本發明屬于藥劑學技術領域，具體涉及一種絲膠蛋白水凝膠的制備方法。
背景技術：
水凝膠（Hydrogel）是以水為分散介質的凝膠，具有網狀交聯結構的水溶性高分子中引入一部分疏水基團和親水殘基，親水殘基與水分子結合，將水分子連接在網狀內部，而疏水殘基遇水膨脹的交聯聚合物。是一種高分子網絡體系，性質柔軟，能保持一定的形狀，能吸收大量的水。一類采用天然生物材料（如膠原、海藻酸鹽和殼聚糖等）制備得到的水凝膠，因為擁有與機體高度相似的理化特性和優越的生物學性能，已被廣泛地應用于生物醫藥和組織工程領域。
絲膠蛋白（SS）是一種生物相容性優良的天然高分子材料。絲膠蛋白富含絲氨酸、天門冬氨酸、谷氨酸、蘇氨酸等極性氨基酸，約占絲膠蛋白氨基酸總量的70%，與人體皮膚角質層中天然保濕因子的氨基酸組成及比例相似。由于絲膠蛋白具有良好的生物可降解性，促進細胞粘附分化和傷口愈合等功能特性，是一種優異的生物醫用材料。
長期以來由于人們對絲膠蛋白認識的不足和研究的局限性，導致絲膠在繅絲工業中被當作廢物處理，浪費了大量寶貴的天然資源。近年來人們發現絲膠蛋白具有保濕、抗菌、抗氧化、抗凝血以及促進細胞粘附和增殖等生物特性。
技術實現要素：
解決的技術問題：本發明的目的是克服現有技術的不足而提供一種絲膠蛋白水凝膠的制備方法，所制成的絲膠蛋白水凝膠不僅具有多孔性、可降解性，還具有良好的生物相容性。
技術方案： 一種絲膠蛋白水凝膠的制備方法，包括以下步驟：
步驟1，取蠶繭破碎，清洗后晾干，得碎片；
步驟2，將碎片加至含有1-4wt.%復合酶的水溶液中，高壓均質，得到酶解液；
步驟3，采用微濾膜對酶解液進行過濾除雜，得到清液；
步驟4，將清液導入層析柱中進行除雜，得到絲膠蛋白溶液；
步驟5，將所得絲膠蛋白溶液減壓濃縮至體積縮小為15-20%，加入0.5-1.2wt.%戊二醛、0.2-0.7wt.%檸檬酸，攪拌，靜置，即得。
進一步地，步驟1中碎片大小在0.5-1cm。
進一步地，步驟2中復合酶是中性蛋白酶和液體纖維素酶按重量比2：3組成的混合物。
進一步地，步驟2中高壓均質條件為0.8-1.2MPa、循環5次。
進一步地，步驟4中層析柱是聚酰胺柱。
進一步地，步驟5中還需要加入0.1-0.5wt.%海藻酸鈉。
有益效果：本發明采用復合酶結合高壓均質的工藝提取絲膠蛋白，該工藝絲膠蛋白的提取效率可達90%，所制成的絲膠蛋白水凝膠不僅具有多孔性、可降解性，還具有良好的生物相容性。
具體實施方式
實施例1
一種絲膠蛋白水凝膠的制備方法，包括以下步驟：
步驟1，取蠶繭破碎，清洗后晾干，得碎片；
步驟2，將碎片加至含有1wt.%復合酶的水溶液中，高壓均質，得到酶解液；
步驟3，采用微濾膜對酶解液進行過濾除雜，得到清液；
步驟4，將清液導入層析柱中進行除雜，得到絲膠蛋白溶液；
步驟5，將所得絲膠蛋白溶液減壓濃縮至體積縮小為15%，加入0.5wt.%戊二醛、0.2wt.%檸檬酸，攪拌，靜置，即得。
其中，步驟1中碎片大小在0.5-1cm；步驟2中復合酶是中性蛋白酶和液體纖維素酶按重量比2：3組成的混合物，高壓均質條件為0.8MPa、循環5次；步驟4中層析柱是聚酰胺柱。
