本發(fā)明為涉及一種護肝配方，尤指一種保護肝臟免于損傷及纖維化的蝦紅素蜆精護肝配方。

背景技術(shù)：

肝臟為人體機能最復(fù)雜的重要代謝器官，其參與糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素、激素、膽汁等物質(zhì)代謝過程，此外，肝臟也是機體重要解毒器官，其解毒功能對生物體有重要保護作用，當(dāng)肝功能損傷時將引起代謝障礙、毒性物質(zhì)累積、凝血功能失效、營養(yǎng)代謝失調(diào)，嚴重則危及生命。

而引發(fā)肝臟發(fā)炎的因子包含病毒感染、藥物、酒精、代謝異常、膽道阻塞及自體免疫相關(guān)疾病等，當(dāng)肝臟發(fā)炎時，除影響正常肝細胞代謝機能外，當(dāng)各式毒物經(jīng)交換至肝臟后，由肝微粒酵素代謝引發(fā)大量自由基生成，自由基將使蛋白質(zhì)合成受阻、脂質(zhì)分解代謝失調(diào)、三酸甘油酯蓄積、脂質(zhì)過氧化等作用，進而造成肝細胞病變而壞死(necrosis)，最終導(dǎo)致胞中物質(zhì)滲出。

雖然，肝臟具有強大再生和代償能力，可修復(fù)輕度或局限性肝實質(zhì)損傷避免造成肝功能障礙，當(dāng)肝炎誘發(fā)因子刺激停止時，已形成的纖維化基質(zhì)，可透過基質(zhì)金屬蛋白脢(matrixmetalloproteinases，簡稱mmps)等蛋白酵素活性水解細胞外纖維化基質(zhì)，回復(fù)正常肝臟機能，若是肝臟持續(xù)受到不同肝炎誘發(fā)因子的刺激，將進一步造成大量肝臟損傷，形成不可逆的肝臟嚴重損傷，即肝硬化，病程最終將出現(xiàn)肝功能障礙、肝功能衰竭、肝昏迷等癥狀。

由于痛覺神經(jīng)僅分布于肝臟表面，故肝臟病變初期，病人通常沒有特別明顯的癥狀，而一旦肝病患者發(fā)病感覺疼痛時，病情皆已相當(dāng)嚴重。因此，若能夠于疾病未發(fā)或初期預(yù)防肝臟發(fā)炎、肝臟損傷，甚至于避免肝臟纖維化的發(fā)生或發(fā)展，預(yù)期可大幅改善病患的生活質(zhì)量及降低后續(xù)醫(yī)療支出。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的主要目的，在于提供一種具預(yù)防或治療肝臟發(fā)炎、損傷、纖維化及肝臟硬化的配方。

為達上述目的，本發(fā)明提供一種保護肝臟免于損傷及纖維化的蝦紅素蜆精護肝配方，其包含有一蝦紅素以及一包含有一肝糖的蜆精，其中，該蝦紅素與該蜆精為活性成分，該蝦紅素的重量百分比介于0.01％至10％之間，該蜆精的重量百分比介于90％至99.99％之間。

其中，蝦紅素屬于類胡蘿卜素家族中葉黃素類家族的一員，其化學(xué)學(xué)名為3,3’-dihydroxy-β,β’-carotene-4,4’-dione(分子式c40h52o4，分子量為596.86da)，屬于一種具橙紅色色素的物質(zhì)，因其化學(xué)結(jié)構(gòu)含有雙鍵的長鏈結(jié)構(gòu)，所以具有極為強大的抗氧化力，約為其他類胡蘿卜素的十倍，更是水溶性維他命e(α-tocopherol)的一百倍。

優(yōu)選的是，該蝦紅素選自于由3s,3’s游離態(tài)蝦紅素、3r,3’s游離態(tài)蝦紅素和3r,3’r游離態(tài)蝦紅素所組成的群組中的至少一種。

優(yōu)選的是，該蝦紅素選自于由3s,3’s單酯化態(tài)蝦紅素-cm:n、3r,3’s單酯化態(tài)蝦紅素-cm:n和3r,3’r單酯化態(tài)蝦紅素-cm:n所組成的群組中的至少一種，其中，m表脂肪酸鏈的碳原子數(shù)，m＝12、14、15、16、17、18、20、22、24，n表脂肪酸鏈的雙鍵數(shù)，n＝0至6。

優(yōu)選的是，該蝦紅素選自于由3s,3’s雙酯化態(tài)蝦紅素-cm:n/cx:y、3r,3’s雙酯化態(tài)蝦紅素-cm:n/cx:y和3r,3’r雙酯化態(tài)蝦紅素-cm:n/cx:y所組成的群組中的至少一種，其中，m及x表脂肪酸鏈的碳原子數(shù)，m＝12、14、15、16、17、18、20、22、24，x＝12、14、15、16、17、18、20、22、24，n及y表脂肪酸鏈的雙鍵數(shù)，n＝0至6，y＝0至6。

