皮膚潰瘍是臨床上常見(jiàn)病、多發(fā)病。其主要原因有燒傷、化學(xué)灼傷或皮膚外傷感染及長(zhǎng)期壓迫等原因?qū)е隆６嘁?jiàn)于老年人，常合并有下肢靜脈曲張、慢性濕疹、心臟病、糖尿病等。由于局部皮膚營(yíng)養(yǎng)障礙或治療不當(dāng)，潰瘍可遷延不愈或反復(fù)發(fā)作，給患者帶來(lái)不便。
糖尿病足（diabetic foot， DF）是糖尿病患者足或下肢組織破壞的一種病理狀態(tài)，是周?chē)堋⑸窠?jīng)病變發(fā)展的共同結(jié)果。糖尿病足最常見(jiàn)的臨床表現(xiàn)是組潰瘍。潰瘍可累及皮膚、皮下組織、肌肉、骨骼。糖尿病足潰瘍是糖尿病嚴(yán)重并發(fā)癥之一，是導(dǎo)致糖尿病患者致殘、致死的主要原因。糖尿病足潰瘍的發(fā)生往往涉及多個(gè)發(fā)病機(jī)制，主要原因是由于糖尿病合并大、小、微血管病變致使局部血液灌注不足，周?chē)窠?jīng)病變以及機(jī)械性損傷合并感染所致。通常，糖尿病組潰瘍的治療方法包括控制高血糖、高血脂和高血壓；減輕患處的局部壓力；使用抗血栓與改善下肢血液循環(huán)的藥物；使用抗炎藥物；以及高壓氧艙等手段。當(dāng)糖尿病足潰瘍發(fā)展到深部感染或壞疽時(shí)，為防止感染進(jìn)一步擴(kuò)散危及患者生命，截肢術(shù)常常是必需的。目前仍缺乏有效治療糖尿病足的局部使用的有效藥物。
紅樹(shù)林生態(tài)系是世界上最富多樣性、生產(chǎn)力最高的海洋生態(tài)系之一。紅樹(shù)林沼澤區(qū)有充足的植物材料，有豐富的浮游藻類(lèi)和浮游生物，這些條件正適合于為微生物的繁殖。在過(guò)去的十幾年里，紅樹(shù)林棲息地被證明是真菌新種屬的豐富來(lái)源，這形成了海洋真菌第二大的生態(tài)學(xué)亞類(lèi)。卷線孢菌素是一種紅色的色素，最先從Bostryconema alpespre cesati （Tetrahedron Lett.58:6087, 1968; Tetrahedron Lett. 58: 6091, 1968;Tetrahedron. 26: 1339, 1968）中分離得到，能抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。隨后有報(bào)道從Nigrospora oryzae（Sankyo Kenkyusho Nenpo. 21: 165, 1969）、Fungus Arthrinium phaeospermum（Experientia. 31: 783, 1975）、Alternaria eichhorniae（Appl Environ Microbiol. 43: 846, 1982）中分離得到，并發(fā)現(xiàn)其具有除草活性。2000年，姜廣策、林永成、周世寧（中山大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），39: 68, 2000）從中國(guó)南海紅樹(shù)內(nèi)生真菌 #1403次級(jí)代謝產(chǎn)物中分離得到卷線孢菌素，體外細(xì)胞毒試驗(yàn)結(jié)果顯示: 卷線孢菌素均能夠有效抑制多種腫瘤細(xì)胞株的生長(zhǎng)（CN1347865A等）。另有報(bào)道卷線孢菌素能抑制結(jié)核分枝桿菌（CN102732474A）。
