技術領域：
本發明總體上涉及具有抗病毒活性的化合物，更特別地對抗正粘病毒科(Orthomyxoviridae)病毒感染的核苷活性物，及其藥物組合物和使用方法。
背景技術：
：屬于A和B屬的正粘病毒科的流感病毒每年引起季節性流感爆發，這引起了急性傳染性呼吸道感染。兒童和老年人，以及患有慢性疾病的人群處于產生導致高發病率和死亡率的嚴重并發癥的高風險中(Memoli等，DrugDiscoveryToday2008，13，590-595)。在三種流感屬中，A型病毒是引起大部分嚴重疾病的毒性最強的人病原體，可以傳遞至其他物種，并且產生人流感大面積流行。最近在2009年的侵略性豬A/H1N1毒株的人流感爆發強調了需要新的抗病毒治療劑。盡管目前將每年的疫苗接種方案用于保護人群免受流感感染，但這些方案必須預期在季節性爆發期間將流行的病毒株才是有效的，并且它們沒有解決突發的、未預期的流感流行的問題。再者，最近在2009年的侵略性豬A/H1N1毒株的人流感爆發是這一問題的實例。目前有幾種抗病毒治療劑可用，其他的正在研發中(Hedlund等，Viruses2010，2，1766-1781)。其中，目前可用的抗病毒治療劑是M2離子通道阻斷劑金剛胺和金剛乙胺，以及神經氨酸酶抑制劑奧司他韋(oseltamivir)和扎那米韋(zanamivir)。然而，對于所有這些藥物，已經產生了抗藥性。因此，對于新的抗流感治療劑存在持續的需求。具有新的作用機理的有前景的新的抗流感劑目前正在研發中。在這些新藥劑中是法匹拉韋(favipiravir)，其通過抑制流感RNA聚合酶靶向病毒基因復制。然而，仍然不確定這種研究中的藥物候選物是否能用于治療。因此，仍然需要研發通過這種作用機理抑制流感的其他化合物。核堿基吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪、咪唑并[1,5-f][1,2,4]三嗪、咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪，和[1,2,4]三唑并[4,3-f][1,2,4]三嗪的特定核糖苷已經公開于CarbohydrateResearch2001,331(1),77-82；Nucleosides&Nucleotides1996,15(1-3),793-807；TetrahedronLetters1994,35(30),5339-42；Heterocycles1992,34(3),569-74；J.Chem.Soc.PerkinTrans.11985,3,621-30；J.Chem.Soc.PerkinTrans.11984,2,229-38；WO2000056734；OrganicLetters2001,3(6),839-842；J.Chem.Soc.PerkinTrans.11999,20,2929-2936；和J.Med.Chem.1986,29(11),2231-5。然而，尚未公開將這些化合物用于正粘病毒科感染的治療。Babu，WO2008/089105和WO2008/141079，Cho等，WO2009/132123和Francom等，WO2010/002877公開了具有抗病毒、抗-HCV和抗RNA-依賴性RNA聚合酶(anti-RdRp)活性的吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪基、咪唑并[1,5-f][1,2,4]三嗪基、咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪基，和[1,2,4]三唑并[4,3-f][1,2,4]三嗪基的核堿基的核糖苷。Butler等，WO2009/132135公開了抗病毒吡咯并[1,2-f][1,2,4]三嗪基、咪唑并[1,5-f][1,2,4]三嗪基、咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪基和[1,2,4]三唑并[4,3-f][1,2,4]三嗪基核苷，其中核苷糖的1’位置被氰基或甲基基團取代。然而，尚未公開這些化合物用于治療正粘病毒科感染的有效性。技術實現要素：本文中提供了抑制正粘病毒科病毒的化合物。本發明還包括抑制病毒核酸聚合酶，特別是正粘病毒科RNA-依賴性RNA聚合酶(RdRp)，而不是細胞核酸聚合酶的通式I的化合物。通式I的化合物對于治療人和其他動物的正粘病毒科感染是有用的。本發明的第一個實施方案涉及通式I的化合物：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯；其中：R1和R7各自獨立地是H、鹵素、ORa、(C1-C8)鹵代烷基、CN、N3、(C1-C8)烷基、(C1-C8)取代的烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)取代的烯基、(C2-C8)炔基或(C2-C8)取代的炔基，其中所述取代基選自由-X、-Rb、-OH、＝O、-ORb、-SRb、-S-、-NRb2、-N+Rb3、＝NRb、-CX3、-CN、-OCN、-SCN、-N＝C＝O、-NCS、-NO、-NO2、＝N2、-N3、-NHC(＝O)Rb、-OC(＝O)Rb、-NHC(＝O)NRb2、-S(＝O)2-、-S(＝O)2OH、-S(＝O)2Rb、-OS(＝O)2ORb、-S(＝O)2NRb2、-S(＝O)Rb、-OP(＝O)(ORb)2、-P(＝O)(ORb)2、-P(＝O)(O-)2、-P(＝O)(OH)2,-P(O)(ORb)(O-)、-C(＝O)Rb,-C(＝O)X、-C(S)Rb、-C(O)ORb、-C(O)O-、-C(S)ORb、-C(O)SRb、-C(S)SRb、-C(O)NRb2、-C(S)NRb2和-C(＝NRb)NRb2組成的組，其中每個X獨立地是鹵素：F、Cl、Br或I；并且每個Rb獨立地是H、烷基、芳基、芳烷基、雜環，或保護基團或前藥部分；R2是ORa；R3是鹵素或N3；每個Ra獨立地是H、芳基、芳烷基或(C1-C8)烷基；R4和R5各自獨立地是H、＝O、ORa,、N(Ra)2、N3、CN、S(O)nRa、鹵素或(C1-C8)鹵代烷基；n是0、1或2；和R6是H、芳基、芳烷基，或其中W1和W2各自獨立地是ORa或通式Ia的基團：其中：每個Y獨立地是鍵或O；M2是0、1或2；每個RX是H、鹵素或OH。在優選的實施方案中，通式I的化合物由通式II來表示：或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或酯。在其他優選的實施方案中，R1是H，R2是OH或O-芐基和/或R3是F或N3，并且更優選，R3是F。在本發明的特定實施方案中，R4是NH2，并且R5是H、F、Cl、Br、N3、CN、CF3、NH2、SMe或SO2Me，并且，在另一個實施方案中，R5是NH2，并且R4是＝O、OH、OMe、Cl、Br、I、NH2、NHMe、NHcPr或SMe。在再進一步優選的實施方案中，R4和R5都是NH2或SMe，R5是H，或R4是＝O。在其他優選的實施方案中，R6是H、芐基，或其中W2是OH，并且W1是通式Ia的基團：其中：每個Y是O；M2是2；并且每個RX是H。在另一個實施方案中，R7是H或OH。本發明的第二個實施方案涉及包含治療有效量的如本發明第一個實施方案中限定的通式I、II或III的化合物和藥物學上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物。在其特定的實施方案中，所述藥物組合物進一步包含至少一種附加的治療劑。本發明的第三個實施方案涉及用于治療需要的哺乳動物的正粘病毒感染的方法，其包括給藥治療有效量的如本發明第一個實施方案中限定的通式I、II或III或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯的化合物。在一些實施方案中，待治療的正粘病毒感染是流感病毒A感染、流感病毒B感染或流感病毒C感染。在另一個實施方案中，該方法包括通過給藥治療有效量的藥物組合物來治療需要的哺乳動物的正粘病毒感染，所述藥物組合物包含有效量的通式I、II或III化合物或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯，并結合藥物學上可接受的稀釋劑或載體。在另一個實施方案中，本發明提供了一種抑制正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶的方法。在進一步的實施方案中，該方法包括將感染了正粘病毒科病毒的細胞接觸有效量的通式I、II或III或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯的化合物。在這個實施方案的另一個方面中，本發明提供了一種治療正粘病毒科病毒感染的方法，并且在特定的實施方案中，進一步包括給藥治療有效量的至少一種附加治療劑或其組合物，所述附加治療劑選自由皮質類固醇、抗炎信號傳導調節劑、β-2腎上腺素受體激動劑支氣管擴張劑、抗膽堿能藥、粘液溶解劑、高滲鹽水、抑制前炎性細胞移動至感染部位的藥劑，及其混合物組成的組。在特定的實施方案中，附加治療劑是病毒血球凝集素抑制劑、病毒神經氨酸酶抑制劑、M2離子通道抑制劑、正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑或唾液酸酶。在另一個實施方案中，附加治療劑選自由病毒唑、奧司他韋、扎那米韋、拉尼米韋(laninamivir)、帕拉米韋(peramivir)、金剛胺、金剛乙胺、CS-8958、法匹拉韋、AVI-7100、α-1蛋白酶抑制劑和DAS181組成的組。在本發明的另一個實施方案中，通過吸入給藥通式I、II或III的化合物和/或至少一種附加治療劑。具體實施方式本發明的第一個實施方案涉及通式I的化合物：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯；其中：R1和R7各自獨立地是H、鹵素、ORa、(C1-C8)鹵代烷基、CN、N3、(C1-C8)烷基、(C1-C8)取代的烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)取代的烯基、(C2-C8)炔基或(C2-C8)取代的炔基，其中所述取代基選自由-X、-Rb、-OH、＝O、-ORb、-SRb、-S-、-NRb2、-N+Rb3、＝NRb、-CX3、-CN、-OCN、-SCN、-N＝C＝O、-NCS、-NO、-NO2、＝N2、-N3、-NHC(＝O)Rb、-OC(＝O)Rb、-NHC(＝O)NRb2、-S(＝O)2-、-S(＝O)2OH、-S(＝O)2Rb、-OS(＝O)2ORb、-S(＝O)2NRb2、-S(＝O)Rb、-OP(＝O)(ORb)2、-P(＝O)(ORb)2、-P(＝O)(O-)2、-P(＝O)(OH)2,-P(O)(ORb)(O-)、-C(＝O)Rb,-C(＝O)X、-C(S)Rb、-C(O)ORb、-C(O)O-、-C(S)ORb、-C(O)SRb、-C(S)SRb、-C(O)NRb2、-C(S)NRb2和-C(＝NRb)NRb2組成的組，其中每個X獨立地是鹵素：F、Cl、Br或I；并且每個Rb獨立地是H、烷基、芳基、芳烷基、雜環，或保護基團或前藥部分；R2是ORa；R3是鹵素或N3；每個Ra獨立地是H、芳基、芳烷基或(C1-C8)烷基；R4和R5各自獨立地是H、＝O、ORa,、N(Ra)2、N3、CN、S(O)nRa、鹵素或(C1-C8)鹵代烷基；n是0、1或2；和R6是H、芳基、芳烷基，或其中W1和W2各自獨立地是ORa或通式Ia的基團：其中：每個Y獨立地是鍵或O；M2是0、1或2；而且每個RX是H、鹵素或OH。關于通式Ia，Y是O時，RX不是鹵素。除非另外指出，確定本文中使用的以下術語和短語具有以下含義。在本文中使用商品名時，申請人意在獨立地包括商品名產品和該商品名產品的活性藥物組分。“烷基”為含正、仲、叔或環碳原子的烴。例如，烷基可以具有1到20個碳原子(即C1-C20烷基)、1到8個碳原子(即C1-C8烷基)或1到6個碳原子(即C1-C6烷基)。