專利名稱：哌啶酮連氮化合物抗白血病k562細胞增殖活性及制備的制作方法
技術領域：
本發明屬于抗白血病K562細胞增殖醫藥先導化合物，具體地說是一種哌啶酮連 氮化合物抗白血病K562細胞增殖活性及制備。
背景技術：
哌啶類衍生物是一類具有生物活性的化合物，在農藥、醫藥領域具有重要的應用 價值。現有技術表明，哌啶類衍生物在農業生產中具有很好的殺蟲、殺菌、除草作用，是重要 的化學農藥。在醫藥領域廣泛應用于消炎、鎮痛、抗心率失常、抗組胺、抗腫瘤、抗膽堿、抗精 神病、抗哮喘、抗白血病、抗高血壓等藥物的合成，在過敏性疾病和中樞神經系統疾病的臨 床治療中具有重要的治療效果。連氮類化合物含有兩個共軛的C = N鍵，表現為C = N N =C，是希夫堿類化合物的一種。希夫堿是一類具有良好生物活性的重要有機化合物，在抗 癌、殺菌、除草方面具有生物活性。而含雜環的希夫堿具有很好的抗細胞毒素、抗痙攣、抗細 胞增殖、殺菌的生物活性。本發明充分發揮希夫堿的生物活性特點，設計和合成了新的連氮 類希夫堿類化合物——S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮類化合物。本發明在世界上首次將N-取代哌啶環引入連氮結構中，以取代胺和丙烯酸甲 酯為原料，經過Michael加成，Dieckmann縮合，水解脫羧等反應合成中間體N_取代哌 啶-4-酮；再將N-取代哌啶-4-酮與水合胼發生雙縮合反應得相應S-反式雙-N-取代哌 啶-4-酮連氮類化合物，設計合成了通式為(I)的S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮類化 合物。經抗白血病K562活性測定顯示在lOOii g/mL濃度下，對白血病K562細胞系的增殖 有明顯的抑制作用，抑制率高達70. 16 87. 46%，明顯高于抗癌藥5-氟脲嘧啶60. 26%, 對白血病K562細胞增殖具有較高的抑制活性。

發明內容
本發明目的是提供一種對白血病K562癌細胞系的增殖有顯著抑制作用的含有 S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮類醫藥先導化合物——哌啶酮連氮化合物。本發明的另一目的是提供哌啶酮連氮化合物的制備方法。本發明的再一目的是提供該哌啶酮連氮化合物在白血病K562癌細胞系增殖中的 抑制作用。本發明的目的通過以下技術方案來實現含有S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮類的抗白血病K562細胞增殖醫藥先導化 合物，通式為 其中n為0，1，2，3，4，5中的一種；禮為氫(H)、甲基(CH3)、甲氧基(0CH3)、氟(F)、 氯(C1)、溴(Br)中的一種；1 2為苯基、2-四氫呋喃基、2-呋喃基、2-噻吩基、3-吡啶基、 6-氯-3-吡啶基、5-氯-2-噻唑基等五元或六元取代雜環基中的一種。通式⑴表示的含S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮類的抗白血病K562細胞增 殖醫藥先導化合物，制備方法如下(1)將取代胺與丙烯酸甲酯經過Michael加成反應制成黃色油狀物N，N_雙丙 酸甲酯取代胺；(2)將N，N-雙0 -丙酸甲酯取代胺在醇鈉作用下發生Dieckmarm縮合和酸作用 下水解脫羧得到黃色油狀物N-取代哌啶-4-酮；(3)N-取代哌啶-4-酮在pH值為4. 6酸催化作用下與85%的水合胼雙縮合得到 S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮，即得到通式為(I)的最終產物。上述制備過程的反應式為 步驟(1)中A、取代胺丙烯酸甲酯比例為1:4;B、反應溶劑為甲醇；C、反應條件室溫攪拌20min，加熱回流8h。步驟(2)中A、縮合劑為甲醇鈉；B、取質量分數25%的鹽酸溶液提取環合產物，進行水解脫羧反應。步驟(3)緩沖溶液pH值為4. 6。本發明的哌啶酮連氮化合物，在抑制白血病K562癌細胞的增殖中的應用。本發明的要點在于合成N，N_雙丙酸甲酯取代胺(反應式中的2)采用先室溫攪拌20min，再加熱回流8h的方式取代已有技術的長時間靜置，縮短反應時間；用低沸點的甲醇作為溶劑，通 過攪拌使反應在均相體系中進行；由于回流溫度較低，不僅減少了高溫副反應的發生，而且 大大加快了反應進程。由于反應物配比不同對產率的影響，本發明選擇最佳配比取代胺 丙烯酸甲酯為1 4.0，產率為98-99%。合成N-取代-4-哌啶酮(反應式中的5)采用化學性質較溫和的甲醇鈉代替氫化 鈉作為縮合劑，不僅降低了成本，而且起到了更好的縮合效果。直接用質量分數25%的鹽酸 溶液將環合產物提取，令其進入水相后水解脫羧，簡化了操作，同時避免了環境污染，提高 本步驟所得中間產物N-取代-4-哌啶酮(反應式中的5)產率。本發明合成S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮(通式I)，經過大量的酸催化、堿 催化和不加催化劑時對反應速率及產率影響的實驗，選擇PH值為4. 6以醋酸與磷酸氫二鈉 的緩沖溶液催化時為最佳反應條件。通式為(I)的化合物對白血病K562癌細胞的增殖具有較高的抑制活性。本發明的優點是1、本發明S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮對白血病K562細胞的增殖具有較高 的抑制活性。2、本發明方法工藝簡單、生產容易。本發明在世界上首次將N-取代哌啶環引入連氮結構中，即以取代胺和丙烯酸 甲酯為原料，經過Michael加成，Dieckmarm縮合，水解脫羧等反應合成中間體N-取代哌 啶-4-酮，再將N-取代哌啶-4-酮與水合胼發生雙縮合反應得相應S-反式雙-N-取代哌 啶-4-酮連氮類化合物，設計合成了通式為(I)的S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮類醫 藥先導化合物，具有明顯的新穎性和創造性；本發明測定了該哌啶酮連氮化合物對白血病 K562癌細胞系的增殖具有顯著的抑制活性，高于現有的抗癌藥物，在現代醫藥生產中具有 顯著的實用性。


圖1為用MTT法測S-反式雙-N-取代哌啶_4_酮連氮(I)對白血病K562細胞系 增殖的抑制效果圖。
具體實施例方式下面結合具體實施例進一步闡述本發明的技術特點。含有S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮類的抗白血病K562細胞增殖醫藥先導化 合物——哌啶酮連氮化合物，通式為 其中n為0，1，2，3，4，5中的一種；禮為氫(H)、甲基(CH3)、甲氧基(0CH3)、氟(F)、氯(C1)、溴(Br)中的一種；1 2為苯基、2-四氫呋喃基、2-呋喃基、2-噻吩基、3-吡啶基、 6-氯-3-吡啶基、5-氯-2-噻唑基等五元或六元取代雜環基中的一種。
本發明制備的哌啶酮連氮化合物——含有S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮類 的抗白血病K562細胞增殖醫藥先導化合物的實例是(la)、s-反式雙-N-環己基哌啶-4-酮連氮；
(lb)、s-反式雙-N-芐基哌啶-4-酮連氮；
(Ic)、s-反式雙-N-對甲基芐基哌啶-4-酮連氮；
(Id)、s-反式雙-N-對甲氧基芐基哌啶-4-酮連氮；
(Ie)、s-反式雙-N- (3,4-亞甲基二氧芐基)-哌啶-4-酮連
(If)、(士)-S-反式雙-N-(l-苯乙基)哌啶-4-酮連氮；
(Ig)、(R)-S-反式雙-N-(l-苯乙基)哌啶-4-酮連氮；
(Ih)、S-反式雙-N-苯乙基哌啶-4-酮連氮；
(Ii)、S-反式雙-N- (3-吡啶甲基)哌啶-4-酮連氮；
(Ij)、S-反式雙-N- (6-氯-3-吡啶甲基)哌啶-4-酮連氮；
(Ik)、S-反式雙-N- (2-四氫呋喃甲基)哌啶-4-酮連氮；
(11)、S-反式雙-N- (2-呋喃甲基)哌啶-4-酮連氮；
