一種中藥灌注液及其制備方法和應用的制作方法
【專利摘要】本發明公開了一種中藥灌注液，包含有按重量份計的以下組分：淫羊藿80份，陽起石60份，丹參60份、紅花60份，益母草60份，當歸60份，黃芪60份，菟絲子60份，桃仁60份；并提供了其制備方法和應用。本發明的有益效果為：（1）根據養牛業實際生產需要，組成新的配方，有效解決了養牛業實際生產中關鍵環節：適繁母牛卵巢疾病性不孕癥問題，提高適繁母牛情期受胎率，受胎率高達82.04%；（2）根據中獸醫穴位理論，通過不同給藥方式：子宮灌注或穴位注射，使藥物發揮最大藥效；（3）利用現代制藥工藝，通過水提醇沉法，精制成既可子宮灌注，也可穴位注射的新型制劑，提高現有生產工藝，能夠達到質量可控制的目的。
【專利說明】一種中藥灌注液及其制備方法和應用
[0001]
【技術領域】
[0002]本發明涉及畜用制劑，具體涉及一種中藥灌注液及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0003]隨著我國人民生活水平的提高，畜牧養殖業已經成為我國農業領域增長最快的產業之一，而牛養殖業又是畜牧業中增長最快的產業之一，在國民經濟中扮演著越來越重要角色。尤其是肉牛和奶牛的養殖規模越來越大，養殖水平逐步提高。據中國行業研究網行業研究資訊，截止2010年，我國肉牛存欄量就超過了 12353.2萬頭，牛肉總產量位居世界第四位；2008年，全國奶牛存欄達到1233.5萬頭，奶產量達到3870萬噸，奶類產量位居世界第三位，成為奶類生產大國。在牛養殖業中，增加牛只數量就顯得尤為重要，使得繁育母牛按時發情懷孕成為牛養殖業中重要環節。[0004]卵巢疾病性不孕癥是造成繁育母牛發情周期異常，繁殖性能低下，引起母牛不孕的主要原因之一。其中主要包括母牛卵巢靜止、持久黃體、卵巢囊腫、卵泡交替發育、排卵延遲等多種疾病。由于此類疾病發病率高，影響養牛業比較嚴重，所以國內外一直都很關注。N.Hollis對3172頭奶牛發病情況定期統計，發現在產后150天內僅卵巢囊腫牛就有210頭，發病率為6.26% ；Ahmadljaz等報道，奶牛卵巢囊腫發生率約為6_19%。東北農業大學對6158頭奶牛調查，患卵巢疾病牛325頭，發病率為5.29%，其中卵巢機能不全124頭，占卵巢疾病的38.15%，持久黃體45頭，占13.85%，卵巢囊腫123頭，占37.85%，卵泡交替發育25頭，占7.69%，排卵延遲8頭，占2.46%。中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所對黑龍江、天津、江蘇、湖南、甘肅、四川、陜西、河北等省、市的83個奶牛場的21596頭成年母牛進行了調查，因卵巢疾病引起的不孕牛1830頭，占8.45%，其中持久黃體555頭，占卵巢病的30.32%，卵巢靜止443頭，占24.20%,卵巢囊腫379頭，占21.69%，卵巢萎縮184頭，占10.05%,排卵延遲64頭，占3.50%,卵巢、輸卵管炎70頭，占3.82%，卵巢及輸卵管其它疾病(卵巢腫瘤、輸卵管硬結、粘連等)135頭，占7.38%。由此可見，卵巢疾病性不孕癥是牛常見病和多發病，按目前文獻記載，我國每年因本病造成的經濟損失多達數億元。
[0005]以下列舉出于本發明相關的現有技術，并進行評析:
1、與本發明相關的現有技術一:
現有技術一的技術方案:
目前臨床上治療牛卵巢性不孕證的主要是應用激素療法。如前列腺素F2a(PGF2a)及其類似物被公認為是治療持久黃體的首選藥物，具有良好的溶黃體作用。用20-30mg PGF2a或0.5-1.0mg氯前列烯醇肌注，絕大多數母牛于注射后3-5天內黃體退化。促性腺激素釋放激素(GnRH)及其類似物是治療卵巢囊腫和卵巢靜止，暗發情較為理想的藥物。無論那類囊腫，都可單獨應用GnRH或與其他激素配合應用。
