專利名稱：α-氨基-N-羥基-乙酰胺衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及α-氨基乙酰異羥肟酸衍生物、其制備方法、含有所說衍生物的藥物組合物、這種異羥肟酸衍生物作為藥劑的用途以及通過單獨(dú)使用或與一種或多種其它治療劑聯(lián)合使用所說的衍生物來治療由降解基質(zhì)的金屬蛋白酶(MMP)介導(dǎo)的病況或疾病、特別是過度增生性疾病的方法。
本發(fā)明具體說涉及下式I的α-氨基-N-羥基-乙酰胺衍生物或其鹽， 其中R是二-低級(jí)烷基氨基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，m表示1至10且包括10的整數(shù)，并且n表示0至10且包括10的整數(shù)。
優(yōu)選，基團(tuán)R或環(huán)丙基甲氧基位于各自相應(yīng)苯環(huán)的第4位。更優(yōu)選，這兩個(gè)基團(tuán)都位于各自相應(yīng)苯環(huán)的第4位。
本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R是二甲基氨基或[1，2，3]三唑-2-基。
n優(yōu)選是1至4之間的整數(shù)，更優(yōu)選n是1。
m優(yōu)選是1至5之間的整數(shù)。更優(yōu)選m是1、2或3并且首選m是1。
除非另有說明，在本發(fā)明的公開內(nèi)容中，命名為“低級(jí)”的有機(jī)基團(tuán)含有不超過7個(gè)、優(yōu)選不超過4個(gè)的碳原子。
低級(jí)烷基是支鏈或直鏈的并且含有1至7個(gè)碳原子，優(yōu)選1至4個(gè)碳原子，更優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)碳原子，并且例如，表示甲基或乙基。
鹽主要是酸加成鹽，例如，無機(jī)酸如鹽酸的加成鹽。
式I化合物具有有價(jià)值的藥理學(xué)特性。具體說，它們是MMP，特別是MT1-MMP、MMP-2和MMP-9的選擇性抑制劑，并且可用于治療MMP所介導(dǎo)的病況、特別是上述所列的病況。
降解基質(zhì)的金屬蛋白酶(MMP)這一酶家族中的各個(gè)成員，例如，明膠酶、基質(zhì)溶素和膠原酶涉及各種生物學(xué)過程，例如組織基質(zhì)降解(例如，膠原萎陷)和很多病理學(xué)病況，包括異常結(jié)締組織和基底膜基質(zhì)代謝，例如，關(guān)節(jié)炎(例如，骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)、組織潰瘍(例如，角膜、表皮和胃潰瘍)、異常傷口愈合、牙周疾病、骨疾病(例如，佩吉特氏疾病和骨質(zhì)疏松癥)、腫瘤轉(zhuǎn)移或侵入、牛皮癬以及HIV-感染(J.Leuk.Biol.52(2)244-248，1992)、動(dòng)脈粥樣硬化、血管成形術(shù)中的心室擴(kuò)張和再狹窄。
巨噬細(xì)胞金屬彈性蛋白酶是另一種降解基質(zhì)的金屬蛋白酶，其參與彈性蛋白的降解并且與諸如肺病，例如肺氣腫和COPD(慢性阻塞性肺病)等病理學(xué)病況有牽連。
選擇性通常是藥理活性化合物的一個(gè)有利特點(diǎn)，因?yàn)楹羞x擇性化合物的藥物比含具較小選擇性的化合物的藥物，其副作用要小。由于MMP家族由數(shù)種參與不同生物學(xué)過程的不同酶組成，因而可能期望具有針對(duì)單獨(dú)MMP或MMP酶家族的單個(gè)亞組的選擇性抑制劑。
式I化合物及其可藥用鹽特別適合用作MT1-MMP(1膜型基質(zhì)金屬蛋白酶)、MMP2(明膠酶A)和MMP9(明膠酶B)的抑制劑。
據(jù)報(bào)道，很多肽可以與病理學(xué)過程或疾病中所牽涉的生物物質(zhì)，諸如酶、細(xì)胞或受體相互作用。肽的缺陷是在生理學(xué)條件下、特別是在溫血?jiǎng)游镅夯蛭覆康纳韺W(xué)條件下容易水解。式I化合物的優(yōu)點(diǎn)是它不是肽。
有益效果可以在本領(lǐng)域通常已知的藥理學(xué)測(cè)試中進(jìn)行評(píng)價(jià)，并且在本文中作舉例說明。
上述特性可以在體外和體內(nèi)測(cè)試中得到驗(yàn)證，有利的是，在這些測(cè)試中使用哺乳動(dòng)物，例如，大鼠、豚鼠、狗、兔或分離的器官和組織以及哺乳動(dòng)物的酶制品。體外劑量的范圍可以是約10-5摩爾至10-10摩爾濃度。體內(nèi)劑量范圍，取決于給藥途徑，可以是約0.1至100mg/kg。
抗炎活性可以在本領(lǐng)域公知的標(biāo)準(zhǔn)炎性和關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型中測(cè)定，例如，大鼠的佐劑性關(guān)節(jié)炎模型和膠原II誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎模型(Mediatorsof Inflam.1，273-279(1992))。
測(cè)定對(duì)基質(zhì)溶素活性的抑制效果的一種測(cè)試方法是基于基質(zhì)溶素對(duì)P物質(zhì)的水解，其使用了Harrison等，Anal.Biochem.180，110-113(1989)的改良方法。在此試驗(yàn)中，將P物質(zhì)通過重組人基質(zhì)溶素水解，產(chǎn)生片段P物質(zhì)7-11，其可以通過HPLC來定量。在一個(gè)典型的試驗(yàn)中，將待測(cè)化合物的10mM儲(chǔ)備溶液在試驗(yàn)用緩沖劑中稀釋至50mM，與8mg重組人基質(zhì)溶素(摩爾重量45-47kDa，2單位；其中1單位在30分鐘內(nèi)產(chǎn)生20毫摩爾的P物質(zhì)7-11)1∶1混合，并且與0.5mM P物質(zhì)一起以0.125mL的最終體積于37℃下保溫30分鐘。通過添加10mM EDTA將反應(yīng)停止，并且在RP-8 HPLC上定量測(cè)定P物質(zhì)7-11。從不含抑制劑的對(duì)照反應(yīng)中計(jì)算基質(zhì)溶素活性抑制的IC50和Ki。
巨噬細(xì)胞金屬彈性蛋白酶(MME)抑制活性可以通過測(cè)定截短的重組小鼠巨噬細(xì)胞金屬彈性蛋白酶對(duì)[3H]-彈性蛋白降解時(shí)所受到的抑制來確定，具體如下所述將約2ng通過Q-Sepharose柱色譜法純化的重組截短小鼠巨噬細(xì)胞金屬彈性蛋白酶(FASEB雜志，Vol.8，A151，1994)，與期望濃度的測(cè)試化合物在5nMCaCl2、400nM NaCl、[3H]彈性蛋白(60,000cpm/管)和20m0MTris(pH 8.0)的存在下于37℃下保溫過夜。將樣品在微量離心機(jī)中于12,000rpm下旋轉(zhuǎn)15分鐘。將上清液的一份等分試樣在閃爍計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)，以便測(cè)定被降解的[3H]彈性蛋白的量。從一系列濃度的測(cè)試化合物和獲得的酶活性的抑制百分比確定IC50。
式I化合物對(duì)MT1-MMP、MMP1(膠原酶1)和MMP2(明膠酶A)的抑制活性可以如下測(cè)定在100％DMSO中，制備底物(MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2，C.G.Knight等，F(xiàn)EBS lett.，296，263-266，(1992))的濃度為1.0mM的儲(chǔ)備溶液。在100％DMSO中制備抑制劑的儲(chǔ)備溶液。將抑制劑從在100％DMSO中的溶液稀釋成試樣，而對(duì)照用等體積的DMSO替代，使所有試驗(yàn)中來自抑制劑和底物稀釋液的最終DMSO濃度是6.0％。在含6.0％DMSO的試驗(yàn)用緩沖劑(150mM NaCl，10mM CaCl2，50mMTris-ClpH7.5，0.05％Brij-35)中，在將底物和抑制劑稀釋于其中之后，進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)中所用的底物濃度是10μM。測(cè)試在37℃下進(jìn)行。使用320nm的激發(fā)波長和340nm的發(fā)射波長來監(jiān)測(cè)熒光變化。將反應(yīng)混合物一式兩份地添加到96孔microfluor平板的適宜孔中。將反應(yīng)混合物與抑制劑一起預(yù)保溫30min，通過添加MMP酶來使反應(yīng)開始，并且測(cè)定熒光強(qiáng)度10min。選擇位于曲線線性部分上的時(shí)間點(diǎn)來測(cè)定活性。抑制結(jié)果按對(duì)對(duì)照(未抑制的)反應(yīng)中的活性產(chǎn)生50％抑制(IC50)時(shí)的抑制劑濃度來表示。在此測(cè)試中，式I化合物及其可藥用鹽對(duì)MMP2的IC50抑制濃度[μmol/升]為0.0001-0.030，通常是0.0002-0.010，并且對(duì)MT1-MMP的IC50抑制濃度[μmol/升]為0.0005-0.125，通常是0.001-0.05。式I化合物對(duì)MMP1(膠原酶1)的IC50抑制濃度比對(duì)MT1-MMP的IC50高最多1000倍，通常是高約40-倍至400-倍。式I化合物對(duì)MMP1的IC50抑制濃度比對(duì)MMP2的IC50高最多2000倍，對(duì)大部分的式I化合物來說，高約100倍至1000倍。
