本發(fā)明涉及一種富含葡萄籽中活性成分的山葡萄酒及其發(fā)酵制備方法。
背景技術：
：山葡萄也稱東北山葡萄，是葡萄科葡萄屬落葉藤本植物。原產(chǎn)中國東北、華北及朝鮮、俄羅斯遠東地區(qū)，果實可用于釀酒，屬于東亞葡萄種群的野生種。其味酸微甘澀，性平。無毒。入肺腎經(jīng)。據(jù)《朝藥錄》中記載：“山葡萄果實強心，利尿，壯筋骨，止渴，潤肺止咳，治筋骨濕流，煩熱口渴，熱淋，小便不利，虛勞咳喘等。”山葡萄釀制的酒是一種含有極復雜的營養(yǎng)成分的有機液體，與歐亞品種葡萄酒相比的明顯優(yōu)勢如下：1.山葡萄酒中富含的糖、有機酸、多種維生素和無機鹽等250多種成分的營養(yǎng)價值已經(jīng)得到充分的肯定，特別是山葡萄酒中含有大量的原花青素和白藜蘆醇等多種能防治心血管疾病作用的抗氧化活性元素；2.氨基酸是葡萄酒中的重要營養(yǎng)成分，與歐亞種葡萄酒比較，山葡萄酒是人體必需的八種氨基酸含量高的酒種；3.礦物質是人體中重要的功能性成份，在山葡萄酒中含有多種礦物成份，除鈉外均比歐亞種葡萄酒高；4.干浸出物是葡萄酒的重要質量指標，與歐亞種葡萄酒比較山葡萄酒干浸出物高。葡萄籽主要來源于葡萄酒釀造工業(yè)過程的下腳料，占整粒葡萄的5％-7％，其中含有豐富的多酚類物質、油脂類、揮發(fā)性成分以及粗蛋白和礦物質元素等。目前葡萄籽多應用于功能性油脂的提取，如：復合葡萄籽油、不飽和脂肪酸油酸、亞油酸、亞麻酸、維生素E、維生素P等，而將葡萄籽中其他活性成分充分利用并且應用于生產(chǎn)的案例較少。此外，我國的葡萄酒產(chǎn)業(yè)當中，未見有將葡萄籽放入葡萄酒中繼續(xù)發(fā)酵的事例。鑒于山葡萄獨特的天然營養(yǎng)優(yōu)勢和葡萄籽中富含大量的功能活性成分，同時為了保證葡萄酒生產(chǎn)過程中葡萄籽等資源的最大化利用，本發(fā)明提供一種具有獨特風味口感的，并富含多酚類化合物、花色苷、有機酸等多種抗氧化活性成分的山葡萄酒及其制備工藝。技術實現(xiàn)要素：針對上述問題，本發(fā)明在葡萄酒的釀造過程中，提出了一種將葡萄籽研磨成粉后加入到葡萄酒里繼續(xù)發(fā)酵的方法，同時優(yōu)化了山葡萄的深加工工藝，從活性成分檢測、風味口感等多角度改進山葡萄酒的釀造技術。本發(fā)明的技術方案如下：一種帶籽高活性山葡萄酒的制備方法，包括以下步驟：(1)預處理：將山葡萄經(jīng)過清洗、瀝干、去梗后備用；(2)分裝：將山葡萄稱重、適度破碎、分裝至發(fā)酵罐；(3)有氧發(fā)酵：按照所用山葡萄量加入2‰重量份的葡萄酒酵母，并根據(jù)山葡萄的含糖量比重，加入10％-15％重量份的蔗糖，攪拌均勻后在室溫20-25℃條件下半封口發(fā)酵8-12天；(4)無氧發(fā)酵：與步驟(3)相同室溫條件下，將發(fā)酵罐完全密封，每天定時攪拌、排氣，為期25-35天；(5)葡萄籽加工：將上述經(jīng)過無氧發(fā)酵后的葡萄酒進行過濾，分離濾出物中的全部葡萄籽，將葡萄籽清洗去除雜質，于不高于60℃條件下干燥，之后將葡萄籽破碎至60-120目粒徑，投入過濾后的葡萄酒清液中備下一步發(fā)酵；(6)后發(fā)酵：保持原發(fā)酵溫度，于密封條件下靜置發(fā)酵3個月，期間每隔2-3天進行適當排氣；(7)過濾、灌裝、封口、后包裝：發(fā)酵完成后的山葡萄酒剔除底層沉淀，并進行最終過濾、灌裝、封口、后包裝。