煙酰胺是輔酶I和輔酶II的組成部分，稱(chēng)為許多脫氫酶的輔酶。缺乏時(shí)可影響細(xì)胞的正常呼吸和代謝而引起糙皮病。煙酰胺經(jīng)腸胃道易被吸收，分布到全身組織，經(jīng)肝臟代謝，僅少量以原型自尿液排出，用于補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)及治療皮炎、舌炎等。
眾所周知，在選擇傷口敷料處理傷口時(shí)，護(hù)理人員需要面對(duì)的一個(gè)難題是在處理慢性傷口滲出液的同時(shí)還要提供給傷口有利的愈合環(huán)境，這些有利的環(huán)境條件包括，吸收傷口分泌液和保持傷口濕潤(rùn)，同時(shí)可以有效地抑制傷口的微生物增長(zhǎng)。創(chuàng)面活性修復(fù)材料，可以刺激表皮細(xì)胞和形成纖維細(xì)胞的移行、降低新生修復(fù)血管的循環(huán)阻力，阻礙粒細(xì)胞的沉積、抑制血管內(nèi)皮腫脹，減少細(xì)胞碎片在血管內(nèi)的堆積，大大降低微血管的血液阻力和栓塞發(fā)生率，從而起到改善局部微循環(huán)，組織修復(fù)，具有促進(jìn)血管生長(zhǎng)作用，可用于治療有少量滲液傷口，機(jī)械外傷、挫傷，治療糖尿病性潰瘍、褥瘡、壓力性潰瘍，皮膚和粘膜潰瘍及糜爛性病變、局部性燒燙傷、各種手術(shù)及外傷造成的創(chuàng)面、延遲愈合的手術(shù)切口、不明原因引起的難以愈合的傷口。
中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)01122949.7，公開(kāi)了一種新型生物敷料，特別是用于人體皮膚創(chuàng)傷、燒傷及體表潰瘍的殼聚糖生物流體敷料膜及其制備方法。它是以殼聚糖為主要原料，經(jīng)酸解、添加明膠、甘油，再用碳酸氫鈉進(jìn)行中和及過(guò)濾，從而提供一種生物相容性好。該產(chǎn)品容易存在酸殘留，而且中和過(guò)濾，設(shè)備和工藝較為復(fù)雜。
中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)200810039461.4，公開(kāi)了一種明膠/生物活性玻璃復(fù)合海綿敷料及其制備方法。該方法以明膠為原料配制含量為1～30％的溶液，添加生物活性玻璃粉體，其工藝方法的工藝時(shí)間長(zhǎng)，而且需要冷凍干燥，不但能耗高，也不利于規(guī)模化生產(chǎn)。明膠主要載體成份的敷料，還存在使用中易失水硬化，使創(chuàng)面的接觸的舒適度降低。
發(fā)明詳述
本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N用于皮膚潰瘍的護(hù)理用敷料，其特征是包括活性成分和輔料。本發(fā)明的活性成分包括卷線孢菌素和煙酰胺。本發(fā)明的敷料中還包含透明質(zhì)酸或其鹽、可溶性銀鹽、海藻酸鹽和殼聚糖等作為輔料。
本申請(qǐng)所述的護(hù)理用敷料，其中活性成分的含量占所述敷料總重量的0.1%-1.5%，優(yōu)選0.5%-1%。
本申請(qǐng)所述的卷線孢菌素的結(jié)構(gòu)式如下：
本申請(qǐng)所述的活性成分中，其中卷線孢菌素和煙酰胺的比例為1:1-1:9，優(yōu)選1:2.5-1:8.
