本發(fā)明涉及抗癌藥物領(lǐng)域，特別是一種含苯胺基結(jié)構(gòu)的1,3,4-噻二唑的二硫醚類化合物及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

惡性腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的疾病之一，因此，尋找新的治療手段和靶標(biāo)日益受到人們的關(guān)注。硫氧還蛋白(thioredoxin,Trx)是一種普遍表達(dá)于各種生物組織器官的小分子多功能蛋白質(zhì)。硫氧還蛋白(Trx)、硫氧還蛋白還原酶(thioredoxinreductase,TrxR)和煙酰腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)共同組成了硫氧還蛋白(Trx)系統(tǒng)。研究顯示，Trx系統(tǒng)和腫瘤的關(guān)系非常密切，影響著腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、增殖、分化的過程，甚至可以作為臨床預(yù)后的一項(xiàng)指標(biāo)。Trx已成為國際上腫瘤分子生物學(xué)研究中的一大熱點(diǎn)，是一個(gè)極具臨床意義的腫瘤治療新靶點(diǎn)，參見：文獻(xiàn)1)Arnér ESJ,Holmgren A.Eur.J.Biochem.2000,267,6102；文獻(xiàn)2)Kirkpatrick D,Kuperus M,Dowdeswell M,et al.Biochem.Pharmacol.1998,55,987；文獻(xiàn)3)Tan Q,Li J,Yin HW,et al.Invest New Drugs 2010,28,205；文獻(xiàn)4)Xing FX,Li SL,Ge XY,et al.Oral Oncol.2008,44,963；文獻(xiàn)5)Urig S,Becker K.Semin.Cancer Biol.2006,16,452；文獻(xiàn)6)He J,Li DD,Xiong K,et al.Bioorg.Med.Chem.2012,20,3816。

在本領(lǐng)域的現(xiàn)有技術(shù)中，1-甲基丙基-2-咪唑基二硫醚(PX-12)，是一種具有二硫醚結(jié)構(gòu)的抗癌藥物。研究表明,PX-12中的二硫鍵是該藥物分子與硫氧還蛋白還原酶和硫氧還蛋白發(fā)生反應(yīng)的關(guān)鍵活性區(qū)域。其可以導(dǎo)致硫氧還蛋白還原酶和硫氧還蛋白的活性下降而觸發(fā)了其分子靶向性的抗癌作用。這一報(bào)道對(duì)通過結(jié)構(gòu)改造尋求性能更好的二硫醚類抗癌藥物具有重要的指導(dǎo)意義。

近年來，為了發(fā)現(xiàn)更新更有效和更廣譜的抗癌新藥，本發(fā)明對(duì)基于1,3,4-噻二唑的二硫醚類化合物做了進(jìn)一步研究。發(fā)現(xiàn)有十二個(gè)化合物對(duì)三種癌細(xì)胞表現(xiàn)了很好的增殖抑制活性，均具有開發(fā)為新的抗癌藥物的前景。目前尚無關(guān)于該十二個(gè)化合物的相關(guān)抗癌作用的文獻(xiàn)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是針對(duì)上述技術(shù)分析，提供含苯胺基結(jié)構(gòu)的1,3,4-噻二唑二硫醚類化合物的應(yīng)用，該類化合物具有抗癌活性，為研制新的抗癌藥物和豐富臨床用藥品種開辟新的途徑。

本發(fā)明的技術(shù)方案：

一種含苯胺基結(jié)構(gòu)的1,3,4-噻二唑的二硫醚類化合物的應(yīng)用，其特征在于：所述的化合物用于制備抗癌藥物。

所述的化合物為一組含苯胺基結(jié)構(gòu)的1,3,4-噻二唑二硫醚類化合物，包括正丁基(2-間氯苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、正丁基(2-間甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、異丁基(2-苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、異丁基(2-間氯苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、異丁基(2-間甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、2-丁基(2-苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、2-丁基(2-對(duì)氟苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、2-丁基(2-對(duì)硝基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、2-丁基(2-對(duì)三氟甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、2-丁基(2-對(duì)甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、2-丁基(2-間氯苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚、2-丁基(2-間甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚。