上述測(cè)試中所用的酶如下制備MT1-MMP質(zhì)粒將編碼全長人MT1-MMP基因的cDNA片段的催化域[H.Sato等Nature(倫敦)，37061-65，1994]]通過聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增，使用如下的引物CTCCATATGTACGCCATCCAGGGTCTCAA用作有義引物，該引物在ATG起始密碼子的5′-末端處包括一NdeI位點(diǎn)；以及CTCGGATCCTCACCCAT AAAGTTGCTGGAT-GCC用作反義引物，其具有BamHI位點(diǎn)和一個(gè)TGA終止密碼子(1)。將所得的519-bp片段的PCR產(chǎn)物亞克隆在pET11a(Stratagene)的NdeI和BamHI獨(dú)特位點(diǎn)之間。通過ABI PRISMTM染料終止循環(huán)測(cè)序試劑盒，用ABI PRISMTM 377DNA測(cè)序儀(Perkin Elmer)，驗(yàn)證MT1-MMP的催化域(CD-MT1-MMP)的序列。
表達(dá)和純化使用此亞克隆化的CD-MT1-MMP轉(zhuǎn)染大腸桿菌(E.coli)菌株BL21[DE3](Hanahan，D.J.Mol.Biol.1983；166(4)557-80)并且以不溶性包含體物質(zhì)的形式表達(dá)。將轉(zhuǎn)染子在37℃下于50mlLuria-Bertani(LB)培養(yǎng)基中在50g/ml氨芐青霉素的存在下生長至細(xì)胞密度為OD600＝0.6-1.0，并且用1mM異丙基-1-D-吡喃半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)CD-MT1-MMP產(chǎn)生。用5mg/ml溶菌酶和10μg/ml DNase I處理后，通過使用含0.2M NaCl、1％w/v脫氧膽酸和1％v/v Nonidet P-40的去污劑緩沖液，從收獲的細(xì)胞中制備包含體。將此包含體再懸浮于由6M尿素、100mM 2-巰基乙醇和20mM Tris-Cl組成的pH8.5的增溶緩沖劑中，以達(dá)到溶解。使用10ml Q-Sepharose(Amersham Pharmacia Biotech)柱將酶純化和復(fù)性，其中所說的柱用20mM Tris-Cl(pH7.5)中的5mM CaCl2、0.02％v/v NaN3已平衡過。用三體積的相同緩沖劑洗滌之后，用兩體積線性梯度的0.5-1.0M NaCl洗脫結(jié)合蛋白。將收集的級(jí)分(各自為1ml)在平衡緩沖液中透析6h。將Superdex G200柱(1×15cm)(AmershamPharmacia)用20mM Tris-Cl(pH 7.5)、5mM CaCl2、0.02％NaN3平衡。將脫鹽樣品上Superdex G200柱并且以0.5ml/min的流速進(jìn)行色譜分析。收集1ml的級(jí)分并且通過免疫印跡法分析30ml等分試樣。將顯出最高純度的級(jí)分匯集在一起，在Amicon攪拌池中用YM2膜濃縮并且在-80℃下儲(chǔ)存。
將洗脫的蛋白質(zhì)對(duì)5mM CaCl2、0.5mM ZnSO4、20mMTris-Cl(pH7.5)的5L緩沖劑透析兩次，然后在Amicon攪拌池中用YM2膜濃縮。在這些條件下，重組蛋白保持可溶性并且正確地折疊。
MMP1(膠原酶1)質(zhì)粒通過cDNA(得自從人U937細(xì)胞(ATCC#CRL-2367)中分離的RNA)的PCR，產(chǎn)生人膠原酶的cDNA。用來產(chǎn)生此cDNA的引物是AAGAAGCTTAAGGCCAGTATGCACAGCTTTCCT和AAGGCGGCCGCA CACCTTCTTTGGACTCACACCA，對(duì)應(yīng)于報(bào)道的cDNA序列的第58-1526位核苷酸(GenBank登記號(hào)X05231)。將所得的cDNA片段亞克隆至哺乳動(dòng)物表達(dá)載體pBPV-MMT的Not I位點(diǎn)中(Matthias，P.等，J.Mol.Biol.1986，187(4)557-68)。
將C127細(xì)胞(ATCC-小鼠乳腺腫瘤細(xì)胞系)在補(bǔ)充有10％熱滅活的胎牛血清和1X抗生素-抗真菌溶液的Dulbecco改良基本培養(yǎng)基中，于37℃下在濕潤C(jī)O2保溫箱中生長。使用磷酸鈣沉淀法，對(duì)以8×105接種在100mm皿中的細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前5h，將培養(yǎng)基替換成新鮮的培養(yǎng)基。用15μg的表達(dá)載體轉(zhuǎn)染各皿。轉(zhuǎn)染后16-18h將細(xì)胞用PBS洗滌兩次，并且在生長培養(yǎng)基中保溫培養(yǎng)另外48h。然后通過與濃度為400μg/ml的新霉素相關(guān)抗生素G418一起保溫培養(yǎng)來選擇克隆。通過酶試驗(yàn)，在來自被選克隆的培養(yǎng)基中分析膠原酶表達(dá)。
表達(dá)和純化將16升的培養(yǎng)基濃縮至1.6升并且通過Wilhelm等描述的方法(Proc.Natl.Acad.Sci.(USA).1987；846725-29)分離酶。將最終的產(chǎn)物在Superose G-75(Pharmacia/LKB，Piscataway，NJ)凝膠過濾柱上進(jìn)一步純化，其中所說的柱已在含0.15M NaCl的試驗(yàn)緩沖劑中平衡過。將酶匯集在一起并且按等分試樣在-70℃下儲(chǔ)存。用1mM APMA(氨基苯基乙酸汞，ICN Pharmaceuticals)在37℃下將重組膠原酶原(43-45kDa)活化，通過對(duì)含0.15M NaCl的試驗(yàn)緩沖劑進(jìn)行大量透析來除去APMA。將活化的酶(～36-kDa)在-70℃下凍存至使用前。
MMP2(明膠酶A)質(zhì)粒由Motoharu Seiki教授(Institute of Medical Science，東京大學(xué))提供人MMP2原的cDNA。通過cDNA(得自從人HT1080細(xì)胞(ATCC#CCL121)中分離的RNA)的PCR，產(chǎn)生編碼全長人MMP2原的cDNA。產(chǎn)生此cDNA的引物是GAATTCGATGGAGGCG CTAATGGCCCGG和CTCGAGT CAGCAGCCTAGCCAGTCGGATTTGAT，對(duì)應(yīng)于報(bào)道的全長人MMP2原的cDNA序列(GenBank登記號(hào)J03210)。將所得的2.0KbPCR片段克隆至pFAST BAC 1載體(pBAC-MMP2)的EcoR1/Xho 1位點(diǎn)中(I.E.Collier等，J.Biol.Chem.，2636579-6587，1988)。
表達(dá)和純化對(duì)于r-MMP2原的桿狀病毒表達(dá)，將pBAC-MMP2轉(zhuǎn)化至DH10BAC感受態(tài)細(xì)胞中，以產(chǎn)生r-MMP2原桿粒DNA。將重組桿粒DNA用Cellfectin試劑(Gibco BRL)轉(zhuǎn)染至培養(yǎng)的昆蟲細(xì)胞(Tn細(xì)胞)中。將重組桿狀病毒進(jìn)行噬斑純化至同質(zhì)，并且用來產(chǎn)生高滴度重組桿狀病毒原種。通過明膠信號(hào)識(shí)別蛋白體的受體，證實(shí)r-MMP2原的表達(dá)。
