天然植物提取物及防治蜜蜂微孢子蟲病的用途
【專利摘要】本發明提供一種天然植物提取物，以葡萄皮作為原料，用乙醇溶劑浸提，經過超聲波破碎、旋轉蒸發等工藝提取出來的膏狀物質，再制成一定濃度的葡萄皮提取物糖漿混合物，制備成防治蜜蜂微孢子蟲病的藥物。使用時裝于飼喂器中，讓感染微孢子蟲的蜜蜂自由取食，作用于蜜蜂和微孢子蟲，從而達到有效防治蜜蜂微孢子蟲病的效果。本發明對蜜蜂無毒無副作用，該物質富含花青素等黃酮類化合物以及單寧、纖維素等物質。對蜜蜂微孢子蟲病的防治效果好；藥物的原料來源廣泛、易得，制取簡單，成本低；對蜂產品及環境無污染，是一種健康、環保、生態、高效的防治蜜蜂微孢子蟲病的新途徑。
【專利說明】天然植物提取物及防治蜜蜂微孢子蟲病的用途

【技術領域】
[0001]本發明屬于蜜蜂飼養管理領域，涉及一種蜜蜂病害的防治藥物，尤其涉及一種防治蜜蜂微孢子蟲病的天然植物提取物及其藥物用途。

【背景技術】
[0002]蜜蜂微孢子蟲病，又稱“蜜蜂微粒子病”，是由蜜蜂微孢子蟲引起的一種成年蜂常見的消化道傳染病。微孢子蟲是一種專營細胞內寄生的原始真核寄生蟲，蜜蜂微孢子蟲主要是通過侵染成年蜜蜂腸道上皮細胞，破壞蜜蜂腸道的正常消化功能。蜂群患病輕微時，癥狀不明顯，常常被忽視，而一旦嚴重，則使得蜜蜂的消化能力下降，免疫力、采集力下降，蜜蜂壽命縮短，蜂群群勢減弱，甚至可能會引起整個蜂群的崩潰。感染蜜蜂的微孢子蟲主要有西方蜜蜂微孢子蟲apis)和東方蜜蜂微孢子蟲OVo1Seffia ceranae、。近年來大量研究發現東方蜜蜂微孢子蟲已經在世界養蜂范圍內很多地區逐漸取代西方蜜蜂微孢子蟲，成為危害全球養蜂業的重要病害之一。我們對浙江省定地意蜂場的調查也表明，由東方蜜蜂微孢子蟲引起的蜜蜂微孢子蟲病廣泛流行，部分地區病情嚴重。
[0003]煙曲霉素是目前國際上被認可、能夠有效防治蜜蜂微孢子蟲病的主要藥物。但是作為一種抗生素，煙曲霉素在蜂群中的長期使用會導致蜂產品的藥物殘留問題。已有大量研究表明煙曲霉素在治療人類腦炎微孢子蟲病以及癌癥等方面中會產生副作用。因此煙曲霉素僅主要在北美國家的蜂群中使用，而在很多其他國家，蜜蜂微孢子蟲病幾乎無藥可用。隨著人們健康、環保意識的增強，對健康、安全蜂產品的追求使得開發對人畜及環境相對安全、不致殘留的天然植物提取物來防治蜜蜂微孢子蟲病的意義顯著。


【發明內容】

[0004]本發明的目的是提供一種防治蜜蜂微孢子蟲病的天然植物提取物，通過以下步驟實現:稱取一定量于37°C烘干的葡萄皮，加入體積質量比為25倍的50%-75%乙醇溶液，室溫下密封放置浸提4 h，于45°C下超聲提取60 min;過濾取濾液，再往過濾后的殘渣中加入體積質量比為10倍的50%-75%乙醇溶液，重復以上超聲步驟,取濾液,合并兩次濾液,于55°C旋轉蒸發，揮干乙醇，獲得葡萄皮浸膏提取物。
[0005]本發明所述的天然植物提取物為葡萄皮浸膏提取物。
[0006]本發明的另一個目的是提供所述葡萄皮浸膏提取物在制備防治蜜蜂微孢子蟲病的藥物中的應用。所述藥物通過以下步驟制備:將葡萄皮浸膏提取物與濃度為40%-70%蔗糖糖漿按質量體積比為0.25%-3%配制成不同濃度的葡萄皮提取物糖漿混合物。當需要時，將混合物裝于飼喂器中，讓感染微孢子蟲的蜜蜂自由取食，作用于蜜蜂和微孢子蟲，從而達到防治蜜蜂微孢子蟲病的效果。
[0007]本發明以葡萄皮作為原料，用乙醇溶劑浸提，經過超聲波破碎、旋轉蒸發等工藝提取出來的膏狀物質，該物質富含花青素等黃酮類化合物以及單寧、纖維素等物質。本發明方法與現有的藥物防治方法相比，具有以下特點:(1)防治蜜蜂微孢子蟲病效果好，對蜜蜂無毒無副作用，甚至能夠延長蜜蜂的壽命；(2)藥物的原料來源廣泛、易得，制取簡單，成本低；(3)不存在對蜂產品以及環境的藥物殘留問題，對人畜以及環境“零污染”，為社會提供一種健康、環保、生態、高效的防治蜜蜂微孢子蟲病的新途徑。

