本發明涉及博落回地上非果實部分的應用，具體涉及博落回屬植物包括博落回(Macleaya cordata(Willd)R.Br.)和小果博落回(Macleaya microcarpa(Maxim.)Fedde)的博落回地上非果實部分的干燥粉末或提取物在動物獸藥或藥物飼料添加劑中的應用；屬于獸藥領域。
背景技術：
養殖業飼用抗生素的濫用，影響了自然界均衡的微生物環境，造成病原的適應性變異，導致細菌耐藥性增加，也導致動物自身免疫下降、疾病頻發和采食量減少。因此，使用綠色安全的中獸藥替代抗生素類獸藥或藥物飼料添加劑，是現代畜牧業發展的必然趨勢。
博落回屬植物，包括博落回(Macleaya cordata(Willd.)R.Br.)與小果博落回(Macleaya microcarpa(Maxim.)Fedde)，我國大部分地區均有分布，是一種富含生物堿及三萜類、黃酮類等其他活性物質的民間傳統中藥。
在博落回的應用方面，農業部獸藥質量標準中收錄的博落回注射液是由博落回果經提取、分離制成的生物堿硫酸鹽的滅菌水溶液，其具有抗菌消炎的功能，主治仔豬的白痢、黃痢；中獸藥博落回提取物及其制劑是由博落回果莢和/或葉經提取、分離制成的苯并菲啶類生物堿，具有抗菌、消炎，促生長的作用(專利號ZL 200910043145.9)；
郁建生(2007)將博落回果莢和根中經提取的有效成分總生物堿與穿心蓮全草提取至穿心蓮內酯制成復方博落回注射液、口服液用以治療仔豬白痢、禽霍亂疾病取得較好效果；郁建生等將博落回與穿心蓮配合制成復方博落回注射液已申請專利(專利號ZL 200510020409.0)，其具有廣譜清熱解毒消腫、抗菌抗病毒消炎功效，主要用于治療畜禽患流行性感冒、腹瀉痢疾、仔豬白痢和黃痢等。
曾建國將博落回藥材用酸性溶液進行滲漉，滲漉液加堿調至偏堿性進行堿沉，沉淀用低碳醇溶解，并加入適量的活性炭進行回流提取，提取液回收部分溶劑后加酸成鹽析出桔紅色晶狀沉淀，沉淀濾過用醇洗去殘留的酸干燥后即得博落回提取物已申請專利(專利號ZL 200910043045.6)。
曾建國將博落回果莢和/或葉提取物用于制備對畜禽常見病原菌李氏桿菌、嗜血桿菌、巴氏桿菌或鏈球菌有較好的抑制作用和殺滅作用的獸藥；或將博落回提取物用于制備預防腹瀉的作用的獸藥已申請專利(專利號ZL 201010293039.9)。
曾建國從含芐基異喹啉類生物堿的植物——博落回、小果博落回、血水草、白屈菜植物中提取得到的普托品類總類生物堿，主要以原阿片堿和別隱品堿為代表已申請專利(專利號ZL 200910042840.3)，其在驅除經濟動物豬、雞線蟲病方面具有良好的應用。
綜合上述文獻可知，現有技術都是從博落回果或者葉經提取分離生物堿，且用于抗炎、抑菌和治療動物消化道疾病的獸藥或藥物飼料添加劑添加在飼料中，以達到發揮其抑菌、抗炎和促生長的作用。
技術實現要素：
從以上的現有技術可以了解到，目前技術人員的研究主要集中在博落回總生物堿的提取，和以生物堿類物質為活性成分在動物生產上的應用。而對博落回的不同收獲期的其他部分和生物堿之外活性成分的應用研究，鮮少報道。
發明人通過數十年對博落回的持續研究，驚喜的發現博落回地上非果實部分或其提取物，對動物具有良好的抗應激的功效，以及提高飼料轉化率或改善動物生產性能。本發明將其用于獸藥或動物藥物飼料添加劑所具有的良好的技術效果，是發明人意料之外的。
在現有技術基礎上，本發明的目的旨在綜合利用博落回資源，提供一種博落回地上非果實部分或其提取物用于制備獸藥或動物藥物飼料添加劑，具有抗應激的功效，可以作為獸藥使用，同時還具有提高飼料轉化率或改善動物生產性能的良好功效可以作為動物藥物飼料添加劑使用。