[0006]促黃體素(LH)和人絨毛膜促性腺激素(hCG)是治療卵巢囊腫較為理想的藥物。促卵泡激素(FSH)和孕馬血清促性腺激素(PMSG)可以治療卵巢靜止。還有雌激素，肌注20-30mg己烯雌酚或5-10mg雌二醇對暗發情(再牛接近排卵時注射)一般有效。此外，還有催產素、孕酮(P4)、甲狀腺素、皮質醇等。
[0007]現有技術一的缺點:
目前臨床上應用激素類藥物治療卵巢疾病性不孕癥存在以下副作用:
(I)臨床上多數根據直腸檢查來判斷母牛卵巢活動情況，由于技術操作者的臨床經驗不同，易引起主觀誤判，選擇治療藥物激素不當。這樣極易引起機體生殖激素調節紊亂，使母牛不易受孕。
[0008](2)養牛場和養殖個體戶為了提高經濟效益，大量、多次應用激素治療，極易對母牛機體造成傷害。
[0009](3)大量、多次應用激素治療，易造成肉、牛奶中激素殘留，威脅人類健康。
[0010]2、與本發明相關的現有技術二: 現有技術二的技術方案:
目前臨床上除多數應用激素療法外，部分應用中藥制劑進行治療。
[0011]I)催情散、促孕灌注液:
催情散和促孕灌注液為《中國獸藥典》(2000年版)二部收載的品種。催情散為古籍之經典中藥復方，組方為淫羊藿6g、陽起石(酒淬)6g、當歸4g、香附5g、益母草6g、菟絲子5g共6味藥。粉碎，過篩，混勻，即得。療效確切。促孕灌注液組方為淫羊藿400g、益母草400g、紅花200g共3味藥。水提醇沉，加注射用葡萄糖粉50g，精濾，灌封，滅菌，即得。從20世紀90年代初，宋大魯等對促孕灌注液的作用機理進行了一系列的研究，并對質量控制進行了研究。張寶康等用聚酰胺薄膜層析法鑒別了制劑中的淫羊藿和紅花，用薄層層析法鑒別了制劑中的黃柏與益母草，用分光光度法測定了藥劑中總生物堿和總黃酮的含量。平星等對促孕灌注液中淫羊藿苷含量進行分析，建立了該制劑中淫羊藿苷的含量測定方法。
[0012]2)新型促孕灌注液:
孔祥峰等研究表明，新型促孕灌注液可增加子宮收縮波幅和頻率。周淑貞等通過測定淫羊藿苷、小檗堿、總生物堿和干浸膏的含量，比較了用水提法、半仿生法、水提醇沉和半仿生醇沉法對新型促孕灌注液提取效果的影響，結果半仿生提取法效果最好。
[0013]3)催情助孕液:
是由淫羊藿、紅花等中藥組成的一種中藥復方制劑，王東才應用該制劑治療奶牛持久黃體18例、卵巢囊腫12例和卵巢靜止4例，總有效率達100%，治愈率達94%。關玉強等對該制劑的質量控制進行研究，建立了制劑中淫羊藿苷的含量測定方法高效液相色譜法。李世宏等用其治療奶牛持久黃體、卵巢靜止和卵巢囊腫等卵巢性不孕癥61例，平均發情率為99.4%，受孕率為81.5%，其中治療持久黃體36例，平均發情率為98.2%，受孕率為79.8% ；治療卵巢靜止12例，平均發情率為100%，受孕率為85.4% ;卵巢囊腫13例，平均發情率為100%,受孕率為79.2%。
[0014]現有技術二的缺點:
(O目前治療牛卵巢疾病性不孕癥有效中藥成方單一。《中國獸藥典》(2000年版)二部收載的品種僅有2個，為催情散和促孕灌注液，是古籍之經典中藥復方。目前有學者進行了藥理學研究。雖然療效確切，但生產工藝比較粗放，質量標準需要繼續提高，以便進行規模化生產。
[0015](2)其它有關文獻資料中的新型促孕灌注液、催情助孕液有報道，目前有部分藥理學研究，治療效果尚可，但治療例數較少，療效需要進一步驗證，生產工藝及質量標準需要標準化，距離達到《中國獸藥典》收錄標準還很遠。