一種所述含苯胺基結(jié)構(gòu)的1,3,4-噻二唑二硫醚類化合物的制備方法，步驟如下：

1)將2-取代苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、巰基異硫脲鹽酸鹽和乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)化合物純品。

所述巰基異硫脲鹽酸鹽為正丁巰基異硫脲鹽酸鹽、異丁巰基異硫脲鹽酸鹽、仲丁巰基異硫脲鹽酸鹽；巰基異硫脲鹽酸鹽與2-取代苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑的摩爾比為1-1.3:1；2-取代苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑與乙醇的用量比為1mmol：5-8mL；碳酸氫鈉與2-取代苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑的摩爾比為1.2-1.5:1。

一種含苯胺基結(jié)構(gòu)的1,3,4-噻二唑二硫醚類化合物的應(yīng)用，用于制備抗癌藥物，包括抗宮頸癌(Hela)、肝癌(SMMC-7721)和肺癌(A549)。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是:十二個(gè)含苯胺基結(jié)構(gòu)的1,3,4-噻二唑二硫醚類化合物具有很強(qiáng)的抗癌活性，為研制新的抗癌藥物和豐富臨床用藥品種開辟新的途徑；其制備方法工藝簡單、易于實(shí)施、收率可達(dá)45-70％，適于規(guī)模化生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

為了尋找療效好和對(duì)多種癌細(xì)胞均有抑制活性的抗癌藥物，結(jié)合對(duì)抗癌藥物的認(rèn)識(shí)，根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)和申請(qǐng)人實(shí)驗(yàn)室多年研究工作成果，合成了多個(gè)二硫醚類化合物，并對(duì)獲得的目標(biāo)化合物進(jìn)行體外抗癌活性初篩藥理試驗(yàn)。發(fā)現(xiàn)其中十二個(gè)含苯胺基結(jié)構(gòu)的1,3,4-噻二唑二硫醚類化合物具有很強(qiáng)的抗癌活性，具有開發(fā)為新的抗癌藥物的前景。目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)已經(jīng)由紅外光譜(IR)和核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證。

實(shí)施例1：

正丁基(2-間氯苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.484g(2mmol)2-間氯苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)正丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物正丁基(2-間氯苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.332g，收率50.2％，熔點(diǎn)103.5-105.3℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為a。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物a結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3261,1601,1510,1540,1354,1173,493；¹H-NMR(DMSO-d₆)10.75(s,1H,NH),7.84(s,1H,Ar-H),7.41(d,1H,Ar-H),7.36(t,1H,Ar-H),7.08(d,1H,Ar-H),3(t,2H,SCH₂),1.64-1.72(m,2H,CH₂),1.34-1.43(m,2H,CH₂),0.89(t,3H,CH₃)；

實(shí)施例2：

正丁基(2-間甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.446g(2mmol)2-間甲基苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)正丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物正丁基(2-間甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.382g，收率61.4％，熔點(diǎn)98.2-99.4℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為b。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物b結(jié)構(gòu)；IR(KBr)cm^-1:3260,1602,1558,1509,1397,1192,503；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.46(s,1H,NH),7.4(s,1H,Ar-H),7.35(d,1H,Ar-H),7.25(t,1H,Ar-H),6.85(d,1H,Ar-H),2.99(t,2H,SCH₂),2.31(s,3H,Ar-H),1.65-1.72(m,2H,CH₂),1.34-1.43(m,2H,CH₂),0.89(t,3H,CH₃)。

