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磷脂?糖胺聚糖仿生細胞外基質納米膜及其制備方法與應用與流程

文檔序號:12076144閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種仿生細胞外基質納米膜的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

S1:將糖胺聚糖溶于磷酸鹽緩沖溶液中,然后加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和添加劑,得到混合液,再將所述混合液去除氧氣后活化;其中,所述添加劑為1-羥基苯并三氮唑或N-羥基丁二酰亞胺;

S2:將磷脂溶于復配乳液中,然后加入到所述S1得到的產物中進行反應;其中,所述復配乳液包括水和有機溶劑;

S3:將所述S2得到的產物干燥,得到仿生細胞外基質納米膜。

2.根據權利要求1所述的仿生細胞外基質納米膜的制備方法,其特征在于:

所述S1中,所述糖胺聚糖、所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和所述添加劑的物質的量比為1:1:(1~10);

所述S2中,所述磷脂和所述復配乳液的質量比為1:(10~100),所述復配乳液中,所述有機溶劑和所述水的體積比為1:(1~100);

所述糖胺聚糖和所述磷脂的質量比為1:(1~100)。

3.根據權利要求1所述的仿生細胞外基質納米膜的制備方法,其特征在于:

所述S1中:所述糖胺聚糖包括肝素、透明質酸和硫酸軟骨素中的一種或幾種,所述糖胺聚糖的相對分子質量為8000~14000;

所述S2中:所述磷脂包括1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酰乙醇胺、L-磷脂酰乙醇胺、1,2-二硬酯酰-sn-甘油-3-磷酰乙醇胺、1,2-二棕櫚酰基-sn-丙三基-3-磷酸乙醇氨、1,2-二肉豆蔻酰-sn-丙三基-3-磷脂酰乙醇胺、1,2-二油酰基-sn-丙三基-3-磷脂酰乙醇胺、膽固醇甲酰胺和花生四烯酰胺中的一種或幾種。

4.根據權利要求1所述的仿生細胞外基質納米膜的制備方法,其特征在于:

所述S2中:所述有機溶劑包括乙醇、異丙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、二甲亞砜和二甲基甲酰胺中的一種或幾種;所述水為雙蒸水。

5.根據權利要求1所述的仿生細胞外基質納米膜的制備方法,其特征在于:

所述S1中,將所述糖胺聚糖溶于磷酸鹽緩沖溶液中具體包括:將所述糖胺聚糖加入所述磷酸鹽緩沖溶液中,得到糖胺聚糖與磷酸鹽緩沖溶液的混合物,然后在0~37℃的條件下超聲10~30min;

其中,所述超聲的功率為20~400W,所述磷酸鹽緩沖溶液的pH值為6.0~6.8,在所述糖胺聚糖與磷酸鹽緩沖溶液的混合物中,所述糖胺聚糖的質量分數為10%~50%。

6.根據權利要求1所述的仿生細胞外基質納米膜的制備方法,其特征在于:

所述S1中,所述活化的溫度為0~37℃,所述活化的時間為15~45min;

所述S2中,所述反應的溫度為0~100℃,所述反應的時間為0.5~72h;

所述S3中,所述干燥為冷凍干燥,所述冷凍干燥的溫度為-60℃~-80℃,所述冷凍干燥的時間為2~48h。

7.權利要求1-6任一項所述的方法制備得到的仿生細胞外基質納米膜。

8.一種熒光仿生細胞外基質納米膜的制備方法,其特征在于:

包括權利要求1-6任一項所述的仿生細胞外基質納米膜的制備方法的所有步驟,并在所述S2中的所述反應后,還包括步驟:在所述反應后的產物中加入熒光物質進行避光反應;其中,所述糖胺聚糖和所述熒光物質的物質的量比為1:1000,所述熒光物質為5-FAM-乙二胺或AF488-N-羥基琥珀酰亞胺,所述避光反應的溫度為15~30℃,所述避光反應的時間為15~60min。

9.權利要求8所述的方法制備得到的熒光仿生細胞外基質納米膜。

10.權利要求7所述的仿生細胞外基質納米膜或權利要求9所述的熒光仿生細胞外基質納米膜在制備胰島培養或胰島移植產品中的應用。

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