與粗提物粉末均勻混合，夾帶比為
8-15% (此處，夾帶比指夾帶劑與粗提物粉末的體積質量比，ml/g)，平衡10-30min后，進行動態萃取，在萃取釜壓力15-60Mpa，萃取溫度35_60°C，萃取時間0.5-5小時，分離釜壓力5-30Mpa，分離釜溫度10-50°C，分離時間0.5-5小時，同一流程中分離釜壓力始終小于萃取釜壓力，二氧化碳流量10-100L/h的條件下，減壓分離，得到棗環磷酸腺苷提取物。
[0022]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述步驟(1)中粉碎原料后，環磷酸腺苷的含量為0.01-0.08%。
[0023]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述步驟(1)中選取含水量在5-15%的棗為原料。
[0024]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述步驟(1)中選取含水量在10%的棗為原料，粉碎原料，使粒徑為250 μ m (65目)。
[0025]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述步驟(1)中棗為金絲小棗(河北滄州)或大雪棗(山東沂蒙山區)。
[0026]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述步驟(2)抽真空的真空度保持在_70pa，加入50% (v/v)乙醇水溶液，保持20min，其中，所述原料與50% (v/v)乙醇水溶液的重量比為1:10。
[0027]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述步驟(2)中反應系統溫度-10-0°c，是通過高壓差連續式低溫提取器外周冷凝循環系統中的冷卻水實現的。
[0028]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述冷卻水為95% (v/v)乙醇。
[0029]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述步驟(4)加壓的壓力達到 llMpa，保持 15min。
[0030]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述步驟(7)中提取液為固液分離后經400目的濾膜過濾至澄清的離心液。
[0031]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所述步驟(9)中以90% (v/v)乙醇作夾帶劑與粗提物粉末均勻混合，夾帶比為15%，平衡30min后，進行動態萃取，在萃取釜壓力40Mpa，萃取溫度37°C，萃取時間5小時，分離釜壓力6Mpa，分離釜溫度30°C，分離時間2.5小時，同一流程中分離釜壓力始終小于萃取釜壓力，二氧化碳流量20L/h的條件下，減壓分離，得到棗環磷酸腺苷提取`物。
[0032]優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，所得到的環磷酸腺苷可進一步經傳統制劑工藝加工生產得到膠囊劑、口服液、露劑、顆粒劑、沖劑、片劑等相關劑型的
女口
廣叩ο
[0033]本發明的有益效果是:
[0034]本發明所述高含量棗環磷酸腺苷提取物，抗缺氧，抗疲勞，改善生活質量方面效果突出，該高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，將原料棗進行低溫干燥處理，總灰分不超過2.0%，利用同批藥材提取液富集環磷酸腺苷，采用高壓差低溫連續提取技術，通過瞬時的真空加壓，將棗中組織細胞進行破裂，使胞內相關成分與溶媒充分接觸、直接溶解，從而達到高效提取的效果，再通過超臨界二氧化碳萃取技術分離得到高收率、高純度的環磷酸腺苷(cAMP)，采用特定濃度的乙醇作夾帶劑，選擇條件獲得以高含量的環磷酸腺苷活性成分，其濃度在15mg/g以上，是食品或藥品的優質原料。
[0035]與現有提取技術相比，本發明所述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法具有以下明顯優點:
[0036](1)提取轉移率高；
[0037](2)生產效率高；
[0038](3)質量可控性高；
[0039](4)操作可控程度高；
[0040](5)資源綜合利用率高:溶媒用量大幅減少，提取液中環磷酸腺苷含量高，后期濃縮成本降低；
[0041](6)綜合運行成本低；
[0042](7)自動化程度高；
[0043](8)環境污染低。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0044]圖1是環磷酸腺苷標準品高效液相色譜圖；
[0045]圖2是實施例1所得高含量棗環磷酸腺苷提取物的高效液相色譜圖。
【具體實施方式】
[0046]下面結合具體實施例對本發明所述技術方案作進一步的說明。
[0047]實施例1
[0048]一種高含量棗環磷酸腺苷提取物，其具體制備步驟如下:
[0049](1)放置物料:將含水量10%的河北滄州金絲小棗10kg，粉碎過65目篩，使粒徑250 μ m，置于高壓差連續式低溫提取器中；
[0050](2)抽真空:通過高壓差連續式低溫提取器外周冷凝循環系統中的冷卻水(95%(v/v )乙醇)使反應系統溫度_7 V條件下，在高壓差連續式低溫提取器內形成真空，真空度保持在_70pa，恒壓后，加入50% (v/v)乙醇水溶液，保持20min，其中，所述原料與50% (v/v)乙醇水溶液的重量比為1:10 ;
[0051](3)減真空:緩慢通入凈化的壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內壓力升至OMpa,時間約為3min ；
[0052](4)加壓:繼續通入壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力達llMpa，保持 15min ；
[0053]( 5 )減壓:停止加壓，打開放氣閥，抽真空，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力降至 OMpa ；
[0054](6)循環提取:繼續步驟(2)- (5)，循環10次；
[0055](7)分離:經過濾、離心，將固液分離，離心液經400目的濾膜過濾至澄清，收集提取液；
[0056](8)干燥:將步驟(7)所得提取液濃縮，真空干燥，粉碎過65目篩，得棗的粗提物粉末；
[0057](9)超臨界萃取:以90%(v/v)乙醇作夾帶劑與粗提物粉末均勻混合，夾帶比為15%(此處，夾帶比指夾帶劑與粗提物粉末的體積質量比，ml/g)，平衡30min后，進行動態萃取，在萃取釜壓力40Mpa，萃取溫度37°C，萃取時間5小時，分離釜壓力6Mpa，分離釜溫度30°C，分離時間2.5小時，同一流程中分離釜壓力始終小于萃取釜壓力，二氧化碳流量20L/h的條件下，減壓濃縮、干燥，得到棗環磷酸腺苷提取物，對棗環磷酸腺苷提取物進行高效液相色譜法檢測，其中，色譜儀:由P200 II高壓恒流泵、UV200 II紫外可變波長檢測器及Echr0m98色譜工作站等部分組成；樣品處理:準確量取10ml用蒸餾水定容于50ml容量瓶中，搖勻，離心,0.45 μ m濾膜過濾，即得；色譜柱:Hydersir BDS C18 ;流動相:20mol/LKH2P04-甲醇(90:10);柱溫:25V ;檢測波長:254nm;7流速:0.6mL/min ;進樣量:10yLo如圖1和圖2所示，其中環磷酸腺苷含量為15mg/100g的提取物。
[0058]實施例2[0059]一種高含量棗環磷酸腺苷提取物，其具體制備步驟如下:
[0060](I)放置物料:選取含水量在5%的大雪棗(山東沂蒙山區)為原料，粉碎原料，使粒徑為 180 μ m (80 目)；
[0061](2)抽真空:在反應系統溫度0°C條件下，在高壓差連續式低溫提取器內形成真空，真空度保持在-lOOpa，加入水溶液，保持30min，其中，所述原料與水溶液的重量比為1:6 ；
[0062](3)減真空:通入凈化壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力升至OMpa，保持IOmin ；
[0063](4)加壓:繼續通入壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力達到12Mpa，保持Imin ；
[0064](5)減壓:停止加壓，抽真空，使高壓差連續式低溫提取器中的壓力降至OMpa ；
[0065](6)循環提取:將步驟(2)- (5)進行循環，循環10次；
[0066](7)分離:通過過濾、離心，使固液分離，收集提取液；
[0067](8)干燥:將步驟(7)所得提取液濃縮，真空干燥，粉碎過80目篩，得粗提物粉末；
[0068](9)超臨界萃取:以99% (v/v)乙醇作夾帶劑與粗提物粉末均勻混合，夾帶比為8% (此處，夾帶比指夾帶劑與粗提物粉末的體積質量比，ml/g)，平衡30min后，進行動態萃取，在萃取釜壓力60Mpa，萃取溫度35°C，萃取時間0.5小時，分離釜壓力30Mpa，分離釜溫度10°C，分離時間0.5小時，同一流程中分離釜壓力始終小于萃取釜壓力，二氧化碳流量IOL/h的條件下，減壓分離，得到環磷酸腺苷含量為10mg/100g的提取物。
[0069]實施例3
[0070]一種高含量棗環磷酸腺苷提取物，其具體制備步驟如下:
[0071](I)放置物料:選取含水量在30%的金絲小棗(河北滄州)為原料，粉碎原料，使粒徑為 850 μ m (24 目);
[0072](2)抽真空:在反應系統溫度-10°C條件下，在高壓差連續式低溫提取器內形成真空，真空度保持在_20pa，加入5% (v/v)乙醇水溶液，保持5min，其中，所述原料與5% (v/v)乙醇水溶液的重量比為1:20 ;
[0073](3)減真空:通入凈化壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力升至OMpa，保持Imin ；
[0074](4)加壓:繼續通入壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力達到8Mpa，保持 20min ；
