本發明涉及一種降血糖膠囊，具體涉及一種蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊、其制備方法及用途。
背景技術：
糖尿病是一種代謝紊亂性疾病，其主要特征是由胰島素分泌和胰島素作用缺陷誘導的葡萄糖代謝受損，從而導致葡萄糖穩態的失衡。根據是否依賴胰島素分為I型糖尿病和II型糖尿病。II糖尿病的主要特征是胰島素依賴型組織對胰島素的生物學效應減弱又稱為“胰島素抵抗”以及胰島β細胞缺陷造成患者空腹及餐后高血糖。據統計，2000年全球糖尿病患者將近1.5億(我國約占20％)。隨著人們生活水平的不斷提高，肥胖和糖尿病的發病率逐年增加。最新的流行病學調查顯示，2010年中國成年人的糖尿病發病率高達11.6％，其中有90％以上為非胰島素依賴的II型糖尿病。
目前市場和臨床上通常采用長期注射胰島素及其類似物等化學合成藥物的方法來維持患者體內血糖水平，不僅容易引起永久性神經損傷、低血糖癥、乳酸中毒、特殊肝細胞損傷等后遺癥還大大增加患者經濟負擔。而中藥制劑和天然的水提物在數百年的糖尿病治療史中被證明有確切的療效，其不僅能提高患者生活質量還能延緩并發癥的發展。近年來，越來越多的研究集中在開發預防和減少血糖異常誘發的并發癥等的天然降血糖藥物。
蝙蝠蛾擬青霉(Paccilomyces hepiali)，是從野生冬蟲夏草子座分離出來的具有與冬蟲夏草高度相似的指紋圖譜的蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉株。蝙蝠蛾擬青霉中含有多種甾醇類物質和大量的脂肪酸，具有抗腫瘤、免疫調節、抗疲勞和耐缺氧等生物活性。但是關于其降血糖活性尚無相關研究。
技術實現要素：
針對現有技術中存在的上述不足，本發明所要解決的技術問題是提供一種安全有效的降血糖膠囊。
本發明目的是通過如下技術方案實現的：
一種蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊，其原料包括如下組分：蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉200～300g，五味子270～410g，人參240～360g。
優選的，所述蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊，其原料包括如下組分：蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉250g，五味子340g，人參300g。
本發明還提供了所述的蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊的制備方法，其包括以下步驟：
(1)按配比稱取人參、五味子，凈制后加入5-6L質量分數為75％的乙醇回流提取2次，每次1～2小時，過濾提取液棄去藥渣，合并濾液后進行減壓蒸發，回收乙醇并將濾液濃縮至相對密度為1.30～1.35g/cm3(60℃)的浸膏，減壓干燥后得到干膏，粉碎后過80目篩，得到干膏粉；
(2)按配比稱取蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉，凈制后與步驟(1)得到的干膏粉混合均勻，用質量分數為85％的乙醇潤濕制軟材，制粒，55-60℃干燥，整粒，得到0.3g/粒的蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊裝入膠囊殼。
優選的，
步驟(1)所述減壓蒸發的條件為-0.065～-0.075MPa，65℃；
步驟(1)所述減壓干燥的條件為-0.085Mpa，65℃；
步驟(2)所述制粒為16目篩制粒，所述整粒為14目篩整粒；
步驟(2)所述膠囊殼為0#膠囊殼。
本發明還提供了所述蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊在制備降血糖藥物或保健品中的應用。
本發明所述的蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊降糖效果極佳，且安全有效、無副作用。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明做進一步的說明，以下所述，僅是對本發明的較佳實施例而已，并非對本發明做其他形式的限制，任何熟悉本專業的技術人員可能利用上述揭示的技術內容加以變更為同等變化的等效實施例。凡是未脫離本發明方案內容，依據本發明的技術實質對以下實施例所做的任何簡單修改或等同變化，均落在本發明的保護范圍內。