【具體實施方式】
[0008]本發明結合實施例作進一步的說明。
[0009]實施例1
稱取10 g于37°C烘箱干燥過的葡萄皮，加入250 ml的75%的乙醇溶液，室溫下密封放置4 h,于45°C超聲提取60 min,過濾取濾液。再往過濾后的殘洛中加入100 ml的75%的乙醇溶液，重復以上超聲步驟，取濾液，合并兩次濾液。于55°C旋轉蒸發儀揮干乙醇至呈膏狀液體。取一定量的葡萄皮浸膏提取物與70%的蔗糖糖漿配制成質量體積比為3%的葡萄皮提取物糖漿混合物，讓感染微孢子蟲的蜜蜂自由取食。
[0010]結果:在感染后第7 d和第13 d，實驗組蜜蜂的微孢子蟲孢子數分別為未經藥物處理組的29.9%和32.9%，第13 d時，實驗組蜜蜂存活率為87%，而未經藥物處理組蜜蜂存活率僅為50%。
[0011]實施例2
稱取10 g于37°C烘箱干燥過的葡萄皮，加入250 ml的75%的乙醇溶液，室溫下密封放置4 h,于45°C超聲提取60 min,過濾取濾液。再往過濾后的殘洛中加入100 ml的75%乙醇溶液，重復以上超聲步驟，取濾液，合并兩次濾液。于55°C旋轉蒸發儀揮干乙醇至呈膏狀液體。取一定量的葡萄皮浸膏提取物與70%的蔗糖糖漿配制成質量體積比為1%的葡萄皮提取物糖漿混合物，讓感染微孢子蟲的蜜蜂自由取食。
[0012]結果:在感染后第7 d和第13 d，實驗組蜜蜂的微孢子蟲孢子數分別為未經藥物處理組的23.5%和48.2%。第13 d時，實驗組蜜蜂存活率為90%，而未經藥物處理組蜜蜂存活率僅為50%。
[0013]實施例3
稱取10 g于37°C烘箱干燥過的葡萄皮，加入250 ml的75%的乙醇溶液，室溫下密封放置4 h,于45°C超聲提取60 min,過濾取濾液。再往過濾后的殘洛中加入100 ml的75%乙醇溶液，重復以上超聲步驟，取濾液，合并兩次濾液。于55°C旋轉蒸發儀揮干乙醇至呈膏狀液體。取一定量的葡萄皮浸膏提取物與70%的蔗糖糖漿配制成質量體積比為0.5%的葡萄皮提取物糖漿混合物，讓感染微孢子蟲的蜜蜂自由取食。
[0014]結果:在感染后第7 d和第13 d，實驗組蜜蜂的微孢子蟲孢子數分別為未經藥物處理組的34.2%和65.9%。第13 d時，實驗組蜜蜂存活率為93%，而未經藥物處理組蜜蜂存活率僅為50%。
[0015]實施例4
稱取10 g于37°C烘箱干燥過的葡萄皮，加入250 ml的75%的乙醇溶液，室溫下密封放置4 h,于45°C超聲提取60 min,過濾取濾液。再往過濾后的殘洛中加入100 ml的75%乙醇溶液，重復以上超聲步驟，取濾液，合并兩次濾液。于55°C旋轉蒸發儀揮干乙醇至呈膏狀液體。取一定量的葡萄皮浸膏提取物與70%的蔗糖糖漿配制成質量體積比為0.25%的葡萄皮提取物糖漿混合物，讓感染微孢子蟲的蜜蜂自由取食。
[0016]結果:在感染后第7 d和第13 d，實驗組蜜蜂的微孢子蟲孢子數分別為未經藥物處理的蜜蜂微孢子的66.7%和89.1%。第13 d時，實驗組蜜蜂存活率為90%，而未經藥物處理組蜜蜂存活率僅為50%。
[0017]實施例5