本申請(qǐng)所述的護(hù)理用敷料中的所用的輔料，透明質(zhì)酸或其鹽同時(shí)含有高分子量透明質(zhì)酸和低分子量透明質(zhì)酸，其中高分子量透明質(zhì)酸或其鹽的分子量為100~280萬(wàn)道爾頓，優(yōu)選120-180萬(wàn)道爾頓；低分子量透明質(zhì)酸或其鹽的分子量為0.5~40萬(wàn)道爾頓，優(yōu)選0.5~30萬(wàn)道爾頓。
本申請(qǐng)所述的輔料中，透明質(zhì)酸鹽為鈉鹽。
本申請(qǐng)所述的敷料中，可溶性銀鹽為硝酸銀。
本申請(qǐng)所述的輔料中，高分子量透明質(zhì)酸或其鹽的含量占所述敷料總重量的0.05%-12%，低分子量透明質(zhì)酸或其鹽的含量為0.5%-12%，可溶性銀鹽的含量為0.005%-2%，海藻酸鹽的含量為3%-20%，殼聚糖的含量為0.1%-20%。
本申請(qǐng)所述的輔料中，高分子量透明質(zhì)酸或其鹽的含量占所述敷料總重量的0. 5%-8%，低分子量透明質(zhì)酸或其鹽的含量為0.9%-7%，可溶性銀鹽的含量為0.005%-1%，海藻酸鹽的含量為4%-15%，殼聚糖的含量為0.9%-10%。
本申請(qǐng)的所述輔料中，還可含有含量共為3%-8%的聚乙二醇，丙二醇或甘油，余量以水補(bǔ)足。
本申請(qǐng)所述的護(hù)理用敷料除了制成凝膠劑之外，還可將凝膠劑經(jīng)刮涂、干燥、固化成膜，切制（按規(guī)格尺寸分切），在所獲得的復(fù)合膜上覆蓋泡棉、無(wú)紡布或纖維棉等材料，得到吸附性增強(qiáng)和膜抗拉伸強(qiáng)度提高的貼敷劑產(chǎn)品。
本申請(qǐng)的一個(gè)目的是提供一種護(hù)理皮膚潰瘍的敷料。申請(qǐng)人意外地發(fā)現(xiàn)卷線孢菌素能增強(qiáng)局部的血液循環(huán)，促進(jìn)傷口愈合，與煙酰胺一起能達(dá)到更好的治療皮膚潰瘍的效果，尤其是糖尿病導(dǎo)致的皮膚潰瘍。
本申請(qǐng)的另一方面是提供了一種敷料輔料的組合，其中高分子量和低分子量透明質(zhì)酸共用，發(fā)揮多重功效。高分子量透明質(zhì)酸具有優(yōu)良的黏彈性、保濕性及吸水性，能為凝膠制劑提供適宜的年度和粘附性，保證凝膠劑的形態(tài)。低分子量透明質(zhì)酸除了具有一定保濕性能，還能夠促進(jìn)血管生成，清除過(guò)多的自由基，減少細(xì)胞氧化損傷，更容易滲透到皮膚深層。兩者共用可以對(duì)傷口愈合發(fā)揮輔助作用。此外，再與殼聚糖、海藻酸鹽和硝酸銀進(jìn)行配伍，所獲得的基質(zhì)中可溶性銀鹽能起到消毒殺菌的效果，殼聚糖可進(jìn)一步加速皮膚的再生和恢復(fù)，也有一定的抑菌效果，海藻酸鹽使得形成的復(fù)合膜不但具備優(yōu)良的柔韌性，而且抗拉伸性能和生物相容性良好。
本申請(qǐng)的另一方面是提供一種制備所述護(hù)理皮膚潰瘍的敷料的方法，其中包括將卷線孢菌素放入水中超聲乳化分散，然后稱(chēng)取高分子量透明質(zhì)酸、低分子量透明質(zhì)酸、海藻酸鹽和殼聚糖放入水中攪拌，然后向上述混合物中依此加入聚乙二醇，卷線孢菌素的分散液以及煙酰胺和硝酸銀。經(jīng)過(guò)充分?jǐn)噭颍尤胨a(bǔ)足1000g，即得本申請(qǐng)的凝膠狀敷料。如有需要，還可將所得凝膠經(jīng)刮涂、低溫干燥后固化成膜，切制（按規(guī)格尺寸分切），在所獲得的復(fù)合膜上覆蓋無(wú)紡布獲得貼敷劑。
本申請(qǐng)的另一方面是提供一種用途，卷線孢菌素和煙酰胺的組合在制備護(hù)理皮膚潰瘍，尤其是糖尿病足潰瘍的敷料中的用途，其中所述敷料的輔料中還含有高分子量透明質(zhì)酸和低分子量透明質(zhì)酸。
制備例1
1）稱(chēng)取0.5g卷線孢菌素，放入少量水中超聲乳化。