(Im)、S-反式雙-N- (2-噻吩甲基)哌啶-4-酮連氮。實施例1 制備S-反式雙-N-環己基哌啶-4-酮連氮(la)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將0. lmol 環己胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴加速度控制在 4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min，再加熱回流 8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回收甲醇和未反應的 丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(0-丙酸甲酯)環己胺(2)。向500mL干燥的三頸瓶中加入100mL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加0. Olmol N，N-雙(日-丙酸甲酯))環己胺(2)和50mL 無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘稠，需加大攪 拌速度，并將100mL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫，加入少量乙 醇除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取，油浴回流6h， 直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入質量分數 35%的NaOH溶液中和至pH = 8. 5，用乙酸乙酯(100mLX3)萃取。合并乙酸乙酯層，用飽和 NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸乙酯，減壓蒸餾剩余物質，得 到淡黃色油狀液體N-環己基哌啶-4-酮(5)。向100mL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N-環己基哌啶-4-酮(5) 及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶液，調節pH值 為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完畢控制攪拌， 薄層色譜TLC跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋蒸得到淺黃色色 固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式雙-N-環己基哌啶-4-酮連 氮(la)。
6
元素分析實測值73. 78, H% 10. 73, N% 15.45計算值 73. 69, H% 10. 68, N% 15.63IR(KBr 壓片 01^) 1632(0 = N)，1117 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) : 1. 09-1. 32 (m，8H，cyclohexyl) , 1. 80 (t, J = 2. 8Hz, 1H, cyclohexyl), 1. 96 (d, J = 8.4Hz，lH，cyclohexyl), 2. 38 (t, J = 5.6Hz，2H，CH2, piperidine) ,2. 43 (d, J = 4.2Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 49 (d, J = 4.2Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 53 (t, J = 5. 6Hz, 2H, CH2, piperidine)。實施例2 制備S-反式雙-N-芐基哌啶-4-酮連氮(lb)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將0. lmol 芐胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴加速度控制在 4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min，再加熱回流 8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回收甲醇和未反應的 丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(0-丙酸甲酯)芐胺(2)。向500mL干燥的三頸瓶中加入100mL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加O.Olmol N，N-雙(3 -丙酸甲酯))芐胺⑵和50mL無 水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘稠，需加大攪拌 速度，并將100mL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫，加入少量乙醇 除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取，油浴回流6h， 直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入質量分數 35%的NaOH溶液中和至pH = 8. 5，用乙酸乙酯(100mLX3)萃取。合并乙酸乙酯層，用飽和 NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸乙酯，減壓蒸餾剩余物質，得 到淡黃色油狀液體N-芐基哌啶-4-酮(5)。向100mL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N_芐基哌啶_4_酮(5)及 2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶液，調節pH值為 4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完畢控制攪拌，薄 層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋蒸得到淺黃色色 固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式雙-N-環己基哌啶-4-酮連 氮(lb)。元素分析實測值76. 84, H% 8. 12, N% 14.88計算值 76. 97, H% 8. 07, N% 14.96IR(KBr 壓片 01^) 1643(0 = N)，1601，1496，1453 (C = C)，1115 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :2. 43 (t, J = 5.6Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 46 (d, J = 4. 2Hz,2H,CH2, piperidine) ,2. 51 (d, J = 4. 2Hz, 2H, CH2, piperidine), 2. 60 (t, J = 5. 6Hz, 2H, CH2, piperidine)，3. 56 (s, 2H, N_CH2Ph)，7. 25 7. 36 (m, 5H, Ph_H)。實施例3 制備S-反式雙-N-對甲基芐基哌啶-4-酮連氮(Ic)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將0. lmol 對甲基芐胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴加速度控 制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min，再加熱 回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應 結束后，回收甲醇和未反應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N_雙(日-丙酸甲酯)對甲基芐胺(2)。