實施例2
一種絲膠蛋白水凝膠的制備方法，包括以下步驟：
步驟1，取蠶繭破碎，清洗后晾干，得碎片；
步驟2，將碎片加至含有2wt.%復合酶的水溶液中，高壓均質，得到酶解液；
步驟3，采用微濾膜對酶解液進行過濾除雜，得到清液；
步驟4，將清液導入層析柱中進行除雜，得到絲膠蛋白溶液；
步驟5，將所得絲膠蛋白溶液減壓濃縮至體積縮小為17%，加入0.6wt.%戊二醛、0.5wt.%檸檬酸，攪拌，靜置，即得。
其中，步驟1中碎片大小在0.5-1cm；步驟2中復合酶是中性蛋白酶和液體纖維素酶按重量比2：3組成的混合物，高壓均質條件為0.9MPa、循環5次；步驟4中層析柱是聚酰胺柱。
實施例3
一種絲膠蛋白水凝膠的制備方法，包括以下步驟：
步驟1，取蠶繭破碎，清洗后晾干，得碎片；
步驟2，將碎片加至含有1wt.%復合酶的水溶液中，高壓均質，得到酶解液；
步驟3，采用微濾膜對酶解液進行過濾除雜，得到清液；
步驟4，將清液導入層析柱中進行除雜，得到絲膠蛋白溶液；
步驟5，將所得絲膠蛋白溶液減壓濃縮至體積縮小為18%，加入0.6wt.%戊二醛、0.4wt.%檸檬酸，攪拌，靜置，即得。
其中，步驟1中碎片大小在0.5-1cm；步驟2中復合酶是中性蛋白酶和液體纖維素酶按重量比2：3組成的混合物，高壓均質條件為1MPa、循環5次；步驟4中層析柱是聚酰胺柱。
實施例4
一種絲膠蛋白水凝膠的制備方法，包括以下步驟：
步驟1，取蠶繭破碎，清洗后晾干，得碎片；
步驟2，將碎片加至含有4wt.%復合酶的水溶液中，高壓均質，得到酶解液；
步驟3，采用微濾膜對酶解液進行過濾除雜，得到清液；
步驟4，將清液導入層析柱中進行除雜，得到絲膠蛋白溶液；
步驟5，將所得絲膠蛋白溶液減壓濃縮至體積縮小為20%，加入1.2wt.%戊二醛、0.7wt.%檸檬酸，攪拌，靜置，即得。
其中，步驟1中碎片大小在0.5-1cm；步驟2中復合酶是中性蛋白酶和液體纖維素酶按重量比2：3組成的混合物，高壓均質條件為1.2MPa、循環5次；步驟4中層析柱是聚酰胺柱。
實施例5
本實施例與實施例3的區別在于：步驟5中還需要加入0.1-0.5wt.%海藻酸鈉。
一種絲膠蛋白水凝膠的制備方法，包括以下步驟：
步驟1，取蠶繭破碎，清洗后晾干，得碎片；
步驟2，將碎片加至含有1wt.%復合酶的水溶液中，高壓均質，得到酶解液；
步驟3，采用微濾膜對酶解液進行過濾除雜，得到清液；
步驟4，將清液導入層析柱中進行除雜，得到絲膠蛋白溶液；
步驟5，將所得絲膠蛋白溶液減壓濃縮至體積縮小為18%，加入0.6wt.%戊二醛、0.4wt.%檸檬酸，攪拌，靜置，即得。
其中，步驟1中碎片大小在0.5-1cm；步驟2中復合酶是中性蛋白酶和液體纖維素酶按重量比2：3組成的混合物，高壓均質條件為1MPa、循環5次；步驟4中層析柱是聚酰胺柱。
本發明采用復合酶結合高壓均質的工藝提取絲膠蛋白，該工藝絲膠蛋白的提取效率可達90%，所制成的絲膠蛋白水凝膠不僅具有多孔性、可降解性，還具有良好的生物相容性。