本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一種新的炎琥寧化合物及其藥物組合物。
背景技術(shù)：
炎琉寧，化學名稱為:14-脫羥-11，12-二脫氫穿心蓮內(nèi)酯-3，19-二琥珀酸半酯鉀鈉鹽-水合物，分子式為：C28H34KNaO10·H2O。炎琥寧是從中藥穿心蓮中提取的二萜化合物穿心蓮內(nèi)酯經(jīng)酯化、脫水、成鹽而制成的脫水穿心蓮內(nèi)酯琥珀酸半酯鉀鈉鹽，具有抗菌消炎、清熱解毒、促進腎上腺皮質(zhì)功能及鎮(zhèn)靜作用，是目前中醫(yī)急癥中常用藥物之一。
炎琥寧能夠抑制早期毛細血管透性增高與炎性滲出水腫，能特異性地興奮垂體-腎上腺皮質(zhì)功能，促進ACTH釋放，增加垂體前葉中ACTH的生物合成；體外具有滅活腺病毒、流感病毒、呼吸道病毒等多種病毒的作用。實踐中，炎琥寧不僅對某些病毒和細菌有直接的殺滅作用，而且能夠提高人體對疾病的防御和抵抗能力，全面治療各種細菌和病毒對人體造成的損傷。
由于炎琥寧分子結(jié)構(gòu)中存在橋形共軛結(jié)構(gòu)，以及α、β不飽和內(nèi)酯鍵，因此，其穩(wěn)定性較差。在將其制備成藥物制劑時，在制備、儲存和使用各個階段中，炎琥寧易氧化，從而導致藥品變質(zhì)，進而影響藥物療效，而且還會在臨床使用過程中導致一些不良反應的發(fā)生，從而嚴重影響了用藥的安全性。
現(xiàn)有技術(shù)方案多通過向制劑中加入輔料來提高制劑穩(wěn)定性，如加入賦形劑、穩(wěn)定劑等。但實際應用過程中發(fā)現(xiàn)，雖然所得凍干制劑的穩(wěn)定性在一定程度上得到了改善，但由于其處方中輔料的用量過大，導致粉針劑的藥用效果一般，且保存時間長后穩(wěn)定性依然會顯著下降。此外輔料的加入增大了不良反應出現(xiàn)的幾率，輔料的種類及用量同樣也會影響制劑的質(zhì)量，從而限制了其應用。
有鑒于此，特提出本發(fā)明。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種新的炎琥寧化合物。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明包括如下步驟：
一種如式(Ⅰ)所示的新的炎琥寧化合物
所述炎琥寧化合物為晶體，使用Cu-Kα射線測量得到的X-射線粉末衍射圖中特征峰在2θ為7.3°、9.6°、12.0°、13.4°、15.9°、17.5°、18.0°、19.8°、23.4°、23.8°、24.6°、27.1°顯示。
本發(fā)明所得的炎琥寧化合物的生物利用度高，以本發(fā)明所得的炎琥寧化合物為主藥制得的藥物組合物藥效更優(yōu)越。
所述炎琥寧化合物的熔點為200～205℃。
所述炎琥寧化合物的制備方法包括如下步驟：
(1)將穿琥寧溶于體積比為7:1的水和無水乙醇的混合溶液中，穿琥寧與水和無水乙醇的混合溶液的用量比為1g:4ml，得溶液1；
(2)20℃下向溶液1中以20～30mL/min的速度攪拌加入0.5mol/L的碳酸氫納水溶液，調(diào)節(jié)pH至6.5～7.0，然后以0.2～0.3℃/min的速度升溫到25～30℃后加入活性炭，繼續(xù)攪拌反應1～2小時，抽濾，收集濾液，得溶液2；
(3)以0.2～0.3℃/min的速度將溶液2的溫度下降至3～5℃，停止攪拌，靜置養(yǎng)晶5～6小時，抽濾，濾餅用無水乙醇洗滌，在70～80℃下干燥4小時，得炎琥寧化合物。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種包括上述炎琥寧化合物的炎琥寧藥物組合物，所述炎琥寧藥物組合物的劑型為炎琥寧凍干粉針劑，包括：