優(yōu)選的是，該配方進一步包含有一添加物，該添加物選自于由膠原蛋白、玻尿酸、維生素c、維生素e、輔酶q10、西紅柿紅素、胡蘿卜素、玉米黃質(zhì)/素、姜黃素、葉黃素、麩胺酸發(fā)酵物、谷胱甘肽、五味子萃取物、枸杞萃取物、紅棗萃取物、山藥萃取物、薏仁萃取物、百合萃取物、穿心蓮萃取物、蓮子萃取物、蓮子心萃取物、銀耳萃取物、黑木耳萃取物、人參萃取物、西洋蔘萃取物、丹蔘萃取物、桂圓萃取物、葡萄籽萃取物、刺五加萃取物、朝鮮薊萃取物、水飛薊萃取物、銀杏葉萃取物、銀杏果萃取物、紅景天萃取物、淫羊藿萃取物、黃連萃取物、大豆萃取物、黑豆萃取物、蜂膠萃取物、桐核麥萃取物、 靈芝萃取物、牛樟芝萃取物、褐藻萃取物、綠藻萃取物、冬蟲夏草萃取物、葡萄籽萃取物、金盞花萃取物、穿心蓮萃取物、山桑子萃取物、黃耆萃取物、姜黃萃取物、當(dāng)歸萃取物、熟地黃萃取物、白芍萃取物、川芎萃取物、奶薊萃取物、真珠草萃取物、豬苓萃取物、茯苓萃取物、防己萃取物、三七萃取物、七葉膽萃取物、麥門冬萃取物、巴西卡姆果萃取物、綠茶萃取物、芝麻萃取物和韭菜子萃取物所組成的群組中的至少一種。

優(yōu)選的是，該蝦紅素選自于由螺類的萃取物、微生物的萃取物、水生動物的萃取物、水生藻類植物的萃取物和人造合成蝦紅素所組成的群組中的至少一種。

優(yōu)選的是，該螺類為選自于由福壽螺屬和瓶螺屬所組成的群組中的至少一種，其中，福壽螺屬包含有福壽螺、黃金福壽螺、囊袋福壽螺、沼地福壽螺、梯狀福壽螺、孤島福壽螺、瓶狀福壽螺、大福壽螺、斑點福壽螺、島嶼福壽螺、明線福壽螺、邁阿密福壽螺及黑嘴福壽螺，瓶螺屬包含有光瓶螺、帶瓶螺、元寶螺及象牙螺；該微生物為選自于由大腸桿菌屬、副球菌屬、酵母菌屬和紅酵母菌屬所組成的群組中的至少一種，其中，大腸桿菌屬包含有大腸桿菌，副球菌屬包含有副球菌，酵母菌屬包含有釀酒酵母，紅酵母菌屬包含有紅發(fā)夫酵母；該水生動物選自于由對蝦屬、磷蝦屬、假磷蝦屬、手磷蝦屬、北方磷蝦屬、螯龍蝦屬、龍蝦屬、脊龍蝦屬、鮭/鱒屬、太平洋鮭屬和紅點鮭屬所組成的群組中的至少一種，其中，對蝦屬包含有草蝦、玫瑰蝦、紅尾蝦、紅粉溝蝦、深溝對蝦、西方對蝦、紅斑對蝦，磷蝦屬包含有南極大磷蝦、太平洋磷蝦、美洲磷蝦、短小磷蝦、冰磷蝦、長額磷蝦、鳥喙磷蝦、假駝磷蝦、卷葉磷蝦、大眼磷蝦、柔弱磷蝦、南極磷蝦、長吻磷蝦、非凡磷蝦、隆背磷蝦、光明磷蝦、茄苳磷蝦、小型磷蝦、擬駝磷蝦、詩博加磷蝦、刺磷蝦、三棘磷蝦、科隆磷蝦、擬真磷蝦、冷磷蝦、特異磷蝦、漢森磷蝦、半駝磷蝦、薄板磷蝦及瓦倫蒂尼磷蝦，假磷蝦屬包含有中華假磷蝦，手磷蝦屬包含有隆柱螫磷蝦、近緣柱螫磷蝦、海島柱螫磷蝦、二晶柱螫磷蝦及三晶柱螫磷蝦，北方磷蝦屬包含有北方磷蝦、葉線足磷蝦、三刺燧磷蝦，螯龍蝦屬包含有歐洲螯龍蝦及波士頓龍蝦，龍蝦屬包含有中國龍蝦、波紋龍蝦、雜色龍蝦、日本龍蝦、雜色龍蝦、棘刺龍蝦及眼斑龍蝦，脊龍蝦屬包含有日本脊龍蝦，鮭/鱒屬包含有大西洋鮭魚，太平洋鮭屬包含有彩虹鮭、粉紅鮭、狗鮭、銀鮭及大鱗鉤吻鮭，紅點鮭屬包含有貝加爾湖 紅點鮭、北極紅點鮭、美洲紅點鮭；水生藻類植物選自于由紅球藻屬、綠球藻屬、新綠藻屬及節(jié)螺藻屬所組成的群組中的至少一種，其中，紅球藻屬包含有雨生紅球藻、奧斯陸紅球藻及湖棲紅球藻，綠球藻屬包含有胞綠球藻、多核綠球藻、擬容綠球藻、溫氏綠球藻，新綠藻屬包含有富油新綠藻及溫氏新綠藻，節(jié)螺藻屬包含有極大節(jié)螺藻及鈍頂節(jié)螺藻。