合適的烷基的實例包括，但不限于，甲基(Me，-CH3)，乙基(Et，-CH2CH3)，1-丙基(n-Pr，n-丙基，-CH2CH2CH3)，2-丙基(i-Pr，i-丙基，-CH(CH3)2)，1-丁基(n-Bu，n-丁基，-CH2CH2CH2CH3)，2-甲基-1-丙基(i-Bu，i-丁基，-CH2CH(CH3)2)，2-丁基(s-Bu，s-丁基，-CH(CH3)CH2CH3)，2-甲基-2-丙基(t-Bu，t-丁基，-C(CH3)3)，1-戊基(n-戊基，-CH2CH2CH2CH2CH3)，2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)，3-戊基(-CH(CH2CH3)2)，2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)，3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)，3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)，2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)，1-己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)，2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)，3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))，2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)，3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)，4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)，3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)，2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)，2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)，3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3)和辛基(-(CH2)7CH3)。“烯基”是具有至少一個不飽和位點(即碳-碳，sp2的雙鍵)的含有正，仲，叔或環碳原子的烴。例如，烯基可以具有2到20個碳原子的(即，C2-C20烯基)，2至8個碳原子數(即，C2-C8烯基)，或2至6個碳原子(即C2-C6烯基)。合適的烯基的實例包括，但不限于，乙烯或乙烯基(-CH＝CH2)，烯丙基(-CH2CH＝CH2)，環戊烯基(-C5H7)，和5-己烯基(-CH2CH2CH2CH2CH＝CH2)。“炔基”是具有至少一個不飽和位點(即碳-碳，sp三鍵)的含有正，仲，叔或環碳原子的烴。例如，炔基可以具有2至20個碳原子(即，C2-C20炔基)，2至8個碳原子(即C2–C8炔烴，)，或2至6個碳原子(即，C2-C6炔基)。合適的炔基的實例包括，但不限于，乙炔基(-C≡CH)，炔丙基(-CH2C≡CH)等。“芳基”是指通過從母體芳環系統的單個碳原子除去一個氫原子產生的單價芳族烴基。例如，芳基可以具有6至20個碳原子，6至14個碳原子，或6至10個碳原子。典型的芳基包括，但不限于，從苯衍生的基團(例如，苯基)、取代的苯、萘、蒽、聯苯等。“芳烷基”指的是其中一個鍵合碳原子(通常是末端或sp3碳原子)的氫原子被芳基取代的無環烷基(acyclicalkylradical)。典型的芳烷基包括，但不限于，芐基、2-苯乙烷-1-基、萘基甲基、2-萘乙烷-1-基、萘并芐基(naphthobenzyl)、2-萘并苯乙烷-1-基等。芳烷基可以包含6至20個碳原子，例如，烷基部分是1至6個碳原子而芳基部分是6至14個碳原子。“碳環”或“碳環基”是指飽和的(即，環烷基)、部分不飽和的(例如，環烯基、環烷二烯基等)或芳環，具有3至7個碳原子作為單環，7至12個碳原子作為雙環，以及高達約20個碳原子作為多環。單環碳環具有3至7個環原子，更典型地5或6個環原子。雙環碳環的環原子數為7至12個環原子，例如，排列為雙環[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]系統，或9或10個環原子，排列為雙環[5,6]或[6,6]系統，或螺環稠合的環。單環碳環的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、1-環戊-1-烯基、1-環戊-2-烯基、1-環戊-3-烯基、環己基，1-環己-1-烯基、1-環己-2-烯基、1-環己-3-烯基和苯基。雙環碳環的非限制實例包括萘基、四氫萘和十氫萘。“鹵代烷基”是其中烷基基團的一個或多個氫原子被鹵素原子替代的如上定義的烷基基團。鹵代烷基基團的烷基部分可以具有1至20個碳原子(即，C1-C20鹵代烷基)、1至12個碳原子(即，C1-C12鹵代烷基)或1至6個碳原子(即，C1-C6烷基)。合適的鹵代烷基基團的實例包括，但不限于，-CF3、CHF2、CFH2、CH2CF3等。如本文中使用的“雜環”或“雜環基”包括，例如但不限于，Paquette，LeoA.；PrinciplesofModernHeterocyclicChemistry(現代雜環化學原理)(W.A.Benjamin，NewYork，1968)，特別是第1、3、4、6、7和9章；TheChemistryofHeterocyclicCompounds,ASeriesofMonographs(雜環化合物化學，專著系列)(JohnWiley&Sons，NewYork，1950至今)，特別是第13、14、16、19和28卷；和J.Am.Chem.Soc.(1960)82:5566中所述的那些雜環。在本發明的一個特定實施方案中，“雜環”包括如本文中定義的“碳環”，其中一個或多個(例如，1、2、3或4個)碳原子已經被雜原子(例如，O、N或S)替代。術語“雜環”或“雜環基”包括飽和環、部分不飽和環和芳環(即，雜芳環)。關于烷基、烯基、芳基等的術語“取代的”，例如，“取代的烷基”、“取代的烯基”、“取代的芳基”，分別是指其中一個或多個氫原子各自獨立地被非氫取代基替代。典型的取代基包括，但不限于，-X、-Rb、-OH、＝O、-ORb、-SRb、-S-、-NRb2、-N+Rb3、＝NRb、-CX3、-CN、-OCN、-SCN、-N＝C＝O、-NCS、-NO、-NO2、＝N2、-N3、-NHC(＝O)Rb、-OC(＝O)Rb、-NHC(＝O)NRb2、-S(＝O)2-、-S(＝O)2OH、-S(＝O)2Rb、-OS(＝O)2ORb、-S(＝O)2NRb2、-S(＝O)Rb、-OP(＝O)(ORb)2、-P(＝O)(ORb)2、-P(＝O)(O-)2、-P(＝O)(OH)2、-P(O)(ORb)(O-)、-C(＝O)Rb、-C(＝O)X、-C(S)Rb、-C(O)ORb、-C(O)O-、-C(S)ORb、-C(O)SRb、-C(S)SRb、-C(O)NRb2、-C(S)NRb2、-C(＝NRb)NRb2，其中每個X獨立地是鹵素：F、Cl、Br或I；并且每個Rb獨立地是H、烷基、芳基、芳烷基、雜環，或保護基或前藥部分。如本文中所用的術語“前藥”指的是給藥于生物系統時，由于自發化學反應、酶催化的化學反應、光分解和/或代謝化學反應而產生藥物物質(即，活性成分)的任何化合物。因此，前藥是治療活性化合物的共價修飾類似物或潛在形式。“保護基團”是指遮掩或改變官能團的性質或作為整體的化合物的性質的化合物的部分。保護基團的化學結構可以大范圍地改變。保護基團的一個功能是作為母體藥物物質合成中的中間體。化學保護基團和用于保護/去保護的策略是本領域公知的。參見：“ProtectiveGroupsinOrganicChemistry(有機化學中的保護基團)”，TheodoraW.Greene(JohnWiley&Sons，Inc.，NewYork，1991。保護基團通常用于遮掩特定官能團的反應性，以有助于所需化學反應的效率，例如，以有序和計劃的方式遮掩和破壞化學鍵。除了受保護的官能團的反應性，化合物的官能團的保護改變了其他物理性質，如極性、親脂性(疏水性)和可以通過常規分析工具可以測量的其他性質。化學上保護的中間體自身可以是生物活性或無活性的。受保護的化合物還可以呈現出改變的，并且在一些情況中，優化的體外和體內特性，如通過細胞膜以及對酶降解或螯合作用的抵抗力。在這種作用中，具有計劃治療作用的受保護的化合物可以稱為前藥。保護基團的另一個功能是將母藥轉化成前藥，由此前藥在體內轉化時釋放母藥。因為活性前藥可以比母藥更有效地吸收，前藥可以在體內具有比母藥更高的功效。在化學中間體的情況中，在體外，或在前藥的情況中，在體內，除去保護基團。對于化學中間體，去保護后所得到的產物，例如，醇類，在生理學上可接受的，不是特別重要，盡管通常如果產物是藥物學上無害的，則更理想。“前藥部分”指代謝期間，通過水解，酶分裂或通過一些其他過程，在細胞內部系統地從活性抑制化合物分離的不穩定官能團(Bundgaard,Hans,“DesignandApplicationofProdrugs”inATextbookofDrugDesignandDevelopment(1991)，P.Krogsgaard-LarsenandH.Bundgaard,Eds.HarwoodAcademicPublishers,pp.113-191)。能夠酶激活與本發明的膦酸酯前藥化合物相關的機制的酶包括，但不限于，酰胺酶、酯酶、微生物酶、磷脂酶、膽堿酯酶和磷酸酶。前藥部分可以用來增強溶解度，吸收和親脂性，以優化藥物傳遞，生物利用率和功效。前藥部分可以包括活性代謝產物或藥物本身。示例性的前藥部分包括水解作用敏感的或不穩定的酰氧基甲基酯-CH2OC(＝O)R30和酰氧基甲基碳酸酯-CH2OC(＝O)OR30，其中R30是C1-C6烷基、C1-C6取代的烷基、C6-C20芳基或C6-C20取代的芳基。Farquhar等(1983)J.Pharm.Sci.72:324；以及美國專利No.4816570、4968788、5663159和5792756，首先將酰氧基烷基酯用作前體藥物策略，用于羧酸類，然后用于磷酸酯和膦酸酯。在本發明的特定化合物中，前藥部分是磷酸酯基團的一部分。酰氧基烷基可以用于傳遞磷酸通過細胞膜和增強口服生物利用率。酰氧基烷基酯的密切變體，烷氧羰基酯(碳酸酯)，作為本發明組合的化合物中的前體藥物部分，也可以增強口服生物利用率。示例性酰氧基甲基酯是特戊酰氧基甲氧基，(POM)-CH2OC(＝O)C(CH3)3。示例性酰氧基甲基碳酸酯前藥部分是特戊酰氧基甲氧基碳酸酯(POC)-CH2OC(＝O)OC(CH3)3。磷酸酯基團可以是磷酸酯前藥部分。前藥部分可以對水解是敏感的，如，但不限于，包含特戊酰氧基甲氧基碳酸酯(POC)或POM基團的那些。或者，前藥部分可以對酶加強的分裂是敏感的，如乳酸酯或膦酸酯-酯基團。本領域技術人員將認識到應當選擇通式I的化合物的取代基和其他部分，以便提供足夠穩定的化合物，以提供可以配制成可接受穩定的藥物組合物的藥物學上有用的化合物。認為具有這樣穩定性的通式I的化合物落入本發明的范圍內。注意到本發明包括通式I及其藥物學上可接受的鹽(以及復合物、共晶等)、溶劑化物或酯范圍內的化合物的所有對映異構體、非對映異構體和外消旋混合物、互變異構體、多晶型物、假多晶型物。這樣的對映異構體和非對映異構體的所有混合物在本發明的范圍內。通式I的化合物及其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯可以作為不同的多晶型物或假多晶型物存在。如本文中所用的，晶體多晶現象意思是晶體化合物以不同晶體結構存在的能力。晶體多晶現象由晶體堆積的差異(堆積多晶現象)或相同分子的不同構象之間的堆積差異(構象多晶現象)引起的。如本文中所用的，晶體假多晶現象意思是化合物的水合物或溶劑化物以不同晶體結構存在的能力。本發明的假多晶現象可能是由于晶體堆積的差異(堆積假多晶現象)或由于相同分子的不同構象之間的堆積差異(構象假多晶現象)而存在的。本發明包括通式I的化合物的所有多晶型物和假多晶型物及其藥物學上可接受的鹽。通式I的化合物及其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯，還可以作為無定形固體存在。如本文中所用的，無定形固體是其中固體中不存在原子位置的長程序(long-rangeorder)的固體。當晶體大小是兩納米或更小時，該定義也適用。添加劑，包括溶劑，可以用于形成本發明的無定形形式。本發明包括通式I的化合物的所有無定形形式及其藥物學上可接受的鹽。在本發明的特定實施方案中，通式I的化合物由通式II來表示：或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或酯；其中變量與通式I的定義相同。優選，通式II中的R1是H，R4是NH2或＝O，和/或R5是NH2或H。更優選，化合物選自由以下組成的組：或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或酯。在通式I的化合物的優選實施方案中，R1是H、CH2OH、CH2F、CHF2、CH＝CH2、C≡CH、CN、CH2CH＝CH2、N3、CH3或CH2CH3，并且，更優選，R1是H。