將感染桿狀病毒的Tn細(xì)胞的培養(yǎng)液離心并且通過0.22mm孔徑濾器過濾除去細(xì)胞碎片。將重組MMP2原于4℃下吸附至在25mM Tris-HCl(pH 7.5)、1M NaCl、10mM CaCl2、0.05％Briji 35的平衡緩沖劑中的明膠Sepharose 4B(Pharmacia Biotech)上。用平衡緩沖劑洗滌珠粒后，用含10％DMSO的平衡緩沖劑洗脫r-MMP2原。將酶在4℃下儲(chǔ)存直至活化前。為進(jìn)行試驗(yàn)，將此純化的MMP2原用1mM APMA在37℃下活化1hr。
MMP9(明膠酶-B)由TPA處理過的THP1人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞的培養(yǎng)基制備MMP9。將THP1細(xì)胞維持在含10％FCS的DMEM/F-12培養(yǎng)基中，并且在不含血清的培養(yǎng)基中用TPA(1nM)刺激48h以產(chǎn)生MMP9原。所有的純化過程在4℃下進(jìn)行。通過Centricon(Amicon)將1升的培養(yǎng)基濃縮至100ml并且上明膠-sepharose(Pharmacia)柱(1×8cm)，其中所說的柱用50mMTris-Cl(pH＝8.0)、300mM NaCl平衡過。將含MMP-9原的級(jí)分用存在于50mM Tris-Cl(pH＝8.0)、300mM NaCl中的10％DMSO洗脫，然后對(duì)50mM Tris-Cl(pH 7.5)、150mM NaCl透析。將級(jí)分通過Centricon濃縮并且上Sephadex G200(2×20cm)柱進(jìn)行色譜，其中所說的柱用含150mMNaCl的50mM Tris-Cl(pH＝7.5)平衡過。將純化的MMP9原以原液的形式在-80℃下儲(chǔ)存，并且使用必需量的酶原用于活化。將MMP9原用1mM氨基苯基乙酸汞(APMA，ICN Pharmaceuticals)在含150mM NaCl、10mM CaCl2和0.05％Brij-35的50mM Tris-Cl(pH＝7.5)(MMP試驗(yàn)緩沖劑)中于37℃下活化18h，并且通過對(duì)MMP試驗(yàn)緩沖劑作大量透析來除去APMA。將活化的MMP9在-80℃下凍存至使用前。
MMP9的試驗(yàn)然后，將活化的MMP-9(82kDa)用于篩選化合物。在此研究的所有MMP試驗(yàn)中，使用25μM的熒光肽，2-N-甲基氨基苯甲酸(Nma)-Gly-Pro-Gln-Gly-Leu-Ala-Gly-Gln-Lys-Nε-(2，4-二硝基-苯基)(Dnp)-NH2(Peptide Institute，Osaka，日本)作為唯一的底物。在100％DMSO中制備底物的濃度為1.0mM的儲(chǔ)備溶液。試驗(yàn)在MMP試驗(yàn)緩沖劑中進(jìn)行。將反應(yīng)混合物一式兩份地添加到96孔microfluor平板的適宜孔中并且在37℃下預(yù)保溫30min。通過添加0.5nM活化的MMP9來使反應(yīng)開始。通過溶解在100％DMSO中，制備各抑制劑的儲(chǔ)備溶液。將抑制劑從具有100％DMSO的稀釋溶液(由儲(chǔ)備溶液制備)添加到試驗(yàn)混合物中。向?qū)φ仗砑拥润w積的DMSO。來自抑制劑和底物溶液的DMSO最終濃度為5.0％。在460nm下監(jiān)測(cè)熒光的增加(在355nm下激發(fā))。選擇曲線線性部分上的時(shí)間點(diǎn)來測(cè)定活性。抑制結(jié)果按對(duì)對(duì)照反應(yīng)中的活性產(chǎn)生50％抑制(IC50)時(shí)的抑制劑濃度來表示。
式I化合物的抗腫瘤效果也可以在例如體內(nèi)轉(zhuǎn)移模型中得到證實(shí)，在所述模型中使用EGFP轉(zhuǎn)染的HT1080細(xì)胞并測(cè)定轉(zhuǎn)移至裸鼠肺部中的腫瘤細(xì)胞的熒光強(qiáng)度(其中給所說的裸鼠靜脈內(nèi)注射腫瘤細(xì)胞)或者使用B16-F10黑素瘤細(xì)胞并在將腫瘤細(xì)胞靜脈內(nèi)注射至BDF1小鼠中后測(cè)定肺部腫瘤結(jié)節(jié)。
EGFP轉(zhuǎn)染的HT1080在裸鼠的尾靜脈內(nèi)注射腫瘤細(xì)胞的混懸液[2×106個(gè)細(xì)胞/0.1ml PBS(磷酸鹽緩沖的鹽水)]。在頭一天(0天)中相對(duì)于細(xì)胞注射時(shí)間的-1hr和+5hrs時(shí)，給動(dòng)物口服施用化合物。之后，給動(dòng)物每天給藥兩次，第一次在上午9-10:30而第二次在下午5:30-7:00。化合物以在1％羧甲基纖維素(Wako，日本)中的混懸液的形式以60mg/kg每天兩次的劑量施用。給對(duì)照組只施用賦形劑。第17天時(shí)，將動(dòng)物處死后從小鼠中取出肺。將取出的肺部組織分成直徑大約為2-3mm的塊，然后在微量離心管中將大約100mg的組織懸浮于0.2ml PBS中，隨后溫和勻化并且離心。室溫下，將細(xì)胞用1ml溶胞試劑(150mM NH4Cl，0.1mMEDTA-4 Na，10mM KHCO3pH7.4)洗滌3次以便將紅細(xì)胞裂解，然后用1ml PBS洗滌2次。在最后的洗滌之后，將細(xì)胞用0.5ml的存在于PBS中的1％Triton溶胞。在15000rpm下離心5min后，將0.23ml的各上清液轉(zhuǎn)移至96孔多孔板的孔中。通過使用熒光平板讀出器(Cytoflour II)，在分別為485nm和530nm的激發(fā)和發(fā)射波長下測(cè)定熒光強(qiáng)度。使用濕肺重量將所獲得的每個(gè)肺的熒光標(biāo)準(zhǔn)化。
按照Fidler的方法研究B16-F10黑素瘤實(shí)驗(yàn)性轉(zhuǎn)移模型。通過胰蛋白酶消化收獲細(xì)胞，并且用含血清的培養(yǎng)基洗滌一次并且用冷PBS洗滌三次，然后保持在冰上。在小鼠的尾靜脈中注射腫瘤細(xì)胞的混懸液(2×105個(gè)細(xì)胞/0.1ml PBS)。在頭兩天(0、1天)中相對(duì)于細(xì)胞注射時(shí)間的-1小時(shí)、+5小時(shí)、23小時(shí)和29小時(shí)時(shí)，給動(dòng)物口服施用化合物。之后，給動(dòng)物每天上午給藥一次。化合物以在1％羧甲基纖維素(Wako，日本)中的混懸液的形式以120mg/kg的劑量施用。給對(duì)照組只施用賦形劑。第14天時(shí)，將動(dòng)物處死后從小鼠中取出肺，并且用布安氏溶液(存在于蒸餾水中的2％苦味酸∶10％甲醛中性緩沖溶液∶乙酸＝15∶5∶1)固定后，人工計(jì)算腫瘤結(jié)節(jié)的數(shù)目。
本發(fā)明化合物的抗腫瘤效果可以如下測(cè)定，例如按照本領(lǐng)域公知的方法測(cè)定在處理的Balb/c裸鼠中皮下植入的人腫瘤的生長，并與安慰劑處理的小鼠進(jìn)行比較。示例性的腫瘤為例如，雌激素依賴性人乳腺癌BT20和MCF7、人膀胱癌T24，人結(jié)腸癌Colo 205、人肺腺癌A549和人卵巢癌NIH-OVCAR3。
對(duì)腫瘤血管生成的作用可以例如在植入了丸粒狀Walker 256癌(以刺激從異組織邊緣(limbus)的血管實(shí)現(xiàn)血管發(fā)生)的大鼠中測(cè)定，如Galardy等，Cancer Res.54，4715(1994)中所述。
此外，式I化合物的抗腫瘤、特別是抗轉(zhuǎn)移活性還可以在自發(fā)轉(zhuǎn)移瘤模型中得到證實(shí)，其中大鼠乳腺腫瘤BN472被同位移植到受體大鼠中，并且轉(zhuǎn)移至肺部和局部淋巴結(jié)的瘤清晰可見。