向500mL干燥的三頸瓶中加入100mL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加O.Olmol N，N-雙(日-丙酸甲酯))對甲基芐胺⑵和 50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘稠，需加 大攪拌速度，并將100mL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫，加入少 量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取，油浴回流 6h，直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入35% (質量分數)的NaOH溶液中和至堿性( 11 = 8.5左右)，用乙酸乙酯(100mLX3)萃取。合 并乙酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸乙酯， 減壓蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體N-對甲基芐基哌啶-4-酮(5)。向100mL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N_對甲基芐基哌啶_4_酮 (5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶液，調節 PH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完畢控制攪 拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋蒸得到淺 黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式雙-N-對甲基芐基哌 啶-4-酮連氮(Ic)。元素分析實測值77. 61, H% 8. 37, N% 13.83計算值 77. 57, H% 8. 51, N% 13. 92IR(KBr 壓片 01^)1641(0 = N)，1609，1511，1455 (C = C)，1116 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :2. 36 (s, 3H, CH3) , 2. 41 (t, J = 5. 6Hz, 2H, CH2, piperidine) ,2. 56 (d, J = 4.2Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 59 (d, J = 4.2Hz，2H，CH2, piperidine)，2. 63 (t, J = 5. 6Hz,2H, CH2, piperidine)，3. 55 (d, J = 2. 2Hz,2H, N_CH2Ph)， 7. 15 (d, J = 8. 0Hz，2H，Ph_H)，7. 24 (d, J = 8. 0Hz，2H，Ph_H)。實施例4 制備S-反式雙-N-對甲氧基芐基哌啶-4-酮連氮(Id)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將0. lmol 對甲氧基芐胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴加速度 控制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min，再加 熱回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回收甲醇和未
反應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(0-丙酸甲酯)對甲氧基芐胺 ⑵。向500mL干燥的三頸瓶中加入lOOmL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加0. Olmol N，N-雙(日-丙酸甲酯)對甲氧基芐胺⑵和 50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘稠，需加 大攪拌速度，并將lOOmL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫，加入少 量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用質量分數25 %的鹽酸溶液150mL提取，油浴回流6h， 直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入35% (質 量分數)的NaOH溶液中和至堿性( 11 = 8.5左右)，用乙酸乙酯(100mLX3)萃取。合并乙 酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸乙酯，減壓 蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體N-對甲氧基芐基哌啶-4-酮(5)。
向100mL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0.04mol N_對甲氧基芐基哌 啶-4-酮(5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶 液，調節PH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完 畢控制攪拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋 蒸得到淺黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式雙-N-對甲 氧基芐基哌啶-4-酮連氮(Id)。元素分析實測值71. 75, H% 7. 98, N% 12.71計算值 71. 86, H% 7. 89, N% 12. 89IR (KBr 壓片 01^) 1646(0 = N)，1611，1510，1452 (C = C)；NMR(CDC13/400MHz) :2. 31 (t，J = 5. 6Hz，2H，CH2，piperidine)，2. 39 (d，4H，J = 4. 2Hz,CH2, piperidine) ,2. 44 (d, J = 4. 2Hz, 2H, CH2, piperidine), 2. 49 (t, J = 5. 6Hz，2H， CH2, piperidine) ,3. 73(s，3H，0_CH3)，6. 87 (d, J = 8. 8Hz，2H，Ph_H)，7. 21 (d, J = 8. 8Hz, 2H,Ph-H)。實施例5 制備S-反式雙-N-(3，4-亞甲基二氧芐基)_哌啶_4_酮連氮(Ie)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將0. lmol 3，4_亞甲基二氧芐胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴 加速度控制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min， 再加熱回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回收甲醇 和未反應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(日-丙酸甲酯)-(3，4-亞 甲基二氧芐基)胺⑵。