谷氨酰胺具有提高免疫力的效用，有助于患者的恢復，同時，谷氨酰胺轉(zhuǎn)化成的谷胱甘肽具有抗氧化的作用，其通過消滅自由基達到消炎的效果，從而使藥物組合物的藥效更為優(yōu)越。
山梨酸鉀具有抗氧化的作用，有利于提高藥物的穩(wěn)定性，控制有效成分含量的下降及其他雜質(zhì)物質(zhì)含量的增加，從而提高有效成分的利用率，進而增強藥物組合物的藥效。
本發(fā)明人經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)，谷氨酰胺和山梨酸鉀的協(xié)同作用極大地提高了藥物組合物的穩(wěn)定性和藥效。
本發(fā)明還提供了上述炎琥寧藥物組合物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：
(1)對注射劑瓶和膠塞分別進行清洗、滅菌；
(2)向配料罐中加入處方量的炎琥寧化合物、山梨酸鉀以及處方量60％的注射用水，將pH調(diào)節(jié)至6.5～7.0；
(3)加入處方量的谷氨酰胺，攪拌溶解后，加入的注射用水至處方量全量，將pH調(diào)節(jié)至6.5～7.5；
(4)加入針用活性炭，吸附后過濾脫碳，中間體檢查合格后，用微孔濾膜過濾除菌；
(5)灌裝于注射劑瓶中并壓好膠塞，冷凍干燥后即得炎琥寧藥物組合物。
在加入谷氨酰胺前，本發(fā)明先對混合溶液進行了pH調(diào)節(jié)，以使混合溶液的pH在加入谷氨酰胺后仍處于較佳范圍，最終得到質(zhì)量佳的炎琥寧藥物組合物。
所用pH調(diào)節(jié)劑為碳酸氫納。
所述中間體檢合格標準為pH＝7.0～7.5。
所述的冷凍干燥具體包括如下步驟：
(1)將裝有藥液的注射劑瓶的溫度降至-40℃并保持2～3h；
(2)進行抽真空操作，將溫度以小于19℃/小時的速度升溫至-10℃，然后以1～27℃/小時的速度升溫至40℃，保持2～11小時后停止抽真空操作。
優(yōu)選的，所述的冷凍干燥具體包括如下步驟：
(1)將裝有藥液的注射劑瓶的溫度降至-40℃并保持3h；
(2)進行抽真空操作，將溫度以10～19℃/小時的速度升溫至-10℃，然后以18～27℃/小時的速度升溫至40℃，保持5～10小時后停止抽真空操作。
更優(yōu)選的，所述的冷凍干燥具體包括如下步驟：
(1)將裝有藥液的注射劑瓶的溫度降至-40℃并保持3h；
(2)進行抽真空操作，將溫度以15℃/小時的速度升溫至-10℃，然后以22℃/小時的速度升溫至40℃，保持8小時后停止抽真空操作。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：
1、本發(fā)明采用所得的炎琥寧化合物作為原料藥，并通過谷氨酰胺和山梨酸鉀的協(xié)同作用，使最終制得的炎琥寧凍干粉針劑具有更好的穩(wěn)定性和更優(yōu)越的藥效。
2、采用本發(fā)明所述的工藝方法制得的炎琥寧凍干粉針劑具有理想的穩(wěn)定性，從而切實確保了患者的用藥安全，同時還具有更加優(yōu)越的藥效。
附圖說明
圖1為本發(fā)明的炎琥寧化合物的X射線粉末衍射圖譜。
具體實施方式
為使本發(fā)明實施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面對實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述，以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
實施例1新的炎琥寧化合物的制備
(1)將5g穿琥寧溶于17.5ml水和2.5ml無水乙醇的混合溶液中，得溶液1；
