油茶籽殼原花青素的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及植物產(chǎn)品提取加工【技術(shù)領(lǐng)域】，具體來說是一種油茶籽殼原花青素的制備方法，包括：粉碎、提取、過濾，濃縮、濃度調(diào)整、上樣、洗脫、濃縮干燥后得原花青素；本發(fā)明方法能從油茶籽殼中提取原花青素，所需時間短，提取物純度高，所用試劑均為乙醇，具有操作簡單、成本低的特點，可廣泛運用于油茶籽殼中原花青素的提取分離。
【專利說明】油茶籽殼原花青素的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物產(chǎn)品提取加工【技術(shù)領(lǐng)域】，具體來說是一種油茶籽殼原花青素的制 備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 原花青素有非常強的抗氧化和清除自由基的性能，具有保護心血管和預防高血 壓、抗炎、抗誘變、抗?jié)儭⒖鼓[瘤、抑制微生物活性、促進毛發(fā)生長、調(diào)節(jié)免疫活性等作用， 是一種高效、低毒的天然活性物質(zhì)，廣泛分布于自然界中。雖然原花青素的需求量日益增 大，但目前國際市場上流行的相關(guān)產(chǎn)品來源較單一，以葡萄籽、松樹皮為主。有一些文章報 道過對其它材料的研究，但可能由于含量太低或其他原因，大多數(shù)沒有利用性開發(fā)與生產(chǎn)。
[0003] 油茶廣泛分布在我國華中、華南、華東、西南等地，隨著我國農(nóng)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整和國家 退耕還林工程的實施，油茶以其經(jīng)濟、防護兼用林的突出產(chǎn)品優(yōu)勢、經(jīng)濟優(yōu)勢和比較優(yōu)勢， 成為我國發(fā)展最快和最具發(fā)展?jié)摿Φ哪颈居土现弧ｉL期以來油茶種子主要用于茶油的制 取，而油茶籽殼的利用率較低。本研究以油茶籽殼為原料，提取純化其中的原花青素，一方 面開辟新的原花青素來源，另一方面可充分利用油茶的資源提高油茶籽殼的利用價值，增 加附加值，具有重要現(xiàn)實意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是上述存在的問題，提供一種油茶籽殼原花青素的制備方法，該方 法可快速地從油茶籽殼提取原花青素。
[0005] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種油茶籽殼原花青素的制備方法， 步驟為：取油茶籽殼粉碎，加入油茶籽殼5?10倍重量的質(zhì)量濃度為50?60%的乙醇， 90°C條件下連續(xù)提取兩次，過濾，合并濾液，55°C真空條件下濃縮回收乙醇，得油茶籽殼原 花青素提取液，加入適量的水調(diào)整提取液濃度，使其中原花青素含量為1. 12?1. 68mg/ml， 以2?3BV/h的流速通過裝有AB-8大孔吸附樹脂的層析柱，上樣液體積3?7BV，上樣完畢 后關(guān)閉層析柱活塞，靜置〇. 5h，然后打開活塞，用6BV的蒸餾水通過層析柱至流出水為無色 后，再用質(zhì)量濃度為10?60%的乙醇洗脫，洗脫液在55°C真空條件下濃縮干燥后得原花青 素。
[0006] 進一步的，所述提取時間為60?90min。
[0007] 進一步的，所述洗脫時，乙醇溶液的流速為2?3BV/h。
[0008] 本發(fā)明中，利用乙醇洗脫時，分別用3BV的質(zhì)量濃度為10%，30%、40%的乙醇以 2?3BV/h依次洗脫層析柱，并分別收集，將質(zhì)量濃度為30%乙醇洗脫注液在55°C真空濃縮 后干燥，干粉中原花青素含量大于90% ;將質(zhì)量濃度為乙醇洗脫液合并在55°C 真空濃縮后干燥，干粉中原花青素含量大于50% ;
[0009] 或用3?5BV的質(zhì)量濃度為60 %乙醇以2?3BV/h的流速洗脫層析柱，洗脫液在 55°C真空濃縮后干燥，干粉中原花青素含量大于50%。
[0010] 本發(fā)明的有益技術(shù)效果是：本發(fā)明方法能從油茶籽殼中提取原花青素，所需時間 短，提取物純度高，所用試劑均為乙醇，具有操作簡單、成本低的特點，可廣泛運用于油茶籽 殼中原花青素的提取分離。

【具體實施方式】
[0011] 實施例1
[0012] 油茶籽殼原花青素的制備方法，取油茶籽殼粉碎，加入油茶籽殼5倍重量的質(zhì)量 濃度為50%的乙醇，90°C條件下連續(xù)提取兩次，過濾，提取時間為60min，合并提取的濾液， 用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）在55°C條件下真空濃縮回收乙醇，得油茶籽殼 原花青素提取液，加入適量水調(diào)整提取液濃度，使其中原花青素含量為1. 12mg/ml，以2BV/ h的流速通過裝有AB-8大孔吸附樹脂的層析柱，上樣液體積3BV，上樣完畢后關(guān)閉層析柱活 塞，靜置0. 5h，然后打開活塞，用6BV的蒸餾水通過層析柱至流出水為無色后，再依次用3BV 質(zhì)量濃度為1〇%、40%的乙醇分別洗脫，流速為2BV/h，將兩種濃度的洗脫液合并在55°C真 空條件下濃縮干燥，干粉中原花青素含量大于50%。