[0075](5)減壓:停止加壓，抽真空，使高壓差連續式低溫提取器中的壓力降至OMpa ；
[0076](6)循環提取:將步驟(2)- (5)進行循環，循環10次；
[0077](7)分離:經過濾、離心，將固液分離，離心液經400目的濾膜過濾至澄清，收集提取液；
[0078](8)干燥:將步驟(7)所得提取液濃縮，真空干燥，粉碎過20目篩，得粗提物粉末；
[0079](9)超臨界萃取:以5% (v/v)乙醇作夾帶劑與粗提物粉末均勻混合，夾帶比為15%(此處，夾帶比指夾帶劑與粗提物粉末的體積質量比，ml/g)，平衡IOmin后，進行動態萃取，在萃取釜壓力15Mpa，萃取溫度60°C，萃取時間5小時，分離釜壓力5Mpa，分離釜溫度50°C，分離時間5小時，同一流程中分離釜壓力始終小于萃取釜壓力，二氧化碳流量100L/h的條件下，減壓分離，得到環磷酸腺苷含量為9.5mg/100g的提取物。
[0080]實施例4
[0081]一種高含量棗環磷酸腺苷提取物，其具體制備步驟如下:
[0082](I)放置物料:選取含水量在15%的金絲小棗為原料，粉碎原料，過65目篩；
[0083](2)抽真空:在反應系統溫度_5°C條件下，在高壓差連續式低溫提取器內形成真空，真空度保持在_50pa，加入70%(v/v)乙醇水溶液，保持20min，其中，所述原料與70%(v/V)乙醇水溶液的重量比為1:8 ；
[0084](3)減真空:通入凈化壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力升至OMpa，保持5min ；
[0085](4)加壓:繼續通入壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力達到lOMpa，保持IOmin ；
[0086](5)減壓:停止加壓，抽真空，使高壓差連續式低溫提取器中的壓力降至OMpa ；
[0087](6)循環提取:將步驟(2)- (5)進行循環，循環10次；
[0088](7)分離:經過濾、離心，將固液分離，離心液經400目的濾膜過濾至澄清，收集提取液；
[0089](8)干燥:將步驟(7)所得提取液濃縮，真空干燥，粉碎過40目篩，得粗提物粉末；
[0090](9)超臨界萃取:以70% (v/v)乙醇作夾帶劑與粗提物粉末均勻混合，夾帶比為12% (此處，夾帶比指夾帶劑與粗提物粉末的體積質量比，ml/g)，平衡25min后，進行動態萃取，在萃取釜壓力40Mpa，萃取溫度45°C，萃取時間4小時，分離釜壓力25Mpa，分離釜溫度40°C，分離時間4小時，同一流程中分離釜壓力始終小于萃取釜壓力，二氧化碳流量90L/h的條件下，減壓分離，得到環磷酸腺苷含量為13mg/100g的提取物。
[0091]實施例5
[0092]一種高含量棗環磷酸腺苷提取物，其具體制備步驟如下:
[0093]( I)放置物料:選取含水量在20%的金絲小棗為原料，粉碎原料，過40目篩；
[0094](2)抽真空:在反應系統溫度_8°C條件下，在高壓差連續式低溫提取器內形成真空，真空度保持在_60pa，加入70%(v/v)乙醇水溶液，保持15min，其中，所述原料與70%(v/V)乙醇水溶液的重量比為1:15 ;
[0095](3)減真空:通入凈化壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力升至OMpa，保持5min ；
[0096](4)加壓:繼續通入壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力達到12Mpa，保持5min ；
[0097](5)減壓:停止加壓，抽真空，使高壓差連續式低溫提取器中的壓力降至OMpa ；
[0098](6)循環提取:將步驟(2)- (5)進行循環，循環10次；
[0099](7)分離:經過濾、離心，將固液分離，離心液經400目的濾膜過濾至澄清，收集提取液；
[0100](8)干燥:將步驟(7)所得提取液濃縮，真空干燥，粉碎過65目篩，得粗提物粉末；
[0101](9)超臨界萃取:以90%(v/v)乙醇作夾帶劑與粗提物粉末均勻混合，夾帶比為13%(此處，夾帶比指夾帶劑與粗提物粉末的體積質量比，ml/g)，平衡20min后，進行動態萃取，在萃取釜壓力50Mpa，萃取溫度40°C，萃取時間2.5小時，分離釜壓力15Mpa，分離釜溫度20°C，分離時間2.5小時，同一流程中分離釜壓力始終小于萃取釜壓力，二氧化碳流量30L/h的條件下，減壓分離，得到環磷酸腺苷含量為11.5mg/100g的提取物。
[0102]上述實施例中所得高含量棗環磷酸腺苷提取物可用于制備液體飲料，例如，取2g實施例1中所得高含量棗環磷酸腺苷提取物，溶解在4L純水中，無菌灌封，每瓶10mL。
[0103]以實施例1所述高含量棗環磷酸腺苷提取物進行如下試驗:
[0104]通過對比試驗前后血氧飽和度、血紅蛋白含量、血乳酸含量、血尿素氮含量的變化，對本發明所述高含量棗環磷酸腺苷提取物的抗缺氧、抗疲勞功效進行評價。
[0105]采用隨機雙盲對照試驗設計，將120例符合納入標準/排除標準的志愿受試者按照1:1:1的比例進行分配，將120人隨機分成高劑量組、低劑量組、空白對照組三組。