將大約25mm3的腫瘤碎片移植在雌性Brown-Norwegian(BN)大鼠乳房的脂肪墊的下面。將式I化合物懸浮于無菌水中的1％羧甲基纖維素(CMC)中。將此制劑以30mg/kg每天一次或15mg/kg每天兩次的劑量口服施用。在帶有腫瘤的對(duì)照組和不帶腫瘤的對(duì)照組(健康大鼠)中，動(dòng)物只接受賦形劑。隨機(jī)選擇后開始治療，并且持續(xù)4周。治療4周后，通過計(jì)算用布安氏固定液固定后肺部表面上的可見病灶的數(shù)量，確定肺的轉(zhuǎn)移。在此模型中，劑量為30mg/kg每天一次或15mg/kg每天兩次的式I化合物可使肺部和局部淋巴結(jié)中轉(zhuǎn)移瘤的發(fā)生率和/或程度都有所降低。肺部轉(zhuǎn)移瘤中數(shù)或局部淋巴結(jié)重量的降低為大約25％和70％。例如，對(duì)實(shí)施例3的化合物而言，肺部病灶的中數(shù)對(duì)兩種劑量來說都是約105個(gè)，而賦形劑對(duì)照組中肺部病灶的中數(shù)為約230個(gè)。基于體重和一般健康狀況的增加，化合物表現(xiàn)出很好的耐受性。這些結(jié)果清楚地表明，式I化合物能夠降低轉(zhuǎn)移瘤，例如，由BN472大鼠乳腺癌產(chǎn)生的轉(zhuǎn)移瘤的轉(zhuǎn)移程度和/或數(shù)量。
式I化合物可以抑制基質(zhì)降解，因此非常適合用于治療對(duì)MT1-MMP、MMP2和/或MMP9酶活性的抑制有響應(yīng)的疾病。尤其可以提及的是骨質(zhì)疏松癥，以及在其過程中破骨細(xì)胞對(duì)骨的重吸收起一定作用的其它疾病，例如，腫瘤誘發(fā)的高血鈣、佩吉特氏疾病或骨轉(zhuǎn)移瘤的治療，還有關(guān)節(jié)和骨的炎癥過程及軟骨組織中的退化過程。尤其是，式I化合物可通過抑制腫瘤生長、腫瘤轉(zhuǎn)移、腫瘤增進(jìn)或侵入和/或腫瘤的血管生成，用于治療對(duì)MT1-MMP、MMP2和/或MMP9酶活性的抑制有響應(yīng)的良性或惡性腫瘤，例如乳腺、肺、膀胱、結(jié)腸、卵巢、腦和皮膚的癌。它們能夠引起腫瘤的消退和防止微轉(zhuǎn)移瘤的生長。
可以用本發(fā)明化合物治療的其它病況包括類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，骨關(guān)節(jié)炎，支氣管病癥(例如，哮喘，通過抑制彈性蛋白的降解)，動(dòng)脈粥樣硬化病(例如，通過抑制動(dòng)脈粥樣斑塊的破裂)以及急性冠心病綜合征，心臟病發(fā)作(心臟局部缺血)，休克(腦局部缺血)，血管成形術(shù)后的再狹窄，還有血管潰瘍形成、擴(kuò)張和動(dòng)脈瘤。其它可用本發(fā)明化合物治療的病況是神經(jīng)系統(tǒng)的炎性脫髓鞘病狀(其中涉及髓磷脂的破壞或損失(例如，多發(fā)性硬化))，視神經(jīng)炎，視神經(jīng)脊髓炎(德維克氏病)，彌漫性和過渡性硬化(希爾德病)和急性傳播性腦脊髓炎，還有導(dǎo)致脫髓鞘的外周神經(jīng)病，例如運(yùn)動(dòng)缺損的Landry-Guillain-Barre-Strohl綜合征；還有組織潰瘍(例如，表皮和胃潰瘍)，異常傷口愈合和牙周疾病。式I化合物還可以治療子宮內(nèi)膜異位，膿毒性休克，炎性腸疾病，局限性回腸炎，特別是腦水腫。
本發(fā)明化合物的眼部應(yīng)用包括治療眼部發(fā)炎，角膜潰瘍，翼狀胬肉，角膜炎，圓錐角膜，開角型青光眼，視網(wǎng)膜病，并且它們還可以與屈光手術(shù)(激光或切開)聯(lián)合使用以最大程度地減少不利效果。
某些金屬蛋白酶抑制劑據(jù)報(bào)導(dǎo)還可抑制腫瘤壞死因子(TNF)的產(chǎn)生和釋放，例如，TNF-α，其是炎癥的重要介體。由此，本發(fā)明的化合物是潛在的哺乳動(dòng)物的抗炎劑。
本發(fā)明化合物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化病況的效果可以通過使用來自膽固醇喂養(yǎng)的兔子的動(dòng)脈粥樣斑塊(其含有活化的基質(zhì)金屬蛋白酶)來評(píng)價(jià)，如Sukhova等，Circulation90，I 404(1994)中所述。對(duì)兔子動(dòng)脈粥樣斑塊中的基質(zhì)金屬蛋白酶活性的抑制效果可以通過原位信號(hào)識(shí)別蛋白體的受體來測(cè)定，如Galis等，J.Clin.Invest.94，2493(1994)中所述，并以斑塊破裂作為指示。
對(duì)血管動(dòng)脈瘤的效果，例如，對(duì)動(dòng)脈瘤形成的抑制，可以在諸如Apo-E轉(zhuǎn)基因小鼠和/或LDL受體剔除小鼠等實(shí)驗(yàn)性模型中測(cè)定。式I化合物可以抑制動(dòng)脈瘤的發(fā)展。
式I化合物可以單獨(dú)給藥，或者與一種或多種其它治療劑聯(lián)合給藥，聯(lián)合治療可以采用的形式有固定聯(lián)合或本發(fā)明化合物和一種或多種其它治療劑交錯(cuò)給藥或彼此獨(dú)立地給藥，或者是將一種或多種其它治療劑和固定聯(lián)合一起組合給藥。此外，式I化合物特別是還可以與化學(xué)療法、放射療法、免疫療法、手術(shù)干預(yù)或其組合相聯(lián)合用于腫瘤治療。如上所述，可以在其它治療策略的背景中作為輔助療法，而長期治療同樣是可能的。其它可能的治療有治療以維持腫瘤消退后的患者狀態(tài)，或甚至作為化學(xué)預(yù)防治療，例如，對(duì)易感患者。
可以聯(lián)合的治療劑特別是一種或多種細(xì)胞抑制化合物或細(xì)胞毒性化合物，例如，化療劑或選自以下的一些治療劑，包括但不限于聚胺生物合成抑制劑；蛋白質(zhì)激酶抑制劑，特別是絲氨酸/蘇氨酸蛋白質(zhì)激酶，例如，蛋白質(zhì)激酶C，或者酪氨酸蛋白質(zhì)激酶，例如，EGF受體酪氨酸激酶、VEGF受體酪氨酸激酶或PDGF受體酪氨酸激酶的抑制劑；細(xì)胞因子；負(fù)生長調(diào)節(jié)劑，例如，TGF-β或IFN-β；芳香酶抑制劑；SH2結(jié)構(gòu)域與磷酸化蛋白質(zhì)相互作用的抑制劑；抗雌激素；拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑；拓?fù)洚悩?gòu)酶II抑制劑；微管活性劑；烷基化劑；抗腫瘤劑；抗代謝物；鉑化合物；抗血管生成化合物；促黃體生成素釋放素激動(dòng)劑；抗雄激素；二膦酸類化合物和trastuzumab。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案尤其涉及式I的化合物及其鹽，其中R是二-低級(jí)烷基氨基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，m是1、2、3、4或5并且n是0。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案尤其涉及式I的化合物及其鹽，其中R是二-低級(jí)烷基氨基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，m是1、2、3、4或5并且n是1、2、3或4。
本發(fā)明特別涉及式I的化合物，其中R是二甲基氨基或1，2，3-三唑-2-基，及其可藥用的前藥衍生物和鹽。
具體說，以下化合物是優(yōu)選的2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]三唑-2-基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3 ]三唑-2-基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺-鹽酸鹽，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二甲基氨基芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二甲基氨基芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺-鹽酸鹽，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]三唑-1-基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，4]三唑-4-基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二乙基氨基芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，和2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二乙基氨基芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺-鹽酸鹽。
