本發明涉及一種新型二丁氧苯基-甲磺酰胺類化合物及其藥學上可接受的鹽作為調節雌激素相關受體ERR-alpha（Estrogen-related receptor alpha，ERR-alpha或ERRα）調節劑及其藥物組合及其在制備預防和/或治療乳腺癌、前列腺癌、胃癌、結腸癌、卵巢癌、宮頸癌或子宮內膜癌等腫瘤的藥物中的用途。
背景技術：
ERRα于1988年由Giguere等克隆鑒定。作為孤兒核受體（Orphan nuclear receptor），ERRα內源性配體一直未被發現。ERRα在體內廣泛表達，從心肌、消化道、大腦、骨骼肌、棕色脂肪以及乳腺癌、卵巢癌等惡性腫瘤等均能檢出。ERRα與雌激素受體α（ERα）具有較高的同源性：DNA結合域（DNA binding domain, DBD）氨基酸相似性68%，配體結合域（Ligand binding domain, LBD）相似性33%。與雌激素受體ERα不同，ERRα不能與雌激素結合，但可與ERα競爭結合雌激素反應元件（Estrogen response elemnt, ERE）,識別序列為AGGTCAnnn TGACCT；而ERRα也能以單體或二聚體的形式結合一類I型類固醇生成因子反應元件TnAAGGTCA，也稱為雌激素相關受體反應元件（ERR response element, ERRE），表明ERRα與ERα在識別DNA時有交叉重疊。
最近的研究提示，除了參與ER信號通路，ERRα在細胞能量代謝、線粒體氧化和生物合成等有重要生理作用，其功能的發揮影響著組織器官的發育、細胞的衰老、腫瘤的發生和發展等。
腫瘤生物學基礎研究表明，孤兒核受體—雌激素相關受體α（ERRα）能促進激素依賴/非依賴的乳腺癌的生長、侵襲，促進血管平滑肌細胞增殖、內皮微管形成及腫瘤血管新生，意味著靶向ERRα的藥物兼具抗乳腺癌的效應，為乳腺癌分子靶向治療提供新策略。
近年來，研究揭示ERRα與雌激素相關的乳腺癌、子宮內膜癌和宮頸癌等雌激素依賴性腫瘤密切相關，更有研究表明眾多非雌激素依賴性腫瘤如前列腺癌、胃腺癌和結直腸癌等的發生發展和臨床預后也與ERRα的表達相關。臨床研究證實，ERRα在乳腺癌、結腸癌、卵巢癌及前列腺癌等腫瘤中表達顯著上調，是一個預后不良的獨立風險因子。通過上調/下調ERRα表達或使用ERRα抑制劑，可以有效抑制缺氧基因的轉錄活性，從而降低體內實體瘤的血管生成與增長。這些研究表明，ERRα可能是多種腫瘤潛在的治療靶點。ERRα反向激動劑XCT790抑制了多種腫瘤細胞的增殖及血管新生。ERRα反向激動劑SR16388有效抑制了裸鼠荷瘤模型中前列腺癌的增長。這些研究表明，靶向ERRα的調節劑有可能作為臨床上有效的抗腫瘤藥物。
綜上所述，雌激素相關受體ERRα可作為多種腫瘤的新型治療靶點，基于雌激素相關受體ERRα開發出來的小分子調節劑，極有可能成為治療相關疾病腫瘤的新藥物分子。
技術實現要素：
1、本發明的目的在于提供一類具有如下式I 結構的雌激素相關受體ERR-alpha調節劑或其藥學上可接受的鹽。
2、本發明的又一目的在于提供式I結構的化合物或其藥學上可接受的鹽。
3、本發明的再一目的在于提供式I所示化合物或其藥學上可接受的鹽在制備預防和/或治療腫瘤疾病的藥物中的應用。優選地，所述腫瘤疾病為乳腺癌、前列腺癌、胃癌、結腸癌、卵巢癌、宮頸癌或子宮內膜癌等腫瘤。
4、一種藥物組合物，包括治療有效量的權利要求1所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽。
5、根據權利要求4所述的要求組合物，其特征是，該藥物組合物進一步含有一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。
6、根據權利要求4所述的藥物組合物，其特征是，所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性成分占總重量比50%~99.5%。
具體實施方式