2）另稱(chēng)取高分子量透明質(zhì)酸鈉100g，低分子透明質(zhì)酸鈉50g，海藻酸鹽30g，殼聚糖8g，放入水中攪拌。
3）稱(chēng)取聚乙二醇30g，加入2）中獲得的溶液，攪勻。
4）將1）中獲得的混合物加入3），另稱(chēng)取煙酰胺0.5g和硝酸銀0.05g一并加入攪勻。
5）加入水補(bǔ)足1000g，攪勻即得凝膠劑。
制備例2
1）稱(chēng)取2g卷線孢菌素，放入少量水中超聲乳化。
2）另稱(chēng)取高分子量透明質(zhì)酸鈉80g，低分子透明質(zhì)酸鈉70g，海藻酸鹽45g，殼聚糖20g，放入水中攪拌。
3）稱(chēng)取聚乙二醇30g，加入2）中獲得的溶液，攪勻。
4）將1）中獲得的混合物加入3），另稱(chēng)取煙酰胺10g和硝酸銀0.05g一并加入攪勻。
5）加入水補(bǔ)足1000g，攪勻即得凝膠劑。
制備例3
1）稱(chēng)取3g卷線孢菌素，放入少量水中超聲乳化。
2）另稱(chēng)取高分子量透明質(zhì)酸鈉120g，低分子透明質(zhì)酸鈉50g，海藻酸鹽100g，殼聚糖60g，放入水中攪拌。
3）稱(chēng)取甘油40g，加入2）中獲得的溶液，攪勻。
4）將1）中獲得的混合物加入3），另稱(chēng)取煙酰胺7.5g和硝酸銀0.05g一并加入攪勻。
5）加入水補(bǔ)足1000g，攪勻即得凝膠劑。
制備例4
1）稱(chēng)取7.5g卷線孢菌素，放入少量水中超聲乳化。
2）另稱(chēng)取高分子量透明質(zhì)酸鈉120g，低分子透明質(zhì)酸鈉50g，海藻酸鹽80g，殼聚糖80g，放入水中攪拌。
3）稱(chēng)取甘油40g，加入2）中獲得的溶液，攪勻。
4）將1）中獲得的混合物加入3），另稱(chēng)取煙酰胺7.5g和硝酸銀0.05g一并加入攪勻。
5）加入水補(bǔ)足1000g，攪勻即得凝膠劑。
對(duì)比例1
1）稱(chēng)取高分子量透明質(zhì)酸鈉120g，低分子透明質(zhì)酸鈉50g，海藻酸鹽80g，殼聚糖80g，放入水中攪拌。
2）稱(chēng)取甘油40g，加入1）中獲得的溶液，攪勻。
3）加入水補(bǔ)足1000g，攪勻即得凝膠劑。
對(duì)比例2
1）稱(chēng)取7.5g卷線孢菌素，放入少量水中超聲乳化。
2）另稱(chēng)取高分子量透明質(zhì)酸鈉120g，低分子透明質(zhì)酸鈉50g，海藻酸鹽80g，殼聚糖80g，放入水中攪拌。
3）稱(chēng)取甘油40g，加入2）中獲得的溶液，攪勻。
4）將1）中獲得的混合物加入3），另稱(chēng)取硝酸銀0.05g一并加入攪勻。
5）加入水補(bǔ)足1000g，攪勻即得凝膠劑。
對(duì)比例3
1）稱(chēng)取高分子量透明質(zhì)酸鈉120g，低分子透明質(zhì)酸鈉50g，海藻酸鹽80g，殼聚糖80g，放入水中攪拌。
2）稱(chēng)取甘油40g，加入1）中獲得的溶液，攪勻。
3）稱(chēng)取煙酰胺7.5g和硝酸銀0.05g一并加入2）中攪勻。
4）加入水補(bǔ)足1000g，攪勻即得凝膠劑。
具體實(shí)施方式
實(shí)驗(yàn)一、對(duì)糖尿病足潰瘍的治療效果
1，糖尿病動(dòng)物模型制備：
大鼠為SD雄性大鼠，SPF級(jí)，體重(180±10)g。高脂飼料喂養(yǎng)8周后，1.5％鏈脲佐菌素溶解于pH值4.5的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液按35mg/kg的劑量左下腹注射獲得II型糖尿病大鼠模型。高脂飼料的制備方法為：首先，將大麥15%，小麥31%，玉米15%，麩皮15%，魚(yú)粉6%按比例攪拌混合均勻后，加入豆粕、油、鹽混勻后加壓成型制成基礎(chǔ)飼料，然后，將基礎(chǔ)飼料73％，豬油20％，奶粉2％，膽固醇1％，蔗糖4％按比例攪拌混合均勻后加壓成型制成高脂飼料。