式I化合物及其鹽可以通過本領(lǐng)域已知的方法來制備，例如，通過將下式II的碳酸或其鹽 其中R是二-低級(jí)烷基氨基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，m表示1至10且包括10的整數(shù)并且n表示0至10且包括10的整數(shù)，首先與能夠?qū)⒋颂妓徂D(zhuǎn)化成相應(yīng)酰鹵的試劑，任選地在適宜的催化劑的存在下在適宜的溶劑存在下反應(yīng)；之后在適宜溶劑或溶劑混合物中、特別是在水和四氫呋喃的混合物中與NH2OH反應(yīng)；并且任選地，為制備鹽，將所得的游離式I化合物轉(zhuǎn)化成鹽，或者如果必要的話為制備游離化合物，將所得的式I的化合物的鹽轉(zhuǎn)化成游離化合物。
下面將更詳細(xì)描述上述方法式II的碳酸與能夠?qū)⒋颂妓徂D(zhuǎn)化成相應(yīng)酰鹵的試劑之間的反應(yīng)，可以在適宜的溶劑中進(jìn)行，如氯仿或者優(yōu)選二氯甲烷。能夠?qū)⒋颂妓徂D(zhuǎn)化成相應(yīng)酰鹵的適宜的試劑是，例如，(COCl)2，還有COCl2、SOCl2、POCl3或POBr3。適宜的催化劑是，例如，二甲基甲酰胺。反應(yīng)在振蕩或攪拌的條件下進(jìn)行。取決于具體反應(yīng)物的性質(zhì)，反應(yīng)在-10℃至+50℃、優(yōu)選0℃至+30℃下進(jìn)行30分鐘至10小時(shí)，優(yōu)選1至3小時(shí)。酰鹵(優(yōu)選是新鮮制備的)與NH2OH在水和第二種溶劑的混合物中的進(jìn)一步反應(yīng)，優(yōu)選在約-35℃至-5℃下、例如-20℃至-10℃下進(jìn)行約1或2小時(shí)，其中所說的第二種溶劑可與其它組分形成均相溶液，例如是四氫呋喃。然后，優(yōu)選通過將反應(yīng)混合物傾入冰水中，使反應(yīng)猝滅。
式II的起始物料可以按如下獲得將下式III的α-氨基酸衍生物 其中R具有如式I化合物中所規(guī)義的含義并且R1是低級(jí)烷基或芐基，與下式IV的化合物 其中Hal是氟、溴或者優(yōu)選是氯，并且m和n具有如式I化合物中所規(guī)義的含義，在適宜的溶劑如二氯甲烷中，在堿的存在下，特別是在叔胺的存在下，并且任選地在催化劑(優(yōu)選二甲基氨基吡啶)的存在下，于0℃至50℃例如室溫反應(yīng)約30分鐘至24小時(shí)，例如10、12或15小時(shí)，得到下式V的碳酸酯
其中R、m和n具有如式I化合物所規(guī)義的含義并且R1是低級(jí)烷基或芐基。然后，可以通過本領(lǐng)域已知的方法將所獲得的碳酸酯水解，得到游離的碳酸。適宜的反應(yīng)條件是，例如，將式V的碳酸酯溶解在四氫呋喃中并且在-10℃至+10℃、優(yōu)選0至+5℃下相繼添加氫氧化鋰一水合物和水。然后，將反應(yīng)混合物加溫至室溫并且攪拌約2至12小時(shí)，例如，4、6或8小時(shí)。
下式III的α-氨基酸衍生物 其中R具有如式I化合物中所規(guī)義的含義并且R1是低級(jí)烷基或芐基，其可以例如按如下方式獲得，將下式VIII的醛 其中R具有如式I化合物中所規(guī)義的含義，在第一步中與下式IX的α-氨基酸酯的鹽酸鹽反應(yīng) 其中R1是低級(jí)烷基或芐基，此反應(yīng)優(yōu)選通過將式IX的酯與叔胺例如三乙胺和MgSO4一起添加到溶解在適宜溶劑如二氯甲烷中的式VIII的醛中進(jìn)行，以便制得相應(yīng)的亞胺。然后，可以將亞胺進(jìn)一步與NaBH4在低于0℃、優(yōu)選-30℃至-5℃、更優(yōu)選-20℃至-10℃下反應(yīng)約30至240分鐘，例如，60或90分鐘，其中優(yōu)選將NaBH4溶解在四氫呋喃和甲醇或乙醇的混合物中。
式VIII的醛，其中R是1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，可以通過將溶解在二甲基甲酰胺中的式VIII的醛(其中R是氯或者非常優(yōu)選地氟)，與1，2，3-三唑或1，2，4-三唑在碳酸鉀的存在下于大約溶劑的回流溫度下反應(yīng)約2至10小時(shí)，例如4或6小時(shí)來獲得。
式IV的化合物，其中Hal是氟、溴或優(yōu)選是氯，可以通過將懸浮于二氯甲烷或另一種適宜溶劑或溶劑混合物中的下式VI的磺酸鈉鹽， 與例如COCl2、SOCl2、POCl3或POBr3，在催化量的二甲基甲酰胺的存在下于約室溫下反應(yīng)約12至24小時(shí)來獲得。
式VI的磺酸鈉鹽可以通過將懸浮于二甲基甲酰胺中并且用氫化鈉在室溫下預(yù)處理過的下式VII的化合物， 與溴烷基-環(huán)烷烴在催化量的碘化四丁基銨的存在下于約50℃至70℃下反應(yīng)12至36小時(shí)，例如24小時(shí)來制備。
通用方法條件可通過本方法獲得的并且具有成鹽特性的游離式I化合物可以按本領(lǐng)域已知的方式轉(zhuǎn)化成鹽，例如，可以用酸或其適宜的衍生物處理，例如，將所述的酸添加到溶解在適宜溶劑如醚(例如，環(huán)醚，尤其是二噁烷并且特別是四氫呋喃)中的式I化合物中。
可以按本領(lǐng)域已知的方式例如，借助于分級(jí)結(jié)晶將可根據(jù)本發(fā)明獲得的異構(gòu)體混合物分成單個(gè)的異構(gòu)體。
上述反應(yīng)可以在本領(lǐng)域已知的反應(yīng)條件下，在沒有或者通常地有溶劑或稀釋劑的存在下(這些溶劑或稀釋劑優(yōu)選對(duì)所用的試劑來說是惰性的并且能夠溶解它們)，在沒有或者有催化劑、縮合劑(例如，五氧化二磷)或中和劑(例如堿，特別是含氮堿，例如三乙胺)的存在下，根據(jù)反應(yīng)的性質(zhì)和/或反應(yīng)的參與者，在低溫、正常溫度或高溫下，例如，約-80℃至約200℃，優(yōu)選約-20℃至約150℃，例如，在所用溶劑的沸點(diǎn)或在室溫下，在大氣壓下或在密閉容器中，如果適宜的話，在壓力下和/或在惰性氣氛中，例如，在氮?dú)鈿夥障逻M(jìn)行。
在各自情形中所具體規(guī)定的反應(yīng)條件是優(yōu)選的。
溶劑和稀釋劑是，例如，水；醇，例如，低級(jí)烷基氫氧化物，例如，甲醇、乙醇、丙醇或者特別是丁醇；二醇，例如，乙二醇；三醇，例如，甘油或芳基醇，例如，苯酚；酰胺，例如，羧酸酰胺，例如，二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺或1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(DMPU)；羧酸，特別是甲酸或乙酸；無機(jī)酸的酰胺，例如，六甲替磷酰三胺；醚，例如，環(huán)醚，例如，四氫呋喃或二噁烷，或無環(huán)醚，例如，二乙醚或乙二醇二甲基醚；鹵化烴，例如，鹵代-低級(jí)鏈烷烴，例如，二氯甲烷或氯仿；酮，例如，丙酮；腈，例如，乙腈；酸酐，例如，乙酸酐；酯，例如，乙酸乙酯；雙鏈烷基锍化物(bisalkanesulfine)，例如，二甲基亞砜；含氮雜環(huán)化合物，例如，吡啶；烴，例如，低級(jí)鏈烷烴，例如，庚烷；或者芳族化合物，例如，苯、甲苯或二甲苯或者這些溶劑的混合物，對(duì)于上述反應(yīng)可以在各自的情形中選擇適宜的溶劑。
可以使用常規(guī)的工藝來后處理可以獲得的式I化合物或其鹽，例如，過量試劑的溶劑分解；再結(jié)晶；色譜法，例如，分配，離子或凝膠色譜，特別是制備型高壓液相色譜法；在無機(jī)和有機(jī)溶劑相之間分配；一次或數(shù)次萃取，特別是在酸化或增加堿度或鹽含量之后；經(jīng)過吸濕性鹽干燥；消化；過濾；洗滌；溶解；蒸發(fā)(如果必要的話，在真空或高度真空條件下)；蒸餾；結(jié)晶，例如，油形式的所得化合物的結(jié)晶或從母液中結(jié)晶，對(duì)產(chǎn)品來說還可以用終產(chǎn)品的晶體作為晶種；或者這些后處理步驟中的兩步或多步的組合，這些步驟還可以重復(fù)使用。
起始物料和中間體可以以純的形式使用，例如，在如緊上面所述的后處理之后，或以部分純化的形式或者，例如，直接以粗產(chǎn)物的形式使用。
鑒于游離形式和鹽形式的式I化合物之間有密切關(guān)系，如果化合物中含有成鹽基團(tuán)，則在適當(dāng)時(shí)應(yīng)當(dāng)適當(dāng)和為方便著想地將上述和下述的游離化合物及其鹽理解為也指相應(yīng)的鹽或游離化合物。