[0013] 實施例2
[0014] 油茶籽殼原花青素的制備方法，取油茶籽殼粉碎，加入油茶籽殼7倍重量的質(zhì)量 濃度為55%的乙醇，在90°C條件下連續(xù)提取兩次，過濾，提取時間為75min，合并提取的濾 液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）在55°C條件下真空濃縮回收乙醇，得油茶 籽殼原花青素提取液，加入適量水調(diào)整提取液濃度，使其中原花青素含量為1. 44mg/ml，以 3BV/h的流速通過裝有AB-8大孔吸附樹脂的層析柱，上樣液體積5BV，上樣完畢后關(guān)閉層析 柱活塞，靜置〇. 5h，然后打開活塞，用6BV的蒸餾水通過層析柱至流出水為無色后，再用5BV 質(zhì)量濃度為60%的乙醇洗脫，速度為3BV/h，洗脫液在55°C真空條件下濃縮干燥，干粉中原 花青素含量大于50%。
[0015] 實施例3
[0016] 油茶籽殼原花青素的制備方法，取油茶籽殼粉碎，加入油茶籽殼10倍重量的質(zhì)量 濃度為60%的乙醇，在90°C條件下連續(xù)提取兩次，過濾，提取時間為90min，合并提取的濾 液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）在55°C條件下真空濃縮回收乙醇，得油茶 籽殼原花青素提取液，加入適量水調(diào)整提取液濃度，使其中原花青素含量為1. 68mg/ml，以 3BV/h的流速通過裝有AB-8大孔吸附樹脂的層析柱，上樣液體積5BV，上樣完畢后關(guān)閉層析 柱活塞，靜置〇. 5h，然后打開活塞，用6BV的蒸餾水通過層析柱至流出水為無色后，再依次 用3BV質(zhì)量濃度為30 %的乙醇洗脫，洗脫速度為3BV/h，將質(zhì)量濃度為30 %乙醇洗脫液在 55°C真空條件下濃縮干燥，干粉中原花青素含量大于90%。
[0017] 實施例4
[0018] 1、油茶籽殼原花青素的檢測方法
[0019] 采用香草醛一鹽酸法：配制濃度為1. 〇mg/ml原花青素標準品溶液，分別取0、 0· 1、0· 2、0· 3、0· 4、0· 5、0· 6、0· 7、0· 8、0· 9ml，加 60 % 乙醇至 1. Oml，加入 6. 0ml4 % 香草 醛-甲醇溶液和3. Oml的濃鹽酸，搖勻，避光，在30°C恒溫水浴中保持30min，取出后在 510nm波長下測其吸光值，吸光值與原花青素含量進行線性回歸處理，線性回歸方程y = 1. 007x-0. 0138, R2 = 0. 9999
[0020] 取樣品溶液1. 0ml與標樣同法顯色，根據(jù)標準曲線計算樣品中原花青素含量。
[0021] 2、正交試驗確定油茶籽殼原花青素提取工藝
[0022] 根據(jù)原花青素在醇水中溶解度較大的特性，選擇四個有關(guān)因素進行提取實驗，提 取次數(shù)為兩次。因素為：溫度（A)，時間（B)，料液比（C)，醇濃度（D)，設計因素見表1，結(jié) 果見表2,方差分析見表3,表明A 3B3C2D2，即溫度為90°C，時間為90min，料液比為1:10， 醇度為60%時提取效果最佳。方差結(jié)果分析表明，在實驗設計水平中四因素只有溫度具 有顯著性差異，其他因素無顯著性差異，因此，工業(yè)上為減少操作時間及后續(xù)濃縮消耗，提 取工藝實際操作條件可以為：溫度為901：，時間為60-901^11，料液比為1 :5-1:10，醇濃度 50% -60%，提取 2 次。
[0023] 表1因素表
[0024]

【權(quán)利要求】
1. 油茶籽殼原花青素的制備方法，其特征在于，步驟為：取油茶籽殼粉碎，加入油茶籽 殼5?10倍重量的質(zhì)量濃度為50?60%的乙醇，90°C條件下連續(xù)提取兩次，過濾，合并濾 液，55°C真空條件下濃縮回收乙醇，得油茶籽殼原花青素提取液，加入適量的水調(diào)整提取液 濃度，使其中原花青素含量為1. 12?1. 68mg/ml，以2?3BV/h的流速通過裝有AB-8大孔 吸附樹脂的層析柱，上樣液體積3?7BV，上樣完畢后關(guān)閉層析柱活塞，靜置0. 5h，然后打開 活塞，用6BV的蒸餾水通過層析柱至流出水為無色后，再用質(zhì)量濃度為10?60%的乙醇洗 脫，洗脫液在55 °C真空條件下濃縮干燥后得原花青素。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述提取時間為60?90min。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脫時，乙醇溶液的流速為2?3BV/ h〇
【文檔編號】A61K36/82GK104083534SQ201410347223
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年7月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月21日
【發(fā)明者】陸英, 劉仲華, 譚斌, 林海燕, 莊凌 申請人:湖南農(nóng)業(yè)大學