一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法
【專利摘要】本發明提供一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法，屬于中藥微生物發酵領域。該方法將中藥人參、黃芪粉碎，將人參和黃芪按照質量比（1～9）：（1～9）混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻浸泡，調節含水量50%～65%，裝入培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中滅菌；將生長并保存于PDA培養基中的靈芝菌種分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于24～30℃避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，烘干，即得到參芪芝藥性菌質。本發明的發酵方法得到的參芪芝藥性菌質，抗氧化活性高于原中藥材，可以用現有的中藥制備技術和工藝方法制成任何固體劑型，包括片劑、散劑等。
【專利說明】一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于中藥微生物發酵領域，具體涉及一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法。
【背景技術】
[0002]人參、黃芪均是臨床治療中常用的補氣藥。人參味甘微苦而性微溫，善補五臟之氣，補氣而兼能養陰，守而不走；黃苗味甘性溫，善走肌表，補氣兼能扶陽，走而不守。二藥配對，具有強大的補氣助陽作用，補元氣生精血，陰陽兼顧，一切氣虛不足之癥均可用之。靈芝自古又稱仙草，按本草綱目記載:“靈芝性平，味苦，無毒，主胸中結，益心氣，補中，增智慧，不忘，久服輕身不老，延年神仙。”現代藥理學證明，靈芝發酵菌絲體具有與靈芝子實體相同的藥理學功效。[0003]中國專利201210115166.9公開了一種靈芝發酵人參的方法及其藥性菌質在治療肺癌中的應用，證實了所得藥性菌質較原中藥在抑制肺癌方面具有更高的活性。但是，目前尚未有任何文獻公開以靈芝為發酵菌種，發酵人參、黃芪2種中藥組合的復配型發酵基質的雙向固體發酵工藝及其及其藥性菌質抗氧化方面的應用。

【發明內容】

[0004]本發明的目的是為了提供一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法，該方法得到的參芪芝藥性菌質具有較高的生物活性。
[0005]本發明提供一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法，該方法包括:將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，將人參和黃芪按照質量比(I~9): (I~9)混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻浸泡，調節含水量50%~65%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中115~121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的靈芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌土夾，分別接入培養瓶中，每瓶接種5 ±夾，封口，于24~30°C避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0006]優選的是，所述的人參和黃芪質量比(I~3): (I~5)。
[0007]優選的是，所述的靈芝菌種包括寒芝和赤芝。
[0008]本發明的有益效果
[0009]本發明提供一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法，該方法利用雙向固體發酵技術將靈芝接種在人參、黃芪兩種中藥組成的復合基質上，靈芝發酵產生菌絲體及代謝產物的同時，產生的酶可催化人參、黃芪的化學成分發生轉化，提高或降低中藥化學成分的含量，從而將三味具有增強免疫、調節機體代謝、延緩衰老的傳統藥材有機配伍，平衡藥理藥性，協調起效，提升原藥材的生物活性。
[0010]本發明的發酵方法得到的參芪芝藥性菌質，抗氧化活性高于原中藥材，可以用現有的中藥制備技術和工藝方法制成任何固體劑型，包括片劑、散劑等。【具體實施方式】
[0011]下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細的說明。
[0012]實施例1
[0013]將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，按質量比1:1混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達60%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中121°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于26°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0014]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于35mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于20mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.35mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于75mg。
[0015]實施例2
[0016]將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，按質量比1: 2混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達60%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中121°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于25°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0017]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于25mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.25mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于30mg。
[0018]實施例3
[0019]將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，按質量比1: 3混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達65%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中115°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于27°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0020]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于85mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于35mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.30mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于20mg。
[0021]實施例4
[0022]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質量比2:1混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達55%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中115°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于30°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0023]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于15mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于35mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.25mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于65mg。
[0024]實施例5
[0025]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質量比3:1混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達50%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于24°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0026]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于20mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.65mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于55mg。
[0027]實施例6[0028]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質量比5:1混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達50%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的赤芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于28°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0029]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于20mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.45mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于50mg。
[0030]實施例7
[0031]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質量比1:1混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達60%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的寒芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于28°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0032]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于20mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.20mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于40mg。
[0033]實施例8
[0034]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質量比1:2混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達60%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中115°C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的寒芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于26°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。[0035]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于20mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于35mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.20mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于45mg。
[0036]實施例9
[0037] 將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質量比1:3混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達65%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的寒芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于25°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0038]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于65mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于35mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.25mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于20mg。
[0039]實施例10
[0040]將人參、黃芪原藥材粉碎，過10目篩，按質量比1:5混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻充分浸泡，調節含水量達65%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的寒芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌塊，分別接入培養瓶中，每瓶接種5塊，封口，于30°C條件下避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
[0041]將發酵得到Ig參芪芝藥性菌質生物量，以甲殼素為標準品，按藥性菌質菌絲體干重計不低于70mg, Ig藥性菌質總阜苷含量以人參阜苷Re為標準品計不低于30mg, Ig藥性菌質總黃酮含量以蘆丁為標準品計不低于0.35mg, Ig藥性菌質總多糖含量以葡萄糖為標準品計不低于15mg。
[0042]以上實施例的說明只是用于幫助理解本發明的方法及其核心思想。應當指出，對于本【技術領域】的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以對本發明進行若干改進和修飾，這些改進和修飾也落入本發明權利要求的保護范圍內。
[0043]對所公開的實施例的上述說明，使本領域專業技術人員能夠實現或使用本發明。對這些實施例的多種修改對本領域的專業技術人員來說將是顯而易見的，本文中所定義的一般原理可以在不脫離本發明的精神或范圍的情況下，在其它實施例中實現。因此，本發明將不會被限制于本文所示的這些實施例，而是要符合與本文所公開的原理和新穎特點相一致的最寬的范圍。
【權利要求】
1.一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法，其特征在于，該方法包括:將中藥人參、黃芪粉碎，過10目篩，將人參和黃芪按照質量比(I~9): (I~9)混合，配制發酵基質，加蒸餾水混勻浸泡，調節含水量50%~65%，裝入250ml培養瓶中，放入高壓滅菌鍋中115~121 °C滅菌2小時；無菌條件下，將生長并保存于PDA培養基中的靈芝菌種按0.4cmX0.4cm的菌土夾，分別接入培養瓶中，每瓶接種5 ±夾，封口，于24~30°C避光培養，待菌絲體長滿整瓶時，終止發酵，收集發酵產物，60°C烘干，即得到參芪芝藥性菌質。
2.根據權利要求1所述的一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法，其特征在于，所述的人參和黃芪質量比(1~3):(1~5)。
3.根據權利要求1所述的一種參芪芝藥性菌質雙向固體發酵方法，其特征在于，所述的靈芝菌 種包括寒芝和赤芝。
【文檔編號】A61K36/481GK103908489SQ201410086789
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年3月11日 優先權日:2014年3月11日
【發明者】宋鳳瑞, 蘇玲, 陳維佳, 劉舒, 鄭重, 劉志強 申請人:中國科學院長春應用化學研究所