化合物，包括其鹽，還可以以水合物的形式獲得，或其晶體中可以含有例如，用于結(jié)晶的溶劑。
本發(fā)明還涉及本方法的如下實(shí)施方案形式其中使用在任一加工階段中可獲得的中間體化合物作為起始物質(zhì)并且實(shí)施所缺少的加工步驟；或者其中起始物質(zhì)在反應(yīng)條件下形成或以衍生物的形式，例如，以鹽的形式使用。
此外，本發(fā)明涉及下式II的化合物及其鹽， 其中R是二-低級(jí)烷基氨基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，m表示1至10且包括10的整數(shù)，且n表示0至10且包括10的整數(shù)。
本發(fā)明還涉及使用本發(fā)明化合物及其可藥用鹽或者其藥物組合物的方法，用于在哺乳動(dòng)物中抑制降解基質(zhì)的金屬蛋白酶，例如，基質(zhì)溶素(MMP3，MMP10，MMP11)；巨噬細(xì)胞金屬彈性蛋白酶(MMP12)且特別是明膠酶(MMP2，MMP9)和MT1-MMP，從而抑制組織基質(zhì)降解及治療如本文所述的依賴于降解基質(zhì)的金屬蛋白酶的病況，例如，炎癥、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎及腫瘤(腫瘤生長、轉(zhuǎn)移、增進(jìn)或侵入)，肺病(例如，肺氣腫)及本文所述的其它病況。腫瘤(癌)包括哺乳動(dòng)物的乳腺、肺部、膀胱、結(jié)腸、前列腺和卵巢的癌以及皮膚癌，包括黑素瘤和卡波西肉瘤。
此外，本發(fā)明涉及治療與MMP，特別是MT1-MMP、MMP2和/或MMP9相關(guān)的病況或疾病，特別是本文所述的病況或疾病的方法，所說的方法包括給需要治療的溫血?jiǎng)游铮ㄈ耍┯弥委熡行Я康氖絀化合物或者這種化合物的可藥用鹽或可藥用前體藥物衍生物。
本發(fā)明尤其涉及治療患有過度增生性疾病、特別是腫瘤疾病并且具體地說對(duì)MT1-MMP、MMP2和/或MMP9抑制有響應(yīng)的過度增生性疾病的溫血?jiǎng)游?包括人)的方法，該方法包括施用能有效抗過度增生的量的式I化合物或其可藥用鹽或可藥用前體藥物衍生物，或者涉及式I的化合物在這種治療中的用途。
本文中所用的術(shù)語“選擇性MMP2抑制劑”和“選擇性MMP9抑制劑”是指，尤其通過本文所述的方法測(cè)定，化合物對(duì)酶MMP1所顯出的抑制濃度IC50比對(duì)酶MMP2或MMP9所顯出的抑制濃度IC50高至少100倍。優(yōu)選，選擇性MMP2或MMP9抑制劑對(duì)酶MMP1所顯出的抑制濃度IC50比對(duì)酶MMP2或MMP9所顯出的IC50高至少1000倍。更優(yōu)選，選擇性MMP2或MMP9抑制劑對(duì)酶MMP1所顯出的抑制濃度IC50比對(duì)酶MMP2或MMP9所顯出的IC50高至少2000倍。
本文所用的術(shù)語“非-肽”是指化合物不具有在脂族胺和羧酸之間含有化學(xué)鍵的亞結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明還涉及式I化合物或其可藥用鹽在抑制溫血?jiǎng)游锇ㄈ说腗T1-MMP、MMP2和/或MMP9中的用途，或者在制備用于治療人或動(dòng)物、特別是化學(xué)治療腫瘤、COPD、腦水腫或哮喘的藥物組合物中的用途。
根據(jù)種族、年齡、個(gè)體狀況、給藥模式和具體的臨床表現(xiàn)，可以給大約70kg體重的溫血?jiǎng)游锸┯糜行┝康谋景l(fā)明化合物，例如，大約0.05至約5g、優(yōu)選約0.25至約2g的每日劑量。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其含有有效量、特別是治療上述一種病狀時(shí)有效的量的活性成分以及適宜于局部、經(jīng)腸例如口服或直腸或者非腸道給藥的可藥用載體，并且這些載體可以是無機(jī)或有機(jī)的、固態(tài)或液態(tài)的。用于口服給藥時(shí)，可以使用特別是片劑或明膠膠囊，其中含有活性成分以及稀釋劑，例如，乳糖、葡萄糖、甘露糖醇和/或甘油；和/或潤滑劑和/或聚乙二醇。片劑中還可以含有粘合劑，例如，硅酸鋁鎂、淀粉例如玉米、小麥或水稻淀粉、明膠，甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮，并且如果需要的話，可以含有崩解劑，例如，淀粉、瓊脂、藻酸或其鹽，例如，藻酸鈉；和/或泡騰劑混合物或吸附劑，色素，調(diào)味劑和甜味劑。還可以以可非腸道給藥的組合物形式或以輸注溶液的形式來使用本發(fā)明的藥理學(xué)活性化合物。藥物組合物可以是經(jīng)過滅菌的和/或可以含有賦形劑，例如，防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑和/或乳化劑、增溶劑、調(diào)節(jié)滲透壓用的鹽和/或緩沖劑。本發(fā)明的藥物組合物中如果需要的話可以含有其它藥理學(xué)活性物質(zhì)，其可以按本領(lǐng)域已知的方式制備，例如，借助于常規(guī)的混合、造粒、制糖膏、溶解或凍干工藝制備，并且含有大約1％至95％、特別是大約1％至20％的活性成分。
此外，本發(fā)明涉及用于治療溫血?jiǎng)游?包括人)腫瘤的藥物組合物，其含有抗腫瘤有效劑量的上述式I化合物或這種化合物的可藥用鹽或可藥用前體藥物衍生物以及藥物載體。
對(duì)于異羥肟酸化合物的前體藥物衍生物，例如，式I的異羥肟酸化合物的前體藥物衍生物，其制備是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。
以下實(shí)施例起舉例說明本發(fā)明的作用而不是限制本發(fā)明范圍。溫度以攝氏度給出。如果沒有其它的說明，所有的蒸發(fā)都在減壓條件下，優(yōu)選地在約15-100mmHg(＝20-133毫巴)之間進(jìn)行。終產(chǎn)品、中間體和起始物料的結(jié)構(gòu)通過標(biāo)準(zhǔn)分析方法來驗(yàn)證，例如，微量分析和光譜特征(例如，MS，IR，NMR)。所用的簡寫是本領(lǐng)域常規(guī)知道的。
所用的簡短名稱和簡寫具有以下含義簡寫AcOEt乙酸乙酯CC 柱色譜法DMAP 二甲基氨基吡啶DMF 二甲基甲酰胺DMSO 二甲基亞砜Et 乙基h小時(shí)Me 甲基min. 分鐘NMR 核磁共振r.t. 室溫sat. 飽和的THF 四氫呋喃NMR光譜數(shù)據(jù)中的簡寫br 寬峰d雙峰J耦合常數(shù)m多重峰q四重峰s單峰t三重峰ppm 百萬分之一實(shí)施例12-[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二甲基氨基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺向36g(85.2mmol)[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二甲基氨基-芐基)-氨基]-乙酸在500ml CH2Cl2中的溶液中，逐滴添加14.8ml(169.7mmol)草酰氯，接著逐滴添加1ml(12.9mmol)DMF(注意！-有大量的氣體產(chǎn)生)并且在0至5℃下攪拌1h。在室溫下攪拌另外1h后，通過使用聚四氟乙烯樹脂管，在N2壓力條件下，將所獲得的酰基氯溶液于-20至-10℃下緩慢加到157ml(2379mmol)50％含水NH2OH在400ml THF中的溶液中。在-10℃下攪拌1.5h后，將反應(yīng)混合物用冰水猝滅并且濾掉沉淀的粉末。將濾液用CH2Cl2萃取，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮，用二乙醚洗滌后得到無色固體狀的標(biāo)題化合物；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)0.30-0.40(m，2H)，0.55-0.65(m，2H)，1.20-1.30(m，1H)，2.85(s，6H)，3.54(s，2H)，3.91(d，2H，J＝6.56Hz)，4.23(s，2H)，6.64(d，2H，J＝8.04Hz)，7.00(d，2H，J＝7.56Hz)，7.06(d，2H，J＝8.04Hz)，7.76(d，2H，J＝7.56Hz)，8.82(brs，1H)，10.42(brs，1H).