向500mL干燥的三頸瓶中加入lOOmL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加O.Olmol N，N_雙(0 -丙酸甲酯)_3，4-亞甲基二氧芐胺 (2)和50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘 稠，需加大攪拌速度，并將lOOmL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫， 加入少量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用質量分數25%的鹽酸溶液150mL提取，油浴 回流6h，直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入 質量分數35%的NaOH溶液中和至pH = 8. 5，用乙酸乙酯(100mLX3)萃取。合并乙酸乙酯 層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸乙酯，減壓蒸餾剩 余物質，得到淡黃色油狀液體N- (3,4-亞甲基二氧芐基)-哌啶-4-酮(5)。向lOOmL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N-(3，4-亞甲基二氧芐 基)_哌啶-4-酮(5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉 的緩沖溶液，調節PH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶 液，滴加完畢控制攪拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾， 將濾液旋蒸得到淺黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式 雙-N- (3,4-亞甲基二氧芐基)_哌啶-4-酮連氮(Ie)。元素分析實測值67. 27, H% 6. 65, N% 12.28計算值 67. 51, H% 6. 54, N% 12. 11IR (KBr 壓片 01^) 1640(0 = N)，1608，1495，1456 (C = C)，1120 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :2. 47 (t, J = 5.6Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 52 (d, J =4. 8Hz，2H，CH2，piperidine)，2. 57 (d, J = 4. 8Hz, 2H, CH2, piperidine), 2. 60 (t, J = 5. 6Hz, 2H, CH2, piperidine)，3. 46 (d, J = 4. 8Hz,2H, N_CH2Ph)，5. 95 (d, J = 5. 2Hz,2H, 0-CH2_0)，
6.75 (d，J = 4. 4Hz，2H, Ph_H)，6. 88 (d，J = 5. 2Hz，1H, Ph_H)。實施例6 制備(士)-S_反式雙-N-(l-苯乙基)哌啶-4-酮連氮(If)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將 0. lmol (士)-1_苯乙胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的 滴加速度控制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌 20min，再加熱回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回 收甲醇和未反應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體(士)_N，N-雙(3-丙酸甲 酯)-(1_苯乙基)胺(2)。向500mL干燥的三頸瓶中加入100mL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加O.Olmol (士)-N，N-雙(0 -丙酸甲酯)(1_苯乙基)胺 (2)和50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘 稠，需加大攪拌速度，并將100mL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫， 加入少量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取， 油浴回流6h，直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下 加入35% (質量分數)的NaOH溶液中和至堿性(pH = 8. 5左右)，用乙酸乙酯(100mLX3) 萃取。合并乙酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙 酸乙酯，減壓蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體(士)-N-(l-苯乙基)哌啶-4-酮(5)。向100mL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol (士)-N_(l-苯乙基)哌 啶-4-酮(5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖 溶液，調節PH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85 %的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴 加完畢控制攪拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾 液旋蒸得到淺黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到(士)-S-反式 雙-N-(l-苯乙基)哌啶-4-酮連氮(If)。元素分析實測值71. 98, H% 7. 81, N% 12.77計算值 71. 86, H% 7. 89, N% 12. 89IR(KBr 壓片 01^) 1643(0 = N)，1610，1496，1451 (C = C)，1115 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :1. 27 (s, 3H, CH3) , 2. 44 (t, J = 6. 0Hz, 2H, CH2, piperidine) ,2. 54 (d, J = 4.8Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 62 (d, J = 4.8Hz，2H，CH2, piperidine) ,2. 77 (t, J = 5.6Hz，2H，CH2, piperidine)，4. 05 (s，1H，Ph-CH), 7. 29
7.36 (m, 5H, Ph_H)。實施例7 制備(R)-S-反式雙-N-(l-苯乙基)哌啶-4-酮連氮(Ig)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0.4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將 0. lmol (R)-(l-苯乙基)胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合 液的滴加速度控制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪 拌20min，再加熱回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后， 回收甲醇和未反應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體(R)_N，N-雙(0-丙酸甲 酯)-(1_苯乙基)胺(2)。