優(yōu)選的是，該蜆精是含有該肝糖的蜆的萃取物。

優(yōu)選的是，該蜆選自于由蜆屬和紅樹蜆屬所組成的群組中的至少一種，其中，蜆屬包含有臺灣蜆、河蜆、花蜆、大蜆、環(huán)紋蜆、島蜆、刻紋蜆、閃蜆、朝鮮蜆、大和蜆、非洲蜆、澳洲蜆、奎師那蜆、溪蜆、林都蜆、馬達加斯加蜆、馬丹尼斯蜆、婆娑蜆、仙臺蜆、阿拉塔蜆、阿薩姆蜆、馬魯巴蜆、錫爾赫特蜆、孟加拉蜆、緬甸蜆及印度蜆；紅樹蜆屬包含有紅樹蜆及歪紅樹蜆。

據(jù)此，將本發(fā)明使用于食品、健康食品或醫(yī)藥相關(guān)的應(yīng)用上，并定期服用，可以降低肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alanineaminotransferase，簡稱alt)與天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(aspartateaminotransferase，簡稱ast)，并可抑制肝臟纖維化，因此，可以達到預(yù)防或治療肝臟發(fā)炎、損傷、纖維化及肝臟硬化等效果。

附圖說明

圖1，為本發(fā)明的天然游離態(tài)蝦紅素結(jié)構(gòu)。

圖2，為本發(fā)明的酯化態(tài)蝦紅素結(jié)構(gòu)。

圖3，為本發(fā)明實驗數(shù)據(jù)的體重變化數(shù)據(jù)圖。

圖4，為本發(fā)明實驗數(shù)據(jù)的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶變化數(shù)據(jù)圖。

圖5，為本發(fā)明實驗數(shù)據(jù)的天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶變化數(shù)據(jù)圖。

圖6a～6d，為本發(fā)明實驗數(shù)據(jù)的肝臟切片圖。

具體實施方式

涉及本發(fā)明的詳細說明及技術(shù)內(nèi)容，現(xiàn)就配合附圖說明如下：

請參閱圖1及圖2所示，本發(fā)明為一種保護肝臟免于損傷及纖維化的蝦紅素蜆精護肝配方，其包含有兩種活性成分，分別為一蝦紅素與一蜆精，該蝦紅素的重量百分比介于0.01％至10％之間，該蜆精包含有一肝糖，且其重量百分比介于90％至99.99％之間。

如圖1所示，為天然游離態(tài)蝦紅素結(jié)構(gòu)(naturalfree-formastaxanthin)，或 如圖2所示為酯化態(tài)蝦紅素結(jié)構(gòu)(ester-formastaxanthin)，其中，x為飽和或不飽和脂肪酸長鏈，3或3’端氫氧基(-oh)可與不同類型脂肪酸長鏈透過酯化反應(yīng)相互鍵結(jié)。本實施例的該蝦紅素可以為3s,3’s游離態(tài)蝦紅素、3r,3’s游離態(tài)蝦紅素或3r,3’r游離態(tài)蝦紅素，亦可以為3s,3’s單酯化態(tài)蝦紅素-cm:n(monoesterastaxanthin-cm:n)、3r,3’s單酯化態(tài)蝦紅素-cm:n或3r,3’r單酯化態(tài)蝦紅素-cm:n，其中，m表脂肪酸鏈的碳原子數(shù)，m＝12、14、15、16、17、18、20、22、24，n表脂肪酸鏈的雙鍵數(shù)，n＝0至6；或者可以為3s,3’s雙酯化態(tài)蝦紅素-cm:n/cx:y(diesterastaxanthin-cm:n/cx:y)、3r,3’s雙酯化態(tài)蝦紅素-cm:n/cx:y或3r,3’r雙酯化態(tài)蝦紅素-cm:n/cx:y，其中，m及x表脂肪酸鏈的碳原子數(shù)，m＝12、14、15、16、17、18、20、22、24，x＝12、14、15、16、17、18、20、22、24，n及y表脂肪酸鏈的雙鍵數(shù)，n＝0至6，y＝0至6。