在本發明進一步的實施方案中，R2是OH或O-芐基，并且，更優選是OH。在本發明進一步的實施方案中，R3是F或N3，并且，更優選R3是F。在進一步優選的實施方案中，R4和R5選自由H、NH2、＝O、NHMe、NHcPr、OH、OMe、Cl、Br、I、SMe、F、N3、CN、CF3和SO2Me組成的組，并且，更優選，R4是O或NH2，和/或R5是H或NH2。在進一步的實施方案中，R6是H、芐基，或其中W2是OH，并且W1是通式Ia的基團：其中：Y是O；M2是2；和每個RX是H，并且，更優選，R6是H。在本發明進一步的實施方案中，R7是H或OH，并且，更優選，R7是H。在本發明的其他優選實施方案中，R1是H，R2是OH和R3是F。在另一個優選實施方案中，R1是H，R2是OH，R3是F，R4和R5是NH2、H或＝O，并且R6和R7是氫。在再另一個優選的實施方案中，R1是H，R2是O-芐基或OH，R3是F，R4是SMe、NH2或＝O，R5是SMe，SO2Me、H或NH2，R6是芐基或其中W2是OH，并且W1是通式Ia的基團：其中：Y是O；M2是2；和每個RX是H，并且R7是H或OH。在本發明的其他特定實施方案中，R4是NH2和R5是H、F、Cl、Br、N3、CN、CF3、NH2、SMe或SO2Me，或R5是NH2和R4是＝O、OH、OMe、Cl、Br、I、NH2、NHMe、NHcPr或SMe。在其優選的實施方案中，R4和R5都是NH2或SMe，R5是H，或R4是＝O。在本發明的另一個實施方案中，R1是H，R2是O-芐基，R3是F，R4是SMe、NH2、OMe或OCH2CH3，R5是H、SMe、SO2Me、NH2、N3或F，R6是芐基，并且R7是H或OH。在本發明的優選實施方案中，通式I的化合物是：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。在本發明的另一個實施方案中，通式I的化合物為：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。在本發明再進一步優選的實施方案中，通式I的化合物為：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。在本發明的特定實施方案中，本發明涉及通式III的化合物：其中R8是NH2、OMe、OCH2CH3或＝O和R9是NH2、H或F，或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。優選，通式III的化合物選自由以下組成的組：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。更優選，通式III的化合物選自由以下組成的組：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。本發明的第二個實施方案涉及包含治療有效量的以上關于本發明第一個實施方案限定的通式I的化合物和藥物學上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物。在其特定的實施方案中，通式I的化合物由以上關于本發明的第一個實施方案限定的通式II或通式III來表示。本發明第二個實施方案中的術語與以上關于本發明的第一個實施方案限定的相同。本發明第二個實施方案中的R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7的優選實施方案與本發明第一個實施方案的相同。在本發明的第二個優選實施方案中，通式I的化合物為：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯，并且，更優選是或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。在本發明的另一個優選實施方案中，通式I的化合物為：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。術語“藥物組合物”和“藥物制劑”在本文中可以互換使用。本發明的藥物組合物含有本發明的化合物并且可以使用任何常規的載體和賦形劑來配制，所述載體和賦形劑將根據常規實踐來選擇。片劑將含有賦形劑、助流劑、填充劑、粘合劑等。含水藥物制劑以無菌形式制備，并且，當打算用于通過口服給藥以外的途徑傳送時，通常將是等滲的。所有藥物制劑將可選含有賦形劑，如“HandbookofPharmaceuticalExcipients(藥物賦形劑手冊)”(1986)中所列的那些。合適的賦形劑包括，但不限于，抗壞血酸和其他抗氧化劑，螯合劑，如EDTA，碳水化物，如葡聚糖，羥基烷基纖維素，羥基烷基甲基纖維素，硬脂酸等。藥物制劑的pH優選范圍為約3至約11，并且更優選約7至約10。盡管活性成分單獨給藥是可能的，但優選將其呈現為藥物制劑。本發明的藥物制劑，用于獸醫和用于人使用，包含至少一種如上限定的活性成分，以及一種或多種載體或賦形劑和可選附加的治療劑。治療有效量或有效劑量在本文中可以互換使用，并且理解為表示產生所需結果需要的活性成分的含量。活性成分的有效劑量至少部分取決于待治療的病癥、毒性、化合物是預防性地使用(較低劑量)或對抗活動的病毒感染、傳送方法和藥物制劑，并且可以通過臨床醫生使用常規劑量遞增研究來容易地確定。有效量可以為約0.0001至約100mg/kg體重/天；優選，約0.01至約10mg/kg體重/天；更優選，約.01至約5mg/kg體重/天；并且最優選，約0.05至約0.5mg/kg體重/天。例如，對于大約70kg體重的成人，日候選劑量范圍為約1mg至約1000mg，優選約5mg至約500mg，并且可以采用單次或多次劑量的形式。在另一個實施方案中，所述藥物組合物進一步包含至少一種附加治療劑。所述附加治療劑可以是另一種通式I的化合物或適于與通式I化合物一起使用的任何治療劑。例如，所述附加治療劑可以選自由皮質類固醇、抗炎信號傳導調節劑、β-2腎上腺素受體激動劑支氣管擴張劑、抗膽堿能藥、粘液溶解劑、高滲鹽水、抑制前炎性細胞移動至感染部位的藥劑，及其混合物組成的組。所述附加治療劑還可以包括用于治療正粘病毒科病毒感染的其他藥物。在其他實施方案中，所述附加治療劑可以是病毒血球凝集素抑制劑、病毒神經氨酸酶抑制劑、M2離子通道抑制劑、正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑、唾液酸酶和用于治療正粘病毒感染的其他藥物。在再另一個實施方案中，所述附加治療劑是病毒唑、奧司他韋、扎那米韋、拉尼米韋、帕拉米韋、金剛胺、金剛乙胺、CS-8958、法匹拉韋、AVI-7100、α-1蛋白酶抑制劑和DAS181。在本發明的其他特定實施方案中，通過藥物組合物治療的正粘病毒感染是由流感A病毒、流感B病毒或流感C病毒引起的。所述藥物組合物包括適用于適于待治療病癥的任何給藥途徑的那些。合適的途徑包括口服、吸入、鼻、局部(包括頰和舌下)、陰道和非腸道(包括皮下、肌內、靜脈內、皮內、鞘內和硬膜外)等。將認識到優選的途徑可以例如隨著接受者的狀況而改變。可以在單位劑型中方便地呈現所述藥物組合物，并且可以通過制藥學領域中已知的任何方法來制備。技術和藥物組合物通常在Remington’sPharmaceuticalSciences(MackPublishingCo.，Easton，PA)中找到。這樣的方法包括使活性成分與載體結合的步驟，所述載體構成一種或多種輔助成分。通常，通過使活性成分與液體載體或細分的固體載體或兩者均勻且密切地結合，并且如果需要，然后將產品成型，來制備藥物組合物。適用于口服給藥的本發明的藥物組合物可以呈現為離散單元，如膠囊、扁囊劑或片劑，各自含有預定含量的活性成分；粉末或顆粒；水性或非水性液體中的溶液或懸浮液；或水包油型液體乳液或油包水型液體乳液。活性成分還可以作為大丸劑、藥糖劑或糊劑來給藥。可以通過壓制或模制來制得片劑，可選使用一種或多種輔助成分。可以通過在合適的機器中壓制自由流動形式的活性成分(如，粉末或顆粒)來制備壓制的片劑，可選與粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑混合。可以通過在合適的機器中模制用惰性液體稀釋劑潤濕的粉末狀活性成分的混合物來制得模制的片劑。片劑可選可以是包衣的或有劃痕的，并且可選配制，使得提供活性成分從其的緩慢或受控釋放。對于眼睛或其他外部組織(例如，嘴和皮膚)的感染，所述藥物組合物優選作為含有活性成分的局部膏劑霜劑來施用，所述活性成分含量為例如0.075％至20％w/w(包括以0.1％w/w增量的0.1％至20％范圍中的活性成分，如0.6％w/w，0.7％w/w等)，優選0.2％至15％w/w，并且最優選0.5％至10％w/w。在膏劑中配制時，所述活性成分可以與石蠟或水混溶性膏劑基料一起使用。或者，可以使用水包油型霜劑基料，在霜劑中配制活性成分。如果需要，霜劑基料的水相可以包括，例如，至少30％w/w的多元醇，即，具有兩個或多個羥基基團的醇，如丙二醇、丁烷1,3-二醇、甘露糖醇、山梨糖醇、甘油和聚乙二醇(包括PEG400)及其混合物。局部藥物組合物可以合適地包括增強活性成分通過皮膚或其他受影響部位吸收或滲透的化合物。這樣的透皮增強劑的實例包括二甲亞砜和相關的類似物。本發明的乳液的油相可以從已知的成分以已知的方式構成。盡管該相可以只包含乳化劑(emulsifier)(另外也稱為乳化劑(emulgent))，但理想地包含至少一種乳化劑與脂肪或油或脂肪和油兩者的混合物。優選，同時包括親水性乳化劑和作為穩定性的親脂性乳化劑。還優選同時包括油或脂肪。總之，含有或不含穩定劑的乳化劑構成所謂的乳化蠟，并且蠟與油和脂肪一起構成所謂的乳化膏劑基料，其形成霜劑藥物組合物的油性分散相。適用于本發明的藥物組合物中的乳化劑和乳化穩定劑包括，但不限于，60、80、鯨蠟硬脂醇、芐醇、肉豆蔻醇、甘油單硬酯酸酯和十二烷基硫酸鈉。用于藥物組合物的合適的油或脂肪的選擇基于實現所需的化妝品特性(cosmeticproperties)。霜劑應當優選是不油膩、不染色且可清洗的產品，具有合適的稠度，以避免從管或其他容器中漏出。直鏈或支鏈、一元-或二元烷基酯，如二-異己二酸酯、異鯨蠟醇硬脂酸酯、椰子脂肪酸的丙二醇二酯、肉豆蔻酸異丙酯、油酸癸酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、棕櫚酸2-乙基己酯或稱作CrodamolCAP的支鏈酯類的混合物，最后三種為優選的酯。這些可以單獨或結合使用，這取決于所需的特性。或者，使用高熔點脂質，如白軟石蠟和/或液體石蠟或其它礦物油。根據本發明的藥物組合物包含與一種或多種藥物學上可接受的載體或賦形劑和可選的其它治療劑一起的根據本發明的組合物。含有活性成分的藥物組合物可以是適合于指定給藥方法的任意形式。當用于口服應用時，例如，可以制成片劑、糖錠、錠劑、水或油混懸浮液、可分散粉劑或顆粒、乳劑、硬或軟膠囊、糖漿劑或酏劑。可以根據藥物組合物制造領域已知的任意方法制備指定用于口服應用的組合物，并且這類組合物可以含有一種或多種試劑，包括甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以便提供適口的制備物。含有活性成分與適合于制備片劑的無毒性藥學上可接受賦形劑的片劑為可接受的。這些賦形劑可以為，例如，惰性稀釋劑，如碳酸鈣或碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；制粒劑和崩解劑，如玉米淀粉或藻酸；粘合劑，如淀粉、明膠或阿拉伯膠；和潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。片劑可以不包衣或通過公知技術，包括微囊化來包衣，以便延緩在胃腸道中崩解和吸收，且由此在較長時間段內提供持續作用。例如，可以使用延時材料，如單獨或與蠟一起使用的甘油單硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。還可以將口服使用的制劑制成硬明膠膠囊，其中將活性成分與惰性固體稀釋劑(如磷酸鈣或高嶺土)混合，或制成軟膠囊，其中將活性成分與水或油介質混合，如花生油、液體石蠟或橄欖油。本發明的含水混懸劑含有活性物質與適于制備含水懸浮液的賦形劑的混合物。這類賦形劑包括懸浮劑，如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉伯樹膠，以及分散或濕潤劑，如天然存在的磷脂(例如，卵磷脂)、環氧烷與脂肪酸的縮合產物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)、環氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產物(例如，十七乙烯氧基鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol))、環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物(例如，聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯)。