稱取10 g于37°C烘箱干燥過的葡萄皮，加入250 ml的50%的乙醇溶液，室溫下密封放置4 h,于45°C超聲提取60 min,過濾取濾液,再往過濾后的殘洛中加入100 ml的50%的乙醇溶液，重復以上超聲步驟，取濾液，合并兩次濾液。于55°C旋轉蒸發儀揮干乙醇至呈膏狀液體。取一定量的葡萄皮浸膏提取物與70%的蔗糖糖漿配制成質量體積比為3%的葡萄皮提取物糖漿混合物，讓感染微孢子蟲的蜜蜂自由取食。
[0018]結果:在感染后第7 d和第13 d，實驗組的蜜蜂微孢子數量分別為未經藥物處理組的28.1%和31.5%，第13 d時，實驗組蜜蜂存活率為85%，而未經藥物處理組蜜蜂存活率僅為50%。
[0019]實施例6
稱取10 g于37°C烘箱干燥過的葡萄皮，加入250 ml的50%的乙醇溶液，室溫下密封放置4 h,于45°C超聲提取60 min,過濾取濾液。再往過濾后的殘洛中加入100 ml的50%的乙醇溶液，重復以上超聲步驟，取濾液，合并兩次濾液。于55°C旋轉蒸發儀揮干乙醇至呈膏狀液體。取一定量的葡萄皮浸膏提取物與40%的蔗糖糖漿配制成質量體積比為3%的葡萄皮提取物糖漿混合物，讓感染微孢子蟲的蜜蜂自由取食。
[0020]結果:在感染后第7 d和第13 d，實驗組的蜜蜂微孢子數量分別為未經藥物處理組的30%和31%，第13 d時，實驗組蜜蜂存活率為84.5%，而未經藥物處理組蜜蜂存活率僅為 50%ο
[0021]實施例7
稱取10 g于37°C烘箱干燥過的葡萄皮，加入250 ml的50%的乙醇溶液，室溫下密封放置4 h,于45°C超聲提取60 min,過濾取濾液,再往過濾后的殘洛中加入100 ml的50%的乙醇溶液，重復以上超聲步驟，取濾液，合并兩次濾液。于55°C旋轉蒸發儀揮干乙醇至呈膏狀液體。取一定量的葡萄皮浸膏提取物與70%的蔗糖糖漿配制成質量體積比為0.25%的葡萄皮提取物糖漿混合物，讓感染微孢子蟲的蜜蜂自由取食。
[0022]結果:在感染后第7 d和第13 d，實驗組的蜜蜂微孢子數分別為未經藥物處理的蜜蜂微孢子的67%和85%。第13 d時，實驗組蜜蜂存活率為88%，而未經藥物處理組蜜蜂存活率僅為50%。
【權利要求】
1.一種天然植物提取物，其特征在于，通過以下步驟實現:稱取已經37°c烘干的葡萄皮，加入體積質量比為25倍的50%-75%乙醇溶液，室溫下密封放置浸提4 h，于45°C下超聲提取60 min ;過濾取濾液，再往過濾后的殘渣中加入體積質量比為10倍的50%_75%乙醇溶液，重復以上超聲步驟，取濾液，合并兩次濾液，于55°C旋轉蒸發，揮干乙醇，獲得天然植物提取物即葡萄皮浸膏提取物。
2.權利要求1所述方法獲得的葡萄皮浸膏提取物在制備防治蜜蜂微孢子蟲病的藥物中的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述藥物通過以下步驟實現:將葡萄皮浸膏提取物與濃度為40%-70%蔗糖糖漿按質量體積比為0.25%-3%配制成葡萄皮提取物糖漿混合物，裝于飼喂器中，即得。
【文檔編號】A61K36/87GK104435405SQ201410672287
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月22日 優先權日:2014年11月22日
【發明者】鄭火青, 陳秀賢, 胡福良, 貢紅日 申請人:浙江大學