進一步的，所述的山葡萄優(yōu)選紅山葡萄。進一步的，所述步驟(3)中當加入12％重量份的蔗糖時，釀制干紅度數(shù)在14°左右。進一步的，步驟(5)中所述干燥也可在自然條件下通風干燥。本發(fā)明同時還請求保護采用上述方法制備的山葡萄酒。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明選用優(yōu)質山葡萄為主要原料，相關研究調查顯示：山葡萄原酒中白藜蘆醇總含量為5.86mg/L，一般赤霞珠原酒中白藜蘆醇的總含量為2.52mg/L，前者為后者的二倍多；山葡萄原酒中微量元素的含量比赤霞珠原酒中高1.5-2倍；山葡萄原酒中黃酮含量1435mg/L，是赤霞珠原酒中黃酮含量441.7mg/L的三倍；花色素苷含量山葡萄原酒比赤霞珠原酒高一倍多。以上幾種成分均為現(xiàn)代研究證明具有一定抗氧化活性的天然產(chǎn)物。山葡萄中含有極其豐富的白藜蘆醇，又稱為芪三酚，是一種生物性很強的天然多酚類物質。近年來，國內(nèi)外越來越多的研究表明，白藜蘆醇具有多種生物學效用，例如其能與人體內(nèi)雌性激素受體結合，調節(jié)血液中膽固醇水平，有效減少人罹患心血管病的危險；能抑制低密度脂蛋白過氧化和血小板凝集，調節(jié)脂類蛋白代謝水平，降低人體血脂，具有良好預防動脈粥樣硬化和冠心病效果；白藜蘆醇還具有強抗氧化和抗自由基功能；具有抗突變、抗癌以及明顯的輻射保護作用；此外，白藜蘆醇還具有抗菌、抗脂質過氧化等作用。而葡萄中的白藜蘆醇多集中存在于葡萄籽和葡萄皮等部位。相關研究顯示，按白藜蘆醇標準的峰高計算，葡萄籽中白藜蘆醇的含量為1.17mg/g，未經(jīng)釀酒的葡萄籽及葡萄皮中白藜蘆醇分別為12.45mg/g和3.44mg/g，均遠遠高出葡萄果肉中白藜蘆醇的含量。本發(fā)明在生物發(fā)酵過程中，巧妙借助天然發(fā)酵產(chǎn)物—乙醇，兼具良好的水溶性和脂溶性的特性，有助于葡萄籽中水溶性、脂溶性活性成分的充分溶出，在最大限度提高產(chǎn)品活性成分含量的同時，保證產(chǎn)品的性狀穩(wěn)定，達到最佳配比。本發(fā)明產(chǎn)品在提高白藜蘆醇、有機酸等高活性抗氧化營養(yǎng)物質的同時，為葡萄籽等葡萄酒釀造產(chǎn)生的副產(chǎn)物提供了深加工利用方案，更好地利用原料資源。并在此基礎上，細化了具體制備工藝流程，通過后續(xù)檢測驗證產(chǎn)品抗氧化活性及相關活性物質含量比照，同時配合感官評定結果，確定了最佳的制備方法。在提高產(chǎn)品中活性成分含量的同時，保證了產(chǎn)品最佳口感風味，使產(chǎn)品兼具營養(yǎng)、保健、美味、耐貯藏、易生產(chǎn)加工等多重優(yōu)勢。附圖說明圖1為實施例1產(chǎn)品的液相色譜圖(峰15#為白藜蘆醇色譜峰)；圖2為實施例2產(chǎn)品的液相色譜圖(峰15#為白藜蘆醇色譜峰)；圖3為實施例3產(chǎn)品的液相色譜圖(峰15#為白藜蘆醇色譜峰)；圖4白藜蘆醇含量檢測曲線；圖5水溶性抗氧化活性物質標準曲線圖；圖6脂溶性抗氧化活性物質標準曲線圖。具體實施方式下面結合具體實施例對本發(fā)明的技術方案作進一步的說明，但本發(fā)明不以任何形式受限于實施例內(nèi)容。