含水懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑(如對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯)、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑，如蔗糖或糖精。可以通過將活性成分懸浮于植物油(如，花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(如，液體石蠟)中來配制油混懸劑。口服混懸劑可以含有增稠劑，如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可以加入如上面所述那些的甜味劑和矯味劑，以便提供適口的口服制劑。可以通過添加抗氧化劑，如抗壞血酸，對這些組合物防腐。適合于通過添加水制備含水混懸劑的本發明的可分散粉末和顆粒提供了活性成分與分散劑或濕潤劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑的混合物。通過以上述披露舉例說明那些合適的分散劑或濕潤劑和懸浮劑。還可以存在其它賦形劑，例如甜味劑、矯味劑和著色劑。本發明的藥物組合物還可以為水包油型乳劑的形式。油相可以為植物油(如，橄欖油或花生油)、礦物油(如，液體石蠟)，或這些的混合物。合適的乳化劑包括天然存在的樹膠(如，阿拉伯樹膠和黃蓍膠)、天然存在的磷脂(如，大豆卵磷脂)、衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯類或偏酯類，如失水山梨糖醇單油酸酯，以及這些偏酯與環氧乙烷的縮合產物，如聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯。該乳劑還可以包含甜味劑和矯味劑。可以使用甜味劑，如甘油、山梨醇或蔗糖來配制糖漿劑和酏劑。這類藥物組合物還可以含有緩和劑、防腐劑、矯味劑或著色劑。本發明的藥物組合物可以為無菌可注射制劑形式，如無菌可注射的水或油混懸劑。可以按照公知技術，使用這些的合適的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配制該混懸劑。無菌可注射制劑還可以為在無毒性腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或懸浮劑，如在1,3-丁-二醇中的溶液，或制備成凍干粉末。在可以使用的可接受的媒介物和溶劑中有水、林格溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌固定油常用作溶劑或懸浮介質。為了這一目的，可以使用任意溫和的固定油，包括合成的甘油一酯或二酯。此外，脂肪酸，如油酸，同樣可以用于制備可注射制劑。可以與載體材料結合產生單一劑型的活性成分的量根據所治療宿主和特定給藥方式的不同而改變。例如，指定用于對人體口服給藥的定時釋放制劑可以包含混合了適當和便利含量的載體物質的約1mg至1000mg活性成分，所述的載體物質的適當和便利含量可以占總組合物的約5％至約95％(重量：重量)。可以制備該藥物組合物以便提供可易于測定的給藥用量。例如，指定用于靜脈內輸注的水溶液可以包含約3μg至500μg活性成分/毫升溶液，以便以約30mL/hr的速率輸注適當的體積。適合于對眼局部給藥的制劑包括滴眼劑，其中將活性成分溶于或懸浮于合適的載體中，尤其是用于活性成分的含水溶劑中。活性成分優選以0.5至20％的濃度存在于這樣的藥物組合物中。適合于在口腔中局部給藥的制劑包括在矯味基質(通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)中包含活性成分的錠劑；在惰性基質(如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)中包含活性成分的軟錠劑；和在合適的液體載體中包含活性成分的漱口藥。可以將用于直腸給藥的制劑制成含合適基質的栓劑，所述的合適的基質例如可可脂或水楊酸酯。適合于肺內或鼻部給藥的藥物組合物具有例如約0.1至約500μm范圍的粒度大小，如約0.5、約1、約30、約35等，其通過經鼻道快速吸入或通過經口腔吸入給藥，以便達到肺泡囊。合適的藥物組合物包括活性成分的水或油溶液。可以按照常規方法制備適合于氣霧劑或干粉給藥的藥物組合物并且可以使其與其它治療劑(如以下討論的迄今為止用于正粘病毒感染治療或預防中的化合物)一起遞送。在另一個方面中，本發明是包含通式I、II或其藥物學上可接受的鹽的新的、有效的、安全的、無刺激的且在生理上相容的可吸入組合物，適用于治療正粘病毒感染以及潛在相關的細支氣管炎。優選的藥物學上可接受的鹽是無機酸鹽，包括鹽酸、溴酸、硫酸或磷酸鹽，因為它們可以引起較少的肺部刺激。優選，在包含顆粒的氣溶膠中將可吸入的藥物組合物傳送至支氣管內的空間，所述顆粒具有約1至約5μm的質量中值空氣動力學直徑(MMAD)。優選，使用噴霧器、加壓計量吸入器(pMDI)或干粉吸入器(DPI)，將通式I的化合物配制成用于氣溶膠傳送。噴霧器的非限制性實例包括霧化、噴射、超聲波、加壓、振蕩多孔板或等價噴霧器，包括利用適應性氣溶膠傳送技術的那些噴霧器(Denyer，J.AerosolMedicinePulmonaryDrugDelivery2010，23Supp1，S1-S10)。噴射式噴霧器利用氣壓，將液體溶液破壞成氣溶膠液滴。超聲波噴霧器通過壓電晶體工作，壓電晶體將液體剪切成小的氣溶膠液滴。加壓的噴霧系統迫使溶液在壓力下通過小孔，以產生氣溶膠液滴。振蕩多孔板裝置利用快速振蕩，將液體流剪切成合適的液滴大小。在優選的實施方案中，使用能夠將通式I的化合物的藥物組合物霧化成所需MMAD顆粒的噴霧器，將用于噴霧的藥物組合物以包含主要為約1μm至約5μm的MMAD的顆粒的氣溶膠傳送至支氣管內的空間。為了成為治療上最有效的并且避免上呼吸道和全身性副作用，主要的霧化顆粒不應當具有高于約5μm的MMAD。如果氣溶膠含有大量具有大于5μm的MMAD的顆粒，顆粒將沉積在上氣道，降低傳送至下呼吸道中的炎性和支氣管收縮部位的藥物量。如果氣溶膠的MMAD小于約1μm，則顆粒具有保持懸浮在吸入的空氣中的趨勢，并且最后在呼氣過程中排出。根據本發明的方法配制和傳送時，用于噴霧的氣溶膠藥物組合物將治療有效量的通式I的化合物傳送至正粘病毒感染的部位，足以治療正粘病毒感染。必須調節給藥的藥物量，以反映出通式I的化合物的治療有效劑量的傳送的效率。在優選的實施方案中，使用霧化、噴射、加壓、振蕩多孔板或超聲波噴霧器的含水氣溶膠藥物組合物的組合，根據噴霧器，允許至少約20％，至約90％，通常約70％，給藥的通式I、II或III的化合物傳送至氣道中。在優選的實施方案中，傳送至少約30至約50％的活性成分。更優選，傳送約70％至約90％的活性成分。在本發明的另一個實施方案中，作為干的可吸入粉末來傳送通式I的化合物或其藥物學上可接受的鹽。作為干粉藥物組合物在支氣管內給藥本發明的化合物，使用干粉或計量吸入器，將化合物的細粒有效傳送至支氣管內的空間。對于通過DPI的傳送，通過研磨噴霧干燥、臨界流體加工或從溶液沉淀，將通式I的化合物加工成主要具有約1μm至約5μm的MMAD的顆粒。能夠產生具有約1μm至約5μm的MMAD的顆粒大小的介質研磨、噴射研磨和噴霧干燥裝置以及程序是本領域公知的。在一個實施方案中，在加工成所需大小的顆粒之前，將賦形劑加入通式I的化合物中。在另一個實施方案中，將賦形劑與所需大小的顆粒混合，以幫助藥物顆粒的分散，例如，通過使用乳糖作為賦形劑。使用本領域公知的裝置來進行顆粒大小測定。例如，多級Anderson階式撞擊取樣器或其他合適的方法，如美國藥典第601章內特意引用的那些，作為用于計量和干粉吸入器內的氣溶膠的表征裝置。在另一個優選實施方案中，使用如干粉吸入器或其他干粉分配裝置這樣的裝置，作為干粉來傳送通式I的化合物。干粉吸入器和裝置的非限制性實例包括US5,458,135；US5,740,794；US5775320；US5,785,049；US3,906,950；US4,013,075；US4,069,819；US4,995,385；US5,522,385；US4,668,218；US4,667,668；US4,805,811和US5,388,572中公開的那些。存在兩種主要的干粉吸入器設計。一種設計是計量裝置，其中將用于藥物的存儲器放置在裝置內，并且病人將一劑藥物加入吸入室內。第二種設計是工廠-計量裝置，其中已經在分開的容器中制造了每個單獨的計量。兩種系統都依賴于藥物的藥物組合物成為1μm至約5μm的MMAD的小顆粒，并且常常涉及與較大的賦形劑顆粒共同配制，所述賦形劑如，但不限于，乳糖。將藥物粉末置于吸入室中(通過裝置計量或通過工廠計量劑量的破壞)，并且病人的吸氣流促進粉末離開裝置并進入口腔中。粉末路徑的非-層狀流動特征引起賦形劑-藥物聚集物分解，并且大的賦形劑顆粒的團塊使其在喉嚨的背部撞擊，同時較小的藥物顆粒沉積在肺部深處。在優選的實施方案中，使用如本文中所述的任一種類型的干粉吸入器，作為干粉來傳送通式I的化合物或其藥物學上可接受的鹽，其中干粉的MMAD，任何賦形劑不計算在內，主要在約1μm至約5μm的范圍中。在另一個優選的實施方案中，使用計量的劑量吸入器，作為干粉來傳送通式I的化合物。計量的劑量吸入器和裝置的非限制性實例包括US5,261,538；US5,544,647；US5,622,163；US4,955,371；US3,565,070；US3,361306和US6,116,234中公開的那些。在優選的實施方案中，使用計量的劑量吸入器，作為干粉傳送通式I的化合物，或其藥物學上可接受的鹽，其中干粉的MMAD，任何賦形劑不計算在內，主要在約1μm至約5μm的范圍中。可以將適合于陰道給藥的藥物組合物制成陰道栓劑、棉塞、霜劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或噴霧劑。藥物組合物除活性成分外，還含有如本領域公知的合適的這類載體。適合于非腸道給藥的藥物組合物包括水性和非水性的無菌注射溶液，其可以包含抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和賦予制劑與指定接受者血液等滲的溶質；和可以包括懸浮劑和增稠劑的水和非水的無菌混懸劑。在單位劑量或多劑量容器中提供藥物組合物，例如密封安瓿和小瓶，并且可以將其儲存在冷凍干燥(凍干)條件下，這僅需要在使用前即刻添加無菌液體載體，例如注射用水。由上述類型的無菌粉末，顆粒和片劑制備臨時注射溶液和混懸液。優選的單位劑量組合物為含有如上文所述活性成分的劑量或單位日亞劑量或其適當部分的那些。應理解，除上面具體提到的組分外，本發明的藥物組合物可以包括本領域中常規有關所討論藥物組合物類型的其它試劑，例如適合于口服給藥的那些可以包括矯味劑。本發明進一步提供了包含至少一種以上限定的活性成分和獸醫載體的獸醫組合物。獸醫載體是用于給藥組合物目的的材料，并且可以是固體、液體或氣體材料，其在獸醫領域另外是惰性的或可接受的，并且與活性成分相容。這些獸醫組合物可以口服、非腸道或通過任何其他所需途徑給藥。本發明的化合物可以用于提供含有一種或多種本發明的化合物作為活性成分的受控釋放的藥物制劑(“受控釋放制劑”)，其中活性成分的釋放是受控的和受調節的，以允許較少頻率的給藥或提高給定活性成分的藥物動力學或毒性性質。在另一個實施方案中，本發明公開了包含本發明的化合物，或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯，結合至少一種附加治療劑，和藥物學上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物。對于正粘病毒科病毒感染的治療，優選，所述附加治療劑是對抗正粘病毒科病毒感染的活性物質，特別是流感病毒感染。這些活性治療劑的非限制性實例是病毒血球凝集素抑制劑、病毒神經氨酸抑制劑、M2離子通道阻斷劑、正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑和唾液酸酶。神經氨酸酶抑制劑的非限制性實例包括奧司他韋、扎那米韋、拉尼米韋、帕拉米韋和CS-8958。病毒M2通道抑制劑的非限制性實例包括金剛胺和金剛乙胺。正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑的非限制性實例是病毒唑和法匹拉韋。唾液酸酶的非限制性實例是DAS181。