本發明屬于醫用紡制材料的制備領域，特別涉及一種緩釋環丙沙星的傷口敷料的制備方法。

背景技術：

傷口敷料，作為是包扎傷口的用品，用以覆蓋瘡、傷口或其他損害的材料，是治療皮膚傷口最常用的醫療器材。人類總在試圖加快傷口愈合，首次有關傷口愈合的報道可追溯到4500年前，那時人們就發現創面覆蓋后較不覆蓋愈合效果要好。長期以來,曾出現大量不同類型的敷料，包括了動植物，礦物質等，如動物皮毛，蜂蜜，植物葉子，甚至粘土，砂和雪也用作創面覆蓋物。但最具有影響性、應用時間最長乃至目前仍占很大市場的是我們稱之為傳統敷料的紗布類敷料。隨著對傷口愈合研究的深入，人們認識到使用敷料的目的遠遠不只是為了覆蓋創面,敷料還必須能幫助傷口愈合,同時也由于材料學和工藝學的進步,使敷料在近十幾年中發生了突破性的變化。

為了制備出理想型敷料，科學工作者們不斷完善優化敷料的各方面性能，備受關注的新型生物活性敷料也是層數不窮，受到廣泛關注。隨著科學技術的提高，關于敷料的類型及其制備方法也是日新月異，目前最常見的幾種生物活性敷料的形式包括薄膜，泡沫，水凝膠和親水纖維等，其中納米纖維敷料受到格外的關注。納米纖維材料擁有很多其他材料所不可比擬的優勢，比如極高的比表面積。而靜電紡絲，作為納米纖維材料中較為普遍的方法，自然也成為制備新型傷口敷料的熱門方法。

利用靜電紡絲技術制備傷口敷料的研究在近些年受到了格外的關注，并且已經取得了突破性的進展。靜電紡絲納米纖維傷口敷料被證明可以有效地保護覆蓋傷口，快速止血，吸收傷口滲出液，維持傷口區域環境，促進傷口區域細胞生長和組織再生。此外，電紡纖維中也可以上載一些利于傷口愈合的藥物制劑，如抗生素，生長因子等，從而賦予敷料一定的抗菌效果以及更為理想的愈合速率。

在患者使用敷料的過程當中，敷料需要定期且較為頻繁地更換以防止傷口發炎，同時利于醫護人員觀察傷口愈合情況。因此，敷料更換時所帶來的二次傷害就難以避免，為了解決此問題，需要研究發現符合條件的新型敷料。

技術實現要素：

本發明所要解決的技術問題是提供一種緩釋環丙沙星的傷口敷料的制備方法，該方法操作簡單、產率較高，在智能緩控釋材料方面具有良好的應用前景；制備得到的納米纖維傷口敷料具有優良的抗生素緩釋效果以及溫度敏感性，在有效促進傷口愈合的同時也可以減輕更換敷料時引起的二次傷害，因而可以應用于功能性醫用材料的制備以及臨床效果分析。

本發明的一種緩釋環丙沙星的傷口敷料的制備方法，包括：

(1)將二甘醇二甲基丙烯酸酯DEGMA和引發劑溶于溶劑中，氮氣氛圍下，85～90℃油浴反應60～70分鐘，終止反應，提純，得到聚二甘醇二甲基丙烯酸酯PDEGMA；

(2)將步驟(1)中的PDEGMA、乳酸己內酯共聚物P(LLA-CL)和環丙沙星混合并溶于溶劑中，攪拌，得到靜電紡絲液；靜電紡絲，得到緩釋環丙沙星的傷口敷料；其中，靜電紡絲液中PDEGMA和P(LLA-CL)的總濃度為0.08g/ml-0.10g/ml，環丙沙星與PDEGMA和P(LLA-CL)總質量的質量比為1：10。

