本發明涉及一種香豆素納米探針的制備方法。
背景技術：
眼部特殊的解剖生理學特征，使得一般的眼用制劑難以透過角膜一房水和血一視網膜所組成的屏障，最終只有不到5％的藥物分布于眼組織內。納米技術在藥物領域的應用，改變了藥物的電性、磁性、光學、粉體和化學等性質，并構造了活性化合物在物理、化學和生物學等方面新的特定功能。納米藥物傳遞系統在眼部的應用，能減小液滴與角膜的接觸角，增加鋪展系數，延長載藥體系在角膜前的滯留時間，以增加藥物向眼內甚至體內的輸送。因此，經眼給藥使藥物直接吸收進入體循環，進而治療全身性疾病也成為近年來的研究熱點。香豆素類化合物以其合適的最大激發、發射波長，可降低細胞組分和生理液體背景熒光干擾的特性，廣泛用于生物體通路的探討。其中，香豆素有足夠大的Stokes位移可避免激發光譜和發射光譜的重疊，進而產生較高的熒光量子產率，靈敏度達到探討給藥通路中低濃度的檢測要求。
技術實現要素：
本發明提出一種香豆素納米探針的制備方法。
一種香豆素納米探針的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）取PLGA，乳酸／羥基乙酸(LA／GA)比例=75：25、50：50和90：10，相對分子量10000；聚乙烯醇；葡聚糖凝膠G一50；備用，以上原料均為市售；
（2）取PLGA200mg和15mg，溶于有機溶液中，再將其分散到2-6％PVA的水溶液25ml中；
（3）用超聲波細胞破碎儀間斷超聲1 0 min，然后磁力攪拌3-4h，揮去有機溶劑，離心(357．8×g)10 min，所得上清液即為納米探針溶液。
優選地，由5ml丙酮和乙醇混合液組成，其中丙酮和乙醇的比例為8：2。
優選地，超聲波細胞破碎儀的功率為150w，其工作時間為3s，間隔3s。
優選地，超聲波細胞破碎儀的功率為120w，其工作時間為1.5，間隔2s。
優選地，所述乳酸／羥基乙酸的比例為75：25。
優選地，所述乳酸／羥基乙酸的比例為90：10。
本發明所述方法制備香豆素納米探針，受試角膜結構完好，上皮組織、基質未出現異角膜、結膜均不產生刺激性,本發明步驟簡單，實用性強，可工業化生產。
具體實施方式
實施例1。
一種香豆素納米探針的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）取PLGA，乳酸／羥基乙酸(LA／GA)比例=75：25、50：50和90：10，相對分子量10000；聚乙烯醇；葡聚糖凝膠G一50；備用，以上原料均為市售；
（2）取PLGA200mg和15mg，溶于有機溶液中，再將其分散到2-6％PVA的水溶液25ml中；
（3）用超聲波細胞破碎儀間斷超聲1 0 min，然后磁力攪拌3-4h，揮去有機溶劑，離心(357．8×g)10 min，所得上清液即為納米探針溶液。
優選地，由5ml丙酮和乙醇混合液組成，其中丙酮和乙醇的比例為8：2。
實施例2
一種香豆素納米探針的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）取PLGA，乳酸／羥基乙酸(LA／GA)比例=75：25、50：50和90：10，相對分子量10000；聚乙烯醇；葡聚糖凝膠G一50；備用，以上原料均為市售；
（2）取PLGA200mg和15mg，溶于有機溶液中，再將其分散到2-6％PVA的水溶液25ml中；
（3）用超聲波細胞破碎儀間斷超聲1 0 min，然后磁力攪拌3-4h，揮去有機溶劑，離心(357．8×g)10 min，所得上清液即為納米探針溶液。
優選地，由5ml丙酮和乙醇混合液組成，其中丙酮和乙醇的比例為8：2。
優選地，超聲波細胞破碎儀的功率為150w，其工作時間為3s，間隔3s。
實施例3
一種香豆素納米探針的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）取PLGA，乳酸／羥基乙酸(LA／GA)比例=75：25、50：50和90：10，相對分子量10000；聚乙烯醇；葡聚糖凝膠G一50；備用，以上原料均為市售；
（2）取PLGA200mg和15mg，溶于有機溶液中，再將其分散到2-6％PVA的水溶液25ml中；
（3）用超聲波細胞破碎儀間斷超聲1 0 min，然后磁力攪拌3-4h，揮去有機溶劑，離心(357．8×g)10 min，所得上清液即為納米探針溶液；
（4）由5ml丙酮和乙醇混合液組成，其中丙酮和乙醇的比例為8：2；
（5）超聲波細胞破碎儀的功率為120w，其工作時間為1.5，間隔2s。
實施例4
一種香豆素納米探針的制備方法，其特征在于包括以下步驟：
（1）取PLGA，乳酸／羥基乙酸(LA／GA)比例=75：25、50：50和90：10，相對分子量10000；聚乙烯醇；葡聚糖凝膠G一50；備用，以上原料均為市售；
（2）取PLGA200mg和15mg，溶于有機溶液中，再將其分散到2-6％PVA的水溶液25ml中；
（3）用超聲波細胞破碎儀間斷超聲1 0 min，然后磁力攪拌3-4h，揮去有機溶劑，離心(357．8×g)10 min，所得上清液即為納米探針溶液；
（4）由5ml丙酮和乙醇混合液組成，其中丙酮和乙醇的比例為8：2；
（5）超聲波細胞破碎儀的功率為150w，其工作時間為3s，間隔3s；
（6）所述乳酸／羥基乙酸的比例為90：10。