向500mL干燥的三頸瓶中加入100mL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加0.01mol(R)-N，N-雙(日-丙酸甲酯)_(1_苯乙基)胺 (2)和50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘 稠，需加大攪拌速度，并將lOOmL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫， 加入少量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用質量分數25%的鹽酸溶液150mL提取，油浴 回流6h，直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入 質量分數35%的NaOH溶液中和至堿性(pH = 8. 5)，用乙酸乙酯(100mLX3)萃取。合并乙 酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸乙酯，減壓 蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體(R)-N-(l-苯乙基)哌啶-4-酮(5)。向100mL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0.04mol(R)-N-(l-苯乙基)哌 啶-4-酮(5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶 液，調節pH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完 畢控制攪拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋蒸 得到淺黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到(R)-S-反式雙-N-環 己基哌啶-4-酮連氮(Ig)。元素分析實測值71. 83, H% 7. 75, N% 12.96計算值 71. 86, H% 7. 89, N% 12. 89IR(KBr 壓片 01^) 1635(0 = N)，1611，1498，1457 (C = C)，1109 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :1.40(d，J = 2.8Hz，3H，CH3), 2. 43 (t, J = 5.6Hz，2H， CH2, piperidine) ,2. 49 (d, J = 6. 8Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 54 (d, J = 3. 2Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 63 (t, J = 5. 6Hz, 2H, CH2, piperidine), 3. 51 3. 56 (dd, J = 6. 4Hz, 1H, Ph-CH)，7. 24 7. 36 (m, 5H, Ph_H)。實施例8 制備S-反式雙-N-苯乙基哌啶-4-酮連氮(Ih)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將0. lmol 苯乙胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴加速度控制在 4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min，再加熱回流 8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回收甲醇和未反應的 丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(日-丙酸甲酯)苯乙胺(2)。向500mL干燥的三頸瓶中加入lOOmL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加0. Olmol N，N-雙(日-丙酸甲酯))苯乙胺(2)和50mL 無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘稠，需加大攪 拌速度，并將lOOmL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫，加入少量乙 醇除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取，油浴回流6h， 直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入35% (質 量分數)的NaOH溶液中和至堿性( 11 = 8.5左右)，用乙酸乙酯(100mLX3)萃取。合并乙 酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸乙酯，減壓 蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體N-苯乙基哌啶-4-酮(5)。向lOOmL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N-苯乙基哌啶-4-酮(5) 及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶液，調節pH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完畢控制攪拌， 薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋蒸得到淺黃色 色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式雙-N-苯乙基哌啶-4-酮 連氮(Ih)。元素分析實測值77. 66, H% 8. 43, N% 13.77計算值 77. 57, H% 8. 51, N% 13.92IR(KBr 壓片 01^) 1635 (C = N)，1609，1496，1455 (C = C)，1116 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :2. 53 (t，J = 5. 6Hz，2H，CH2，piperidine)，2. 64 2. 66 (m， 4H, CH2, Ph-CH2), 2. 67 2.69(m，2H，CH2, piperidine), 2. 74 (t, J = 5.6Hz，2H，CH2, piperidine)，2. 83 2. 87 (m, 2H, N_CH2)，7. 20 7. 33 (m, 5H, Ph_H)。實施例9 制備S-反式雙-N_(3-吡啶甲基)哌啶-4-酮連氮(Ii)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將0. lmol 3-吡啶甲胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴加速度控 制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min，再加熱 回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回收甲醇和未反 應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(0 -丙酸甲酯)-(3-吡啶甲基) 胺⑵。