本發明屬于植物中黃酮和多糖類活性成分的提取分離技術領域，具體涉及一種用于同步提取紅豆杉黃酮和多糖的萃取液及其提取方法。
背景技術：
紅豆杉又名紫杉、赤柏松等，因其資源稀少，被列為世界珍稀樹種加以保護，在我國為珍稀瀕危物種。國內外關于紅豆杉的研究主要集中在紫杉醇的開發利用方面，而關于紅豆杉多糖和黃酮類化合物的研究則較少。目前，已從紅豆杉中分離出400多種化合物，主要分為紫杉烷類和非紫杉烷類兩大類。紫杉烷類為包括紫杉醇在內的紫杉烷二萜化合物，非紫杉烷類化合物則主要為三萜，甾體，黃酮和酚類化合物。
離子液體雙水相體系一般是由親水性離子液體、無機鹽和水形成的雙水相體系。作為一種高效的新型綠色分離體系，它綜合了離子液體和雙水相體系的優點，與傳統聚合物水相體系相比，具有粘度低、不揮發、易回收以及高效、溫和、操作簡便等優點，屬于綠色萃取技術，具有廣泛的應用前景。
技術實現要素：
為了解決上述問題，本發明的目的在于提供一種同步提取紅豆杉黃酮和多糖的萃取液和提取的方法，實現紅豆杉資源的高效利用，本發明具有提取效率高，操作簡便，分離條件溫和，溶劑綠色環保易回收等優點。本發明是通過以下技術方案來實現的：
一種用于同步提取紅豆杉黃酮和多糖的萃取液，所述萃取液為離子液體、無機鹽與水的混合物，所述離子液體、無機鹽、水的重量比例為1:0.9～2:2～5.5。
較佳地，所述離子液體為[Cnmim]X,其中，X為Cl－、NO3－、CF3COO－，Cnmim為3-甲基咪唑型化合物，n為2、3或4。
較佳地，所述無機鹽為K2HPO4、NaH2PO4或K2CO3中的一種或幾種混合物。
使用所述萃取液提取紅豆杉黃酮和多糖的方法，所述方法包括以下步驟：
(1)、樣品前處理：
將干燥后的紅豆杉枝葉粉碎至60～80目過篩，加入石油醚，于索氏提取器中回流脫脂3～4h，收集紅豆杉樣品，烘干后備用；
(2)、離子液體-雙水相萃取：
將脫脂后的紅豆杉樣品與所述萃取液進行混合，在超聲-微波協同作用條件下，萃取紅豆杉黃酮和多糖；萃取完畢后，離心靜置，等待界面穩定后，分離上下相；
(3)、紅豆杉黃酮的制備：
雙水相上相中富含離子液體和黃酮，采用有機溶劑萃取，混合搖勻，靜置分層，分為有機溶劑相和離子液體相，減壓蒸發有機溶劑相得到紅豆杉黃酮，同時回收離子液體；
(4)、紅豆杉多糖的制備：
雙水相下相中富含鹽、水和多糖，將下相進行透析，透析完畢后加入乙醇進行沉淀，離心收集沉淀物，干燥后得到紅豆杉多糖。
較佳地，步驟(2)中紅豆杉樣品、離子液體、無機鹽、水的重量比例為1:7.5～10:9～15:20～40。
較佳地，步驟(2)中的微波功率為300～600W，微波頻率2450MHZ，超聲功率200～400W，超聲頻率為25KHZ，協同作用時間10～15min。
較佳地，步驟(4)中乙醇的濃度為85％～95％，乙醇的體積是透析液體積的4～6倍。
較佳地，步驟(3)中透析時間為9～12h，透析袋的規格為8000～14000Da。
較佳地，步驟(3)中的有機溶劑為正丁醇、丙酮或乙酸乙酯中的一種或幾種混合物。
本發明通過調節鹽的加入量，從而改變離子液體的親疏水性，達到選擇性萃取黃酮和多糖的目的。紅豆杉枝葉中的黃酮含有大量槲皮素、蘆丁等類化合物，存在較強疏水性，故主要分布在以離子液體為主的雙水相上相中；而多糖類化合物由于含有大量的極性基團，具有良好的親水性，所以主要分布在富含水鹽的雙水相下相中。
本發明的有益效果：
(1)、離子液體具有揮發性小、蒸汽壓低、溶解能力強、萃取能力好等獨特的物理化學性質。與傳統有機溶劑相比，具有綠色環保、熱穩定性好、不易燃燒、不爆炸、不揮發、便于重復利用等優點，在天然產物活性成分的提取方面具有廣泛的應用前景。
(2)、采用離子液體、無機鹽和水構成的新型萃取分離體系，最大限度的綜合了離子液體和雙水相萃取的優點。與傳統的雙水相體系相比，離子液體雙水相體系具有萃取效率高，分相時間短，粘度低，萃取過程中不易乳化且離子液體可回收利用等優勢。
(3)、萃取過程中，采用超聲-微波協同作用，充分發揮了兩者的優勢。不僅加快了細胞的破裂，而且使樣品介質內各點受到的作用一致，降低了活性成分與樣品的結合力，加速活性成分從固相進入溶劑的過程，具有省時、節能、提取效率高等優點。
附圖說明
圖1為提取紅豆杉黃酮和多糖的工藝路線圖。
具體的實施方式
下面結合具體實施方式對本發明作進一步的詳細說明，以助于本領域技術人員理解本發明。
實施例1：
一種用于同步提取紅豆杉黃酮和多糖的方法，所述方法包括以下步驟：
(1)、樣品前處理：將干燥后的南方紅豆杉枝葉粉碎至60目過篩，加入石油醚，于索氏提取器中回流脫脂3h，收集紅豆杉樣品，烘干后備用。