實(shí)施例3：

異丁基(2-苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.418g(2mmol)2-苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)異丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物異丁基(2-苯胺-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.331g，收率55.7％，熔點(diǎn)126.7-129.2℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為c。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物c結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:324,1603,1552,1499,1378,1242,501；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.55(s,1H,NH),7.57(d,2H,Ar-H),7.36(t,2H,Ar-H),7.02(t,1H,Ar-H),2.89(d,2H,SCH₂),1.92-2.02

(m,1H,CH),0.98(d,6H,CH₃)。

實(shí)施例4：

異丁基(2-間氯苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.484g(2mmol)2-間氯苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)異丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物異丁基(2-間氯苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.326g，收率49.3％，熔點(diǎn)109.8-112.1℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為d。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物d結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3249,1605,1551,1514,1385,1251,494；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.75(s,1H,NH),7.87(d,1H,Ar-H),7.39(d,1H,Ar-H),7.34(t,1H,Ar-H),7.08(d,1H,Ar-H),2,90(d,2H,SCH₂),1.92-2.03(m,1H,CH),0.98(d,6H,CH₃)。

實(shí)施例5：

異丁基(2-間甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.446g(2mmol)2-間甲基苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)異丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物異丁基(2-間甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.312g，收率50.2％，熔點(diǎn)91.7-93.8℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為e。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物e結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3255,1603,1571,1502,1384,1243,494；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.46(s,1H,NH),7.41(s,1H,Ar-H),7.35(d,1H,Ar-H),7.24(t,1H,Ar-H),6.86(d,1H,Ar-H),2.89(d,2H,SCH₂),2.31(s,3H,Ar-CH₃),1.92-2.02(m,1H,CH),0.98(d,6H,CH₃)。

實(shí)施例6：

2-丁基(2-苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.418g(2mmol)2-苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)2-丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物2-丁基(2-苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.282g，收率47.5％，熔點(diǎn)112.4-114.6℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為f。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物f結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3260,1602,1492,1382,1245,497；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.53(s,1H,NH),7.57(d,2H,Ar-H),7.36(t,2H,Ar-H),7.03(t,1H,Ar-H),3.09-3.17(m,1H,CH),1.52-1.75(m,2H,CH₂),1.32(d,3H,CH3),0.94(t,3H,CH₃)。

實(shí)施例7：

2-丁基(2-對(duì)氟苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.454g(2mmol)2-對(duì)氟苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)2-丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物2-丁基(2-對(duì)氟苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.324g，收率51.4％，熔點(diǎn)145.7-147.3℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為g。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物g結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3254,1618,1560,1510,1377,1218,507；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.53(s,1H,NH),7.58-7.63(m,2H,Ar-H),7.17-7.23(m,2H,Ar-H),3.09-3.17(m,1H,CH),1.49-1.75(m,2H,CH₂),1.32(d,3H,CH₃),0.94(t,3H,CH₃)。

實(shí)施例8：

2-丁基(2-對(duì)硝基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.506g(2mmol)2-對(duì)硝基苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)2-丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物2-丁基(2-對(duì)硝基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.32g，收率46.8％，熔點(diǎn)184.2-186.4℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為h。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物h結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3261,1601,1572,1514,1494,1375,1260,489；¹H-NMR(DMSO-d₆):11.22(s,1H,NH),8.27(d,2H,Ar-H),7.8(d,2H,Ar-H),3.12-3.21(m,1H,CH),1.55-1.75(m,2H,CH₂),1.34(d,3H,CH₃),0.95(t,3H,CH₃)。

實(shí)施例9：

2-丁基(2-對(duì)三氟甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.554g(2mmol)2-對(duì)三氟甲基苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)2-丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物2-丁基(2-對(duì)三氟甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.389g，收率53.4％，熔點(diǎn)186.1-188.4℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為i。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物i結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3254,1618,1556,1502,1384,1256,504；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.91(s,1H,NH),7.78(d,2H,Ar-H),7.72(d,2H,Ar-H),3.11-3.19(m,1H,CH),1.55-1.75(m,2H,CH₂),1.33(d,3H,CH₃),0.95(t,3H,CH₃)。