向500mL干燥的三頸瓶中加入lOOmL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加O.Olmol N, N-雙(日-丙酸甲酯)_3_吡啶甲胺⑵和 50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘稠，需加 大攪拌速度，并將lOOmL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫，加入少 量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取，油浴回流 6h，直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入35% (質量分數)的NaOH溶液中和至堿性( 11 = 8.5左右)，用乙酸乙酯(100mLX3)萃取。合 并乙酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸乙酯， 減壓蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體N-(3-吡啶甲基)哌啶-4-酮(5)。向lOOmL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N_(3_吡啶甲基)哌 啶-4-酮(5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶 液，調節PH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完 畢控制攪拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋 蒸得到淺黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式雙-N-(3-吡 啶甲基)哌啶-4-酮連氮(Ii)。元素分析實測值70. 23, H% 7. 32, N% 22.21計算值 70. 18, H% 7. 50, N% 22.32IR(KBr 壓片 01^)627(0 = N)，1607，1501，1457 (C = C)，1115 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :12.52(t，J = 5.6Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 55 (d, J = 5. 2Hz,2H,CH2, piperidine) ,2. 60 (d, J = 5. 2Hz, 2H, CH2, piperidine), 2. 66 (t, J = 5. 6Hz, 2H,CH2, piperidine) ,4. 63 (d, 2H, CH2-Pyri), 7. 12 (d, J = 7. 6Hz, 1H, Pyri-H), 7. 237. 27 (m, 1H, Pyri-H)，7. 36 (d，J = 8. 0Hz，1H, Pyri-H)，8. 568. 58 (dd, = J2 = 2. 4Hz，1H, Pyri-H)。
實施例10 制備S-反式雙-N_(6-氯-3-吡啶甲基)哌啶-4-酮連氮(Ij)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0.4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將 0. lmol 6-氯-3-吡啶甲胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合 液的滴加速度控制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪 拌20min，再加熱回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束 后，回收甲醇和未反應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(0-丙酸甲 酯)_(6_氯-3-吡啶甲基)胺(2)。向500mL干燥的三頸瓶中加入100mL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加0. Olmol N，N-雙(日-丙酸甲酯)-(6-氯-3-吡啶甲基) 胺(2)和50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘 稠，需加大攪拌速度，并將100mL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫， 加入少量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取， 油浴回流6h，直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下 加入35% (質量分數)的NaOH溶液中和至堿性(pH = 8. 5左右)，用乙酸乙酯(100mLX3) 萃取。合并乙酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙 酸乙酯，減壓蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體N-(6-氯-3-卩比啶甲基)哌啶-4-酮(5)。向100mL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N-(6-氯-3-吡啶甲基) 哌啶-4-酮(5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩 沖溶液，調節PH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液， 滴加完畢控制攪拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾， 將濾液旋蒸得到淺黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式 雙-N- (6-氯-3-吡啶甲基)哌啶-4-酮連氮(I j)。元素分析實測值59. 42, H% 5. 71, N% 18.89計算值 59. 33, H% 5. 88, N% 18.87IR(KBr 壓片 01^) 1633(0 = N)，1612，1486，1453 (C = C)，1112 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :2. 46 (t, J = 5.6Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 52 (d, J =4.8Hz，2H，CH2, piperidine) ,2. 59 (d, J = 4.8Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 77 (t, J = 5.6Hz，2H，CH2, piperidine)，4. 64 (s，2H，CH2-Pyri) ,7. 37 (d, J = 8. 0Hz, 1H, Pyri-H), 7. 827. 84 (dd, = 2. 4Hz, J2 = 2. 8，1H, Pyri-H) ,8. 33 (d, J = 2. 4Hz, 1H, Pyri-H)。