應激是指，機體受外界和內在環境中存在的生物、物理和化學等因子過度刺激后，隨即產生的一系列非特異性全身適應性反應。抗應激，是指緩解或防治由應激源引起的應激綜合癥。
飼料轉換率，也稱為飼料報酬，指消耗單位風干飼料重量與所得到的動物產品重量的比值。是畜牧業生產中表示飼料效率的指標，它表示每生產單位重量的產品所耗用飼料的數量。
動物生產性能，又叫生產力，是指動物最經濟有效地生產畜產品的能力，包括生長性能、產奶性能、產蛋性能，繁殖性能等。與促生長不同。
為了實現上述目的，本發明提供了博落回地上非果實部分的應用，將博落回地上非果實部分和/或博落回地上非果實部分提取物用于制備獸藥或藥物飼料添加劑。
優選的方案，將博落回地上非果實部分和/或博落回地上非果實部分提取物用于制備抗應激獸藥，或用于制備提高飼料轉化率或改善動物生產性能的藥物飼料添加劑。
較優選的方案，博落回地上非果實部分經過干燥后，直接粉碎，制成博落回地上非果實部分粉末。
較優選的方案，博落回地上非果實部分經過干燥后，溶劑提取，得到博落回地上非果實部分提取物。
本發明的技術方案中，提取過程中，采用的溶劑為醇類(如甲醇、乙醇等)或酸水溶液。本發明優選方案，提取溶劑采用乙醇溶液或硫酸水溶液，在進一步優選方案，采用70％(v/v)乙醇水溶液或0.5％(v/v)硫酸水溶液。
進一步優選的方案，博落回地上非果實部分為博落回花期前的地上部分或者博落回花期后的地上非果實部分。
進一步優選的方案，將博落回地上非果實部分和/或博落回地上非果實部分提取物中以液體制劑、散劑或預混劑的形式作為獸藥或藥物飼料添加劑使用。
進一步優選的方案，所述的獸藥或藥物飼料添加劑以口服或飼料拌喂的方式給藥。
較優選的方案，博落回地上非果實部分的干燥粉末和/或提取物作為治療用獸藥時的濃度，以N-p-香豆酰酪胺濃度為0.1～300ppb計量；優選為0.5～100ppb；進一步優選為1～70ppb。博落回地上非果實部分的干燥粉末和/或提取物作為藥物飼料添加劑時添加到動物飼料中的濃度，以N-p-香豆酰酪胺在動物飼料中的添加濃度為1.5～60ppb計量；優選為2.7～37.5ppb；進一步優選為4.1～18.8ppb。
本發明的技術方案將博落回地上非果實部分制成干燥粉末或提取物，充分利用其包含的天然有效活性成分，抗應激，改善動物生長性能或保護腸道健康等，可以替代現有的抗生素的使用。
本發明的博落回地上非果實部分提取物是用博落回地上非果實部分通過乙醇、甲醇等回流提取、濃縮、干燥，得到的提取物。
本發明的博落回地上非果實部分提取物是用博落回地上非果實部分或花期后地上非果實部分通過酸水提取、堿水沉淀后，所得沉淀再用醇溶液提取，濃縮，用濃酸沉鹽，得到的提取物。
本發明的博落回地上非果實部分干燥粉末或提取物可以單獨使用，或者與其它抗炎、抑菌等藥物配合使用。
本發明的博落回地上非果實部分干燥粉末可以直接以混飼的形式給藥。而博落回地上非果實部分提取物可以加輔料制成液體制劑、預混劑或散劑等劑型的獸藥口服給藥。
相對現有技術，本發明的技術方案帶來的有益技術效果：
本發明首次提出將博落回地上非果實部分的干燥粉末或提取物作為有效組分，用于制成抗應激的獸藥，或用于制備飼料轉化率或改善動物生產性能的藥物飼料添加劑，具有藥效好，副作用小，不產生耐藥性、無殘留的優勢，可以替代現有的與之功效類似的抗生素使用。
本發明采用的博落回地上非果實部分干燥粉末或提取物屬于天然植物成分，來源廣，容易獲取，且可以自然降解，對人畜毒性低，符合綠色生態畜牧業標準。
具體實施方式
以下實施例旨在進一步說明本發明內容，而不是限制本發明權利要求的保護范圍。
實施例1