(2)、離子液體-雙水相萃?。簩⒚撝蟮募t豆杉樣品、離子液體[C2mim]Cl、K2HPO4、水按1:7.5:9:20的重量比例混合形成離子液體-雙水相體系，并在超聲-微波協同作用下萃取紅豆杉黃酮和多糖。其中微波功率為300W，微波頻率2450MHZ，超聲功率200W，超聲頻率為25KHZ條件下進行，協同作用時間為10min。萃取完畢后，離心后靜置，等待界面穩定后，分離上下相。測得上相中黃酮的提取率為86.7％，下相中多糖的提取率為81.2％。
(3)、紅豆杉黃酮的制備：上相中富含離子液體和黃酮，采用正丁醇萃取，混合搖勻，靜置分層，將正丁醇相減壓蒸發后得到紅豆杉黃酮，同時回收離子液體和正丁醇。
(4)、紅豆杉多糖的制備：雙水相下相中富含鹽、水和多糖，將下相在8000～14000Da透析袋中透析9h，透析完畢后加入4倍透析液體積的85％乙醇進行沉淀，離心收集沉淀物，干燥后得到紅豆杉多糖。
實施例2：
一種用于同步提取紅豆杉黃酮和多糖的方法，所述方法包括以下步驟：
(1)、樣品前處理：將干燥后的紅豆杉枝葉粉碎至80目過篩，加入石油醚，于索氏提取器中回流脫脂4h，收集紅豆杉樣品，烘干后備用。
(2)、離子液體-雙水相萃?。簩⒚撝蟮募t豆杉樣品、離子液體[C3mim]NO3、NaH2PO4、水按1:10:15:40的重量比例混合形成離子液體-雙水相體系，并在超聲-微波協同作用下萃取紅豆杉黃酮和多糖。其中微波功率為600W，微波頻率2450MHZ，超聲功率400W，超聲頻率為25KHZ條件下進行，協同作用時間為15min。萃取完畢后，離心后靜置，等待界面穩定后，分離上下相。測得上相中黃酮的提取率為90.6％，下相中多糖的提取率為85.8％。
(3)、紅豆杉黃酮的制備：上相中富含離子液體和黃酮，采用丙酮萃取，混合搖勻，靜置分層，將丙酮相減壓蒸發后得到紅豆杉黃酮，同時回收離子液體和丙酮。
(4)、紅豆杉多糖的制備：雙水相下相中富含鹽、水和多糖，將下相在8000～14000Da透析袋中透析12h，透析完畢后加入6倍透析液體積的95％乙醇進行沉淀，離心收集沉淀物，干燥后得到紅豆杉多糖。
實施例3：
一種用于同步提取紅豆杉黃酮和多糖的方法，所述方法包括以下步驟：
(1)、樣品前處理：將干燥后的紅豆杉枝葉粉碎至60目過篩，加入石油醚，于索氏提取器中回流脫脂3.5h，收集紅豆杉樣品，烘干后備用。
(2)、離子液體-雙水相萃?。簩⒚撝蟮募t豆杉樣品、離子液體[C4mim]CF3COO、K2CO3、水按1:8:12:30的重量比例混合形成離子液體-雙水相體系，并在超聲-微波協同作用下萃取紅豆杉黃酮和多糖。其中微波功率為450W，微波頻率2450MHZ，超聲功率300W，超聲頻率為25KHZ條件下進行，協同作用時間為12min。萃取完畢后，離心后靜置，等待界面穩定后，分離上下相。測得上相中黃酮的提取率為88.5％，下相中多糖的提取率為83.4％。
(3)、紅豆杉黃酮的制備：上相中富含離子液體和黃酮，采用乙酸乙酯萃取，混合搖勻，靜置分層，將乙酸乙酯相減壓蒸發后得到紅豆杉黃酮，同時回收離子液體和乙酸乙酯。
(4)、紅豆杉多糖的制備：雙水相下相中富含鹽、水和多糖，將下相在8000～14000Da透析袋中透析10h，透析完畢后加入5倍透析液體積的90％乙醇進行沉淀，離心收集沉淀物，干燥后得到紅豆杉多糖。
實施例4：
一種用于同步提取紅豆杉黃酮和多糖的方法，所述方法包括以下步驟：
(1)、樣品前處理：將干燥后的紅豆杉枝葉粉碎至80目過篩，加入石油醚，于索氏提取器中回流脫脂4h，收集紅豆杉樣品，烘干后備用。
(2)、離子液體-雙水相萃取：將脫脂后的紅豆杉樣品、離子液體[C4mim]NO3、NaH2PO4、水按1:9:15:35的重量比例混合形成離子液體-雙水相體系，并在超聲-微波協同作用下萃取紅豆杉黃酮和多糖。其中微波功率為500W，微波頻率2450MHZ，超聲功率350W，超聲頻率為25KHZ條件下進行，協同作用時間為15min。萃取完畢后，離心后靜置，等待界面穩定后，分離上下相。測得上相中黃酮的提取率為89.2％，下相中多糖的提取率為86.1％。
(3)、紅豆杉黃酮的制備：上相中富含離子液體和黃酮，采用丙酮萃取，混合搖勻，靜置分層，將丙酮相減壓蒸發后得到紅豆杉黃酮，同時回收離子液體和丙酮。
(4)、紅豆杉多糖的制備：雙水相下相中富含鹽、水和多糖，將下相在8000～14000Da透析袋中透析12h，透析完畢后加入5倍透析液體積的95％乙醇進行沉淀，離心收集沉淀物，干燥后得到紅豆杉多糖。
上述實施例，只是本發明的較佳實施例，并非用來限制本發明實施范圍，故凡以本發明權利要求所述的特征及原理所做的等效變化或修飾，均應包括在本發明權利要求范圍之內。