實施例11 制備S-反式雙-N_(2-四氫呋喃甲基)哌啶-4-酮連氮(Ik)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將0. lmol 2-四氫呋喃甲胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴加速 度控制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min，再 加熱回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回收甲醇和 未反應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(0 -丙酸甲酯)-(2-四氫呋 口南甲基)胺⑵。向500mL干燥的三頸瓶中加入lOOmL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。加 入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加O.Olmol N, N-雙(日-丙酸甲酯)_ (2-四氫呋喃甲基)胺 (2)和50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘稠，需加大攪拌速度，并將100mL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫， 加入少量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取， 油浴回流6h，直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下 加入35% (質量分數)的NaOH溶液中和至堿性(pH = 8. 5左右)，用乙酸乙酯(100mLX3) 萃取。合并乙酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙 酸乙酯，減壓蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體N-(2-四氫呋喃甲基)哌啶-4-酮(5)。向100mL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N-(2-四氫呋喃甲基)哌 啶-4-酮(5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶 液，調節PH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完 畢控制攪拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋 蒸得到淺黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式雙-N-(2-四 氫呋喃甲基)哌啶-4-酮連氮(Ik)。元素分析實測值66. 45, H% 9. 52, N% 15.38計算值 66. 26, H% 9. 45, N% 15.46IR (KBr 壓片 01^) 1634(0 = N)，1607，1499，1452 (C = C)，1108 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :2. 03—2. 16 (m，2H，CH2_THF)，2. 44 (t，J = 5.6Hz，2H， CH2, piperidine)，2. 48 (d, J = 4. 0Hz，2H，CH2, piperidine)，2. 56 (d, J = 4. 4Hz,2H, CH2, piperidine), 2. 63 (t, J = 5. 6Hz, 2H, CH2, piperidine), 3. 87 (s, 2H, CH2_THF)。實施例12 制備S-反式雙-N_(2-呋喃甲基)哌啶-4-酮連氮(II)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0.4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將 0. lmol2-呋喃甲胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴加 速度控制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min， 再加熱回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回收甲醇 和未反應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(日-丙酸甲酯)-(2-呋喃 甲基)胺⑵。向500mL干燥的三頸瓶中加入lOOmL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加O.Olmol N，N_雙(日-丙酸甲酯)_ (2-呋喃甲基)胺⑵ 和50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘稠，需 加大攪拌速度，并將lOOmL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫，加入 少量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取，油浴 回流6h，直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入 35% (質量分數)的NaOH溶液中和至堿性(pH = 8. 5左右)，用乙酸乙酯(100mLX3)萃 取。合并乙酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸 乙酯，減壓蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體N-(2-四氫呋喃甲基)哌啶-4-酮(5)。向lOOmL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N-(2-四氫呋喃甲基)哌 啶-4-酮(5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶 液，調節PH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完 畢控制攪拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋 蒸得到淺黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式雙-N-(2-呋喃甲基)哌啶-4-酮連氮(II)。元素分析實測值67. 65, H% 7. 52, N% 15.69計算值 67. 77, H% 7. 39, N% 15.81IR(KBr 壓片 01^) 1627(0 = N)，1615，1500，1461 (C = C)，1114(C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :2. 51 (t, J = 5.6Hz，2H，CH2, piperidine), 2. 57 (d, J = 4. 2Hz, 2H, CH2, piperidine), 2. 61 (d, J = 4. 2Hz, 2H, CH2, piperidine), 2. 67 (t, J = 5. 6Hz, 2H, CH2, piperidine), 3. 61 (s,2H, CH2-furan), 6. 22 (d, J = 3. 2Hz，lH，furan-H), 6. 33 6. 35 (m, 1H, furan-H)，7. 40 7. 41 (dd, = J2 = 0. 8Hz, 1H, furan-H)。實施例13 制備S-反式雙-N-(2-噻吩甲基)哌啶-4-酮連氮(Im)。室溫下，向250mL三頸瓶中加入0. 4mol丙烯酸甲酯和10mL甲醇，攪拌下將0. lmol 2-噻吩甲胺和30mL甲醇的混合液慢慢加入三頸瓶中，溫度自然上升，混合液的滴加速度控 制在4mL/min以內，使反應體系溫度不超過50°C。