在另一個實施方案中，所述附加治療劑選自由病毒唑、奧司他韋、扎那米韋、拉尼米韋、帕拉米韋、金剛胺、金剛乙胺、CS-8958、法匹拉韋、AVI-7100、α-1蛋白酶抑制劑和DAS181組成的組。許多正粘病毒科病毒的感染是呼吸道感染。因此，用于治療呼吸道癥狀和感染后遺癥的附加活性治療劑可以結合通式I、II或III的化合物使用。例如，結合通式I、II或III的化合物用于病毒呼吸道感染治療的其他優選的附加治療劑包括，但不限于，支氣管擴張劑和皮質類固醇。皮質類固醇，其在1950年首先介紹為哮喘治療劑(Carryer，JournalofAllergy，21，282-287，1950)，對于這一疾病，仍然是最有效和一貫有效的治療劑，盡管它們的作用機理尚未完全了解(Morris，J.AllergyClin.Immunol.75(1Pt)1-13，1985)。不幸地，口服皮質類固醇治療與明顯不理想的副作用相關，如軀干肥胖、高血壓、青光眼、葡萄糖不耐受、白內障形成的加速、骨礦物質流失和心理影響，所有這些限制其用作長期治療劑(Goodman和Gilman，第10版，2001)。一種解決全身性副作用的方法是將類固醇藥物直接傳送至炎癥部位。已經研發了吸入的皮質類固醇(ICS)來減輕口服類固醇的嚴重副作用。可以結合通式I的化合物使用的皮質類固醇的非限制性實例是地塞米松、地塞米松磷酸鈉、氟甲龍、醋酸氟甲龍、氯替潑諾、依碳酸氯替潑諾、氫化可的松、潑尼松龍、氟氫可的松、氟羥潑尼松龍、氟羥潑尼松龍丙酮化物、倍他米松、二丙酸倍他米松、甲基潑尼松龍、氟輕松、氟輕松丙酮化物、氟尼縮松、氟尼縮松-21-丁酸酯、氟甲松、特戊酸氟甲松、布地縮松、丙酸鹵倍他索、糠酸莫米松、丙酸氟替卡松、環索奈德；或其藥物學上可接受的鹽。通過抗炎級聯機制作用的其他抗炎劑作為結合通式I的化合物用于病毒性呼吸道感染治療的附加治療劑也是有用的。施用“抗炎信號傳導調節劑”(在本文中稱為AISTM)，如磷酸二酯酶抑制劑(例如，特異性的PDE-4、PDE-5或PDE-7)、轉錄因子抑制劑(例如，通過IKK抑制阻斷NFκB)，或激酶抑制劑(例如，阻斷P38MAP、JNK、PI3K、EGFR或Syk)是停止炎癥的合理方法，因為這些小分子靶向有限數量的常見胞內途徑-對于抗炎治療干預是關鍵點的那些信號傳導途徑(參見P.J.Barnes的綜述，2006)。這些非限制性的附加治療劑包括：5-(2,4-二氟-苯氧基)-1-異丁基-1H-吲唑-6-羧酸(2-二甲基氨基-乙基)-酰胺(P38Map激酶抑制劑ARRY-797)；3-環丙基甲氧基-N-(3,5-二氯-吡啶-4-基)-4-二氟甲氧基-苯甲酰胺(PDE-4抑制劑羅氟司特(Roflumilast))；4-[2-(3-環戊氧基-4-甲氧基苯基)2-苯基-乙基]-吡啶(PDE-4抑制劑CDP-840)；N-(3,5-二氯-4-吡啶基)-4-(二氟甲氧基)-8-[(甲基磺酰)氨基]-1-二苯并呋喃氨甲酰(PDE-4抑制劑歐格米拉(Oglemilast))；N-(3,5-二氯-吡啶-4-基)-2-[1-(4-氟芐基)-5-羥基-1H-吲哚-3-基]-2-氧-乙酰胺(PDE-4抑制劑AWD12-281)；8-甲氧基-2-三氟甲基-喹啉-5-羧酸(3,5-二氯-1-氧-吡啶-4-基)-酰胺(PDE-4抑制劑Sch351591)；4-[5-(4-氟苯基)2-(4-甲烷磺酰-苯基)-1H-咪唑-4-基]-吡啶(P38抑制劑SB-203850)；4-[4-(4-氟-苯基)-1-(3-苯基-丙基)-5-吡啶-4-基-1H-咪唑-2-基]-丁-3-基-1-醇(P38抑制劑RWJ-67657)；4-氰基-4-(3-環戊氧基-4-甲氧基-苯基)-環己烷羧酸2-二乙基氨基-乙酯(西洛司特(Cilomilast)的2-二乙基-乙酯前藥；PDE-4抑制劑)；(3-氯-4-氟苯基)-[7-甲氧基-6-(3-嗎啉-4-基-丙氧基)-喹啉-4-基]-胺(吉非替尼(Gefitinib)，EGFR抑制劑)；和4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-N-[4-甲基-3-(4-吡啶-3-基-嘧啶-2-基氨基)-苯基]-苯甲酰胺(伊馬替尼(Imatinib)，EGFR抑制劑)。抑制前炎性細胞移動至感染部位的藥劑作為結合通式I的化合物用于治療病毒性呼吸道感染的附加治療劑也是有用的。通過這種機理作用的并且已經在動物中通過例如降低由流感引起的最終死亡率證明了實用性的這樣的藥劑的非限制性是EV-077(雙重凝血噁烷合成酶抑制劑/凝血噁烷受體拮抗劑)和(鞘氨醇-1-磷酸受體拮抗劑)。包含吸入的β2-腎上腺受體激動劑支氣管擴張劑(如，福莫特羅(formoterol)、舒喘靈(albuterol)或沙美特羅(salmeterol))和通式I的化合物的組合物也是合適的，但不限制，用于治療呼吸道病毒感染的組合物。吸入的β2-腎上腺受體激動劑支氣管擴張劑(如，福莫特羅或沙美特羅)結合ICS的組合物也用于治療支氣管收縮和炎癥(分別為和)。包含這些ICS和β2-腎上腺受體激動劑組合物連同通式I的化合物的組合物也是合適的，但不限制，用于治療呼吸道病毒感染的組合物。對于非支氣管梗阻的治療或預防，抗膽堿能藥是潛在有用的，并且因此，用作結合通式I的化合物用于治療病毒性呼吸道感染的附加治療劑。這些抗膽堿能藥包括，但不限于，毒蕈堿受體的拮抗劑(特別是M3亞型)，其已經在人類中顯示出用于控制COPD中的膽堿能緊張的治療功效(Witek，1999)；1-{4-羥基-1-[3,3,3-三-(4-氟-苯基)-丙酰基]-吡咯烷-2-羰基}-吡咯烷-2-羧酸(1-甲基-哌啶-4-基甲基)-酰胺；3-[3-(2-二乙基氨基-乙酰氧)-2-苯基-丙酰氧]-8-異丙基-8-甲基-8-氮陽離子-雙環[3.2.1]辛烷(異丙托胺(Ipratropium)-N,N-二乙基甘氨酸酯)；1-環己基-3,4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸1-氮雜-雙環[2.2.2]辛-3-基酯(索非那新(Solifenacin))；2-羥甲基-4-甲烷磺酰基-2-苯基-丁酸1-氮雜-雙環[2.2.2]辛-3-基酯(瑞伐托酯(Revatropate))；2-{1-[2-(2,3-二氫-苯并呋喃-5-基)-乙基]-吡咯烷-3-基}-2,2-二苯基-乙酰胺(達非那新(Darifenacin))；4-氮雜卓(Azepan)-1-基-2,2-二苯基-丁酰胺(Buzepide)；7-[3-(2-二乙基氨基-乙酰氧)-2-苯基-丙酰氧]-9-乙基-9-甲基-3-氧雜-9-氮陽離子-三環[3.3.1.02,4]壬烷(氧托(Oxitropium)-N,N-二乙基甘氨酸酯)；7-[2-(2-二乙基氨基-乙酰氧)-2,2-二-噻吩-2-基-乙酰氧]-9,9-二甲基-3-氧雜-9-氮陽離子-三環[3.3.1.02,4]壬烷(噻托(Tiotropium)-N,N-二乙基甘氨酸酯)；二甲基氨基-乙酸2-(3-二異丙基氨基-1-苯基-丙基)-4-甲基-苯酯(托特羅定(Tolterodine)-N,N-二甲基甘氨酸酯)；3-[4,4-雙-(4-氟-苯基)-2-氧-咪唑啉-1-基]-1-甲基-1-(2-氧-2-吡啶-2-基-乙基)-吡咯烷；1-[1-(3-氟-芐基)-哌啶-4-基]-4,4-雙-(4-氟-苯基)-咪唑啉-2-酮；1-環辛基-3-(3-甲氧基-1-氮雜-雙環[2.2.2]辛-3-基)-1-苯基-丙-2-基-1-醇；3-[2-(2-二乙基氨基-乙酰氧)-2,2-二-噻吩-2-基-乙酰氧]-1-(3-苯氧基-丙基)-1-氮陽離子-雙環[2.2.2]辛烷(阿地(Aclidinium)-N,N-二乙基甘氨酸酯)；或(2-二乙基氨基-乙酰氧)-二-噻吩-2-基-乙酸-1-甲基-1-(2-苯氧基-乙基)-哌啶-4-基酯。通式I的化合物也可以結合粘液溶解劑來治療呼吸道感染的感染和癥狀。粘液分解劑的非限制性實例是氨溴索(ambroxol)。相似地，通式I的化合物可以結合祛痰劑來治療呼吸道感染的感染和癥狀。祛痰劑的非限制性實例是愈創甘油醚(guaifenesin)。噴霧的高滲鹽水用于提高肺病病人中小氣道的即時和長期的清潔(Kuzik，J.Pediatrics2007，266)。通式I的化合物也可以結合噴霧的高滲鹽水，特別是正粘病毒科病毒感染并發支氣管炎時。通式I的化合物與高滲鹽水的組合還可以包括以上討論的任一種其他藥劑。在優選的方面中，使用噴霧的約3％高滲鹽水。還可以在單位劑型中，將本發明的任一種化合物結合一種或多種附加活性治療劑，用于同時或按序給藥于病人。聯合治療可以作為同時或按序的給藥方案來給藥。按序給藥時，可以在兩次或多個給藥中給藥所述組合物。本發明的化合物與一種或多種附加活性治療劑的共同給藥通常是指本發明的化合物和一種或多種附加活性治療劑的同時或按序給藥，使得治療有效量的本發明的化合物和一種或多種附加活性治療劑都存在于病人體內。共同給藥包括在給藥單位劑量的一種或多種附加活性治療劑之前或之后，給藥單位劑量的本發明的化合物，例如，在給藥一種或多種附加活性治療劑的幾秒、幾分鐘或幾小時內給藥本發明的化合物。例如，可以首先給藥單位劑量的本發明的化合物，接著在幾秒或幾分鐘內給藥單位劑量的一種或多種附加活性治療劑。或者，可以首先給藥單位劑量的一種或多種附加治療劑，接著在幾秒或幾分鐘內給藥單位劑量的本發明的化合物。在一些情況中，希望首先給藥單位劑量的本發明的化合物，接著，在幾小時的時間段后(例如，1-12小時)，給藥單位劑量的一種或多種附加活性治療劑。在其他情況中，希望首先給藥單位劑量的一種或多種附加活性治療劑，接著，在幾小時的時間段后(例如，1-12小時)，給藥單位劑量的本發明的化合物。本發明的第三個實施方案涉及一種治療需要的哺乳動物的正粘病毒感染的方法。該方法包括給藥治療有效量的以上關于本發明的第一個實施方案限定的通式I的化合物的步驟。在其特定的實施方案中，通式I的化合物由通式II或通式III來表示，如以上關于本發明的第一個實施方案所限定的。本發明的第三個實施方案中的術語與以上關于本發明的第一個和第二個實施方案相同。本發明的第三個實施方案中的R1、R2、R3、R4、R5、R6和R7的優選實施方案與本發明的第一個實施方案的相同。優選，通式I的化合物是：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯，并且更優選是或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。在本發明另一個優選實施方案中，通式I的化合物是：或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯。在本發明的另一個實施方案，將治療有效量的通式I的化合物或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯的外消旋物、對映異構體、非對映異構體、互變異構體、多晶型物、假多晶型物、無定形或水合物給藥于需要的哺乳動物。在另一個實施方案中，提供了通式I的化合物或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯用于治療由正粘病毒科病毒引起的病毒感染的用途。在這第三個實施方案的另一個方面中，待治療的正粘病毒感染是流感病毒A感染。在這第三個實施方案的另一個方面中，待治療的正粘病毒感染是流感病毒B感染。在這第三個實施方案的另一個方面中，待治療的正粘病毒感染是流感病毒C感染。在優選的實施方案中，本發明的方法包括通過給藥治療有效量的通式I的化合物或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯來治療需要的哺乳動物的正粘病毒感染。在另一個實施方案中，本發明的方法包括通過給藥治療有效量的藥物組合物來治療需要的哺乳動物的正粘病毒感染，所述藥物組合物包含有效量的通式I的化合物或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯，并結合藥物學上可接受的稀釋劑或載體。本領域已知的用于藥物組合物中的，還是與制劑的其他成分相容的并且在生理上對其接受者是無害的任何載體或稀釋劑，可以用于本發明中。合適的稀釋劑包括，但不限于，碳酸鈣或碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉。在另一個實施方案中，本發明的方法包括通過給藥治療有效量的包含有效量的通式I化合物或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯結合至少一種附加治療劑的藥物組合物來治療需要的哺乳動物的正粘病毒感染。所述附加治療劑可以是適于與通式I化合物一起使用的任何治療劑。例如，治療劑可以選自由病毒血球凝集素抑制劑、病毒神經氨酸酶抑制劑、M2離子通道阻斷劑、正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑、唾液酸酶和用于治療正粘病毒感染的其他藥物組成的組。