[0016](3)現有治療牛卵巢疾病性不孕癥中藥整體治療效果不佳，換句話說，就是牛卵巢疾病性不孕癥治愈率低，受胎率低。

【發明內容】

[0017]本發明的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，根據中獸醫學理論和辨證論治的原則，提供了一種能夠有效提高適繁母牛情期受胎率的中藥灌注液，是一種針對牛(肉牛、奶牛)卵巢疾病性不孕癥研制的純中藥制劑。
[0018]為了實現上述目的，本發明提供的技術方案為:一種中藥灌注液，所述中藥灌注液包含有按重量份計的以下組分:淫羊藿80份，陽起石60份，丹參60份、紅花60份，益母草60份，當歸60份，黃芪60份，菟絲子60份，桃仁60份。[0019]組方原則:根據臨床辨證分型，卵巢疾病性不孕癥大多屬于腎陽虛和沖任不調之氣血瘀滯證。因此選擇了具有壯陽補腎，興奮性機能的陽起石、淫羊藿、菟絲子，補血調經、活血祛瘀的當歸、益母草、桃仁、丹參、紅花；還選用了補氣、扶陽的黃芪以扶正固本，從而達到陰平陽秘，使患牛恢復正常的生殖功能。
[0020]本發明的第二個目的是提供了上述的中藥灌注液的制備方法，是將各組分中藥采用水提醇沉法制備中藥灌注液，水提2次，醇沉3次，制成每毫升含生藥I克的澄明灌注液。
[0021]進一步的，上述的中藥灌注液的制備方法，包括以下步驟:
O按照上述配比取各中藥組分，清洗后，加水淹過藥材后，浸潰12小時；
2)將步驟I)得到的浸潰后藥材進行煎熬，煎熬過程為武火燒開后以文火煎熬，每次I小時，煎煮2次，第1次煎煮加水量為藥材質量的7倍，第2次加水量為藥材質量的5倍，合并煎液，并濃縮得到水提藥液，濃縮比例為:中藥組分總重量為560g時濃縮得水提藥液560ml ；
3)將步驟2)得到的水提藥液，候溫后加3倍體積的95%酒精，攪勻后進行沉淀，沉淀時間為24小時，取上清液蒸餾后棄去沉渣，回收酒精并反復沉淀3次，得到醇沉藥液；
4)將步驟3)得到的醇沉藥液中加入蒸餾水使其每1ml含生藥lg，分裝并高壓滅菌得到澄明中藥灌注液。
[0022]本發明的第三個目的是提供了上述中藥灌注液在治療牛卵巢疾病性不孕癥中的應用。
[0023]進一步的，上述的應用，將上述的中藥灌注液進行子宮灌注，具體方法為:將器械和患牛外陰部常規消毒，以直腸把握法將輸精器送入子宮，每次注入中藥灌注液100ml，隔日I次，3次為I療程。
[0024]進一步的，上述的應用，將上述的中藥灌注液以穴位注射的方式進行給藥。
[0025]主要用于繁育母牛卵巢靜止、持久黃體、卵巢囊腫、卵泡交替發育、排卵延遲等卵巢疾病性不孕癥。
[0026]為驗證本發明提供的中藥灌注液的效果，分組選方，共治療卵巢機能障礙病例514例，其中本發明中藥灌注液組子宮灌注治療323例，發情294例，受胎265例，受胎率為82.04%。基本接近健康對照牛。
[0027]本發明的有益效果為:本發明提供了一種中藥灌注液，并提供了其制備方法和應用，具有以下優點:
(1)根據養牛業實際生產需要，組成新的配方，有效解決了養牛業實際生產中關鍵環節:適繁母牛卵巢疾病性不孕癥問題，提高適繁母牛情期受胎率，受胎率高達82.04% ；
(2)根據中獸醫穴位理論，通過不同給藥方式:子宮灌注或穴位注射，使藥物發揮最大藥效；
(3)利用現代制藥工藝，通過水提醇沉法，精制成既可子宮灌注，也可穴位注射的新型制劑，提高現有生產工藝，能夠達到質量可控制的目的。