步驟1.1(4-二甲基氨基-芐基氨基)-乙酸甲酯向50g(335mmol)4-氨基苯甲醛在1000ml CH2Cl2中的溶液中，在0至5℃下相繼添加67.3g(536mmol)甘氨酸甲酯鹽酸鹽、182ml(1305mmol)三乙胺和70g MgSO4。將混合物在室溫下攪拌18h并且通過celite過濾。將濾液減壓濃縮并且將殘余物用AcOEt稀釋。將Et3N-鹽酸鹽濾掉，并且使用甲苯按共沸的方式將濾液減壓濃縮，得到粗亞胺。向此粗制亞胺在500ml THF和500ml MeOH中的溶液中，在-20至-10℃下逐份添加18g(475mmol)NaBH4，并且將混合物攪拌1h。將反應(yīng)混合物用飽和含水NH4Cl緩慢猝滅，然后用CH2Cl2萃取。將合并的萃取物用H2O、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮。將殘余物通過CC在硅膠上純化(正己烷∶AcOEt＝5∶1～1∶1)，得到淡黃色油狀的標(biāo)題化合物。
步驟1.24-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酸鈉鹽向75g(323mmol)4-羥基苯磺酸鈉鹽在1350ml DMF中的懸浮液中，室溫下小心地逐份添加20.67g(517mmol)的60％油懸浮的NaH。向混合物中，相繼添加11.93g(32.3mmol)碘化四丁基銨和50.13ml(517mmol)(溴甲基)-環(huán)丙烷。在60℃下攪拌25h后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫。收集沉淀并且用CH2Cl2洗滌數(shù)次，然后用混合溶劑(EtOH∶H2O＝2∶1)再結(jié)晶，得到無色固體狀的標(biāo)題化合物。
步驟1.34-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基氯向100g(399.6mmol)4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酸鈉鹽的混懸液中，室溫下逐滴添加186.55ml(2557.5mmol)亞硫酰氯和6.19ml(80mmol)DMF。攪拌15h后，將混合物傾入冰水中并且用CH2Cl2萃取。將合并的萃取物用H2O洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮，得到無色固體狀的標(biāo)題化合物；1H-NMR(400MHz，CDCl3)0.35-0.45(m，2H)，0.65-0.75(m，2H)，1.25-1.35(m，1H)，3.91(d，2H，J＝7.04Hz)，7.02(d，2H，J＝9.04Hz)，7.96(d，2H，J＝9.04Hz)。
步驟1.4[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二甲基氨基-芐基)-氨基]-乙酸甲酯向49.4g(222mmol)[(4-二甲基氨基-芐基氨基)-乙酸甲酯]、41.4ml(244mmol)二異丙基乙胺和0.271g(2.2mmol)DMAP在600ml CH2Cl2中的溶液中，在0至5℃下添加存在于100ml CH2Cl2中的54.8g(222mmol)4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基氯。室溫下攪拌15h后，將反應(yīng)混合物用冰水和飽和含水NH4CO3猝滅。將混合物用AcOEt萃取并且將合并的萃取物用飽和含水NH4CO3和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮。將殘余物通過CC在硅膠上純化(正己烷∶AcOEt＝4∶1)，得到無色固體狀的標(biāo)題化合物。
步驟1.5[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二甲基氨基-芐基)-氨基]-乙酸向74.6g(172.4mmol)步驟1.4的化合物在800ml THF中的溶液中，在0至5℃下相繼添加14.5g(345.6mmol)氫氧化鋰一水合物和400mlH2O。在室溫下攪拌4h后，將混合物用含水2mol HCl在0至5℃下中和并且用CH2Cl2萃取數(shù)次。將合并的萃取物用MgSO4干燥并且減壓濃縮，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例22-[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二甲基氨基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺HCl鹽向50g(114.3mmol)實(shí)施例1的化合物在500ml含水90％CH3CN中的溶液中，室溫下相繼添加137ml(137mmol)含水1mol HCl和另外的500ml H2O。將混合物凍干，得到無色固體狀的標(biāo)題化合物；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)0.30-0.40(m，2H)，0.55-0.65(m，2H)，1.20-1.30(m，1H)，3.02(s，6H)，3.61(s，2H)，3.91(d，2H，J＝7.08Hz)，4.0(brs，1H)，4.33(s，2H)，7.07(d，2H，J＝8.56Hz)，7.30(brs，4H)，7.76(d，2H，J＝9.08Hz)，10.53(brs，1H)。
實(shí)施例3[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]三唑-2-基-芐基)氨基]-N-羥基-乙酰胺按照實(shí)施例1的類似方式，由[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]三唑-2-基-芐基)氨基]-乙酸開始，制備標(biāo)題化合物；1H-NMR(400MHz，CDCl3)0.32-0.45(m，2H)，0.55-0.65(m，2H)，1.15-1.30(m，1H)，3.66(s，3H)，3.90(d，2H，J＝7.04Hz)，4.41(s，2H)，7.07(d，2H，J＝8.56Hz)，7.45(d，2H，J＝8.56Hz)，7.79(d，2H，J＝8.04Hz)，7.96(d，2H，J＝8.04Hz)，8.12(s，2H)，8.84(brs，1H)，10.49(brs，1H).
步驟3.14-[1，2，3]-三唑-2-基-苯甲醛(A)和4-[1，2，3]-三唑-1-基-苯甲醛(B)向100g(803mmol)對(duì)-氟苯甲醛在400ml DMF中的溶液中，相繼添加95g(1377mmol)1-H-1，2，3-三唑和200g(1449mmol)K2CO3并且將混合物在100℃下攪拌4h。將混合物冷卻至室溫并且通過celite過濾。將濾液減壓濃縮，得到粗制的晶體，將其用AcOEt洗滌數(shù)次。將未完全溶解在AcOEt中的固體用水洗滌，并且真空干燥，得到4-[1，2，3]-三唑-1-基-苯甲醛(B)。將濾液減壓濃縮，將所獲得的固體溶解于CH2Cl2中然后吸附在硅膠上進(jìn)行干CC(正己烷∶AcOEt＝2∶1～1∶2)，得到淡黃色固體狀的4-[1，2，3]-三唑-2-基-苯甲醛(A)和另一種化合物(B)；1H-NMR(400MHz，CDCl3)化合物A，7.88(s，2H)，8.01(d，2H，J＝8.56Hz)，8.29(d，2H，J＝8.56Hz)，10.06(s，1H)；化合物B7.90(s，1H)，7.98(d，2H，J＝8.56Hz)，8.07(d，2H，J＝8.56Hz)，8.13(s，1H)，10.09(s，1H).