(2)20℃下向溶液1中以20mL/min的速度攪拌加入0.5mol/L的碳酸氫納水溶液，調(diào)節(jié)pH至6.5，然后以0.2℃/min的速度升溫到25℃后加入活性炭，繼續(xù)攪拌反應1小時，抽濾，收集濾液，得溶液2；
(3)以0.2℃/min的速度將溶液2的溫度下降至3℃，停止攪拌，靜置養(yǎng)晶5小時，抽濾，濾餅用無水乙醇洗滌，在70℃下干燥4小時，得炎琥寧化合物。
所述炎琥寧化合物使用Cu-Kα射線測量得到的X-射線粉末衍射圖中特征峰在2θ為7.3°、9.6°、12.0°、13.4°、15.9°、17.5°、18.0°、19.8°、23.4°、23.8°、24.6°、27.1°顯示，熔點為200℃。
實施例2新的炎琥寧化合物的制備
(1)將5g穿琥寧溶于17.5ml水和2.5ml無水乙醇的混合溶液中，得溶液1；
(2)20℃下向溶液1中以30mL/min的速度攪拌加入0.5mol/L的碳酸氫納水溶液，調(diào)節(jié)pH至7.0，然后以0.3℃/min的速度升溫到30℃后加入活性炭，繼續(xù)攪拌反應2小時，抽濾，收集濾液，得溶液2；
(3)以0.3℃/min的速度將溶液2的溫度下降至5℃，停止攪拌，靜置養(yǎng)晶6小時，抽濾，濾餅用無水乙醇洗滌，在80℃下干燥4小時，得炎琥寧化合物。
所述炎琥寧化合物使用Cu-Kα射線測量得到的X-射線粉末衍射圖與實施例1一致，熔點為202℃。
實施例3新的炎琥寧化合物的制備
(1)將5g穿琥寧溶于17.5ml水和2.5ml無水乙醇的混合溶液中，得溶液1；
(2)20℃下向溶液1中以20mL/min的速度攪拌加入0.5mol/L的碳酸氫納水溶液，調(diào)節(jié)pH至7.0，然后以0.3℃/min的速度升溫到25℃后加入活性炭，繼續(xù)攪拌反應2小時，抽濾，收集濾液，得溶液2；
(3)以0.2℃/min的速度將溶液2的溫度下降至5℃，停止攪拌，靜置養(yǎng)晶5小時，抽濾，濾餅用無水乙醇洗滌，在80℃下干燥4小時，得炎琥寧化合物。
所述炎琥寧化合物使用Cu-Kα射線測量得到的X-射線粉末衍射圖與實施例1一致，熔點為202℃。
制劑實施例1炎琥寧凍干粉針劑的制備
處方：規(guī)格：40mg
制備方法：
(1)對注射劑瓶和膠塞分別進行清洗、滅菌；
(2)向配料罐中加入處方量的炎琥寧化合物、山梨酸鉀以及處方量60％的注射用水，用碳酸氫鈉將pH調(diào)節(jié)至7.0；
(3)加入處方量的谷氨酰胺，攪拌溶解后，加入的注射用水至處方量全量，用碳酸氫鈉將pH調(diào)節(jié)至6.8；
(4)加入針用活性炭，吸附后過濾脫碳，中間體檢查合格的pH＝7.0，用微孔濾膜過濾除菌；
(5)灌裝于注射劑瓶中并壓好膠塞，將裝有藥液的注射劑瓶的溫度降至-40℃并保持3h；
(6)進行抽真空操作，將溫度以15℃/小時的速度升溫至-10℃，然后以22℃/小時的速度升溫至40℃，保持8小時后停止抽真空操作，即得炎琥寧藥物組合物。
制劑實施例2炎琥寧凍干粉針劑的制備
處方：規(guī)格：80mg
制備方法：
(1)對注射劑瓶和膠塞分別進行清洗、滅菌；
(2)向配料罐中加入處方量的炎琥寧化合物、山梨酸鉀以及處方量60％的注射用水，用碳酸氫鈉將pH調(diào)節(jié)至6.5；
(3)加入處方量的谷氨酰胺，攪拌溶解后，加入的注射用水至處方量全量，用碳酸氫鈉將pH調(diào)節(jié)至7.0；
(4)加入針用活性炭，吸附后過濾脫碳，中間體檢查合格的pH＝7.2，用微孔濾膜過濾除菌；
(5)灌裝于注射劑瓶中并壓好膠塞，將裝有藥液的注射劑瓶的溫度降至-40℃并保持2h；
(6)進行抽真空操作，將溫度以19℃/小時的速度升溫至-10℃，然后以27℃/小時的速度升溫至40℃，保持10小時后停止抽真空操作，即得炎琥寧藥物組合物。
制劑實施例3炎琥寧凍干粉針劑的制備