實施例中所述試驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法；如無特殊說明，所述試劑和生物材料，均可從商業(yè)途徑獲得。實施例1(最佳方案：后發(fā)酵過程加入葡萄籽)1.預處理：優(yōu)選紅山葡萄，經(jīng)過清洗、瀝干、去梗后備用；2.分裝：選取50kg山葡萄、適度破碎、裝至發(fā)酵罐；3.有氧發(fā)酵：將100g葡萄酒酵母用少量溫水化開后加入發(fā)酵罐，同時加入6kg蔗糖，攪拌均勻后在室溫24℃條件下半封口發(fā)酵10天；4.無氧發(fā)酵：24℃條件下，將發(fā)酵罐完全密封，每天定時攪拌、排氣，為期30天；5.葡萄籽加工：將上述經(jīng)過無氧發(fā)酵后的葡萄酒進行過濾，分離濾出物中的全部葡萄籽，清洗去除雜質，在55℃條件下鼓風干燥4h，之后將葡萄籽破碎至100目粒徑，投入過濾后的葡萄酒清液備下一步后發(fā)酵；6.后發(fā)酵：保持原發(fā)酵溫度，加入葡萄籽粉，于密封條件下靜置發(fā)酵3個月，期間每隔2-3天進行適當排氣；7.過濾、灌裝、封口、后包裝：發(fā)酵完成后的山葡萄酒剔除底層沉淀，并進行最終過濾、灌裝、封口、后包裝。對本實施例產(chǎn)品進行白藜蘆醇含量檢測，結果如下：表1實施例1產(chǎn)品的液相測定結果實施例2(發(fā)酵前加入葡萄籽)1.預處理：優(yōu)選紅山葡萄，經(jīng)過清洗、瀝干、去梗后備用；2.分裝：選取50kg山葡萄、適度破碎、裝至發(fā)酵罐；3.葡萄籽加工：將葡萄籽清洗去除雜質，在55℃條件下鼓風干燥4h，之后將葡萄籽破碎至100目粒徑，投入分裝的葡萄酒發(fā)酵罐，備下一步發(fā)酵；4.有氧發(fā)酵：將100g葡萄酒酵母用少量溫水化開后加入發(fā)酵罐，同時加入6kg蔗糖，與山葡萄、葡萄籽原料攪拌均勻后在室溫24℃條件下半封口發(fā)酵10天；5.無氧發(fā)酵：24℃條件下，將發(fā)酵罐完全密封，每天定時攪拌、排氣，為期30天；6.后發(fā)酵：保持原發(fā)酵溫度，于密封條件下靜置發(fā)酵3個月，期間每隔2-3天進行適當排氣；7.過濾、灌裝、封口、后包裝：發(fā)酵完成后的山葡萄酒剔除底層沉淀，并進行最終過濾、灌裝、封口、后包裝。表2實施例2產(chǎn)品的液相測定結果峰號#保留時間面積峰高化合物名稱含量12.091476177317564922.4299236683118113932.580591976568454843.079203374731526253.2146339058416563.4891099931629973.6561591802060183.88782821759194.0401009687290104.4021005694563114.946383462976125.116321942480135.390540642115145.948401222024156.371346602313白藜蘆醇143.8mg/L168.744292451812實施例3(傳統(tǒng)發(fā)酵法所得常規(guī)葡萄酒)1.預處理：優(yōu)選紅山葡萄，經(jīng)過清洗、瀝干、去梗后備用；2.