所述步驟(1)中引發劑為1,1′-偶氮雙(環己烷甲腈)VAZO-88，溶劑為N,N-二甲基甲酰胺DMF。

所述步驟(1)中DEGMA和引發劑的摩爾比為100：1；單體在反應體系中的濃度為0.36g/ml-0.46g/ml。

所述步驟(1)中溶劑的使用量為5～10ml。

所述步驟(1)中終止反應的方法為冰水浴終止反應。

所述步驟(1)中提純的過程為：首先用二氯甲烷溶解，然后用正己烷沉淀，重復3～4次。

所述步驟(2)中P(LLA-CL)和PDEGMA的質量比為1：3～3：1。

所述P(LLA-CL)和PDEGMA的質量比為3：1、2：1、1：1、1：2或1：3。

所述步驟(2)中溶劑為六氟異丙醇HFIP，用量為5-10毫升。

所述步驟(2)中攪拌的時間為8～12h。

所述步驟(2)中靜電紡絲的條件為：電壓12-16千伏，接收距離150-180毫米，注射器推進速度0.8-1.2毫升/小時.

所述步驟(2)中緩釋環丙沙星的傷口敷料為載有環丙沙星的溫敏納米纖維膜，大小為10*10cm。

本發明的溫敏聚合物PDEGMA在溫度低于相轉變溫度時，具有更理想的生物排斥效果；此外其相轉變時并不具備明顯的遲滯現象，因而更具潛力。

本發明將溫度敏感聚合物應用到敷料材料中。通過靜電紡絲后所得的溫敏納米纖維材料可以通過改變溫度來實現細胞分離，從而減輕敷料更換帶來的二次傷害。在溫敏復合材料中，載入抗生素環丙沙星，環丙沙星可以從纖維中緩釋到傷口區域中，而賦予材料持續的抗菌性，實現對于傷口發炎的治療。

有益效果

(1)本發明方法操作簡單、產率較高，在智能緩控釋材料方面具有良好的應用前景；

(2)本發明制備得到的納米纖維傷口敷料具有優良的抗生素緩釋效果以及溫度敏感性，在有效促進傷口愈合的同時也可以減輕更換敷料時引起的二次傷害，因而可以應用于功能性醫用材料的制備以及臨床效果分析。

附圖說明

圖1為實施例3中可以緩釋環丙沙星的溫度敏感納米纖維傷口敷料(P(LLA-CL)與PDEGMA的質量比為3:1)在37℃磷酸鹽緩沖液(pH7.4)中環丙沙星的藥物釋藥結果；

圖2為大鼠傷口在接受實施例2中的可以緩釋環丙沙星的溫度敏感納米纖維傷口敷料(P(LLA-CL)與PDEGMA的質量比為2:1)處理前以及處理21天后的傷口宏觀圖片；

圖3為大鼠傷口在接受實施例2中的可以緩釋環丙沙星的溫度敏感納米纖維傷口敷料(P(LLA-CL)與PDEGMA的質量比為2:1)處理21天后的表皮HE染色組織切片圖片；

圖4為實施例1中的可以緩釋環丙沙星的溫度敏感納米纖維傷口敷料(P(LLA-CL)與PDEGMA的質量比為1:1)的SEM圖。

具體實施方式

下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。

實施例1

用電子分析天平稱取二甘醇二甲基丙烯酸酯DEGMA 2.256克和1,1′-偶氮雙(環己烷甲腈)VAZO-88 0.003克溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺DMF中，于氮氣保護下85℃油浴反應60分鐘后，冰水浴終止反應，所得產物用二氯甲烷溶解后，在正己烷中沉淀3次，得聚二甘醇二甲基丙烯酸酯PDEGMA。用電子分析天平稱取PDEGMA 0.24克，P(LLA-CL)0.24克(乳酸己內酯共聚物P(LLA-CL)與聚二甘醇二甲基丙烯酸酯PDEGMA的質量比為1:1)，環丙沙星0.048g溶解于6毫升HFIP中(環丙沙星與兩種聚合物總質量的質量比為1：10)，常溫下磁力攪拌8小時至完全溶解得聚合物濃度為8％(克/毫升)的電紡溶液。在下述條件下進行靜電紡絲：電壓為12千伏，注射器推進速度為0.8毫升/小時，接收距離為150毫米，鋁箔紙接收，得到大小為10厘米x10厘米的聚二甘醇二甲基丙烯酸酯與乳酸己內酯共聚物混合靜電紡溫敏納米纖維，即緩釋環丙沙星的傷口敷料。所制備的纖維形貌如圖4所示，纖維粗細均勻，無相分離現象，因此具有優良的形貌。