此外，該蝦紅素的來源可以為螺類的萃取物、微生物的萃取物、水生動物的萃取物或水生藻類植物的萃取物，即由螺類、微生物、水生動物或水生藻類植物萃取而來，或是以人造合成的方式來合成該蝦紅素。其中，螺類可以為福壽螺屬(pomaceagenus)或瓶螺屬(pilagenus)，福壽螺屬(pomaceagenus)包含有福壽螺(pomaceacanaliculata)、黃金福壽螺(pomaceabridgesii)、囊袋福壽螺(pomaceahaustrum)、沼地福壽螺(pomaceapaludosa)、梯狀福壽螺(pomaceascalaris)、孤島福壽螺(pomaceainsularum)、瓶狀福壽螺(pomaceadoliodes)、大福壽螺(pomaceagigas)、斑點福壽螺(pomaceamaculate)、島嶼福壽螺(pomaceainsularum)、明線福壽螺(pomacealineata)、邁阿密福壽螺(pomaceamiamiensis)、黑嘴福壽螺(pomaceaurceus)等等；瓶螺屬(pilagenus)包含有光瓶螺(pilapolita)、帶瓶螺(pilatischbeini)、元寶螺(pilaleopordovillensis)及象牙螺(pilagracilis)等等。微生物可以為大腸桿菌屬(escherichiagenus)、副球菌屬(paracoccusgenus)、酵母菌屬(saccharomycesgenus)及紅酵母菌屬(xanthophyllomycesgenus)，大腸桿菌屬(escherichiagenus)包含有大腸桿菌(escherichiacoli)等；副球菌屬(paracoccusgenus)包含有副球菌(paracoccuscarotinifaciens)等；酵母菌屬(saccharomycesgenus)包含有釀酒酵母(saccharomycescerevisiae)等；紅酵母菌屬(xanthophyllomycesgenus)包含有紅發(fā)夫酵母(xanthophyllomycesdendrorhous或phaffiarhodozyma)等。水生動物可以為對蝦屬(penaeusgenus)、磷蝦屬(euphausiagenus)、假磷蝦屬 (pseudeuphausiagenus)、手磷蝦屬(stylocheironspecies)、北方磷蝦屬(meganyctiphanesgenus)、螯龍蝦屬(homarusspecies)、龍蝦屬(panulirusgenus)、脊龍蝦屬(linuparusgenus)、鮭/鱒屬(salmospecies)、太平洋鮭屬(oncorhynchusgenus)、紅點鮭屬(salvelinusgenus)，對蝦屬(penaeusgenus)包含有草蝦(penaeusmonodon)、玫瑰蝦(penaeusbrasiliensis)、紅尾蝦(penaeuspaulensis)、紅粉溝蝦(penaeusduorarum)、深溝對蝦(penaeuscanaliculatus)、西方對蝦(penaeusoccidentalis)、紅斑對蝦(penaeuslongistylus)等；磷蝦屬(euphausiagenus)包含有南極大磷蝦(euphausiasuperba)、太平洋磷蝦(euphausiapacifica)、美洲磷蝦(euphausiaamericana)、短小磷蝦(euphausiabrevis)、冰磷蝦(euphausiacrystallorophias)、長額磷蝦(euphausiadiomedeae)、鳥喙磷蝦(euphausiamutica)、假駝磷蝦(euphausiapseudogibba)、卷葉磷蝦(euphausiarecurva)、大眼磷蝦(euphausiasanzoi)、柔弱磷蝦(euphausiatenera)、南極磷蝦(euphausiasimilis)、長吻磷蝦(euphausialongirostris)、非凡磷蝦(euphausiaeximia)、隆背磷蝦(euphausiagibba)、光明磷蝦(euphausialucens)、茄苳磷蝦(euphausiamucronata)、小型磷蝦(euphausianana)、擬駝磷蝦(euphausiaparagibba)、詩博加磷蝦(euphausiasibogae)、刺磷蝦(euphausiaspinifera)、三棘磷蝦(euphausiatriacantha)、科隆磷蝦(euphausiakrohnii)、擬真磷蝦(euphausiafallax)、冷磷蝦(euphausiafrigida)、特異磷蝦(euphausiadistinguenda)、漢森磷蝦(euphausiahanseni)、半駝磷蝦(euphausiahemigibba)、薄板磷蝦(euphausialamelligera)、瓦倫蒂尼磷蝦(euphausiavallentini)等；假磷蝦屬(pseudeuphausiagenus)包含有中華假磷蝦(pseudeuphausiasinica)等；手磷蝦屬(stylocheironspecies)包含有隆柱螫磷蝦(stylocheironcarinatum)、近緣柱螫磷蝦(stylocheironaffine)、海島柱螫磷蝦(stylocheironinsulare)、二晶柱螫磷蝦(stylocheironmicrophthalma)、三晶柱螫磷蝦(stylocheironsuhmii)等；北方磷蝦屬(meganyctiphanesgenus)包含有北方磷蝦(meganyctiphanesnorvegica)、葉線足磷蝦(nematoscelislobate)、三刺燧磷蝦(thysanopodatricuspidata)等；螯龍蝦屬(homarusspecies)包含有歐洲螯龍蝦(homarusgammarus)、波士頓龍蝦(homarusamericanus)等；龍蝦屬(panulirusgenus)包含有中國龍蝦(panulirusstimpsoni)、波紋龍蝦(panulirushomarus)、雜色龍蝦(panulirusversicolor)、日本龍蝦(panulirusjaponicas)、雜色龍蝦(panulirusversicolor)、棘刺龍蝦(palinuruselephas)、眼斑龍蝦(panulirus argus)等等；脊龍蝦屬(linuparusgenus)包含有日本脊龍蝦(linuparustrigonus)等等；鮭/鱒屬(salmospecies)包含有大西洋鮭魚(salmonsalar)等等；太平洋鮭屬(oncorhynchusgenus)包含有彩虹鮭(oncorhynchusmykiss)、粉紅鮭(oncorhynchusgorbuscha)、狗鮭(oncorhynchusketa)、銀鮭(oncorhynchuskisutch)及大鱗鉤吻鮭(oncorhynchustshawytscha)等等；紅點鮭屬(salvelinusgenus)包含有貝加爾湖紅點鮭(salvelinusalpinuserythrinus)、北極紅點鮭(salvelinusalpinusalpinus)、美洲紅點鮭(salvelinusfontinalis)等等。水生藻類植物可以為紅球藻屬(haematococcusgenus)、綠球藻屬(chlorococcumgenus)、新綠藻屬(neochlorisgenus)及節(jié)螺藻屬(arthrospiragenus)，紅球藻屬(haematococcusgenus)包含有雨生紅球藻(haematococcuspluvialis)、奧斯陸紅球藻(haematococcusdroebakensis)及湖棲紅球藻(haematococcuslacustris)等等；綠球藻屬(chlorococcumgenus)包含有胞綠球藻(chlorococcuminfusionium)、多核綠球藻(chlorococcummultinucleatum)、擬容綠球藻(chlorococcumolofaciens)、溫氏綠球藻(chlorococcumwimmeri)；新綠藻屬(neochlorisgenus)包含有富油新綠藻(neochlorisoleoabundans)、溫氏新綠藻(neochloriswimmeri)等等；節(jié)螺藻屬(arthrospiragenus)包含有極大節(jié)螺藻(arthrospiramaxima)、鈍頂節(jié)螺藻(arthrospiraplatensis)等等。