實施例中用到的藥品及儀器如下：
蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉，購買自青海珠峰冬蟲夏草原料有限公司，批號：ZF0116F002。
鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)購于Sigma-Aldrich公司，格列苯脲購自河南羚銳制藥股份有限公司，DMEM高糖培養基購自Gibco，胎牛血清購自四季青，胰蛋白酶和雙抗(青霉素、鏈霉素)均購自Solarbio，DCFH-DA購自Sigma，生化試劑均為國產分析純試劑，購買自國藥集團。
實驗檢測試劑盒：小鼠甘油三酯、膽固醇試劑盒購買自上海源葉生物試劑有限公司。
試驗小鼠為4周齡C57BL/6j小鼠，雄性，體重18～22g。合格證號為SCXK-(吉)2015-0001，由長春生物制品研究所提供。
儀器：GSY-II恒溫水浴鍋(北京市醫療設備廠)；GENESIS SQ 25ES型冷凍干燥機(美國)；SMF-320A多級閃蒸器(河南金鼎科技公司)SYNERGY4酶標儀(Biotek美國伯騰)。
實施例1
實施例1的蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊由如下方法制備得到：
(1)稱取人參300g、五味子340g，凈制后加入5L質量分數為75％的乙醇回流提取2次，每次2小時，過濾提取液棄去藥渣，合并濾液后在-0.065MPa，65℃下進行減壓蒸發，回收乙醇并將濾液濃縮至相對密度為1.30～1.35g/cm3(60℃)的浸膏，在-0.085Mpa，65℃下減壓干燥后得到干膏，粉碎后過80目篩，得到干膏粉；
(2)稱取250g蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉，凈制后與步驟(1)得到的干膏粉混合均勻，用質量分數為85％的乙醇潤濕制軟材，16目篩制粒，55℃干燥，14目篩整粒，得到0.3g/粒的蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊裝入0#膠囊殼。
實施例2
實施例2的降血糖膠囊由如下方法制備而成：
(1)制備人參水提物：將300g人參粉碎成細粉，加入去離子水，料液比1:60g/ml，在85℃下加熱提取3次，每次3小時，1500rpm離心10min，過濾后用多級閃蒸器將濾液濃縮，凍干，即得人參水提物；
(2)制備五味子水提物：將340g五味子粉碎成細粉，加入去離子水，料液比1:60g/ml，在85℃下加熱提取3次，每次3小時，1500rpm離心10min，過濾后用多級閃蒸器將濾液濃縮，凍干，即得五味子水提物；
(3)制備蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉水提物：將250g蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉浸入去離子水中，料液比1:60g/ml，在85℃下加熱提取3次，每次3小時，1500rpm離心10min，過濾后用多級閃蒸器將濾液濃縮，凍干，即得蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉水提物；
(4)將得到的人參水提物、五味子水提物、蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉水提物混合均勻，用質量分數為85％的乙醇潤濕制軟材，16目篩制粒，55-60℃干燥，14目篩整粒，得到0.3g/粒的降血糖膠囊裝入0#膠囊殼。
實施例3
實施例3的降血糖膠囊由如下方法制備而成：
(1)制備人參水提物：將300g人參粉碎成細粉，加入去離子水，料液比1:60g/ml，在85℃下加熱提取3次，每次3小時，1500rpm離心10min，過濾后用多級閃蒸器將濾液濃縮，凍干，即得人參水提物；
