技術(shù)特征：

1.一種比較斷奶仔豬血清GA、Cor含量以及小腸絨毛高度差異的標(biāo)記引物，其特征在于：該引物對包括GLS、EGFR、IGF-1、IGF-1R；其中，

引物對GLS，正向引物序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；

引物對EGFR，正向引物序列如SEQ ID NO.3所示，反向引物序列如SEQ ID NO.4所示；

引物對IGF-1，正向引物序列如SEQ ID NO.5所示，反向引物序列如SEQ ID NO.6所示；

引物對IGF-1R，正向引物序列如SEQ ID NO.7所示，反向引物序列如SEQ ID NO.8所示。

2.一種比較斷奶仔豬血清GA、Cor含量以及小腸絨毛高度差異的方法，其特征在于：該方法分別以與血清GA、Cor含量呈正相關(guān)的候選基因GLS和EGFR的表達(dá)水平比較不同斷奶仔豬個體血清GA、Cor含量差異，與小腸絨毛高度呈正相關(guān)的候選基因IGF-1、IGF-R的表達(dá)水平比較不同斷奶仔豬個體小腸絨毛高度差異。

3.一種比較斷奶仔豬腸道發(fā)育狀況的方法，其特征在于：該方法以與斷奶仔豬腸道生長發(fā)育相關(guān)聯(lián)的血清GA、Cor含量、仔豬小腸絨毛高度為對象，通過分析與血清GA、Cor含量呈正相關(guān)的候選基因GLS和EGFR的表達(dá)水平，與小腸絨毛高度呈正相關(guān)的候選基因IGF-1、IGF-R的表達(dá)水平，判定斷奶仔豬腸道發(fā)育狀況，標(biāo)記基因表達(dá)水平高的斷奶仔豬比標(biāo)記基因表達(dá)水平低的斷奶仔豬腸道發(fā)育更良好。

4.權(quán)利要求3所述的比較斷奶仔豬腸道發(fā)育狀況的方法，其特征在于：該方法具體包括如下步驟：(1)斷奶仔豬小腸總RNA提取；(2)引物設(shè)計：分別設(shè)計候選基因GLS的反轉(zhuǎn)錄引物對GLS、候選基因EGFR的反轉(zhuǎn)錄引物對EGFR、候選基因IGF-1的反轉(zhuǎn)錄引物對IGF-1、候選基因IGF-1R的反轉(zhuǎn)錄引物對IGF-1R；(3)反轉(zhuǎn)錄合成cDNA：使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒對步驟(1)得到的總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA；(4)采用步驟(2)通過q-RT-PCR方法測定候選基因GLS、EGFR、IGF-1、IGF-1R在斷奶仔豬個體小腸中的表達(dá)量；(5)根據(jù)各候選基因在不同斷奶仔豬個體的表達(dá)量的差異確定不同斷奶仔豬腸道發(fā)育狀況；

其中，引物對GLS，正向引物序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；

引物對EGFR，正向引物序列如SEQ ID NO.3所示，反向引物序列如SEQ ID NO.4所示；

引物對IGF-1，正向引物序列如SEQ ID NO.5所示，反向引物序列如SEQ ID NO.6所示；

引物對IGF-1R，正向引物序列如SEQ ID NO.7所示，反向引物序列如SEQ ID NO.8所示。

5.權(quán)利要求4所述的比較斷奶仔豬腸道發(fā)育狀況的方法，其特征在于，步驟(4)所述q-RT-PCR方法具體包括如下步驟：

(1)標(biāo)準(zhǔn)品制備及條件優(yōu)化：每個待測RNA的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物取等量混合，將cDNA混合樣按梯度稀釋，用RT-PCR的反應(yīng)體系，對每個目的基因作標(biāo)準(zhǔn)曲線來優(yōu)化整個反應(yīng)條件；

(2)q-RT-PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立和擴(kuò)增曲線：采用RT-PCR方法作目的基因GLS、EGFR、IGF-1、IGF-1R的標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到各個目的基因及內(nèi)參β-Actin基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線，對結(jié)果相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)及擴(kuò)增效率均等于或接近于1.000時，表明實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)誤差較小，可信度較高，實(shí)驗(yàn)所得的Ct值可準(zhǔn)確地測定起始cDNA的拷貝數(shù)；目的基因和看家基因標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率小于0.1，表明兩個基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率基本一致，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中可以使用分析Comparative Delta-delta Ct法進(jìn)行相對定量分析；

(3)相關(guān)候選基因的q-RT-PCR反應(yīng)：采用RT-PCR法檢測豬GLS、EGFR、IGF-1、IGF-1R、FUT1、LYZ、TAP1、SLA-DQB、TLR4基因及內(nèi)參基因β-Actin在斷奶仔豬小腸各段的表達(dá)量；

(4)數(shù)據(jù)分析：目的基因mRNA表達(dá)豐度采用2^-ΔΔCT法對有效數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計算出每個樣本目的基因的相對表達(dá)水平，通過內(nèi)參基因β-Actin校正；

其中，內(nèi)參基因β-Actin的擴(kuò)增引物對β-antin上游序列如SEQ ID NO.9所示，下游引物序列如SEQ ID NO.10所示。

6.權(quán)利要求5所述的比較斷奶仔豬腸道發(fā)育狀況的方法，其特征在于，步驟(4)q-RT-PCR 反應(yīng)體系為20μL，包括：SYBR綠色熒光染料10μL，上游引物1μL，下游引物1μL，cDNA1μL，超純水7μL；反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性30s；95℃變性10s，退火溫度下退火30s，40個循環(huán)，于65℃5s至95℃5s時搜集熒光值；其中，引物對GLS的退火溫度為58.8℃；引物對EGFR的退火溫度為60℃；引物對IGF-1和IGF-1R的退火溫度為61℃。

7.權(quán)利要求4所述的比較斷奶仔豬腸道發(fā)育狀況的方法，其特征在于，步驟(3)反轉(zhuǎn)錄合成cDNA具體包括如下步驟：(1)基因組DNA除去反應(yīng)：體系包括：5×gDNA Eraser緩沖液2μL，gDNA Eraser1μL，總RNA1μg，加超純水至10μL；反應(yīng)條件為：42℃反應(yīng)2min，4℃保存，得反應(yīng)液I；(2)反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)：體系包括：反應(yīng)液I 10μL，Buffer2 4.0μL，RT酶混合液I 1.0μL，RT Primer Mix 1.0μL，加超純水至20μL；反應(yīng)條件為：使用普通PCR儀設(shè)置程序37℃反應(yīng)15min，85℃反應(yīng)5s，4℃保存，得反轉(zhuǎn)錄樣品cDNA，檢測后置于-20℃條件下備用。

8.權(quán)利要求3-7任一項所述比較斷奶仔豬腸道發(fā)育狀況的方法，其特征在于：所述斷奶仔豬品種為安徽地方品種安慶六白豬。

9.權(quán)利要求3-7任一項所述方法在斷奶仔豬抗應(yīng)激生理反應(yīng)能力比較中的應(yīng)用，其特征在于：該方法比較GLS、EGFR和IGF-1、IGF-R的表達(dá)水平，基因表達(dá)水平越高，說明與基因表達(dá)正相關(guān)的GA、Cor和仔豬小腸絨毛高度水平越高，仔豬斷奶抗應(yīng)激能力越強(qiáng)。

10.權(quán)利要求9所述方法在斷奶仔豬抗應(yīng)激生理反應(yīng)能力比較中的應(yīng)用，其特征在于：所述斷奶仔豬品種為安徽地方品種安慶六白豬。