實(shí)施例10：

2-丁基(2-對(duì)甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.446g(2mmol)2-對(duì)甲基苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)2-丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物2-丁基(2-對(duì)甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.427g，收率68.7％，熔點(diǎn)130.2-132.7℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為j。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物j結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3256,1606,1545,1517,1499,1376,1235,504；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.37(s,1H,NH),7.36(d,2H,Ar-H),7.13(d,2H,Ar-H),2.99-3.07(m,1H,CH),2.22(s,3H,Ar-CH₃),1.48-1.67(m,2H,CH₂),1.26(d,3H,CH₃)0.86(t,3H,CH₃)。

實(shí)施例11：

2-丁基(2-間氯苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.484g(2mmol)2-間氯苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)2-丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物2-丁基(2-間氯苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.362g，收率54.7％，熔點(diǎn)122.9-125.5℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為k。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確化合物k結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3253,1600,1550,1509,1363,1248,497；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.73(s,1H,NH),7.84(s,1H,Ar-H),7.4(d,1H,Ar-H),7.36(d,1H,Ar-H),7.07(d,1H,Ar-H),3.10-3.18(m,1H,CH),1.54-1.74(m,2H,CH₂),1.32(d,3H,CH₃),0.94(t,3H,CH₃)。

實(shí)施例12：

2-丁基(2-間甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚的制備，步驟如下：

1)在50mL圓底燒瓶中，將0.446g(2mmol)2-間甲基苯胺基-5-巰基-1,3,4-噻二唑、0.522g(2.6mmol)2-丁巰基異硫脲鹽酸鹽和15mL乙醇混合并攪拌均勻，在0-10℃下滴入16mL、濃度為4wt％碳酸氫鈉水溶液，攪拌反應(yīng)6-8h，得到反應(yīng)液；

2)將上述反應(yīng)液經(jīng)減壓濃縮、冷卻，析出固體，然后硅膠柱層析提純，用體積比為10：1的石油醚-乙酸乙酯洗脫，制得目標(biāo)物2-丁基(2-間甲基苯胺基-1,3,4-噻二唑-5-基)二硫醚0.412g，收率66.2％，熔點(diǎn)83.3-84.5℃。該制得的產(chǎn)物設(shè)編號(hào)為l。

通過紅外光譜(IR)、核磁共振氫譜(¹H-NMR)確證化合物l結(jié)構(gòu)：IR(KBr)cm^-1:3198,1596,1572,1488,1373,1245,504；¹H-NMR(DMSO-d₆):10.44(s,1H,NH),7.40(s,1H,Ar-H),7.35(d,1H,Ar-H),7.23(t,1H,Ar-H),6.85(d,1H,Ar-H),3.08-3.17(m,1H,CH),2.31(s,3H,Ar-H),1.54-1.75(m,2H,CH₂),1.32(d,3H,CH₃),0.94(t,3H,CH₃)。

體外抗癌活性測定

以上實(shí)施例所制得的產(chǎn)物抗癌活性體外篩選試驗(yàn)：

產(chǎn)物樣品以DMSO溶解，受試化合物濃度為5×10^-5mol/L，藥劑處理48小時(shí)，采用CCK-8法測定系列化合物對(duì)人體宮頸癌細(xì)胞(Hela)、人體肝癌細(xì)胞(SMMC-7721)和人體肺癌細(xì)胞(A549)的增殖抑制率如表1所示：

表1

表1檢測結(jié)果表明：該類化合物對(duì)癌細(xì)胞增殖具有較好的抑制效果，具有應(yīng)用于制備抗癌藥物，包括抗宮頸癌(Hela)、肝癌(SMMC-7721)和肺癌(A549)的前景。

上述內(nèi)容，僅是本發(fā)明代表性實(shí)施例，并非對(duì)本發(fā)明作任何形式的限制，凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。