本實驗考察博落回主產區同年度不同時期地上非果實部分有效成分含量和生物量占全株百分比：
開花期前地上部分有效成分含量以N-p-香豆酰酪胺計0.001～0.105％，開花期前地上部分重占博落回全株重量百分比80％以上。
開花期后地上非果實部分有效成分含量以N-p-香豆酰酪胺計0.001～0.065％，開花期后地上非果實部分重占博落回全株重量百分比60～80％。
實施例2
取博落回的干燥開花期前地上部分、花期后地上非果實部分各1000g，粉碎過二號篩(國家標準R40/3系列)，即得博落回粉，見下表1。
表1博落回花期前地上部分和花期后地上非果實部分打粉結果
實施例3
取博落回的開花期前地上部分、花期后地上非果實部分各1000g，打粉，加70％醇溶液回流提取3次，依次為10、8、8倍量，每次提取1～2.5小時，合并提取液，濃縮干燥即得博落回醇提物，見下表2。
表2博落回花期前地上部分和花期后地上非果實部分醇提結果
實施例4
取博落回的干燥開花期前地上部分、開花期后地上非果實部分各1000g，打粉，用10L 95℃0.5％的硫酸溶液浸泡1.5小時后開始滲漉，并逐步加入20L 95℃0.5％的硫酸溶液進行滲漉，合并滲漉液，加入氫氧化鈣調pH＝10.5堿沉，所得沉淀回流提取2次，第1次加95％的乙醇1.5L，回流2小時，第2次加95％乙醇1.2L，回流1小時，合并兩次醇提液，濃縮回收乙醇至濃縮液體積約為1L，濃縮干燥即得博落回酸提物，見下表3。
表3博落回花期前地上部分和花期后地上非果實部分酸水提取結果
實施例5
實施例4制得的開花期前地上非果實部分提取物稱取200g，使用藥物粉碎機粉碎，過120目篩，備用；再稱取藥用淀粉3800g。將博落回提取物與藥用淀粉使用小型混合機充分混合15分鐘，檢查變異系數<0.5％，得到博落回開花期前地上部分或花期后地上非果實部分提取物預混劑或散劑4000克。
實施例6
博落回地上非果實部分粉末和提取物抗應激試驗
試驗動物：昆明種小鼠，雌雄兼用，成年體重為18～26g，幼年體重為12～14g。
對小鼠游泳時間的影響：取雄性成年小鼠30只，隨機分為3組，每組10只，給藥組的灌胃給藥劑量見下表10，對照組給同體積生理鹽水，每天1次，連續7d，于游泳前禁食4h，供飲水。末次給藥后40min，每鼠尾部系以體重7.5％的負荷放入水深30cm、溫度28℃的浴槽中游泳，記錄每只小鼠自入水至溺死沉入水底不再起來的時間。
結果見下表4。
表4對小鼠游泳時間的影響
對小白鼠耐壓缺氧時間的影響：取健康小白鼠30只，試驗組、對照組各10只。給藥組的灌胃給藥劑量見下表5，對照組老鼠按用相同體積的生理鹽水灌胃。將250mL廣口瓶瓶口涂以凡士林，瓶中放入生石灰10g。用藥30分鐘后，將小鼠放入廣口瓶內，每瓶一只，加蓋密封。觀察并記錄小鼠呼吸停止即缺氧死亡時間。結果見下表5。
表5對小鼠耐常壓缺氧的影響
對小鼠耐低溫的影響：取成年雄性小鼠30只，隨機分為3組，每組10只，給藥組的灌胃給藥劑量見下表6，對照組給同體積生理鹽水，每天1次，連續3d，末次給藥后30min，將小鼠裝入鐵籠，放入低溫冰箱(-20℃)，記錄每鼠存活時間。結果見表6。
表6對小鼠耐低溫的影響
綜合試驗結果表明，博落回地上非果實部分的提取物對小鼠抗疲勞、耐缺氧、耐低溫有明顯的作用。說明博落回開花期前地上部分或花期后地上非果實部分的活性成分對各種有害刺激的非特異性抵抗能力，延緩生理機能紊亂的過程并力求使紊亂的機能恢復正常，因而對機體呈現出明顯的抗應激效應和適應原樣作用。
實施例7
博落回地上非果實部分粉末和提取物制成的預混劑對炎熱環境下豬熱應激、提高飼料轉化率的影響
