本發明屬于藥物技術領域，具體涉及單克隆抗體c11c1在制備治療內毒素血癥的藥物中的應用。

背景技術：

內毒素或稱脂多糖（lipopolysaccharide，lps）是革蘭氏陰性菌細胞壁的主要組成成分之一，具有很強的致炎作用。當機體受到創傷感染，革蘭氏陰性菌侵入血循環并生長繁殖時，產生的內毒素形成內毒素血癥，其臨床表現為發燒、心動過速、血壓下降、呼吸急促和白細胞增多。內毒素激活炎癥細胞釋放炎癥介質，導致全身炎癥反應綜合征(sirs)、多器官功能不全綜合征(mops)甚至多臟器功能衰竭(mof)，進而危害生命。目前內毒素血癥的病理生理過程和發病機制仍然不清楚，缺乏有效的治療措施。面臨這一嚴重迫境，科學家的共識和挑戰是如何確立新的靶點和建立新的干預途徑。顯然，充分闡明革蘭氏陰性細菌及其表面脂多糖與宿主蛋白之間的相互作用，已成為目前亟待解決的關鍵問題，這一問題的解決對于認識內毒素血癥的發病機理，建立有效的新的靶向預防和治療措施，從而挽救人類生命，具有極其重要的臨床意義。

技術實現要素：

本發明公開了單克隆抗體c11c1在制備治療內毒素血癥的藥物中的應用，可作為新的干預內毒素血癥的途徑，為控制內毒素血癥確立新靶點和新策略，在治療內毒素血癥的潛在價值。

為達到上述發明目的，本發明采用如下技術方案：

單克隆抗體c11c1在制備治療內毒素血癥的藥物中的應用。

單克隆抗體c11c1在cam實驗中能夠抑制fgf22或vegf誘導的新血管的形成，本發明首次公開單克隆抗體c11c1在制備治療內毒素血癥的藥物中的應用。

血漿高分子量激肽原（highmolecularweightkininogen，hk）由重鏈、含緩激肽(bk)肽段和輕鏈三部分組成。重鏈包括第1～3功能域，bk組成部分居于第4功能域，輕鏈包括第5、6二個功能域。單克隆抗體c11c1識別hk上第5個結構域，有效抑制hk結合到內皮細胞上；c11c1也降低hk的促凝活性，無論是人血漿還是小鼠血漿，加入c11c1后血漿上清中hk與lps的結合，與加入igg組相比，明顯增加，說明c11c1抑制血漿中hk與lps的結合，從而抑制脂多糖結合蛋白的生成；c11c1在體內與hk結合后，從而阻斷了hk與lps的結合，對lps所造成的死亡具有保護作用。

本發明還公開了單克隆抗體c11c1在制備抑制血漿高分子量激肽原與內毒素結合藥物中的應用。

本發明還公開了單克隆抗體c11c1在制備治療內毒素導致的肺損傷藥物中的應用。

本發明還公開了一種治療內毒素血癥的藥物，包括單克隆抗體c11c1；還可以包括常規藥用輔料；所述常規藥用輔料包括（但不限于）ph調節劑、滲透壓調節劑、增溶劑、助溶劑、乳化劑、穩定劑、防腐劑、賦形劑、填充劑、崩解劑、粘合劑、矯味劑、矯嗅劑和潤滑劑。所述藥物組合物可以通過注射給藥、鼻腔給藥、肺部給藥、透皮給藥、口服給藥等多種方式施用于患者。

本發明還公開了一種治療內毒素血癥的藥物的制備方法，將單克隆抗體c11c1與常規藥用輔料混合得到。

本發明首次公開了單克隆抗體c11c1在制備治療內毒素血癥的藥物中的應用，c11c1抑制血漿中hk與lps的結合，從而抑制脂多糖結合蛋白的生成；c11c1在體內與hk結合后，從而阻斷了hk與lps的結合，對lps所造成的死亡具有保護作用；可作為新的干預內毒素血癥的途徑，為控制內毒素血癥確立新靶點和新策略，在治療內毒素血癥的潛在價值。

