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一種融合蛋白質(zhì)及其在檢測沙門氏菌中的應(yīng)用的制作方法

文檔序號:11124336閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種蛋白質(zhì),是如下(a1)或(a2):

(a1)由序列表中序列1自N末端第1至120位氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì);

(a2)將(a1)經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且可以與靶標(biāo)分子結(jié)合的由(a1)衍生的蛋白質(zhì)。

2.一種融合蛋白,包括結(jié)合區(qū)段和標(biāo)記區(qū)段;所述結(jié)合區(qū)段如序列表中序列1自N末端第1至120位氨基酸殘基所示。

3.如權(quán)利要求2所述的融合蛋白,其特征在于:所述標(biāo)記區(qū)段如序列表中序列1自N末端第139至322位氨基酸殘基所示。

4.權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)的應(yīng)用,為如下(b1)-(b6)中任一種:

(b1)檢測靶標(biāo)分子;

(b2)制備用于檢測靶標(biāo)分子的試劑盒;

(b3)結(jié)合靶標(biāo)分子;

(b4)制備用于結(jié)合靶標(biāo)分子的試劑盒;

(b5)富集靶標(biāo)分子;

(b6)制備用于富集靶標(biāo)分子的試劑盒;

所述靶標(biāo)分子為序列表中序列3的自5′端第22-33位核苷酸所示的DNA分子。

5.權(quán)利要求2或3所述融合蛋白的應(yīng)用,為如下(c1)或(c2):

(c1)檢測靶標(biāo)分子;

(c2)制備用于檢測靶標(biāo)分子的試劑盒;

所述靶標(biāo)分子為如序列表中序列3的自5′端第22-33位核苷酸所示DNA分子。

6.含有權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)的試劑盒;所述試劑盒的用途為如下(d1)或(d2)或(d3):

(d1)檢測靶標(biāo)分子;

(d2)結(jié)合靶標(biāo)分子;

(d3)富集靶標(biāo)分子;

所述靶標(biāo)分子為序列表中序列3的自5′端第22-33位核苷酸所示的DNA分子。

7.含有權(quán)利要求2或3所述融合蛋白的試劑盒;所述試劑盒的用途為檢測靶標(biāo)分子;

所述靶標(biāo)分子為如序列表中序列3的自5′端第22-33位核苷酸所示DNA分子。

8.一種用于檢測沙門氏菌的試劑盒,包括權(quán)利要求3所述融合蛋白和特異引物對;

所述特異引物對由引物F和引物R組成;

所述引物F為如下(e1)或(e2);

(e1)序列表的序列7所示的單鏈DNA分子;

(e2)將序列7經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列7具有相同功能的DNA分子;

所述引物R為如下(e3)或(e4);

(e3)序列表的序列8所示的單鏈DNA分子;

(e4)將序列8經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列8具有相同功能的DNA分子。

9.一種用于檢測沙門氏菌的試劑盒;包括權(quán)利要求3所述融合蛋白、生物素標(biāo)記的特異引物對和鏈霉親合素標(biāo)記磁珠;

所述特異引物對由引物F和引物R組成;

所述引物F為如下(e1)或(e2);

(e1)序列表的序列7所示的單鏈DNA分子;

(e2)將序列7經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列7具有相同功能的DNA分子;

所述引物R為如下(e3)或(e4);

(e3)序列表的序列8所示的單鏈DNA分子;

(e4)將序列8經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列8具有相同功能的DNA分子。

10.一種檢測沙門氏菌的方法,包括如下步驟(f1)-(f5):

(f1)采用生物素標(biāo)記的特異引物對模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;

(f2)將步驟(f1)得到的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與鏈霉親合素標(biāo)記的磁珠共孵育;

(f3)完成步驟(f2)后,收集磁珠,與權(quán)利要求3所述融合蛋白共孵育;

(f4)完成步驟(f3)后,收集磁珠檢測熒光信號;

所述模板為待測樣本的基因組DNA或培養(yǎng)待測樣本得到的菌液;

所述特異引物對由引物F和引物R組成;

所述引物F為如下(e1)或(e2);

(e1)序列表的序列7所示的單鏈DNA分子;

(e2)將序列7經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列7具有相同功能的DNA分子;

所述引物R為如下(e3)或(e4);

(e3)序列表的序列8所示的單鏈DNA分子;

(e4)將序列8經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列8具有相同功能的DNA分子。

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