分裝：選取50kg山葡萄、適度破碎、裝至發(fā)酵罐；3.有氧發(fā)酵：將100g葡萄酒酵母用少量溫水化開后加入發(fā)酵罐，同時加入6kg蔗糖，攪拌均勻后在室溫24℃條件下半封口發(fā)酵10天；4.無氧發(fā)酵：24℃條件下，將發(fā)酵罐完全密封，每天定時攪拌、排氣，為期30天；5.后發(fā)酵：保持原發(fā)酵溫度，于密封條件下靜置發(fā)酵3個月，期間每隔2-3天進行適當排氣；6.過濾、灌裝、封口、后包裝：發(fā)酵完成后的山葡萄酒剔除底層沉淀，并進行最終過濾、灌裝、封口、后包裝。對本實施例產(chǎn)品進行白藜蘆醇含量檢測，結果如下：表3實施例3產(chǎn)品的液相測定結果峰號#保留時間面積峰高化合物名稱含量12.12523613729327022.448613252361089732.580426846946980643.082176379526370653.2105723705675263.6541482241378973.87640626698584.003142382855294.413569684539104.631460553066114.984419224106125.164382153172135.532349481897145.975246301596156.384177171251白藜蘆醇25.2mg/L實施例41.預處理：優(yōu)選紅山葡萄，經(jīng)過清洗、瀝干、去梗后備用；2.分裝：選取10kg山葡萄、適度破碎、分裝至發(fā)酵罐；3.有氧發(fā)酵：將20g葡萄酒酵母用少量溫水化開后加入發(fā)酵罐，同時加入1kg蔗糖，攪拌均勻后在室溫20℃條件下半封口發(fā)酵12天；4.無氧發(fā)酵：20℃條件下，將發(fā)酵罐完全密封，每天定時攪拌、排氣，為期35天；5.葡萄籽加工：將上述經(jīng)過無氧發(fā)酵后的葡萄酒進行過濾，分離濾出物中的全部葡萄籽，清洗去除雜質，在50℃條件下鼓風干燥5h，之后將葡萄籽破碎至60目粒徑，投入過濾后的葡萄酒清液備下一步發(fā)酵；6.后發(fā)酵：保持原發(fā)酵溫度，于密封條件下靜置發(fā)酵3個月，期間每隔2-3天進行適當排氣；7.過濾、灌裝、封口、后包裝：發(fā)酵完成后的山葡萄酒剔除底層沉淀，并進行最終過濾、灌裝、封口、后包裝。實施例51.預處理：優(yōu)選紅山葡萄，經(jīng)過清洗、瀝干、去梗后備用；2.分裝：選取100kg山葡萄、適度破碎、分裝至發(fā)酵罐；3.有氧發(fā)酵：將200g葡萄酒酵母用少量溫水化開后加入發(fā)酵罐，同時加入15kg蔗糖，攪拌均勻后在室溫25℃條件下半封口發(fā)酵8天；4.無氧發(fā)酵：25℃條件下，將發(fā)酵罐完全密封，每天定時攪拌、排氣，為期25天；5.葡萄籽加工：將上述經(jīng)過無氧發(fā)酵后的葡萄酒進行過濾，分離濾出物中的全部葡萄籽，清洗去除雜質，在60℃條件下鼓風干燥3h，之后將葡萄籽破碎至120目粒徑，投入過濾后的葡萄酒清液備下一步發(fā)酵；6.后發(fā)酵：保持原發(fā)酵溫度，于密封條件下靜置發(fā)酵3個月，期間每隔2-3天進行適當排氣；7.過濾、灌裝、封口、后包裝：發(fā)酵完成后的山葡萄酒剔除底層沉淀，并進行最終過濾、灌裝、封口、后包裝。