2，糖尿病燙傷性潰瘍模型：
取1中的大鼠用戊巴比妥納45mg/kg腹腔注射麻醉，背部用脫毛劑脫毛，用燙傷儀在背部燙出直徑為1.8cm的深I(lǐng)I度燙傷創(chuàng)面，燙傷條件為：燙頭溫度85℃；壓力0.5kg時(shí)間為10秒。創(chuàng)面暴露不包扎，編號(hào)后單籠飼養(yǎng)。
3，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：
第一組：生理鹽水
第二組：對(duì)比例1凝膠劑
第三組：對(duì)比例2凝膠劑
第四組：對(duì)比例3凝膠劑
第五組：制備例4凝膠劑
第六組：制備例3凝膠劑
第七組：制備例2凝膠劑
每組均由5只小鼠組成，每日給藥1次，連續(xù)給藥18天。創(chuàng)面形成后當(dāng)天開(kāi)始治療，治療前用雙氧水、生理鹽水沖洗傷口并用碘伏消毒創(chuàng)面，然后用給相應(yīng)藥物0.2ml并用棉簽涂均勻。
4，測(cè)定對(duì)燙傷性損傷的治療作用：
所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從創(chuàng)面形成當(dāng)天到治療結(jié)束，傷口表面干燥無(wú)滲出，無(wú)化膿潰爛現(xiàn)象，從表1可以看出，載藥凝膠劑對(duì)II型糖尿病SD大鼠燙傷性皮膚損傷均有較好的治療效果，從創(chuàng)面形成(0天)后開(kāi)始，隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)，各組傷口面積均逐漸縮小，并呈劑量依賴(lài)性。
表1，本申請(qǐng)凝膠劑對(duì)II型糖尿病SD大鼠皮膚燙傷性損傷的治療作用（mean±SD）
實(shí)驗(yàn)二、對(duì)外傷導(dǎo)致的皮膚損傷的治療作用
1，動(dòng)物模型制備
選用體重180-220g的雄性SD大鼠，用戊巴比妥納45mg／kg腹腔注射麻醉，背部用脫毛劑脫毛，在背部左右兩側(cè)各做一個(gè)直徑1．8cm圓形標(biāo)記，用碘伏皮膚消毒后沿標(biāo)記線將全層皮膚切除，形成面積約2．45cm2的新鮮創(chuàng)面。創(chuàng)面按壓止血，暴露治療，編號(hào)并單籠飼養(yǎng)，給普通鼠糧自由攝取。
2，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：
第一組：生理鹽水
第二組：對(duì)比例1凝膠劑
第三組：對(duì)比例2凝膠劑
第四組：對(duì)比例3凝膠劑
第五組：制備例4凝膠劑
第六組：制備例3凝膠劑
第七組：制備例2凝膠劑
每組均由5只小鼠組成，每日給藥1次，連續(xù)給藥14天。創(chuàng)面形成后當(dāng)天開(kāi)始治療，治療前用雙氧水、生理鹽水沖洗傷口并用碘伏消毒創(chuàng)面，然后用給相應(yīng)藥物0.2ml并用棉簽涂均勻。
3，測(cè)定對(duì)創(chuàng)傷性損傷的治療作用
所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物從創(chuàng)面形成當(dāng)天到治療結(jié)束，傷口表面干燥無(wú)滲出，無(wú)化膿潰爛現(xiàn)象，從表2可以看出，載藥凝膠劑對(duì)SD大鼠創(chuàng)傷性皮膚損傷均有較好的治療效果，從創(chuàng)面形成(0天)后開(kāi)始，隨著治療時(shí)間的延長(zhǎng)，各組傷口面積均逐漸縮小，并呈劑量依賴(lài)性。
表2，本申請(qǐng)凝膠劑對(duì)SD大鼠皮膚創(chuàng)傷性損傷的治療作用（mean±SD）