[0028]根據對514例不孕牛的臨床實驗觀察和藥效試驗，初步認為，該制劑具有生產工藝簡單，療效好，見效快，使用方便，無副作用等優點。用本發明提供的中藥灌注液進行子宮灌注治療的323例，發情294例(91.02%)，受胎265例(82.04%)。此種療法與當前主要療法相比，其受胎率均高于其他療法。可在全國范圍內大面積推廣應用。[0029]該制劑推廣使用可使適繁母牛提早懷孕，減少母牛空懷時間，因而可以節約飼草、飼料，提高料肉比；節約人工成本，多產牛犢，奶牛多產牛奶。
[0030]每I頭奶牛減少I個情期，一般為21天，節約飼草、料為21天X 30元/天=630元；節約人工最少估計100元(每個飼養員飼喂20頭奶牛計)；多產牛奶為21天X20kg/天X4元/kg牛奶=1680元；多產犢牛每頭按1000元計。
[0031]若按2008年全國奶牛1233.5萬頭計算，假設適繁母牛為1/2，即616.75萬頭，卵巢疾病性不孕癥發病率為5% (低于我們調查發病率)，那么，就有30.8375萬頭為卵巢疾病性不孕癥。則計算如下:
節約飼草飼料約為=30.8375萬頭X 630元=19427.625萬元；
節約人工=30.8375萬頭X 100元=3083.75萬元；
多產牛犢=3.08375萬頭X 1000元=30837.5萬元；
奶牛合計=19427.625萬元+ 3083.75萬元+ 30837.5萬元 =53348.875 萬元。
[0032]僅養殖奶牛一項，每年可產生經濟效益5億多元，若再加上肉牛養殖每年存欄I億頭以上，經濟效益更加可觀。
[0033]此外，肉、牛乳中藥物無殘留，為綠色食品，對提高人民生活質量，對養牛業的發展，具有重要意義，可產生明顯的社會效益。
【具體實施方式】
[0034]實施例1:
1、試驗動物:
從蘭州城關奶牛場、臨澤奶牛場、七里河奶牛場、蘭州鐵路奶牛場、蘭煉奶牛場、蘭州民族奶牛場、西寧市奶牛場、天津市等奶牛場，選擇產后2月以上不發情的奶牛514例作為治療對象，經直腸檢查所確定的不孕類型為:持久黃體242例，卵巢靜止180例，卵巢囊腫74例，卵巢萎縮18例，分組用不同方法進行治療。[0035]2、臨床檢查:
在治療前直腸檢查子宮角的行狀、大小、質地、位置及收縮反應，卵巢的形狀、大小、質地和黃體等。
[0036]3、實驗室檢查:
患牛血漿孕酮水平的測定；血液流變學的檢測；血中微量元素含量的測定；中藥對雌性小白鼠性器官發育的影響實驗；藥液安全性實驗。
[0037]4、治療藥物及制法:
方I (對照方):淫羊藿100g、陽起石100g、丹參100g、紅花100g、益母草100g。
[0038]方2 (本發明):淫羊藿80g、陽起石60g、丹參60g、紅花60g、益母草60g、當歸60g、黃苗60g、英絲子60g、桃仁60g。
[0039]將方I或方2分別放入不銹鋼桶內，用水沖洗藥材中的塵土，加水淹過藥面，加水量為藥材質量的7倍，浸潰12小時，武火(大火)燒開，文火(小火)煎熬，每次I小時,煎煮2次，第2次煎煮前加水量為藥材質量的5倍，合并煎液，濃縮至500ml (方l)/560ml (方2)，候溫加3倍體積的95%酒精，攪勻、沉淀24小時，取上清液蒸餾回收酒精，反復沉淀3次，將所得藥液加入蒸餾水使其每1ml含生藥lg。分裝、高壓滅菌。[0040]5、治療方法:
方1、方2分別穴位注射或子宮灌注。
[0041]①穴位注射:取雁翅(仿馬雁翅)、后海穴。
[0042]雁翅穴:位于髖結節到背中線所作垂線的中、外1/3交界處，刺入臀中肌約6cm左右，每4次為I療程。
[0043]后海穴:位于肛門與尾根之間的凹陷中。向前上方刺入6cm左右，注入方I或方2藥液20ml，隔日I次，4次為I療程。
[0044]②子宮灌注:用0.1%新潔爾滅消毒輸精管及乳膠管(直徑約0.5cm的乳膠管0.5m接于輸精管末端)，外陰部洗凈消毒，術者一手以直腸把握法握住子宮頸，另一手持輸精管送入子宮內，助手用100mL注射器吸取方I或方2藥液100mL注入子宮內，隔日I次，3次為I療程。