滴加完畢后，室溫下攪拌20min，再加熱 回流8h，回流溫度為63°C，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。待反應結束后，回收甲醇和未反 應的丙烯酸甲酯，減壓蒸餾，得到淺黃色油狀液體N，N-雙(0-丙酸甲酯)_(2_噻吩甲基) 胺⑵。向500mL干燥的三頸瓶中加入lOOmL無水甲苯、0. 122mol金屬鈉攪拌加熱回流。 加入lmL無水甲醇，然后慢慢滴加O.Olmol N，N_雙(日-丙酸甲酯)_ (2-噻吩甲基)胺(2) 和50mL無水甲苯混合液。待滴加完畢后，回流6h。回流過程中，反應體系逐漸變得粘稠，需 加大攪拌速度，并將lOOmL無水甲苯分批加入到反應容器中。停止回流，冷卻至室溫，加入 少量乙醇除去未反應完的Na，將混合物用25% (質量分數)的鹽酸溶液150mL提取，油浴 回流6h，直至用FeCl3溶液試驗無顏色變化，表明反應結束。冷卻反應混合物，攪拌下加入 35% (質量分數)的NaOH溶液中和至堿性(pH = 8. 5左右)，用乙酸乙酯(100mLX3)萃 取。合并乙酸乙酯層，用飽和NaCl(40mLX3)溶液洗滌，10g無水硫酸鎂干燥，蒸餾回收乙酸 乙酯，減壓蒸餾剩余物質，得到淡黃色油狀液體N-(2-噻吩甲基)哌啶-4-酮(5)。向lOOmL干燥的三頸瓶中加入40mL無水乙醇，0. 04mol N_(2_噻吩甲基)哌 啶-4-酮(5)及2. 2g高溫焙燒過的分子篩加熱攪拌，滴加少量醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶 液，調節PH值為4. 6，緩慢滴加0. 02mol 85%的水合胼與5mL無水乙醇的混合溶液，滴加完 畢控制攪拌，薄層色譜(TLC)跟蹤反應進程。回流6小時后停止反應，趁熱過濾，將濾液旋 蒸得到淺黃色色固體，用石油醚乙醇=5 1進行重結晶兩次，得到S-反式雙-N-(2-噻 吩甲基)哌啶-4-酮連氮(Im)。元素分析實測值62. 23, H% 6. 69, N% 14.52計算值 62. 14, H% 6. 78, N% 14.49IR(KBr 壓片 01^) 1636(0 = N)，1611，1493，1449 (C = C)，1117 (C-N)；NMR(CDC13/400MHz) :2. 49 (t，J = 5. 6Hz，2H，CH2，piperidine)，2. 58 2. 61 (m， 4H, CH2, piperidine)，2. 68 (t, J = 5. 6Hz,2H, CH2, piperidine)，3. 78 (d, J = 0. 8Hz,2H, thio-CH2)，6. 92 6. 98 (m, 2H, thio-H) ,6. 92 6. 98 (dd, = 1. 6Hz, J2 = 1. 2Hz, 1H, thio-H)。實施例14 哌啶酮連氮化合物對抗白血病K562細胞增殖活性的抑制作用測試1.測試藥 及配制
實驗藥品與試劑自制化合物(I)，用DMS0配至所需濃度(DMS0濃度彡1%。)，滅 菌4°C保存。MTT (四甲基偶氮唑藍)試劑購自Sigma公司。人白血病K562細胞購于上海 中科院細胞庫。10%SDS試劑(Sino-American Biotechnology產品)，用含20%小牛血清 (FBS)的RPMI-1640(美國GiBCo公司)培養液，其它試劑都是市售分析純。在37°C、5% C02、飽和濕度的培養箱中進行傳代培養，待細胞處于對數生長期時用于實驗。2.儀器設備超凈工作臺，潔凈<3.5粒/L(>0.5i!m塵粒)，安泰技術有限公司； C02細胞培養箱，Thermo公司Forma Scientific, Inc ；倒置顯微鏡，日本尼康(Nikon)公司， 型號810818 ；酶聯免疫檢測儀，Bio-RAD Model 680 ；96孔平板，美國Costar公司；SK2200H 型超聲波清洗器，上海科導超聲儀器有限公司。3.試驗方法實驗在96孔板中進行，體系含IX 105細胞及不同濃度的目標化合物全培養液。 每孔總體積100 iiL，每組8個復孔，設置藥物顏色對照孔(不含細胞)和含細胞與藥物的 培養孔，分別培養44h后，在各孔中加入MTT(5mg/mL, 10 u L),繼續培養4h，再加入10% SDS100 u L終止反應，37 °C過夜，用酶聯免疫檢測各孔在570nm的吸光度A值。并依下式計 算腫瘤生長抑制率 4.實驗結果用MTT法測S-反式雙-N-取代哌啶_4_酮連氮(I)對白血病K562細胞系增殖的 影響，抑制率見下圖，IC5(1值見表1。表1標題化合物I抑制K562的IC5Q值 S-注b(士)_ ;C(R)_。圖1、表1表示抗白血病K562活性測定顯示標題化合物對白血病K562癌細胞增 殖具有較好的抑制作用。化合物對白血病K562癌細胞增殖的抑制率隨著濃度的升高而升 高，圖1所示，大部分目標化合物在100iig/mL時對白血病K562癌細胞的抑制率明顯高于 同濃度臨床抗癌藥物5-氟尿嘧啶(5-FU)，達到>80%的抑制效果。表1所示，目標化合物 的IC5(1在9. 37-39. 17 u g/mL之間并且存在著顯著性差異，I e是系列化合物中最有抗白血 病K562潛在活性的化合物，其IC5(1值為9. 37 u g/mL，對白血病K562細胞增殖具有較高的 抑制活性。上述本發明的實施例，并不用于限制本發明。對于本領域的技術人員來說，本發明 可以有變化。凡在本發明的精神和原則之內，所作的等同替換，改進等，均應包括在本發明 的保護范圍之內。
權利要求
一種哌啶酮連氮化合物，用通式(I)表示其中n為0，1，2，3，4，5中的一種；R1為氫、甲基、甲氧基、氟、氯、溴中的一種；R2為苯基、2-四氫呋喃基、2-呋喃基、2-噻吩基、3-吡啶基、6-氯-3-吡啶基、5-氯-2-噻唑基等五元或六元取代雜環基中的一種。FSA00000084288200011.tif
2.一種哌啶酮連氮化合物的制備方法，步驟如下(1)將取代胺與丙烯酸甲酯經過Michael加成反應制成黃色油狀物N，N-雙β-丙酸 甲酯取代胺；(2)將N，N-雙β-丙酸甲酯取代胺在醇鈉作用下發生Dieckmarm縮合和酸作用下水 解脫羧得到黃色油狀物N-取代哌啶-4-酮；(3)N-取代哌啶-4-酮在ρΗ值為4. 6的醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶液催化作用下與 85%的水合胼雙縮合得到通式為(I)的含S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮抗白血病Κ562 醫藥先導化合物；上述制備過程的反應式為
3.根據權利要求2所述的哌啶酮連氮化合物的制備方法，其特征在于步驟(1)中A、取代胺丙烯酸甲酯比例為1 4;B、反應溶劑為甲醇；C、反應條件室溫攪拌20min，加熱回流8h。
4.根據權利要求2所述的哌啶酮連氮化合物的制備方法，其特征在于步驟(2)中A、縮合劑為甲醇鈉；B、取質量分數25%的鹽酸溶液提取環合產物，進行水解脫羧反應。
5.根據權利要求2所述的哌啶酮連氮化合物的制備方法，其特征在于步驟(3)緩沖 溶液PH值為4.6。
6.一種哌啶酮連氮化合物，在抑制白血病K562癌細胞的增殖中的應用。
全文摘要
本發明屬于抗白血病K562細胞增殖醫藥先導化合物，一種哌啶酮連氮化合物抗白血病K562細胞增殖活性及制備，結構為通式(I)。本發明制備方法如下將取代胺與丙烯酸甲酯經過Michael加成反應制成黃色油狀物N，N-雙β-丙酸甲酯取代胺；在醇鈉作用下發生Dieckmann縮合和酸作用下水解脫羧得到黃色油狀物N-取代哌啶-4-酮；在pH值為4.6的醋酸與磷酸氫二鈉的緩沖溶液催化作用下與85％的水合肼雙縮合得到S-反式雙-N-取代哌啶-4-酮連氮，通式為(I)的哌啶酮連氮化合物制成。本發明的優點是生產工藝簡單、容易，對白血病K562細胞增殖具有較高的抑制活性。
文檔編號C07D211/72GK101863883SQ20101014577
公開日2010年10月20日 申請日期2010年4月13日 優先權日2010年4月13日
發明者王海峰, 薛思佳 申請人:上海師范大學