而該蜆精的來源則為含有該肝糖的蜆的萃取物，即自具有該肝糖的蜆中萃取出來，其中，蜆可以為蜆屬(corbiculaspecies)、紅樹蜆屬(geloinagenus)，蜆屬(corbiculaspecies)包含有臺灣蜆(corbiculaflumineaformosa或corbiculafluminalis)、河蜆(corbiculafluminea)、花蜆(corbiculaformosana)、大蜆(corbiculamaxima或corbiculasubsulcata)、環(huán)紋蜆(corbiculaleana)、島蜆(corbiculainsularis)、刻紋蜆(corbiculalargillierti)、閃蜆(corbiculanitens)、朝鮮蜆(corbiculaproducta)、大和蜆(corbiculajaponica)、非洲蜆(corbiculaafricana)、澳洲蜆(corbiculaaustralis)、奎師那蜆(corbiculakrishnaea)、溪蜆(corbiculafluviatilis)、林都蜆(corbiculalinduensis)、馬達加斯加蜆(corbiculamadagascariensis)、馬丹尼斯蜆(corbiculamatannensis)、婆娑蜆(corbiculapossoensis)、仙臺蜆(corbiculasandai)、阿拉塔蜆(corbiculaarata)、阿薩姆蜆(corbiculaassamensis)、馬魯巴蜆(corbiculamaroubra)、錫爾赫特蜆(corbiculasylhetica)、孟加拉蜆(corbiculabensoni)、緬甸蜆(corbiculanoetlingi)及印度蜆 (corbiculastriatella及corbiculaloehensis)等等；紅樹蜆屬(geloinagenus)包含有紅樹蜆(geloinacoaxans或geloinaerosa)及歪紅樹蜆(geloinaexpansa)等等。