二、本發(fā)明成品質量檢測方法及最優(yōu)加工方案確定說明：(一)產(chǎn)品中白藜蘆醇含量的檢測采用如下方案方法：(1)原理本方法適用于測定葡萄酒、冰葡萄酒中白藜蘆醇的含量，樣品經(jīng)水浴加熱除去乙醇后再用水定容至原體積，經(jīng)C18反相柱分離，以波長306nm檢測，用外標法定量。(2)儀器設備與試劑①儀器設備：高效液相色譜儀LC-10A；色譜柱：HYPERSILBDSC18(5μm，4.6mm×250mm)②試劑：白藜蘆醇標準品(＞99％)，乙腈(色譜純)，超純水(3)實驗步驟①白藜蘆醇標準儲備溶液(1.0g/L)：準確稱取10.0mg白藜蘆醇于10mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，存放在冰箱中備用。②白藜蘆醇標準系列溶液：將白藜蘆醇標準儲備溶液用甲醇稀釋成20.0mg/L，40.0mg/L，60.0mg/L，100.0mg/L標準系列溶液。③用白藜蘆醇標準系列溶液分別進樣后，以標樣濃度對峰面積作標準曲線(Y＝149600x+80000；R2＝0.9967；其中X為白藜蘆醇含量mg/L，Y為峰面積)。(4)樣品的處理和測定：樣品經(jīng)水浴加熱除去乙醇后再用水定容至原體積，進樣前用0.45μm濾膜過濾。根據(jù)標準品的保留時間定性樣品中白藜蘆醇的色譜峰。根據(jù)樣品的峰面積，以外標法計算白藜蘆醇的含量。(5)色譜條件色譜柱：BDSC18柱(5μm，4.6mm×250mm)，柱溫：室溫，流動相：乙腈:水＝30:70，流速：1.0mL/min，檢測波長：306nm，進樣量：10μL。(6)結果計算以標準峰面積為橫坐標，標準白藜蘆醇含量(mg/L)為縱坐標，制作標準曲線。如圖4所示。X＝C×F式中：X——白藜蘆醇含量，mg/L；C——由標準曲線求得樣品溶液中白藜蘆醇的含量，mg/L；F——樣品的稀釋倍數(shù)。(二)、本發(fā)明產(chǎn)品的抗氧化能力測定方法及結果1、ACW法---水溶性物質的抗氧化能力(1)實驗原理①Phochem是采用化學發(fā)光法來測定樣品中的抗氧化物的含量。自由基(超氧陰離子基O2·-)是在紫外光(UV)照射下光敏劑(發(fā)光氨L)與O2反應，產(chǎn)生中間產(chǎn)物[L*O2]，在與O2的相互作用下，生成超氧陰離子基O2·-和發(fā)光氨陽離子自由基。其自由基反應公式如下：L+hv(UV)+O2→[L＊O2]→L·++O2·-這些自由基中，有一部分與樣品中的抗氧化物反應，當所有抗氧化物被自由基消耗完后，剩下的超氧陰離子基O2·-繼續(xù)與發(fā)光氨陽離子自由基反應，產(chǎn)生激發(fā)態(tài)的酞酸胺陰離子AP＊2-，由于激發(fā)態(tài)的酞酸胺陰離子不穩(wěn)定，要回到基態(tài)而發(fā)光(藍色光)，發(fā)射光被光電倍增管檢測。其檢測反應公式如下：O2·-+L·+→N2+AP＊2-→AP2-+hv(blueluminescence)這里，發(fā)光氨有兩個作用：光敏劑和檢測劑。②發(fā)光信號強度通過光電倍增管在預定的時間內(nèi)被連續(xù)的檢測。在ACW方法中，自由基與抗氧化物反應，直到抗氧化物被消耗完之前的一段時間是不發(fā)光的，我們定義這段時間為滯后時間(Lag-time)。