在再另一個實施方案中，本發明提供了治療病人正粘病毒感染的方法，其包括：將治療有效量的通式I、II的化合物，或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯給藥于病人。在再另一個實施方案中，本申請提供了治療病人正粘病毒感染的方法，其包括：將治療有效量的通式I、II的化合物，或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯和至少一種附加活性治療劑給藥于病人，由此抑制正粘病毒聚合酶。在再另一個實施方案中，本發明提供了治療病人正粘病毒感染的方法，其包括：將治療有效量的通式I、II的化合物，或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯和至少一種附加活性治療劑給藥于病人，所述至少一種其他活性治療劑選自由干擾素、病毒唑類似物、病毒血球凝集素抑制劑、病毒神經氨酸酶抑制劑、M2離子通道阻斷劑、正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑、唾液酸酶和用于治療正粘病毒感染的其他藥物組成的組。在再另一個實施方案中，本申請提供了本發明的化合物，或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物和/或酯，用于制備用于治療病人正粘病毒感染的藥物的用途。在本發明的另一個方面中，以下公開了方法，其可以用于制備本發明的通式I化合物。本發明的另一個方面涉及抑制正粘病毒聚合酶活性的方法，其包括用本發明的組合物處理懷疑含有正粘病毒科病毒的樣品的步驟。本發明的組合物可以作為正粘病毒聚合酶的抑制劑，作為用于這樣的抑制劑的中間體，或具有以下所述的其他用途。所述抑制劑將結合正粘病毒聚合酶的表面上或腔內的具有正粘病毒聚合酶獨有幾何形狀的位置。結合正粘病毒聚合酶的組合物可以以不同程度的可逆性來結合。那些實質性地不可逆地結合的化合物是用于本發明的這種方法中的理想候選物。一旦被標記，將實質性地不可逆地結合組合物用作檢測正粘病毒聚合酶的探針。因此，本發明涉及檢測懷疑含有正粘病毒聚合酶的樣品中的正粘病毒聚合酶的方法，其包括步驟：用包含結合標記的本發明化合物的組合物處理懷疑含有正粘病毒聚合酶的樣品；和觀察樣品對標記活性的作用。合適的標記是診斷領域公知的并且包括穩定的自由基、熒光團、放射性同位素、酶、化學發光基團和色原。使用官能團，如羥基、羧基、硫氫基或氨基，以常規方式來標記本文中的化合物。在本發明的內容中，懷疑含有正粘病毒聚合酶的樣品包括天然或人造材料，如活生物體；組織或細胞培養物；生物樣品，如生物材料樣品(血液、血清、尿液、腦脊髓液、淚液、痰液、唾液、組織樣品等)；實驗室樣品；食物、水或空氣樣品；生物制品樣品，如細胞提取物，特別是合成所需糖蛋白的重組細胞；等等。通常，將懷疑樣品含有產生正粘病毒聚合酶的生物體，常常是病原生物體，如正粘病毒科病毒。樣本可以包含在任何介質中，包括水和有機溶劑\水混合物。樣品包括活生物體，如人，以及人造材料，如細胞培養物。本發明的處理步驟包括將本發明的組合物加入樣品中或將組合物的前體加入樣品中。添加步驟包括如本文中所述的任一種給藥方法。如果需要，可以通過包括檢測正粘病毒聚合酶活性的直接或間接方法的任一種方法來觀察施用組合物后的正粘病毒聚合酶的活性。測定正粘病毒聚合酶活性的定量、定性和半定量方法全都考慮了。通常，使用以上所述篩選方法之一，然而，任何其他方法，如觀察活生物體的生理特性，也是適用的。含有正粘病毒聚合酶的生物體包括正粘病毒科病毒。本發明的化合物在動物或人的正粘病毒感染的治療或預防中是有用的。在再另一個實施方案中，本申請提供了抑制細胞中的正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶的方法，其包括：將正粘病毒科病毒感染的細胞接觸有效量的通式I、II的化合物，或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯，由此抑制正粘病毒聚合酶。在這個實施方案的一個方面中，還將細胞接觸至少一種附加治療劑。在本發明的特定實施方案中，正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶可以是流感病毒ARNA-依賴性RNA聚合酶、流感病毒BRNA-依賴性RNA聚合酶、流感病毒CRNA-依賴性RNA聚合酶，或其混合物。在再另一個實施方案中，本申請提供了抑制細胞中的正粘病毒聚合酶的方法，其包括：將感染了正粘病毒科病毒的細胞接觸有效量的通式I、II的化合物，或其藥物學上可接受的鹽、溶劑化物或酯，和至少一種附加活性治療劑，所述至少一種附加活性治療劑選自由干擾素、病毒唑類似物、病毒神經氨酸酶抑制劑、病毒神經氨酸酶抑制劑、M2離子通道阻斷劑、正粘病毒RNA-依賴性RNA聚合酶抑制劑、唾液酸酶和用于治療正粘病毒感染的其他藥物組成的組。在另一個方面中，本發明還提供了本文中公開的方法和新的中間體，其用于制備本發明的通式I化合物。在其他方面中，提供了用于合成、分析、分選、分離、純化、表征和測試本發明的化合物的新方法。還落入本發明范圍內的是本文中所述的化合物的體內代謝產物，至這樣的產物是新的并且現有技術非顯而易見的程度。這樣的產物源自例如給藥化合物的氧化、還原、水解、酰胺化、酯化等，主要是由于酶過程。因此，本發明包括通過通過以下方法產生的新的和非顯而易見的化合物，所述方法包括將本發明的化合物接觸哺乳動物一段足以產生其代謝產物的時間。通常通過制備放射性標記的本發明的化合物(例如，14C或3H)，以可檢測的劑量(例如，高于約0.5mg/kg)非腸道地給藥于動物，如大鼠、小鼠、豚鼠、猴子，或給藥于人，允許足夠的時間來進行代謝(通常約30秒至30小時)并從尿液、血液或其他生物樣品分離其轉化產物，從而來鑒定這樣的產物。這些產物是容易分離的，因為它們是標記的(其他通過使用能夠結合代謝物中存活的表位的抗體來分離)。以常規方式，例如，通過MS或NMR分析來測定代謝物結構。通常，以本領域技術人員公知的與常規藥物代謝研究相同的方式來進行代謝物的分析。轉化產物，只要它們沒有另外在體內發現，在用于本發明化合物的治療給藥的診斷試驗中是有用的，即使它們不具有其自身的正粘病毒聚合酶抑制活性。用于測定化合物在替代胃腸道分泌中的穩定性的配方和方法是已知的。在37℃下孵育1小時時，低于約50摩爾百分比的受保護基團在替代腸或胃液中是去保護的情況中，在本文中將化合物限定為穩定的。不能僅僅因為化合物對胃腸道是穩定就意味著它們不能在體內水解。本發明的前藥通常在消化系統中將是穩定的，但在消化腔、肝或其他代謝器官中，或通常在細胞內，可以實質性地水解成母藥。實施例特定的縮寫和首字母縮略詞用于描述實驗的詳細內容。盡管這些中的大部分是本領域技術人員理解的，但表1包含了這些縮寫和首字母縮略詞中的許多的列表。表1.縮寫和首字母縮略詞列表化合物的制備化合物1：(2S,3R,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-2-(2,4-二(甲硫基)咪唑并[1.2-f][1,2.4]三嗪-7-基)-3-氟四氫呋喃-2-醇向-78℃的THF(30ml)中的7-溴-2,4-二(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(2.5g，7.57mmol)的混合物中，逐滴加入nBuLi(己烷中1.6M，6.15ml，9.84mmol)。在-78℃攪拌30分鐘后，逐滴加入THF(5ml)中的(3R,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟二氫呋喃-2(3H)-酮(2.43g，8.33mmol)。在-78℃攪拌3小時后，使混合物溫熱至室溫。然后將混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后用飽和NH4Cl淬滅。用乙酸乙酯提取反應。層分離，并且用鹽水洗滌合并的有機層，通過Na2SO4干燥，并濃縮，以提供粗制物，其可以通過快速柱色譜使用乙酸乙酯/己烷純化，以提供作為黃色泡沫的所需化合物(2S,3R,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-2-(2,4-二(甲硫基)咪唑并[1.2-f][1,2.4]三嗪-7-基)-3-氟四氫呋喃-2-醇(1)(2g，48％)。MS(m/z)：543.2[M+H]+。化合物2：7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2,4-二(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪向-78℃的二氯甲烷(3ml)中的(2S,3R,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-2-(2,4-二(甲硫基)咪唑并[1.2-f][1,2.4]三嗪-7-基)-3-氟四氫呋喃-2-醇(1)(300mg，0.55mmol)的溶液中逐滴加入BF3OEt2(1.20ml，8.81mmol)，接著加入Et3SiH(1.52ml，8.81mmol)。使反應溫熱至室溫，并且攪拌2小時，接著用飽和NaHCO3淬滅，接著用二氯甲烷提取。分離有機層，用鹽水洗滌，通過Na2SO4干燥，并濃縮，以提供粗制物，其可以通過快速柱色譜使用乙酸乙酯/己烷純化，以提供所需化合物7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2,4-二(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(2)(218mg，75％)。MS(m/z)：527.2[M+H]+。化合物3：7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺將液氨(120ml)中的7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2,4-二(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(2)在鋼制反應釜中在60℃下加熱18小時。將反應釜冷卻至室溫，并且通過快速柱色譜使用乙酸乙酯/己烷純化反應，以提供所需化合物7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(3)(330mg，89％)。MS(m/z)：496.2[M+H]+。化合物4：7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-(甲磺酰基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺向二氯甲烷(10ml)中的7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(3)(330mg，0.57mmol)溶液中，一次性加入3-氯過氧苯甲酸(MCPBA，77％)(627mg，3.42mmol)。使反應溫熱至室溫并攪拌2小時。用H2O(15ml)中的20％Na2SO4淬滅反應，并且攪拌20分鐘。分離層，并且用二氯甲烷提取水溶液。用飽和的NaHCO3和鹽水洗滌合并的有機層，然后通過Na2SO4干燥，并濃縮，以提供粗制混合物，其可以通過硅膠柱色譜使用乙酸乙酯/二氯甲烷純化，以提供作為透明油的所需化合物7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-(甲磺酰基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4)(276mg，87％)。MS(m/z)：528.1[M+H]+。化合物5：7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2,4-二胺將液氨(100ml)中的7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-(甲磺酰基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4)(276mg，0.52mmol)在鋼制反應釜中在110℃下加熱26小時。將反應釜冷卻至室溫，并且通過快速柱色譜使用乙酸乙酯/二氯甲烷純化粗反應，以提供所需化合物7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2,4-二胺(5)(185mg，78％)。MS(m/z)：465.3[M+H]+。