步驟3.2(4-[1，2，3]-三唑-2-基-芐基氨基)乙酸甲酯向60g(347mmol)4-[1，2，3]-三唑-2-基-苯甲醛在1000ml CH2Cl2中的溶液中，在0至5℃下相繼添加78.9g(629mmol)甘氨酸甲酯鹽酸鹽、104.2ml(749mmol)三乙胺和150g MgSO4。將混合物在室溫下攪拌18h并且通過celite過濾。將濾液減壓濃縮并且將殘余物用AcOEt稀釋。濾掉Et3N鹽酸鹽，并且使用甲苯按共沸的方式將濾液減壓濃縮，得到粗制的亞胺。向此粗制亞胺在600ml THF和600ml MeOH中的溶液中，在-20至-10℃下逐份添加20g(526mmol)NaBH4并且將混合物攪拌1h。將反應(yīng)混合物用飽和含水NH4Cl緩慢猝滅，然后用CH2Cl2萃取。將合并的萃取物用H2O、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮。將殘余物通過CC在硅膠上純化(正己烷∶AcOEt＝2∶1～1∶1)，得到標(biāo)題化合物。
步驟3.3[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]-三唑-2-基-芐基)氨基]-乙酸甲酯向79.5g(323.2mmol)步驟3.2的化合物、80.9ml(581.6mmol)Et3N和1.97g(16.1mmol)DMAP在1000ml CH2Cl2中的溶液中，添加99.6g(404mmol)4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基氯在150ml CH2Cl2中的溶液并且在0至5℃下攪拌60min.。在室溫下攪拌另外18h后，將反應(yīng)混合物用冰水猝滅并且用CH2Cl2萃取。將合并的萃取物用H2O、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮。將殘余物通過CC在硅膠上純化(正己烷∶AcOEt＝41～2∶1)，得到無色固體狀的標(biāo)題化合物；1H-NMR(400MHz，CDCl3)0.35-0.45(m，2H)，0.65-0.75(m，2H)，1.25-1.35(m，1H)，3.58(s，3H)，3.87(d，2H，J＝7.04Hz)，3.94(s，2H)，4.52(s，2H)，6.99(d，2H，J＝7.04Hz)，7.37(d，2H，J＝8.56Hz)，7.81(s，2H)，7.82(d，2H，J＝7.04Hz)，8.02(d，2H，J＝8.56Hz)。
步驟3.4[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]-三唑-2-基-芐基)氨基]-乙酸按照類似于步驟1.5的方式，獲得標(biāo)題化合物；1H-NMR(400MHz，CDCl3)0.35-0.45(m，2H)，0.65-0.75(m，2H)，1.25-1.35(m，1H)，3.86(d，2H，J＝7.04Hz)，3.95(s，2H)，4.51(s，2H)，6.97(d，2H，J＝8.56Hz)，7.34(d，2H，J＝8.56Hz)，7.80(s，2H)，7.83(d，2H，J＝8.56Hz)，8.01(d，2H，J＝8.56Hz)。
或者可以通過如下順序獲得步驟3.3的化合物步驟3.5(4-[1，2，3]-三唑-2-基-苯基)-甲醇向42.26g(244mmol)4-[1，2，3]-三唑-2-基-苯甲醛在140ml THF和420ml MeOH中的溶液中，在0至5℃下逐份添加9.23g(244mmol)NaBH4并且將混合物在相同溫度下攪拌30min。用飽和NH4Cl在0至5℃下猝滅反應(yīng)并且用AcOEt萃取混合物。將合并的萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮，得到無色固體狀的標(biāo)題化合物。
步驟3.62-(4-氯甲基-苯基)-2H-[1，2，3]-三唑向50.58g(289mmol)(4-[1，2，3]三唑-2-基-苯基)-甲醇在2000mlCH2Cl2中的溶液中，在0至5℃下逐滴添加31.59ml(433mmol)亞硫酰氯并且讓反應(yīng)混合物升溫至室溫。攪拌16h后，將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3在0至5℃下堿化并且用CH2Cl2萃取。將合并的萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮，得到標(biāo)題化合物。
步驟3.7(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基氨基)-乙酸甲酯向7.125g(56.75mmol)甘氨酸甲酯鹽酸鹽在60ml二噁烷和24mlH2O中的溶液中，在0至5℃下逐滴添加15ml(107.8mmol)Et3N，然后逐滴添加10g(40.53mmol)4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基氯在10ml二噁烷中的溶液。室溫下攪拌3h后，將反應(yīng)用冰水猝滅并且將混合物用AcOEt萃取。將合并的萃取物用H2O、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮，得到無色固體狀的標(biāo)題化合物1H-NMR(400MHz，CDCl3)0.3-0.40(m，2H)，0.65-0.72(m，2H)，1.20-1.35(m，1H)，3.65(m，3H)，3.77(d，2H，J＝5.04Hz)，3.86(d，2H，J＝7.08Hz)，4.98(brs，1H)，6.96(d，2H，J＝8.52Hz)，7.77(d，2H，J＝8.52Hz)。
步驟3.8[(4-環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]三唑-2-基-芐基)氨基]-乙酸甲酯向1g(3.3mmol)步驟3.7的化合物在10ml DMF中的溶液中，室溫下相繼添加0.8086g(4.175mmol)2-(4-氯甲基-苯基)-2H-[1，2，3]三唑、0.0555g(0.33mmol)KI和0.646g(4.68mmol)K2CO3。攪拌18h后，將反應(yīng)用冰水猝滅并且將混合物用AcOEt萃取。將合并的萃取物用H2O、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且減壓濃縮，得到固體，將其用二乙醚和MeOH洗滌，得到標(biāo)題化合物。
實(shí)施例4按照實(shí)施例1和3中所描述的方法，可以獲得如下化合物
表1 實(shí)施例5無水膠囊如下制備3000個(gè)膠囊，每個(gè)含有0.25g前述實(shí)施例中提到的式I化合物的一種作為活性成分組成活性成分 75.00g乳糖 750.00gAvicel PH 102 300.00g(微晶纖維素)Polyplasdone XL30.00g(聚乙烯吡咯烷酮)硬脂酸鎂 9.00g
制備方法讓活性成分通過30號(hào)手動(dòng)篩(hand screen)。將活性成分、乳糖、Avicel PH 102和Polyplasdone XL在混合器中共混15分鐘。將共混物用足量的水(約500mL)造粒，在35℃烘箱中干燥過夜并且通過20號(hào)篩。讓硬脂酸鎂通過20號(hào)篩，添加到制粒混合物中，并且將混合物在混合器中共混5分鐘。將共混物裝入0號(hào)硬明膠膠囊中，每個(gè)膠囊含有相當(dāng)于25mg活性成分的共混物。
實(shí)施例6體外活性在本申請(qǐng)所描述的體外測(cè)試中，測(cè)定實(shí)施例2化合物的抑制活性，結(jié)果示于下表2。
表2
IC50值是三次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值±SEM。
權(quán)利要求
1.下式I的α-氨基-N-羥基-乙酰胺衍生物或其鹽 其中R是二-低級(jí)烷基氨基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，m表示1至10且包括10的整數(shù)，并且n表示0至10且包括10的整數(shù)。
2.權(quán)利要求1的式I化合物或其鹽，其中R是二甲基氨基或1，2，3-三唑-2-基，m表示1至10且包括10的整數(shù)，并且n表示0至10且包括10的整數(shù)。
3.權(quán)利要求1或2的式I化合物或其鹽，其中m是1，2，3，4或5，并且n是0。
4.權(quán)利要求1或2的式I化合物或其鹽，其中m是1、2、3、4或5，并且n是1、2、3或4。
5.權(quán)利要求1的式I化合物或其鹽，其中R是二-低級(jí)烷基氨基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，n是1并且m是1。
6.權(quán)利要求1的式I化合物或其鹽，選自以下化合物2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]三唑-2-基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]三唑-2-基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺-鹽酸鹽，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二甲基氨基芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二甲基氨基芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺-鹽酸鹽，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，3]三唑-1-基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-[1，2，4]三唑-4-基-芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二乙基氨基芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺，和2-[(環(huán)丙基甲氧基-苯磺酰基)-(4-二乙基氨基芐基)-氨基]-N-羥基-乙酰胺-鹽酸鹽。
7.藥物組合物，其含有權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的式I化合物或這種化合物的可藥用鹽或可藥用前體藥物衍生物以及藥用載體。
8.治療由MMP介導(dǎo)的病況或疾病的方法，包括給需要治療的溫血?jiǎng)游铮ㄈ耍┯弥委熡行Я康臋?quán)利要求1-6任一項(xiàng)的式I化合物或這種化合物的可藥用鹽或可藥用前體藥物衍生物。
9.用于治療人或動(dòng)物體的權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的式I化合物或這種化合物的可藥用鹽或可藥用前體藥物衍生物。
10.權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的式I化合物或這種化合物的可藥用鹽或可藥用前體藥物衍生物在制備用于化學(xué)治療腫瘤、COPD、腦水腫或哮喘的藥物組合物中的用途。
11.下式I的α-氨基乙酰異羥肟酸衍生物或其鹽的制備方法 其中R是二-低級(jí)烷基氨基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，m表示1至10且包括10的整數(shù)，并且n表示0至10且包括10的整數(shù)，所說的方法包括將下式II的碳酸 其中R、m和n具有如式I化合物中所定義的含義，首先與能夠?qū)⒋颂妓徂D(zhuǎn)化成相應(yīng)酰鹵的試劑反應(yīng)，此反應(yīng)任選地在適宜的催化劑的存在下進(jìn)行；之后在適宜溶劑或溶劑混合物中與NH2OH反應(yīng)；并且任選地，為制備鹽，將所得的游離式I化合物轉(zhuǎn)化成鹽，或者如果必要的話為制備游離化合物，將所得的式I化合物的鹽轉(zhuǎn)化成游離化合物。
12.下式II的化合物或其鹽 其中R是二-低級(jí)烷基氨基、1，2，3-三唑-1-基、1，2，3-三唑-2-基或1，2，4-三唑-4-基，m表示1至10且包括10的整數(shù)，并且n表示0至10且包括10的整數(shù)。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I的α－氨基－N－羥基－乙酰胺衍生物或其鹽，其中R是二－低級(jí)烷基氨基、1，2，3－三唑－1－基、1，2，3－三唑－2－基或1，2，4－三唑－4－基，m表示1至10且包括10的整數(shù)并且n表示0至10且包括10的整數(shù)；本發(fā)明還涉及其制備方法、含有所說異羥肟酸衍生物的藥物組合物、這種異羥肟酸衍生物作為藥物的用途以及單獨(dú)使用所說的衍生物或者將其與一種或多種其它治療劑聯(lián)用來治療由降解基質(zhì)的金屬蛋白酶(MMP)介導(dǎo)的病況或疾病的方法。
文檔編號(hào)C07D249/06GK1525956SQ02804713
公開日2004年9月1日 申請(qǐng)日期2002年2月8日 優(yōu)先權(quán)日2001年2月9日
發(fā)明者早川見次, 巖崎源司, 小泉申一, 梅村一郎, 一, 司, 郎 申請(qǐng)人:諾瓦提斯公司