附圖說明

圖1是單克隆抗體c11c1的鑒定結果圖；

圖2是人血漿中hk與lps的結合結果圖；

圖3是小鼠血漿中hk與lps的結合結果圖；

圖4是小鼠生存率結果圖；

圖5是血漿中lps濃度結果圖；

圖6是血漿中主要炎癥因子的含量結果圖；

圖7是小鼠肺組織的病變程度結果圖；

圖8是小鼠肺泡灌洗液中細胞數和蛋白含量以及肺泡髓過氧化物酶結果圖。

具體實施方式

實施例一

附圖1為單克隆抗體c11c1的鑒定結果圖，c11c1識別hk上第5個結構域。在體外檢測c11c1能否抑制血漿中hk與lps的結合。血漿與c11c1或igg孵育后，再與lps-polymyxinb孵育，檢測polymyxinbbeads和上清血漿中hk與lps的結合情況。附圖2、附圖3分別是人血漿、小鼠血漿中hk與lps的結合結果圖；如圖所示，無論是人血漿還是小鼠血漿，加入c11c1后血漿上清中hk與lps的結合，與加入igg組相比，明顯增加；這些結果提示c11c1抑制血漿中hk與lps的結合。

研究c11c1能否改善lps所導致的小鼠死亡，在野生型小鼠注射lps（25mg/kg）前后，分別注射4次c11c1（500μg/mouse）或pbs，觀察兩組小鼠的生存率，附圖4為小鼠生存率結果圖；結果發現，注射c11c1的小鼠，其生存率與注射pbs相比明顯提高，這一結果提示，c11c1在體內與hk結合后，從而阻斷了hk與lps的結合，對lps所造成的死亡具有保護作用。

上述結果提示，c11c1在體內與hk結合后，從而阻斷了hk與lps的結合，為了驗證，從體內檢測c11c1是否能影響lps的代謝。在野生型小鼠注射lps（5mg/kg）前后，分別注射4次c11c1（500μg/mouse）或pbs，在不同時間點取血，檢測血漿中lps濃度，結果見圖5。如圖所示，與pbs組小鼠相比，c11c1組小鼠血漿中lps濃度顯著降低，提示c11c1可以通過阻斷血漿中hk與lps的結合，增加lps清除率，降低其血漿中lps局部濃度。研究c11c1是否會影響血漿中主要炎癥因子的水平，比較pbs組小鼠和c11c1組小鼠在腹腔內注射lps后，血漿中主要炎癥因子的含量，見附圖6，如圖所示，與pbs組小鼠相比，c11c1組小鼠血漿中tnf-α，il-1β的水平明顯降低，說明在lps導致的炎癥反應中，c11c1顯著抑制血漿中主要炎癥因子的水平。c11c1緩解內毒素所致急性肺損傷；對小鼠肺組織進行he染色和掃描電鏡，觀察肺組織的病變程度，結果為附圖7，如圖所示，pbs組小鼠的肺組織間質增生明顯，纖維細胞增多，炎性細胞浸潤明顯，血管擴張，提示炎性較強，而c11c1組小鼠肺損傷明顯改善。如圖所示，在掃描電鏡中可以看出，pbs組小鼠的肺組織具有明顯損傷，喪失典型的肺泡結構，纖維蛋白大量沉積，而c11c1組小鼠的肺損傷得到一定程度的緩解。此外，還檢測了肺泡灌洗液中細胞數和蛋白含量，以及肺泡髓過氧化物酶，結果見附圖8，如圖所示，與pbs組相比，c11c1組小鼠肺泡灌洗液中總蛋白和細胞數都明顯減少，同時，c11c1組小鼠肺泡髓過氧化物酶活性也有明顯的降低。以上結果說明c11c1可以改善內毒素所導致的急性肺損傷。

技術特征：

技術總結
本發明屬于藥物技術領域，具體涉及單克隆抗體C11C1在制備治療內毒素血癥的藥物中的應用。本發明首次公開了單克隆抗體C11C1在制備治療內毒素血癥的藥物中的應用，C11C1抑制血漿中HK與LPS的結合，從而抑制脂多糖結合蛋白的生成；C11C1在體內與HK結合后，從而阻斷了HK與LPS的結合，對LPS所造成的死亡具有保護作用；可作為新的干預內毒素血癥的途徑，為控制內毒素血癥確立新靶點和新策略，在治療內毒素血癥具備潛在價值。

技術研發人員：武藝;陽艾珍;謝展利;王波
受保護的技術使用者：蘇州大學
技術研發日：2017.04.17
技術公布日：2017.08.29