化合物6：(2S,3S,4R,5R)-5-(2,4-二氨基咪唑并[1,2-f][1,2,4]-三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇向乙酸(10ml)中的7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2,4-二胺(5)(145mg，0.31mmol)溶液中加入10％Pd/CDegussa型E101NE/W(290mg)。反應氣氛交換為H2(g)，并且將反應攪拌18小時。通過過濾除去催化劑，并且將混合物在減壓下濃縮。將粗制物干燥，以提供作為白色固體的所需產物(2S,3S,4R,5R)-5-(2,4-二氨基咪唑并[1,2-f][1,2,4]-三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇(6)(85mg，96％)。MS(m/z)：285.2[M+H]+。1HNMR(400MHz,CD3OD):δ7.45(s,1H),5.44-5.38(m,1H),5.24-5.11(d,J＝,1H),4.38-4.33(m,1H),3.98(s,1H),3.91-3.70(m2H)。19F(376MHz,CD3OD):δ(-199.86)-(-200.13)(m)化合物7：2-氨基-7-(2S,3S,4R,5R)-3-氟-4-羥基-5-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[1.2-f][1,2,4]三嗪4(3H)-酮向800ml水中的(2S,3S,4R,5R)-5-(2,4-二氨基咪唑并[1,2-f][1,2,4]-三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇(6)(310mg，1.09mmol)溶液中，加入IX型牛脾腺苷脫氨酶(CasNo.9026-93-1，205μL)。將溶液置于37℃水浴中16小時。將溶液濃縮，并且使用水作為結晶溶劑，將最終化合物結晶，從雜質中分離出來。收集固體，并干燥，以提供作為純的月白色固體的2-氨基-7-(2S,3S,4R,5R)-3-氟-4-羥基-5-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[1.2-f][1,2,4]三嗪4(3H)-酮(7)(246mg，80％)。MS(m/z)：286.2[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.27(s,1H),7.41(s,1H),6.24(s,2H),5.43-5.42(m,1H),5.26-5.20(d,J＝22.8Hz,1H),5.09-4.85(m,2H),4.14-4.09(m,1H),3.77(s,1H),3.69-3.51(m,2H)。19F(376MHz,DMSO-d6):δ(-196.68)-(-196.94)(m)化合物8：((2R,3R,4R,5S)-5-(2-氨基-4-氧-3,4-二氫咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-3-羥基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲基四氫三磷酸鹽在惰性氣氛(N2)下，將2-氨基-7-(2S,3S,4R,5R)-3-氟-4-羥基-5-(羥甲基)四氫呋喃-2-基)咪唑并[1.2-f][1,2,4]三嗪4(3H)-酮(7)(12mg，0.042mmol)溶解于三甲基磷酸鹽(1mL)中。加入氯化氧磷(58mg，0.378mmol)并且將混合物在0℃攪拌2小時，在室溫攪拌2小時。通過分析離子交換柱的監控測定了>80％的單磷酸鹽形成的時間。將溶液冷卻至0℃，并且加入無水DMF(1mL)中的三丁胺(0.15mL，0,63mmol)和三乙氨焦磷酸鹽(0.25g，0.55mmol)溶液。將反應混合物在0℃攪拌2.5小時，然后通過加入H2O(6mL)中的1N三乙氨二碳酸鹽溶液來淬滅。將混合物在減壓下濃縮，并且將殘余物重新溶解于H2O中。將溶液接受離子交換色譜，以產生所述產物((2R,3R,4R,5S)-5-(2-氨基-4-氧-3,4-二氫咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-3-羥基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲基四氫三磷酸鹽(作為四三乙氨鹽)(11mg，28％產量)。MS(m/z)：526.0[M+H]+。1HNMR(400MHz,D2O):δ7.53(s,1H),5.43-5.37(d,J＝24.8Hz,1H),5.29-5.15(d,J＝55.2,1H),4.52-3.47(m,4H)。19F(376MHz,D2O):δ(-197.33)-(-197.60)(m,IF)31P(162MHz,D2O)δ(-10.66)-(-10.78)(d,J＝48.4Hz,IP),(-11.070)-(-11.193)(d,J＝49.2Hz,IP),(-22.990)-(-23.236)(m,IP)。HPLC離子交換：溶劑A：水；溶劑B：1M三乙胺二碳酸鹽。12分鐘內0-50％，然后100％5分鐘，然后在5分鐘內回到0％。柱：Dionex，DNAPacPA-100，4×250mm。TR＝12.04min化合物9：7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺向-78℃的THF(5ml)中的7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-(甲磺酰基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(4)(63mg，0.12mmol)溶液中逐滴加入LiBHEt3(THF中的1.0M，4.78ml，4.78mmol)。將反應溫熱至室溫并且在室溫下攪拌31小時。用冰水淬滅反應混合物，并且用乙酸乙酯提取。用鹽水洗滌有機溶液，并且濃縮，以獲得粗制混合物，將其溶解于CH3OH中并且在真空下濃縮(3x)。通過硅膠色譜用乙酸乙酯/二氯甲烷純化粗制物，以提供所需產物7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(9)(50mg，95％產量)。MS(m/z)：450.3[M+H]+。化合物10：(2S,3S,4R,5R)-5-(4-氨基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇向乙酸(5ml)中的7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(9)(50mg，0.11mmol)溶液中加入10％Pd/C(100mg)。將反應容器氣氛交換為氫，并且將反應在室溫下攪拌過夜。將反應通過硅藻土過濾，并且用CH3OH洗滌。將濾液濃縮，以產生粗制混合物，將其通過硅膠柱色譜使用CH3OH/二氯甲烷純化，以提供作為白色固體的所需產物(2S,3S,4R,5R)-5-(4-氨基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇(10)(23mg，77％產量)。MS(m/z)：270.2[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.22(d,J＝26Hz,2H),8.07(s,1H),7.67(s,1H),5.50-5.48(d,J＝6.4,1H),5.42-5.36(m,lH),5.19-5.03(m,1H),4.88-4.85(m,1H),4.19-4.11(m,1H),3.83-3.81(m,1H),3.72-3.67(m,1H),3.54-3.50(m,1H)。19F(376MHz,CD3OD):δ(-196.69)-(-196.95)(m)化合物11：7-(2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-氟咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺將4mL50％HF/吡啶中的7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-2,4-二胺(5)(140mg，0.30mmol)在-10℃浴中攪拌，并且加入45μL(0.38mmol)t-亞硝酸丁酯。將反應在低溫下攪拌1小時。通過加入50mLH2O淬滅反應，并且用2x50mL二氯甲烷提取水層。將合并的有機物通過Na2SO4干燥并濃縮。在6g硅膠上色譜分離殘余物，以提供所需化合物7-(2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-氟咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(11)(50mg，36％)。MS(m/z)：468.2[M+H]+。1HNMR(400MHz,CDC13):7.60(s,1H),7.3-7.2(bm,10H),7.14(bs,1H),6.37(bs,1H),5.46-5.48(dd,J＝23.2,2.4Hz,1H),5.29-5.15(m,lH),4.72(m,1H),4.56-4.52(m,2H),4.29(m,2H),3.83-3.81(m,1H),3.65-3.63(m,1H)。19F(376MHz,CDC13):δ-69.1(s),(-197.7)-(-198.0)(m)。化合物12：(2R,3R,4R,5S)-5-(4-氨基-2-氟咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇向乙酸(8ml)中的7-(2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-2-氟咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-4-胺(11)(50mg，0.11mmol)溶液中，加入10％Pd/C(100mg)。將反應容器的氣氛交換為氫，并且將反應在室溫下攪拌過夜。將反應通過硅藻土過濾，并用乙酸洗滌，然后用CH3OH洗滌。將濾液濃縮，以獲得粗制混合物，將其通過反相HPLC純化，以提供作為白色固體的所需產物(2R,3R,4R,5S)-5-(4-氨基-2-氟咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇(12)(26mg，84％)。MS(m/z)：288.1[M+H]+。1HNMR(400MHz,CD3OD):δ7.66(s,1H),5.47-5.41(dd,J＝23.6,2.4Hz,1H),5.21-5.06(m,lH),4.35-4.27(m,1H),3.93(bm,1H),3.88(m,1H),3.68(m,1H)。19F(376MHz,CD3OD):δ-72.15(s),(-199.39)-(-196.69)(m)化合物13：7-溴-4-乙氧基-2-(甲硫基)-咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪在室溫下，向EtOH(25ml)中的7-溴-2,4,-二(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(1.0g，3.45mmol)的混合物中，加入NaOEt(EtOH中的21％，1.28ml，3.45mmol)。在室溫下攪拌1小時后，用AcOH(1mL)淬滅反應。在減壓下除去溶劑，并且將混合物在CH2Cl2和1/2飽和鹽水之間分離。分離有機物，通過Na2SO4干燥，通過過濾除去固體，并在減壓下除去溶劑。通過快速柱色譜使用乙酸乙酯/己烷純化粗制材料，以提供作為黃色泡沫的所需化合物7-溴-4-乙氧基-2-(甲硫基)-咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(13)(791mg，79％)。MS(m/z)：288.9/290.8[M+H]+。化合物14：(2S,3R,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-2-(4-乙氧基-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2.4]三嗪-7-基)-3-氟四氫呋喃-2-醇向-78℃的THF(15ml)中的7-溴-4-乙氧基-2-(甲硫基)-咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(13)(917mg，3.17mmol)混合物中，加入LaCl3*2LiCl(THF中的0.6M，5.28mL，3.17mmol)，接著逐滴加入nBuLi(己烷中2.5M，1.27ml，3.17mmol)。