試驗時間：7-8月(試驗期間環境溫度均值35℃，相對濕度均值80％以上)。
試驗設計：選取二元雜交健康仔豬200頭，25日齡左右，隨機分為四組，雌雄各半。處理組Ⅰ：添加110mg/kg的實施例2制備的博落回粉末；處理組Ⅱ：添加25mg/kg實施例5制備的提取物預混劑產品；處理組Ⅲ：添加30mg/kg博落回果提取物預混劑產品(含總生物堿2.25％)；處理組IV：為空白對照組。
按養殖場標準養殖標準程序飼養管理。喂飼日糧中不含其它獸藥飼料添加劑，自由飲水。試驗周期為30d。試驗結果見下表7。
表7仔豬應激試驗結果
如表7中可知，與空白對照組相比較，添加博落回地上非果實部分粉末和提取物的實驗組仔豬平均日采食量、日增重均有提高；料肉比低于對照組。結果說明，在豬日糧中添加博落回地上部地上非果實部分粉末和提取物可緩解仔豬熱應激、提高飼料轉化率。
實施例8
博落回地上非果實部分粉末和提取物制成的預混劑對高密度飼養環境下雞飼料轉化率的影響
試驗設計：選用400只1日齡健康的白羽肉雞，隨機分為四組，每組100只，雌雄各半。處理組Ⅰ：添加110mg/kg的實施例2制備的博落回粉末；處理組Ⅱ：添加25ppm實施例5制備的提取物預混劑產品；處理組Ⅲ：添加50mg/kg博落回果提取物預混劑產品(含總生物堿2.25％)；處理組IV：為空白對照組。
試驗結果見下表8。
表8肉雞飼料轉化率試驗結果
如表8所示結果表明：與空白組相比較，在日糧中添加博落回地上非果實部分粉末和提取物均能有效改善高密度飼養環境下雞的提高飼料轉化率。
實施例9
博落回地上非果實部分粉末的提取物對長途運輸后肉牛血液指標比較試驗
試驗分組：選取體重相近的西門塔爾牛6頭，公母個半。隨機分成2組，每組三頭，管理方式一致，一組為對照組，另一組為試驗組。
試驗方法：當日最高氣溫18.1℃，空氣濕度40％，裝車密度為1頭/m2，運輸途中溫度維持在17℃左右。運輸前分別對試驗組和對照組中動物測量體溫后并靜脈采血。然后在用相同的車輛進行相同距離的長距離運輸，長途運輸途中給對照組和試驗組動物提供等量的普通飼料，給對照組提供普通飲水，給試驗組提供添加實施例4制得的提取物配置成4mg/L的水。經過6個小時長途運輸到達目的地后采血，并用皮質醇試劑測量血液中皮質醇濃度。結果見下表9。
表9運輸前和運輸后試驗動物血液中皮質醇濃度
由表9可知經過6小時運輸以后，試驗組肉牛血液中皮質醇含量顯著低于對照組(P＜0.05)。說明運輸中給試驗動物口服博落回地上非果實部分粉末和提取物可以有效緩解運輸對肉牛造成的應激。
實施例10
博落回地上非果實部分提取物預混劑對草魚生長和抗應激的影響
選擇初始體重為11.49±0.82g的草魚。試驗共分兩個處理，每個處理設3個重復。正式試驗前，草魚在條件相同的其他水族箱馴養4周，然后，選擇規格一致、體格健壯、采食活躍、無病無傷的養殖動物，隨機分組，每組30尾，分別放于400L的養殖桶中進行試驗。每周稱一次魚體質量，并調整投飼量。每天18:00清除桶底的草魚排泄物。養殖試驗持續10周。養殖水溫為(22±3)℃，pH為7.0±0.4，溶解氧不低于5.0mg/L。養殖試驗結束后，計算增重率和飼料系數。試驗結果見表10。
生長試驗結束后，從每個養殖桶中隨機撈取5尾草魚，迅速放入200mg/L MS-222中，在30s內深度麻醉(不影響血清皮質醇含量的測定)，分別采集血樣用于基礎皮質醇水平測定。運輸應激：每組用自制塑料袋網撈取草魚10尾放入盛水15L的塑料袋中，充入純氧，打包，用皮卡車運輸6h，共運輸6包，60尾魚。運輸結束后統計成活率。結果見表11。
表10對草魚生長性能的影響
表11對成活率和血清皮質醇含量的影響