實施例2

用電子分析天平稱取二甘醇二甲基丙烯酸酯DEGMA 3.008克和1,1′-偶氮雙(環己烷甲腈)VAZO-88 0.004克溶解于7毫升N,N-二甲基甲酰胺DMF中，于氮氣保護下88℃油浴反應65分鐘后，冰水浴終止反應，所得產物用二氯甲烷溶解后，在正己烷中沉淀4次，得聚二甘醇二甲基丙烯酸酯PDEGMA。用電子分析天平稱取PDEGMA0.15克，P(LLA-CL)0.3克(乳酸己內酯共聚物P(LLA-CL)與聚二甘醇二甲基丙烯酸酯PDEGMA的質量比為2:1)，環丙沙星0.045g溶解于5毫升HFIP中(環丙沙星與兩種聚合物總質量的質量比為1：10)，常溫下磁力攪拌10小時至完全溶解得聚合物濃度為9％(克/毫升)的電紡溶液。在下述條件下進行靜電紡絲：電壓為14千伏，注射器推進速度為1.0毫升/小時，接收距離為160毫米，鋁箔紙接收，得到大小為10厘米x10厘米的聚二甘醇二甲基丙烯酸酯與乳酸己內酯共聚物混合靜電紡溫敏納米纖維膜，即緩釋環丙沙星的傷口敷料。將所制備的纖維應用于大鼠傷口，敷料每三天進行更換，更換前用室溫的生理鹽水浸潤。由于纖維的溫敏效應，細胞與材料之間的粘附力度下降，部分細胞分離，因而使得材料更為容易地從傷口上更換下來，不會造成嚴重的二次傷害。傷口處理前以及處理21天后的傷口宏觀圖片如圖2所示，傷口在21天后，接近完全愈合，傷口結痂已經脫落，新生皮膚已經完全覆蓋傷口區域。此優良的愈合效果，可進一步由傷口的組織切片照片(圖3)證實，如圖所示，21天后，新生表皮已經具備一定的厚度，且排列整齊，損傷已不明顯，從而進一步證實材料的優良愈合效果。

實施例3

用電子分析天平稱取二甘醇二甲基丙烯酸酯DEGMA 3.76克和1,1′-偶氮雙(環己烷甲腈)VAZO-88 0.005克溶解于10毫升N,N-二甲基甲酰胺DMF中，于氮氣保護下90℃油浴反應70分鐘后，冰水浴終止反應，所得產物用二氯甲烷溶解后，在正己烷中沉淀4次，得聚二甘醇二甲基丙烯酸酯PDEGMA。用電子分析天平稱取PDEGMA 0.25克，P(LLA-CL)0.75克(乳酸己內酯共聚物P(LLA-CL)與聚二甘醇二甲基丙烯酸酯PDEGMA的質量比為3:1)，環丙沙星0.1g溶解于10毫升HFIP中(環丙沙星與兩種聚合物總質量的質量比為1：10)，常溫下磁力攪拌12小時至完全溶解得聚合物濃度為10％(克/毫升)的電紡溶液。在下述條件下進行靜電紡絲：電壓為16千伏，注射器推進速度為1.2毫升/小時，接收距離為180毫米，鋁箔紙接收，得到大小為10厘米x10厘米的聚二甘醇二甲基丙烯酸酯與乳酸己內酯共聚物混合靜電紡溫敏納米纖維膜，即緩釋環丙沙星的傷口敷料。所得載藥纖維進行模擬體內的藥物釋放，結果如圖1所示，環丙沙星可以持續從纖維中釋放超過180小時，因為具備持續抑制微生物生長的能力。