處方：規(guī)格：0.2g
制備方法：
(1)對注射劑瓶和膠塞分別進行清洗、滅菌；
(2)向配料罐中加入處方量的炎琥寧化合物、山梨酸鉀以及處方量60％的注射用水，用碳酸氫鈉將pH調(diào)節(jié)至6.5；
(3)加入處方量的谷氨酰胺，攪拌溶解后，加入的注射用水至處方量全量，用碳酸氫鈉將pH調(diào)節(jié)至6.5；
(4)加入針用活性炭，吸附后過濾脫碳，中間體檢查合格的pH＝7.0，用微孔濾膜過濾除菌；
(5)灌裝于注射劑瓶中并壓好膠塞，將裝有藥液的注射劑瓶的溫度降至-40℃并保持3h；
(6)進行抽真空操作，將溫度以10℃/小時的速度升溫至-10℃，然后以18℃/小時的速度升溫至40℃，保持5小時后停止抽真空操作，即得炎琥寧藥物組合物。
對比例1
其他條件與制劑實施例1相同，區(qū)別僅在于炎琥寧化合物換成市售炎琥寧原料藥。
對比例2
其他條件與制劑實施例1相同，區(qū)別僅在于步驟(2)中不加入山梨酸鉀。
對比例3
其他條件與制劑實施例1相同，區(qū)別僅在于步驟(3)中不加入谷氨酰胺。
對比例4
根據(jù)專利申請?zhí)枮?01110264481.3的中國專利中實施例1所提供的工藝方法制備炎琥寧化合物和炎琥寧藥物組合物。
對比例5
根據(jù)專利申請?zhí)枮?01410057789.4的中國專利中實施例1所提供的工藝方法制備炎琥寧化合物和炎琥寧藥物組合物。
試驗例1穩(wěn)定性試驗
1、化合物穩(wěn)定性試驗
本試驗例考察了實施例1、2、3、市售炎琥寧原料藥和對比例4、5所得的炎琥
寧化合物的穩(wěn)定性，結(jié)果見表1。
表1
由表1可知，與市售炎琥寧原料藥和對比例4、5制得的化合物相比，本發(fā)明所得的炎琥寧化合物的穩(wěn)定性更好。
2、藥物組合物穩(wěn)定性試驗
本試驗例考察了制劑實施例1、2、3和對比例1、2、3、4、5所得的炎琥寧藥物組合物的穩(wěn)定性，結(jié)果見表2。
表2
由表2可知，本發(fā)明所得的炎琥寧合物的穩(wěn)定性優(yōu)于對比例1制得的藥物組合物，可知，本發(fā)明所得的炎琥寧化合物在藥物組合物的穩(wěn)定性方面發(fā)揮重要作用；本發(fā)明所得的炎琥寧合物的穩(wěn)定性優(yōu)于對比例2、3制得的藥物組合物，可知，谷氨酰胺和山梨酸鉀在藥物組合物的穩(wěn)定性方面發(fā)揮重要作用；同時，本發(fā)明所得的炎琥寧藥物組合物的穩(wěn)定性優(yōu)于對比例4、5制得的藥物組合物。
試驗例2動物試驗
1、實驗材料
家兔，體質(zhì)量2.5～3.5kg，在溫度(22±2)℃、相對濕度50％～75％實驗環(huán)境中喂養(yǎng)。對家兔施行適應性測溫操作，1次/d。實驗前10h禁食不禁水。測溫儀探頭上涂凡士林，插入家兔直腸6cm(可在6cm用膠布固定，確保每次插入深度一致)，穩(wěn)定1h以后記錄體溫值。
2、實驗步驟
2.1對脂多糖發(fā)熱模型家兔體溫的影響
實驗當日9:00，在造模給藥前每次間隔30min測家兔體溫3次，取其平均值作為基礎體溫，其中若有體溫超出38.0℃或相鄰兩次體溫差值大于0.4℃的動物淘汰。篩選出合格家兔48只，隨機分為8組，每組6只，分別為：
對照組(0.9％氯化鈉注射液10mL/kg)；
模型組(脂多糖10EU/kg)；
試驗Ⅰ組(脂多糖10EU/kg+本發(fā)明制劑實施例1制得的炎琥寧凍干粉針劑80mg/kg)；
試驗Ⅱ組(脂多糖10EU/kg+本發(fā)明對比例1制得的炎琥寧凍干粉針劑80mg/kg)；
試驗Ⅲ組(脂多糖10EU/kg+本發(fā)明對比例2制得的炎琥寧凍干粉針劑80mg/kg)；
試驗Ⅳ組(脂多糖10EU/kg+本發(fā)明對比例3制得的炎琥寧凍干粉針劑80mg/kg)；