當抗氧化物被消耗完后，自由基繼續(xù)反應，隨著反應的持續(xù)，發(fā)光信號強度不斷增加，直到最大值(V).滯后時間的長短取決于樣品中抗氧化物的含量。在ACW測量中，滯后時間是這樣定義的：由測量曲線的一階導數(shù)算出曲線的拐點，拐點的切線與X軸的交點即是滯后時間(Lag-time)。滯后時間有PCL軟件自動計算出來。③測量曲線的計算原理1)測定曲線的一階導數(shù)。2)測定曲線的拐點3)計算拐點斜率4)拐點切線與X軸的交點定義為滯后時間(Lag-time)5)物質的抗氧化性由空白和樣品滯后時間的差值，即滯差(Lag-Lag(0))來表征。6)滯差與濃度成正比，據(jù)此可得標準曲線。(2)測量過程①空白測量首先執(zhí)行清洗3次，點擊“Purge→Cleaner1”，然后測量空白“blank”至少2次，空白值的RSD最好不超過5％，否則，空白需繼續(xù)測量，直到獲得穩(wěn)定值。不平行的空白值應該刪除。當空白測量穩(wěn)定時，系統(tǒng)才達到穩(wěn)定。②標準測量用50μl的移液槍分別移取5μl、10μl、20μl、30μlReagent4工作溶液(100nmol/L)，相當于0.5nmol、1.0nmol、2.0nmol和3.0nmol的工作曲線系列溶液。由于抗壞血酸容易被氧化，加Reagent4時間應盡可能短，同時加Reagent3和4時間，混勻時間和插到進樣口時間盡量保持一致，這樣可以得到較好的重復性。另外，每次測量前，先加入Reagent1和Reagent2，預先混合好，然后，快速加入Reagent3和Reagent4工作溶液，簡單混勻后，插到進樣口測量。③樣品制備和測量用ACW方法測量的物質必須是水溶液或水溶性的物質。如果樣品的含量超過標注曲線范圍，需要用Reagent1稀釋后才能測量，保證在曲線范圍內(nèi)。如果樣品中有顆粒物存在，需用0.45μm過濾或離心除掉。(3)樣品計算液體樣品計算：其中：Quantity：nmol(以抗壞血酸計)Dilution：稀釋倍數(shù)M：摩爾質量(抗壞血酸176.13g/mol)PipettedVolume：用移液槍移取的體積(μl)如圖5所示為水溶性抗氧化活性物質標注曲線圖。表4水溶性抗氧化物質濃度的測定結果注：表中不同字母代表差異顯著性水平達到P<0.05水平。2、ACL法---脂溶性物質的抗氧化性(1)實驗原理①Phochem是采用化學發(fā)光法來測定樣品中的抗氧化物的含量。自由基(超氧陰離子基O2·-)是在紫外光(UV)照射下光敏劑(發(fā)光氨L)與O2反應，產(chǎn)生中間產(chǎn)物[L＊O2]，在與O2的相互作用下，生成超氧陰離子基O2·-和發(fā)光氨陽離子自由基。其自由基反應公式如下：L+hv(UV)+O2→[L＊O2]→L·++O2·-這些自由基中，有一部分與樣品中的抗氧化物反應，當所有抗氧化物被自由基消耗完后，剩下的超氧陰離子基O2·-繼續(xù)與發(fā)光氨陽離子自由基反應，產(chǎn)生激發(fā)態(tài)的酞酸胺陰離子AP＊2-，由于激發(fā)態(tài)的酞酸胺陰離子不穩(wěn)定，要回到基態(tài)而發(fā)光(藍色光)，發(fā)射光被光電倍增管檢測。其檢測反應公式如下：O2·-+L·+→N2+AP＊２-→AP2-+hv(blueluminescence)這里，發(fā)光氨有兩個作用：光敏劑和檢測劑。