[0106]觀察周期為40天，時間窗為±7天，詳細過程參見表1臨床試驗流程表。
[0107]表1臨床試驗流程表
【權利要求】
1.一種高含量棗環磷酸腺苷提取物，其特征在于:所述提取物中環磷酸腺苷的濃度為每100g大于15mg，該提取物是由下述方法得到的:采用棗的固體或半固體原料，經高壓差連續式低溫提取器提取，提取液濃縮后，真空干燥，粉碎得棗的粗提物；采用超臨界萃取技術萃取粗提物，得到棗環磷酸腺苷提取物。
2.權利要求1所述的棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，其特征在于:采用棗的固體或半固體原料，經高壓差連續式低溫提取器提取，提取液濃縮后，真空干燥，粉碎得棗的粗提物；采用超臨界萃取技術萃取粗提物，得到棗環磷酸腺苷提取物。
3.根據權利要求2所述的棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，其特征在于:具體步驟如下:(1)放置物料:選取含水量在5-30%的棗為原料，粉碎原料，使粒徑為180-850μ m ；(2)抽真空:在反應系統溫度-10-0°C條件下，使高壓差連續式低溫提取器內形成真空，真空度保持在-100—20pa，加入水或5-70% (v/v)乙醇水溶液，保持5_30min，其中，所述原料與水或5-70% (v/v)乙醇水溶液的重量比為1:6-20 ；(3)減真空:通入凈化壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力升至OMpa，保持Ι-lOmin ；(4)加壓:繼續通入壓縮空氣，使高壓差連續式低溫提取器內的壓力達到8-12Mpa，保持 l-20min ；(5)減壓:停止加壓，抽真空，使高壓差連續式低溫提取器中的壓力降至OMpa；(6)循環提取:將步驟(2)- (5)進行循環，循環10次；(7)分離:通過過濾、離心，使固液分`離，收集提取液；(8)干燥:將步驟(7)所得提取液濃縮，真空干燥，粉碎過20-80目篩，得粗提物粉末；(9)超臨界萃取:以5-99%(v/v)乙醇作夾帶劑與粗提物粉末均勻混合，夾帶比為8-15%,平衡10_30min后,進行動態萃取,在萃取爸壓力15_60Mpa,萃取溫度35_60°C,萃取時間0.5-5小時，分離釜壓力5-30Mpa，分離釜溫度10_50°C，分離時間0.5-5小時，同一流程中分離釜壓力始終小于萃取釜壓力，二氧化碳流量10-100L/h的條件下，減壓分離，得到棗環磷酸腺苷提取物。
4.根據權利要求3所述的棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，其特征在于:所述步驟(1)中選取含水量在5-15%的棗為原料。
5.根據權利要求3或4所述的棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，其特征在于:所述步驟(1)中選取含水量在10%的棗為原料，粉碎原料，使粒徑為250 μ m。
6.根據權利要求3所述的棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，其特征在于:所述步驟(2)抽真空的真空度保持在_70pa，加入50% (v/v)乙醇水溶液，保持20min，其中，所述原料與50% (v/v)乙醇水溶液的重量比為10:1 ;所述步驟(2)中反應系統溫度-10-0°C，是通過高壓差連續式低溫提取器外周冷凝循環系統中的冷卻水實現的。
7.根據權利要求6所述的棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，其特征在于:所述冷卻水為95% (v/v)乙醇。
8.根據權利要求3所述的棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，其特征在于:所述步驟(4)加壓的壓力達到llMpa,保持15min。
9.根據權利要求3所述的棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，其特征在于:所述步驟(7)中提取液為固液分離后經400目的濾膜過濾至澄清的離心液。
10.根據權利要求3所述的棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，其特征在于:所述步驟(9)中以90% (v/v)乙醇作夾帶劑與粗提物粉末均勻混合，夾帶比為15%，平衡30min后，進行動態萃取，在萃取釜壓力40Mpa，萃取溫度37°C，萃取時間5小時，分離釜壓力6Mpa，分離釜溫度30°C，分離時間2.5小時，同一流程中分離釜壓力始終小于萃取釜壓力，二氧化碳流量20L/h的條件下，減壓 分離，得到棗環磷酸腺苷提取物。
【文檔編號】A61K31/7076GK103623080SQ201310443550
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年9月25日 優先權日:2013年9月25日
【發明者】吳樂斌, 周甄鴻, 胡晨旭, 劉紅彥, 姜佳 申請人:中恩（天津）醫藥科技有限公司