(2)制備五味子水提物：將340g五味子粉碎成細粉，加入去離子水，料液比1:60g/ml，在85℃下加熱提取3次，每次3小時，1500rpm離心10min，過濾后用多級閃蒸器將濾液濃縮，凍干，即得五味子水提物；
(3)稱取250g蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉，凈制后與人參水提物、五味子水提物、蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉水提物混合均勻，用質量分數為85％的乙醇潤濕制軟材，16目篩制粒，55-60℃干燥，14目篩整粒，得到0.3g/粒的蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉降血糖膠囊裝入0#膠囊殼。
實施例4
實施例4的降血糖膠囊由如下方法制備而成：
(1)制備人參醇提物：將300g人參粉碎成細粉，加入2.5L質量分數為75％的乙醇回流提取2次，每次2小時，過濾提取液棄去藥渣，合并濾液后在-0.065～-0.075MPa，65℃下進行減壓蒸發，回收乙醇并將濾液濃縮至相對密度為1.30～1.35g/cm3(60℃)的浸膏，在-0.085Mpa，65℃下減壓干燥后得到干膏，粉碎后過80目篩，得到人參醇提物；
(2)制備五味子醇提物：將340g五味子粉碎成細粉，加入2.5L質量分數為75％的乙醇回流提取2次，每次2小時，過濾提取液棄去藥渣，合并濾液后在-0.065～-0.075MPa，65℃下進行減壓蒸發，回收乙醇并將濾液濃縮至相對密度為1.30～1.35g/cm3(60℃)的浸膏，在-0.085Mpa，65℃下減壓干燥后得到干膏，粉碎后過80目篩，得到五味子醇提物；
(3)制備蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉醇提物：將250g人參粉碎成細粉，加入2.5L質量分數為75％的乙醇回流提取2次，每次2小時，過濾提取液棄去藥渣，合并濾液后在-0.065～-0.075MPa，65℃下進行減壓蒸發，回收乙醇并將濾液濃縮至相對密度為1.30～1.35g/cm3(60℃)的浸膏，在-0.085Mpa，65℃下減壓干燥后得到干膏，粉碎后過80目篩，得蝙蝠蛾被毛孢菌絲粉醇提物；
(4)將得到的人參醇提物、五味子醇提物、蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉醇提物混合均勻，用質量分數為85％的乙醇潤濕制軟材，16目篩制粒，55-60℃干燥，14目篩整粒，得到0.3g/粒的降血糖膠囊裝入0#膠囊殼。
對比例1
對比例1的降血糖膠囊由如下方法制備得到：
(1)稱取人參640g，凈制后加入5-6L質量分數為75％的乙醇回流提取2次，每次1～2小時，過濾提取液棄去藥渣，合并濾液后在-0.065～-0.075MPa，65℃下進行減壓蒸發，回收乙醇并將濾液濃縮至相對密度為1.30～1.35g/cm3(60℃)的浸膏，在-0.085Mpa，65℃下減壓干燥后得到干膏，粉碎后過80目篩，得到干膏粉；
(2)稱取250g蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉，凈制后與步驟(1)得到的干膏粉混合均勻，用質量分數為85％的乙醇潤濕制軟材，16目篩制粒，55-60℃干燥，14目篩整粒，得到0.3g/粒的降血糖膠囊裝入0#膠囊殼。
對比例2
對比例2的降血糖膠囊由如下方法制備得到：
(1)稱取五味子640g，凈制后加入5-6L質量分數為75％的乙醇回流提取2次，每次1～2小時，過濾提取液棄去藥渣，合并濾液后在-0.065～-0.075MPa，65℃下進行減壓蒸發，回收乙醇并將濾液濃縮至相對密度為1.30～1.35g/cm3(60℃)的浸膏，在-0.085Mpa，65℃下減壓干燥后得到干膏，粉碎后過80目篩，得到干膏粉；
(2)稱取250g蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉，凈制后與步驟(1)得到的干膏粉混合均勻，用質量分數為85％的乙醇潤濕制軟材，16目篩制粒，55-60℃干燥，14目篩整粒，得到0.3g/粒的降血糖膠囊裝入0#膠囊殼。
對比例3
對比例3的降血糖膠囊由如下方法制備得到：