②測量曲線的計算原理1)測定信號曲線的積分值，首先計算空白的平均積分值然后計算樣品的單次積分值∫S2)計算二者積分值之差為3)物質的抗氧化性由積分差除以空白的平均積分值即抑制性來表征，4)抑制性與濃度成正比，據(jù)此可得標準曲線，樣品的含量以相當于多少的Torlox來表示。這些計算由PCL軟件自動執(zhí)行。(2)測量過程①空白測量首先執(zhí)行清洗3次，點擊“Purge→Cleaner2+1”，然后測量空白“blank”至少3次，空白值的RSD最好不超過5-10％，否則，空白需繼續(xù)測量，直到獲得穩(wěn)定值。不平行的空白值應該刪除。當空白測量穩(wěn)定時，系統(tǒng)才達到穩(wěn)定。②標準測量用50μl的移液槍分別移取5μl、10μl、20μl、30μlReagent4工作溶液(100nmol/L)，相當于0.5nmol、1.0nmol、2.0nmol和3.0nmol的工作曲線系列溶液。由于Torlox容易被氧化，加Reagent4時間應盡可能短，同時加Reagent3和4時間，混勻時間和插到進樣口時間盡量保持一致，這樣可以得到較好的重復性。另外，每次測量前，先加入Reagent1和Reagent2，預先混合好，然后，快速加入Reagent3和Reagent4工作溶液，簡單混勻后，插到進樣口測量。③樣品制備和測量用ACL方法測量的物質必須是溶于甲醇的物質。當然也適用于能溶于其他有機溶劑的物質，最好是這種有機溶劑能和甲醇互溶。然而，值得注意的是：有些有機溶劑會溶解樣品管(塑料的)，這樣也會有一定的抗氧化性，造成錯誤的測量結果。所以當使用其他溶劑時，為了排除這種錯誤結果的可能性，需要執(zhí)行一次控制分析(即除了樣品外，加有機溶劑或稀釋劑到樣品中)。如果樣品的含量超過標注曲線范圍，需要用Reagent1或選擇的其他溶劑稀釋后才能測量，保證在曲線范圍內(nèi)。如果樣品中有顆粒物存在，需用0.45um過濾或離心除掉。(3)樣品計算液體樣品計算：其中：Quantity：nmol(以Trolox計)Dilution：稀釋倍數(shù)M：摩爾質量(Trolox250.3g/mol)PipettedVolume：用移液槍移取的體積(μl)如圖6所示為脂溶性抗氧化活性物質標準曲線圖。表5脂溶性抗氧化活性物質含量的測定結果注：表中不同字母代表差異顯著性水平達到P<0.05水平。三、本發(fā)明產(chǎn)品感官評定方法及結果葡萄酒的感官評定又叫品酒、評酒，是指評酒員通過眼、鼻、口等感覺器官對葡萄酒的外觀、香氣、滋味及典型性等感官進行分析評定的一種分析方法。感官評價是了解葡萄酒，更好地釀造、貯藏、檢驗和最后鑒賞葡萄酒快速、有效的方法。表6葡萄酒感官評定標準表7本發(fā)明產(chǎn)品感官評定結果根據(jù)上述檢測及評定結果可知，實施例1方法所得產(chǎn)品從口感、抗氧化活性及典型活性物質含量均在較佳范圍，優(yōu)于實施例2和實施例3等比照組。權衡上述指標，最終確定本發(fā)明所提出的制備方案在口感風味、活性物質含量、抗氧化活性等方面均優(yōu)于傳統(tǒng)葡萄酒，且在工藝技術及具體操作步驟方面作出進一步改進，在保證產(chǎn)品質量的同時，優(yōu)化了加工方案。當前第1頁1 2 3