而本實施例所使用的該蝦紅素是自福壽螺卵及其生殖腺體所萃取出的天然蝦紅素，并進一步利用乳化、微粉化及粉體分散等技術(shù)將天然蝦紅素粉末的粒徑予以納米化，以增加天然蝦紅素粉末的表面積，借此增加溶解度與生體可用率。

本發(fā)明的動物實驗是采用24只約6周齡的雄性spague-dawley(sd)品系大鼠，利用四氯化碳(ccl4)誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生慢性肝臟損傷及纖維化，并投予本發(fā)明進行治療，共分成a、b、c、d四組試驗組別，每組各包含有6只大鼠，試驗組別a為正常對照組；試驗組別b為負對照組；試驗組別c為一倍治療實驗組；試驗組別d為兩倍治療實驗組。

投予四氯化碳的部分：試驗組別a經(jīng)由胃管灌食橄欖油(每100克大鼠灌食0.2毫升橄欖油)；試驗組別b、c及d則經(jīng)由胃管灌食含20％(w/v)四氯化碳的橄欖油(每100克大鼠灌食0.2毫升橄欖油)誘導(dǎo)大鼠慢性肝臟損傷及纖維化，上述灌食頻率皆為每周兩次，并持續(xù)灌食至試驗周期結(jié)束。

投予本發(fā)明的部分：試驗組別a及b經(jīng)由胃管灌食逆滲透水(rowater)；試驗組別c經(jīng)由胃管灌食一倍蝦紅素蜆精護肝配方(喂食劑量為103.3毫克/每公斤大鼠重量)的逆滲透水溶液；試驗組別d經(jīng)由胃管灌食兩倍蝦紅素蜆精護肝配方(喂食劑量為206.7毫克/每公斤大鼠重量)的逆滲透水溶液。上述灌食頻率為每日一次。

其中，大鼠喂食本發(fā)明的劑量為根據(jù)人體建議攝取量進行計算，而本發(fā)明的人體每日建議攝取量為每日1000毫克的蝦紅素蜆精護肝配方，并依大鼠與人體代謝比率6.2進行換算，大鼠每公斤體重的每日攝取量＝(人體每日建議攝取量/60)×6.2，約為103.3毫克/每公斤大鼠重量，其中，60為成人體重(公斤)。

采樣分析時間點為于第1、3、6周，胃管灌食逆滲透水或含本發(fā)明的逆滲透水溶液后兩小時，試驗組別a、b、c及d的大鼠經(jīng)由尾部采血法采集待測血液樣品，而第8周實驗結(jié)束后，將試驗組別a、b、c及d的所有實驗動物犧牲，經(jīng)由頸動脈或腹大動脈采血法采集待測血液樣品，并剖腹采集肝臟、脾臟樣品。

血液樣品的檢驗方式為先于室溫下靜置一小時使其凝結(jié)，再以冷凍高速離 心機于4℃、12000轉(zhuǎn)/分鐘的離心條件下進行離心15分鐘以分離血清，并以自動化生化分析檢驗設(shè)備檢測血清中各項生化指數(shù)。

經(jīng)由剖腹采集的肝臟樣品，經(jīng)秤重后將最大右葉肝分別割取兩塊1公分見方組織塊，以10％(v/v)中性福爾馬林(formaline)固定，其后以石蠟包埋組織塊后，將其制作成5微米(μm)切片并進行膠原蛋白(collagen)的染色，再經(jīng)病理醫(yī)師進行組織病理學(xué)檢查，而經(jīng)由剖腹采集的胰臟樣品則進行秤重。

后續(xù)所有數(shù)據(jù)均以平均值±標準差(mean±s.d.)表示(n＝6)，以單因子變異數(shù)分析(one-wayanova)及鄧肯氏多變域測驗(duncan’smultiplerangetest)比較各組間的差異，以英文字母a、b及c表示統(tǒng)計的結(jié)果，相同字母表示組與組間差異度不具統(tǒng)計意義(p>0.05)。

各項實驗項目的結(jié)果分述如下：

一、體重監(jiān)測：

請搭配參閱圖3與表一所示，試驗期間8周內(nèi)，試驗組別b的體重皆顯著低于試驗組別a(p<0.05)，并于試驗結(jié)束后(第8周)，試驗組別b的體重亦顯著低于試驗組別c、d(p<0.05)。

表一

二、攝食量監(jiān)測：

請搭配參閱表二所示，在試驗期間，試驗組別b、c及d的攝食量皆顯著低于試驗組別a(p<0.05)，而試驗組別b與試驗c、d的攝食量皆無顯著差異(p>0.05)。

表二

三、肝臟、脾臟重量分析：

請搭配參閱表三所示，試驗組別b的肝臟與脾臟的相對重量顯著重于試驗組別a、c、d(p<0.05)。其中，相對重量的定義為肝臟或脾臟絕對重量與大鼠體重的比值，表示方法為：肝臟或脾臟的重量(克)/每100克重量的大鼠。