[0045]6、療效判定標準:
①治愈:治療期間或治療后，持久黃體、卵巢囊腫消失，卵巢機能恢復正常，并發情輸精，在3個情期內受:孕者。
[0046]②好轉:在治療后，持久黃體、卵巢囊腫消失，卵巢機能基本恢復正常，雖發情輸精，但未受孕者。
[0047]③無效:在治療后，持久黃體、卵巢囊腫如故，卵巢機能未恢復正常，且未發情者。
[0048]7、臨床試驗結果:
篩選出的治療牛卵巢疾病新制劑，經安全性試驗，均為發現不良反應。分組選方治療卵巢機能障礙病例514例，方I穴位注射40例，發情32例，受胎13例，受胎率為32.50% ;方2穴位注射108例，發情74例，受胎55例，受胎率50.92% ;方I子宮灌注43例，發情35例，受胎22例，受胎率為51.16% ;方2子宮灌注323例，發情294例，發情率為91.02%,受胎265例，受胎率為82.04。試驗結果表明，方2子宮灌注的發情率、受胎率與其他三組相比，差異顯著(P < 0.05)與健康對照組比較，發情率與受胎率基本接近。催情助孕灌注劑治療結果如表1所示。
[0049]表1
【權利要求】
1.一種中藥灌注液，其特征在于，所述中藥灌注液包含有按重量份計的以下組分:淫羊藿80份，陽起石60份，丹參60份、紅花60份，益母草60份，當歸60份，黃芪60份，菟絲子60份，桃仁60份。
2.一種如權利要求1所述的中藥灌注液的制備方法，其特征在于，是將各組分中藥采用水提醇沉法制備中藥灌注液，水提2次，醇沉3次，制成每毫升含生藥I克的澄明灌注液。
3.根據權利要求2所述的中藥灌注液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: O按照權利要求1所述配比取各中藥組分，清洗后，加水淹過藥材后，浸潰12小時； 2)將步驟I)得到的浸潰后藥材進行煎熬，煎熬過程為武火燒開后以文火煎熬，每次I小時，煎煮2次，第1次煎煮加水量為藥材質量的7倍，第2次加水量為藥材質量的5倍，合并煎液，并濃縮得到水提藥液，濃縮比例為:中藥組分總重量為560g時濃縮得水提藥液560ml ； 3)將步驟2)得到的水提藥液，候溫后加3倍體積的95%酒精，攪勻后進行沉淀，沉淀時間為24小時，取上清液蒸餾后棄去沉渣，回收酒精并反復沉淀3次，得到醇沉藥液； 4)將步驟3)得到的醇沉藥液中加入蒸餾水使其每1ml含生藥lg，分裝并高壓滅菌得到澄明中藥灌注液。
4.一種如權利要求1所述的中藥灌注液在治療牛卵巢疾病性不孕癥中的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，將如權利要求1所述的中藥灌注液進行子宮灌注，具體方法為:將器械和患牛外陰部常規消毒，以直腸把握法將輸精器送入子宮，每次注入中藥灌注液100ml，隔日I次，3次為I療程。
6.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，將如權利要求1所述的中藥灌注液以穴位注射的方式進行給藥。
【文檔編號】A61K9/08GK103908507SQ201410149820
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年4月15日 優先權日:2014年4月15日
【發明者】牛建榮, 張繼瑜, 周緒正, 李冰, 魏小娟, 程富勝 申請人:中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所