在-78℃攪拌30分鐘后，逐滴加入THF(10ml)中的(3R,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟二氫呋喃-2(3H)-酮(805mg，2.44mmol)。在-78℃攪拌30分鐘并使混合物溫熱至室溫后，將混合物在室溫攪拌30分鐘，然后用AcOH淬滅。用乙酸乙酯提取反應。分離層，并且用鹽水洗滌合并的有機層，通過Na2SO4干燥，并濃縮，以提供粗制物，其可以通過快速柱色譜使用乙酸乙酯/己烷來純化，以提供作為黃色泡沫的所需化合物(2S,3R,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-2-(4-乙氧基-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2.4]三嗪-7-基)-3-氟四氫呋喃-2-醇(14)(244mg，19％)。MS(m/z)：541.1[M+H]+。化合物15：7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-4-乙氧基-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪在0℃下向CH2Cl2(5ml)中的(2S,3R,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-2-(4-乙氧基-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3-氟四氫呋喃-2-醇(X)(244mg，0.45mmol)溶液中逐滴加入BF3OEt2(900μl，3.5mmol)，接著加入Et3SiH(600μl，3.5mmol)。使反應溫熱至室溫并且攪拌3小時。用飽和NaHCO3淬滅反應，并用CH2Cl2提取。分離有機層，用鹽水洗滌，通過Na2SO4干燥并濃縮，以產生粗制物，將其通過快速柱色譜使用乙酸乙酯/己烷純化，以提供所需化合物7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-4-乙氧基-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(15)(107mg，46％)。MS(m/z)：525.1[M+H]+。化合物16：7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-4-乙氧基-2-(甲基磺酰基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪在室溫下向CH2Cl2(3ml)中的7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-4-乙氧基-2-(甲硫基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(15)(107mg，0.204mmol)溶液中一次性加入3-氯過氧苯甲酸(MCPBA，77％)(100mg，0.443mmol)。將反應在室溫下攪拌4小時。用H2O中的20％NaS2O3溶液(5ml)淬滅反應，并使其攪拌20分鐘。分離層，并用CH2Cl2提取水溶液。用飽和NaHCO3、鹽水洗滌合并的有機層，通過Na2SO4干燥并濃縮，以提供粗制7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-4-乙氧基-2-(甲基磺酰基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(16)，其不需要純化繼續進行。MS(m/z)：557.1[M+H]+。化合物17：2-疊氮-7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-4-乙氧基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪向DMSO(5mL)中的NaN3(66mg，1.01mmol)溶液中，一次性地加入7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-4-乙氧基-2-(甲基磺酰基)咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(16)(113mg，0.203mmol)。使反應在室溫下攪拌16小時。將混合物在EtOAc/H2O之間分離。分離有機物，并通過Na2SO4干燥，并且通過硅膠色譜使用EtOAc/己烷純化，以提供作為月白色固體的2-疊氮-7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-4-乙氧基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(17)(93mg，88％)。MS(m/z)：520.05[M+H]+。化合物18：(2R,3R,4R,5S)-5-(2-氨基-4-乙氧基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇用氬沖洗CH3OH(5mL)中的2-疊氮-7-((2S,3S,4R,5R)-4-(芐氧基)-5-(芐氧基甲基)-3-氟四氫呋喃-2-基)-4-乙氧基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪(17)(93mg，0.18mmol)，并加入10％Pd/C(100mg)。排空反應容器，并且用H2回裝三次。然后使反應混合物在氫氣氛下攪拌16小時。濾掉固體，并且在減壓下取出有機物，以獲得粗制材料，通過HPLC純化，以獲得作為白色固體的(2R,3R,4R,5S)-5-(2-氨基-4-乙氧基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇(18)(27mg，48％)。MS(m/z)：314.10[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.526(s,1H),8.07(s,1H),6.55(s,2H),5.43-5.41(d,J＝6.46Hz,lH),5.33-5.27(dd,J＝2.25and22.69Hz,1H),5.11-4.96(m,1H),4.84(t,J＝5.58Hz,1H),4.52-4.47(q,J＝7.04Hz,2H),4.17-4.07(m,1H),3.78-3.76(m,1H),3.69-3.65(m,1H),3.511-3.45(m,1H),1.37(t,J＝7.04Hz,3H)19F(376MHz,DMSO-d6):δ(-196.79)-(-197.05)(m)化合物19：(2R,3R,4R,5S)-5-(2-氨基-4-甲氧基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇與用于制備(2R,3R,4R,5S)-5-(2-氨基-4-乙氧基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇的類似方式直接制備(2R,3R,4R,5S)-5-(2-氨基-4-甲氧基咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-2-(羥甲基)四氫呋喃-3-醇(19)，除了在合成的第一步中用MeOH中的NaOMe代替了EtOH中的NaOEt。MS(m/z)：300.18[M+H]+。1HNMR(400MHz,CD3OD):δ7.56(s,1H),5.46(dd,J＝24,2.4Hz,1H),5.15(ddd,J＝54.8,4.4,2.4Hz,1H),4.34(ddd,J＝4.4,8,20.4Hz,1H),4.15(s,3H),3.97(m,1H),3.91(dd,J＝2.4,12.4Hz,1H),3.72(dd,J＝4.4,12Hz,1H)。19F(376MHz,CD3OD):δ(-198.98)-(-199.25)(m)。抗流感試驗流感RNA聚合酶抑制(IC50)試驗流感A/PR/8/34(H1N1)純化病毒作為PBS緩沖液中的懸浮液獲自AdvancedBiotechnologiesInc.(Columbia，MD)。通過在含有100mMTris-HCl，pH8，200mMKCl，3mM二硫蘇糖醇[DTT]，10％甘油，10mMMgCl2，2U/mLRNasin核糖核酸酶抑制劑和2mg/mLV型溶血卵磷脂(Sigma，SaintLouis，MO)的緩沖液中，在室溫下暴露于等體積的2％TritonX-10030分鐘，來破壞病毒粒。將病毒裂解物等份保存在-80℃。濃度是指終濃度，除非另外提及。將核苷酸類似物抑制劑在水中連續稀釋3倍，并且加入含有10％病毒裂解物(v/v)，100mMTris-HCl(pH8.0)，100mMKCl，1mMDTT，10％甘油，0.25％Triton-101(還原的)，5mMMgCl2，0.4U/mLRNasin和200μMApG二核苷酸引物(TriLink，SanDiegoCA)的反應混合物中。通過加入含有一個α-33P標記的NTP和100μM其他三個天然NTP(PerkinElmer，Shelton，CT)的三磷酸核糖核苷酸(NTP)底物混合物來啟動反應。對于每個試驗使用的放射性標記與篩選的核苷酸類似物的類別匹配。用于限制天然NTP的濃度對于ATP、CTP、UTP和GTP分別為20、10、2和1μM。未放射性標記的:放射性標記的NTP的摩爾比在100-400:1的范圍內。將反應在30℃下孵育90分鐘，然后點在DE81濾紙上。將濾器空氣干燥，用0.125MNa2HPO4(3x)、水(1x)和EtOH(1x)洗滌，并且空氣干燥，然后暴露于Typhoon磷光體成像儀并且在TyphoonTrio(GEHealthcare，PiscatawayNJ)上定量放射性。通過將GraphPadPrism中的數據與S形劑量應答擬合，使用可變的斜率等式，將Ymax和Ymin值固定在100％和0％，計算抑制劑的IC50值。測定((2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-4-氧-3,4-二氫咪唑并[1,2-f][1,2,4]三嗪-7-基)-4-氟-3-羥基-3-羥基四氫呋喃-2-基)甲基四氫三磷酸鹽(化合物8)的IC50為2.8μM。正常的人支氣管/氣管上皮細胞流感感染試驗(EC50)將正常的人支氣管/氣管上皮細胞(Lonza，BaselSwitzerland)以4000細胞/孔的密度接種于384-孔平板中的補充了生長因子的BEGM培養基中(Lonza，BaselSwitzerland)。第二天除去培養基，并且用100μL的RPMI+1％BSA(RPMI-BSA)將細胞洗滌三次。此后將30μLRPMI-BSA加入細胞中。將化合物在DMSO中3倍連續稀釋，并且將0.4μL的化合物稀釋物印在平板上。將流感A病毒HK/8/68(AdvancedBiotechnologyInc，Columbia，MD，13.5MOI)，PC/1/73(ATCCManassas，VA，0.3MOI)和流感B病毒B/Lee/40((ATCCManassas，VA，10MOI)加入10μL補充了8ug/mL胰蛋白酶的RPMI-BSA培養基(Worthington，Lakewood，NJ)中的細胞中。五天孵育后，將40μL含有66mMMespH6.5，8mMCaCl2，0.5％NP-40和100μM神經氨酸酶底物(2’-(4-甲基umbelliferyl)-α-D-N-乙酰神經氨酸鈉鹽，SigmaAldrich，St.Luis，MO)的緩沖液加入細胞中。在37℃孵育1小時后，使用360m的激發和450nm的發射來閱讀水解產物的熒光。通過多數據組的非線性回歸來計算EC50值。下表概括了通過該試驗測定的EC50：化合物流感APC/1/73/EC50流感BLee/40EC501930μM36μM18>200μM>200μM12>100μM>100μM100.9μM0.9μM727μM37μM621μM51μM盡管已經參照各種特定的和優選的實施方案和技術描述了本發明，將理解它們不是用來將本發明限于那些實施方案。本領域技術人員將理解可以形成許多變化和改變，同時保持在本發明的精神和范圍內。確定本發明涵蓋所有替換、改變和等價體，其可以包括在本發明的范圍內。當前第1頁1 2 3