表三

四、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)監(jiān)測：

請搭配參閱圖4與表四所示，在第1、3、6及8周自試驗組別b采集的血液樣品的肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)，與同周數(shù)試驗組別a的肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)數(shù)值比較，分別增加為2.67倍、6.38倍、15.40倍及23.23倍，此現(xiàn)象在統(tǒng)計上均具有顯著差異(p<0.05)，證明本試驗利用四氯化碳可有效誘發(fā)實驗動物的肝臟損傷。此外，試驗組別b的丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)會隨實驗周數(shù)增加而增加，在第3、6及8周血液樣品中的肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)與試驗組別b第1周的肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)比較，分別增加為2.15倍、5.09倍、8.01倍，上述實驗證明以四氯化碳誘導(dǎo)慢性肝損傷動物模式是成功的。

在第1周時，試驗組別b、c、d的肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)分別為試驗組別a的2.67倍、2.04倍、1.91倍，此現(xiàn)象在統(tǒng)計上均具有顯著差異(p<0.05)，顯示四氯化碳于試驗組別b、c及d均能誘導(dǎo)顯著的肝臟損傷現(xiàn)象。然而，對比喂食一倍與兩倍蝦紅素蜆精護肝配方的試驗組別c及d，在第1周實驗觀察中尚無顯著抑制丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)上升的功效。

在第6周時，試驗組別c、d的肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)分別為試驗組別b的0.48倍及0.46倍，此現(xiàn)象在統(tǒng)計上均具有顯著差異(p<0.05)；而在第8周時，試驗組別c及d的肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)分別為試驗組別b的0.53倍及0.46倍，此現(xiàn)象在統(tǒng)計上仍具有顯著差異(p<0.05)，顯示持續(xù)喂食一倍或兩倍蝦紅素蜆精護肝配方，即具有顯著抑制四氯化碳誘導(dǎo)肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)上升的功效。

表四

五、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)監(jiān)測：

請搭配參閱圖5與表五所示，將第1、3、6及8周自試驗組別b的肝功能指數(shù)天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)，與同周數(shù)的試驗組別a相比較，分別增加為1.83倍、3.21倍、5.26及9.29倍，此現(xiàn)象在統(tǒng)計上均具有顯著差異(p<0.05)。此外，試驗組別b的肝功能指數(shù)天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)會隨實驗周數(shù)增加而增加，在第3、6及8周血液樣品中的肝功能指數(shù)天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)與試驗組別b第1周比較，分別增加為1.84倍、3.44倍、5.59倍，上述實驗證明以四氯化碳誘導(dǎo)慢性肝損傷動物模式是成功的。

在第3周，試驗組別b、c及d的肝功能指數(shù)天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)分別為試驗組別a的3.21倍、2.65倍、1.74倍，此現(xiàn)象在統(tǒng)計上均具有顯著差異(p<0.05)，顯示經(jīng)過連續(xù)3周以四氯化碳誘導(dǎo)肝臟慢性損傷，在試驗組別b、c及d均能造成肝功能指數(shù)天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)上升現(xiàn)象，然而，試驗組別c及d在第3周實驗觀察中，僅喂食兩倍蝦紅素蜆精護肝配方的試驗組別d具有抑制四氯化碳誘導(dǎo)肝功能指數(shù)天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)上升的功效。

在第6周，將試驗組別c及d的肝功能天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)分別為試驗組別b的0.53倍及0.49倍，此現(xiàn)象在統(tǒng)計上具有顯著差異(p<0.05)；而在第8周時，將試驗組別c及d的肝功能天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)分別為試驗組別b的0.51倍及0.45倍，此現(xiàn)象在統(tǒng)計上具有顯著差異(p<0.05)，顯示持續(xù) 喂食一倍或兩倍蝦紅素蜆精護肝配方，在第6周即具有顯著抑制四氯化碳誘導(dǎo)肝功能指數(shù)天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)上升的功效。

表五

六、其他血液生化學(xué)指數(shù)監(jiān)測：

請搭配參閱表六所示，在試驗結(jié)束后(第8周)，分別對總蛋白質(zhì)(totalprotein)、球蛋白(globulin)、三酸甘油酯(tg,triglycerides)、白蛋白與總膽固醇進行檢測，試驗組別b、c及d的總蛋白質(zhì)、球蛋白與三酸甘油酯的檢測質(zhì)皆低于試驗組別a的檢測值(p<0.05)，然而，試驗組別a、b、c及d的白蛋白與總膽固醇檢測值與各組互相比較，皆無顯著差異(p>0.05)。