試驗Ⅴ組(脂多糖10EU/kg+本發(fā)明對比例4制得的炎琥寧凍干粉針劑80mg/kg)；
試驗Ⅵ組(脂多糖10EU/kg+本發(fā)明對比例5制得的炎琥寧凍干粉針劑80mg/kg)；
于給藥后1、2、3、4h監(jiān)測記錄各組家兔體溫，計算各組家兔在各監(jiān)測點的升溫值(實測體溫－基礎體溫)，繪制平均升溫曲線。
2.2對脂多糖發(fā)熱家兔血清細胞因子和中樞升溫遞質(zhì)的影響
給藥4h檢測家兔體溫后，立即心臟采血，3000r/min離心10min，分離出血清置于-20℃冰箱保存待測。迅速取出全腦，預冷PBS溶液漂洗2～3次洗去血跡，冰浴上操作于視交叉與灰結(jié)節(jié)之間取下丘腦，下丘腦組織加入生理鹽水制備成10％腦勻漿，3000r/min離心10min，取上清置于-20℃冰箱保存待測。按試劑盒說明，測定血清中IL-1β、TNF-α、IL-6、cAMP、PGE2及下丘腦中cAMP、PGE2。
3、統(tǒng)計方法
采用SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計，數(shù)據(jù)以表示，各組間進行單因素方差分析。
4、實驗結(jié)果
4.1給藥后各組家兔體溫變化趨勢
各組家兔體溫變化趨勢見表3。
表3
與對照組比較：aP＜0.01；與模型組比較：bP＜0.05，cP＜0.01
模型組家兔體溫較對照組顯著升高，最高時(3h)升溫值達到1.0℃，提示模型成功。各給藥組在給藥后1h即有降溫作用。與模型組比較，試驗Ⅰ～Ⅵ組在給藥2～4h能顯著抑制脂多糖發(fā)熱模型家兔體溫升高。
4.2給藥后發(fā)熱家兔血清中細胞因子的變化
各組家兔血清中細胞因子的變化見表4。
表4
與對照組比較：aP＜0.01；與模型組比較：bP＜0.05，cP＜0.01
造模給藥4h后，模型組家兔血清中細胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、cAMP、PGE2)水平較對照組顯著升高。與模型組比較，試驗Ⅰ～Ⅵ組對家兔血清中細胞因子(TNF-α、IL-1β)水平無明顯影響；試驗Ⅰ～Ⅵ組能夠明顯降低家兔血清中細胞因子(IL-6、cAMP、PGE2)水平。
4.3給藥后發(fā)熱家兔下丘腦中升溫遞質(zhì)的變化
各組家兔下丘腦中升溫遞質(zhì)的變化見表5。
表5
與對照組比較：aP＜0.01；與模型組比較：cP＜0.01
造模給藥4h后，模型組家兔下丘腦中升溫遞質(zhì)(cAMP、PGE2)水平較對照組顯著升高。與模型組比較，試驗Ⅰ～Ⅵ組能夠明顯降低發(fā)熱家兔下丘腦中cAMP和PGE2水平。
通過對表3～5中的數(shù)據(jù)進行對比，可知，本發(fā)明所得的炎琥寧化合物、谷氨酰胺和山梨酸鉀在藥物組合物的藥效方面發(fā)揮重要作用；同時，本發(fā)明的炎琥寧藥物組合物的藥效優(yōu)于對比例4、5所得的藥物組合物。
以上所述僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，雖然本發(fā)明已以較佳實施例揭露如上，然而并非用以限定本發(fā)明，任何熟悉本發(fā)明的技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明技術(shù)方案范圍內(nèi)，當可利用上述提示的技術(shù)內(nèi)容作出些許更動或修飾為等同變化的等效實施例，但凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案的內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明方案的范圍內(nèi)。