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固體支持物上的樣品制備的制作方法

文檔序號:12056363閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種固體基底結(jié)合的轉(zhuǎn)座酶復(fù)合物,所述復(fù)合物包含:

轉(zhuǎn)座酶組分,所述轉(zhuǎn)座酶組分包含至少一個轉(zhuǎn)座酶;

寡核苷酸連接物組分,所述寡核苷酸連接物組分包含至少一個寡核苷酸連接物,其中每個連接物包含至少一個雙鏈部分,所述至少一個雙鏈部分包含對于所述復(fù)合物的轉(zhuǎn)座酶的識別序列,

并且其中每復(fù)合物至少一個所述連接物已與特異性結(jié)合對的成員結(jié)合,

接頭組分,所述接頭組分包含特異性結(jié)合對,所述特異性結(jié)合對的成員之一與連接物結(jié)合,并且所述特異性結(jié)合對的另一成員與固體基底結(jié)合;和

固體基底,

其中,當(dāng)所述復(fù)合物包含一個轉(zhuǎn)座酶時,所述轉(zhuǎn)座酶通過一個連接物結(jié)合,且當(dāng)所述復(fù)合物包含多于一個轉(zhuǎn)座酶時,至少兩個連接物與所述轉(zhuǎn)座酶結(jié)合。

2.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合物,其中,所述復(fù)合物包含:

轉(zhuǎn)座酶組分,所述轉(zhuǎn)座酶組分包含兩個轉(zhuǎn)座酶;

寡核苷酸連接物組分,所述寡核苷酸連接物組分包含兩個寡核苷酸連接物,

其中每個連接物包含至少一個雙鏈部分,所述至少一個雙鏈部分包含對于所述復(fù)合物的轉(zhuǎn)座酶的識別序列,

其中所述連接物之一已與特異性結(jié)合對的成員結(jié)合,并且

其中一個連接物與一個轉(zhuǎn)座酶結(jié)合,且另一個連接物與另一個轉(zhuǎn)座酶結(jié)合;

接頭組分,所述接頭組分包含特異性結(jié)合對,所述特異性結(jié)合對的成員之一與連接物結(jié)合,且所述特異性結(jié)合對的另一成員與固體基底結(jié)合;和

固體基底。

3.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合物,其中所述轉(zhuǎn)座酶組分包含兩個或更多個不同的轉(zhuǎn)座酶。

4.一種組合物,所述組合物包含:

轉(zhuǎn)座酶復(fù)合物,所述轉(zhuǎn)座酶復(fù)合物包含:

轉(zhuǎn)座酶組分,所述轉(zhuǎn)座酶組分包含至少一個轉(zhuǎn)座酶;和

寡核苷酸連接物組分,所述寡核苷酸連接物組分包含至少一個寡核苷酸連接物,

其中每個連接物包含至少一個雙鏈部分,所述至少一個雙鏈部分包含對于所述復(fù)合物的轉(zhuǎn)座酶的識別序列,

其中每復(fù)合物至少一個所述連接物已與特異性結(jié)合對的成員結(jié)合;和

細(xì)胞裂解物;

其中,當(dāng)所述復(fù)合物包含一個轉(zhuǎn)座酶時,所述轉(zhuǎn)座酶通過一個連接物結(jié)合,并且當(dāng)所述復(fù)合物包含多于一個轉(zhuǎn)座酶時,至少兩個連接物與所述轉(zhuǎn)座酶結(jié)合。

5.如權(quán)利要求4所述的組合物,所述組合物還包含核酸酶抑制劑。

6.如權(quán)利要求5所述的組合物,其中所述核酸酶抑制劑為二價陽離子螯合劑。

7.如權(quán)利要求4所述的組合物,其中所述復(fù)合物包含:

轉(zhuǎn)座酶組分,所述轉(zhuǎn)座酶組分包含兩個轉(zhuǎn)座酶單元;和

寡核苷酸連接物組分,所述寡核苷酸連接物組分包含兩個寡核苷酸連接物,

其中每個連接物包含至少一個雙鏈部分,所述至少一個雙鏈部分包含對于所述復(fù)合物的轉(zhuǎn)座酶的識別序列,并且

其中所述連接物之一已與特異性結(jié)合對的成員結(jié)合,并且其中一個連接物與一個轉(zhuǎn)座酶結(jié)合,且另一個連接物與另一個轉(zhuǎn)座酶結(jié)合。

8.如權(quán)利要求4所述的組合物,其中所述轉(zhuǎn)座酶組分包含兩個或更多個不同的轉(zhuǎn)座酶。

9.一種片段化靶DNA的方法,所述方法包括:在允許所述靶DNA的轉(zhuǎn)座酶介導(dǎo)的裂解的條件下使所述靶DNA與權(quán)利要求1所述的固體基底結(jié)合的復(fù)合物組合。

10.一種產(chǎn)生固體基底結(jié)合的片段化的DNA的方法,所述方法包括:在允許所述靶DNA的轉(zhuǎn)座酶介導(dǎo)的裂解的條件下使靶DNA與權(quán)利要求1所述的固體基底結(jié)合的復(fù)合物組合,所述裂解導(dǎo)致固體基底結(jié)合的片段化的DNA的產(chǎn)生。

11.如權(quán)利要求1所述的復(fù)合物,其中每個連接物還包含至少一個單鏈部分。

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