表六

七、組織病理學(xué)檢查：

進行組織病理學(xué)檢查時，對慢性肝損傷誘發(fā)肝纖維化半定量法評估，評估分數(shù)由等級“1”到“4”，等級1：輕微，有膠原增生；等級2：輕度，中央靜脈和門脈區(qū)兩者間有不連續(xù)的中隔；等級3：中度，中央靜脈和門脈區(qū)兩者間有完整的中隔，中間彼此交會且中隔將肝實質(zhì)分割成許多結(jié)節(jié)，但此中隔尚薄；等級4；嚴重，中央靜脈和門脈區(qū)兩者間有完整的中隔，且此中隔變厚，形成完全肝硬化。

請搭配參閱圖6a至圖6d與表七所示，組織病理學(xué)檢查結(jié)果為利用軟件針對組織病理切片中纖維化區(qū)域進行積分評估并量化，圖6a為試驗組別a的肝臟切片、圖6b為試驗組別b的肝臟切片、圖6c為試驗組別c的肝臟切片、圖6d為試驗組別d的肝臟切片。

試驗組別a與試驗組別b的數(shù)值比較，在統(tǒng)計上具有顯著差異(p<0.05)，結(jié)果顯示以四氯化碳誘導(dǎo)肝臟損傷，能有效誘導(dǎo)大鼠肝臟產(chǎn)生中度至嚴重性肝纖維化。再將試驗組別b與試驗組別c、d的數(shù)值比較，在統(tǒng)計上具有顯著差異(p<0.05)，結(jié)果顯示無論是以胃管灌食一倍或兩倍蝦紅素蜆精護肝配方，均能有效抑制四氯化碳誘導(dǎo)的肝臟纖維化，其能有效將中度至嚴重肝臟纖維化抑制至輕微到輕度肝纖維化，抑制肝臟纖維化程度約60％至64％。

表七

上述動物實驗證明蝦紅素蜆精護肝配方可有效降低因化學(xué)性肝臟損傷所導(dǎo)致的肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)與天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)上升，并可顯著抑制肝臟纖維化，因此，本配方可預(yù)防或治療因病毒感染、藥物、酒精、代謝異常、膽道阻塞、自體免疫相關(guān)疾病或化學(xué)品等因素所引致的肝臟發(fā)炎、肝臟損傷、肝指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)與天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)異常、肝臟纖維化、肝臟硬化等肝臟病變。

除此之外，本發(fā)明進一步可以額外添加一添加物，該添加物可以為膠原蛋白、玻尿酸、維生素c、維生素e、輔酶q10、西紅柿紅素、胡蘿卜素、玉米黃質(zhì)/素、姜黃素、葉黃素、麩胺酸發(fā)酵物(gaba)、谷胱甘肽、五味子萃取物、枸杞萃取物、紅棗萃取物、山藥萃取物、薏仁萃取物、百合萃取物、穿心蓮萃取物、蓮子萃取物、蓮子心萃取物、銀耳萃取物、黑木耳萃取物、人參萃取物、西洋蔘萃取物、丹蔘萃取物、桂圓萃取物、葡萄籽萃取物、刺五加萃取物、朝鮮薊萃取物、水飛薊萃取物、銀杏葉萃取物、銀杏果萃取物、紅景天萃取物、 淫羊藿萃取物、黃連萃取物、大豆萃取物、黑豆萃取物、蜂膠萃取物、桐核麥萃取物、靈芝萃取物、牛樟芝萃取物、褐藻萃取物、綠藻萃取物、冬蟲夏草萃取物、葡萄籽萃取物、金盞花萃取物、穿心蓮萃取物、山桑子萃取物、黃耆萃取物、姜黃萃取物、當(dāng)歸萃取物、熟地黃萃取物、白芍萃取物、川芎萃取物、奶薊萃取物、真珠草萃取物、豬苓萃取物、茯苓萃取物、防己萃取物、三七萃取物、七葉膽萃取物、麥門冬萃取物、巴西卡姆果萃取物、綠茶萃取物、芝麻萃取物、韭菜子萃取物或它們的任意組合等等，可加強或額外增加本發(fā)明的功效，如添加膠原蛋白可以減少骨質(zhì)流失、防止皮膚老化，或添加黃耆添加物可以幫助修復(fù)肝臟等等。

綜上所述，持續(xù)服用蝦紅素蜆精配方6周，即可有效降低肝功能指數(shù)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(alt)與天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ast)，并可抑制肝臟纖維化，故可以預(yù)防或治療肝臟病變，此外，亦可以抑制肝臟、脾臟腫大，并借由額外添加的添加物，可以加強蝦紅素蜆精配方的功效或增加額外的功效。