下面通過具體實施例對本發明進行詳細和具體的介紹，以更好的理解本發明，但下述實施例并不限制本發明范圍，以下將詳細說明本發明式I化合物的生物活性及藥理學評價。
實施例1使用報告基因測試式I化合物對ERR-alpha的轉錄調節活性
本實施例闡明了本發明涉及的式I化合物可以有效地抑制人胚腎細胞HEK-293中ERR-alpha所調控的報告基因的表達，說明本發明所涉及的式I化合物有效地調控了ERR-alpha的功能。報告基因測試技術是本領域工作人員熟悉的技術。
我們利用GAL4融合受體激活法測試式I化合物對ERRs轉錄調控活性。GAL4融合受體激活法是基于哺乳動物細胞單雜交原理，即把受體LBD與酵母轉錄因子DBD構建成融合蛋白表達質粒，使受體的LBD充當活化域( Activation domain ,AD )。當把GAL4融合受體質粒與GAL4DNA反應元件( UAS )驅動的報告基因質粒共同轉染細胞時，在受體激動劑的作用下，GAL4融合受體將結合到5×UAS上，驅動報告基因的表達。而在受體反向激動劑或拮抗劑的作用下，GAL4融合受體與5×UAS的結合減少，將抑制報告基因的表達。
在本發明的實驗中，我們將Gal4-ERR-alpha質粒與表達5×UAS并偶聯了螢火蟲熒光素酶報告基因的質粒(以β-gal表達質粒作為內參)瞬時共轉染進入哺乳動物HEK-293細胞中，加入不同濃度的式I化合物作用24h，檢測熒光素酶和β-gal的活性變化。
1、轉染：接種HEK-293細胞于6cm培養皿中，6 .0×104/皿，培養液為10％FBS DMEM，使其生長狀態良好。37℃5％CO2培養24小時之后，將每孔6×103的細胞接種于96孔Costar細胞培養板，培養過夜。當細胞密度達到70％時，取50mL的無血清培養液(DMEM)于1.5mL的離心管中，然后加2mL的轉染試劑3000Transfection Reagent，用手輕彈幾次，混合之后室溫放置5min。按重組質粒與3000Transfection Reagent以1:5的比例混勻，取20pmol重組質粒( pGal4-ERRs LBD、p5×UAS-Luc及pβ-gal )加到DMEM中，輕柔混合。將無血清DMEM稀釋好的重組質粒再與DMEM稀釋的3000Transfection Reagent的混合物輕彈混勻，室溫放置20min以便形成DNA/lipofectamine的復合物。將孵育好的DNA/lipofectamine的復合物逐滴加入到含有細胞和培養液的培養皿中去，來回輕柔地搖晃細胞培養皿使細胞轉染效率提高，將培養皿放入37℃，5％CO2培養箱中培養6小時，換新鮮培養液( 減少脂質體的細胞毒性)。再次消化細胞，以1×104/孔的細胞接種于96孔Costar細胞培養板中。
2、加入式I化合物及陽性藥XCT790：轉染8h后，加入式I化合物到96孔板中。將陽性對照XCT790和式I化合物稀釋至10×目標濃度加入96孔Costar細胞培養板，體積為10μl，繼續培養24小時每個濃度3復孔，培養24小時后，棄去培養板中培養液，加入細胞裂解液100μl，各取50μl分別用MD多功能酶標儀進行螢火蟲熒光素酶及β-半乳糖苷酶的活性測定，以相對熒光素酶活性(螢火蟲熒光素酶活性/β-半乳糖苷酶活性的比值)計算式I化合物對ERR-alpha的轉錄調節活性。
實驗結果表明，本發明涉及的式I化合物可以劑量依賴性地抑制ERRα的轉錄激活，(IC50＝1.60±0.02μM )，與陽性對照XCT790趨勢一致( IC50＝0 .32±0 .02μM )。
以上所述實施例，描述較為具體和詳細，但并不能因此而理解為對本發明專利范圍的限制。應當指出的是，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本發明構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本發明的保護范圍。因此，本發明專利的保護范圍應以所附權利為準。