(1)稱取人參300g、五味子340g，凈制后加入5-6L質量分數為75％的乙醇回流提取2次，每次1～2小時，過濾提取液棄去藥渣，合并濾液后在-0.065～-0.075MPa，65℃下進行減壓蒸發，回收乙醇并將濾液濃縮至相對密度為1.30～1.35g/cm3(60℃)的浸膏，在-0.085Mpa，65℃下減壓干燥后得到干膏，粉碎后過80目篩，得到干膏粉；
(2)將步驟(1)得到的干膏粉用質量分數為85％的乙醇潤濕制軟材，16目篩制粒，55-60℃干燥，14目篩整粒，得到0.3g/粒的降血糖膠囊裝入0#膠囊殼。
對比例4
對比例4的降血糖膠囊由如下方法制備得到：
稱取250g蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉，用質量分數為85％的乙醇潤濕制軟材，16目篩制粒，55-60℃干燥，14目篩整粒，得到0.3g/粒的降血糖膠囊裝入0#膠囊殼。
測試例1 對STZ誘導的II型糖尿病小鼠的降血糖試驗
對實施例1-4及對比例1-4制得的降血糖膠囊的降血糖效果進行測試。
C57BL/6j小鼠于第0天腹腔注射120mg/kg STZ建糖尿病模型(STZ溶于0.11mol/L、pH 4.2的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液中，現配現用，冰浴保存)，測試空腹血糖，根據建模結果將成功建模的糖尿病小鼠分為10組，每組10只，每組平均血糖值在18.00～19.00mmol/L。這10組分別為4個實施例組、4個對比例組、1個陽性對照組、1個陰性對照組。同時設置一組健康對照組，即未經過STZ建模的健康小鼠，10只。之后，小鼠每天灌胃一次治療20天，陽性對照組每天給予0.2mg/kg格列苯脲(Glibenclamide，GLI)；實施例1-2組和對比例1-4組分別給予4g/kg的降血糖膠囊(給藥劑量均按照去掉膠囊殼后的重量計算)。陰性對照組和健康對照組不給藥。每天觀察小鼠的一般狀況，于第0，10和20天記錄小鼠空腹血糖，于第20天測定。取血前小鼠禁食、自由采水24h，眼內靜脈叢取抗凝血，靜置25min后4000rpm離心10min以獲得血清。依據試劑盒說明，測定小鼠血清中甘油三酯和膽固醇的水平。結果見表1-2。
表1 各組小鼠空腹血糖測定結果(平均值±SD，n＝10)
表2 各組小鼠甘油三酯和膽固醇水平(平均值±SD，n＝10)
由實驗結果可見，與陰性對照組相比較，本發明所得到的降血糖膠囊可以顯著降低小鼠的血糖水平，降低甘油三酯水平，降低膽固醇水平。基本與陽性對照組相當，甚至按照實施例1所述的制備方法，其效果要優于陽性對照組。
實施例1與實施例2-4相比較，在使用相同原料的情況下，實施例1將醇提法制得的人參提取物和五味子提取物與不經處理的蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉直接制粒得到膠囊，其降血糖效果要優于其他制備方法得到的膠囊(實施例2-4)；使用醇提法得到的膠囊(實施例1和4)降糖效果要優于水提法得到的膠囊(實施例2和3)；蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉不經處理直接與人參醇提物和五味子醇提物混合制得的膠囊(實施例1)，其降糖效果要優于將蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉醇提后與人參醇提物和五味子醇提物混合制得的膠囊(實施例4)。可見，其制備方法對于藥物的最終活性具有較大影響。
實施例1-4與對比例1-4相比較，同時含有人參醇提物、五味子醇提物及蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉的降血糖膠囊，其效果明顯優于省略其中任意一種原料制得的降血糖膠囊，可見幾種中藥成分相互配合，起到了協同增效的降血糖效果。尤其是與對比例3相比較，對比例3中僅使用人參醇提物和五味子醇提物制得降血糖膠囊，未使用蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉，其降血糖效果很差，可見蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉在降血糖方面起到了至關重要的作用。