本發明涉及農業環境保護領域，尤其涉及利用蔬菜產區種養廢棄物生產有機肥的菌劑的制備方法。

背景技術：

近年來，我國蔬菜產業發展很快，蔬菜采收、加工、運輸、銷售時必須去掉的廢棄根、莖、葉，以及市場原因滯銷或自然災害導致殘次的全株蔬菜，產生了大量的尾菜。同時，隨著蔬菜產區養殖業規?；目焖侔l展，養殖場產生的畜禽糞便、污水等大量廢棄物。由于缺乏資源化利用的有效途徑，造成了嚴重的資源浪費和環境污染。在蔬菜產區建立 “秸稈+尾菜→養殖業→養殖場畜廢棄物→有機肥→果蔬”循環農業模式，對防治農業面源污染、促進農業經濟發展、保護農業生態環境具有重要意義。

公開號為CN103966148B的專利，利用干茄子秸稈，干黃瓜秧子，干大白菜葉作為主要原料生產有機肥，所用原料因收獲季節的原因，短時期內集中大量產生，晾曬時受到場地、天氣等條件的影響，容易腐敗變質，造成環境污染，有機肥品質難于控制。

技術實現要素：

本發明所要解決的技術問題是提供一種工藝簡單、成本低廉的利用蔬菜產區種養廢棄物生產有機肥的菌劑的制備方法。

為解決上述問題，本發明所述的利用蔬菜產區種養廢棄物生產有機肥的菌劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴將牛奶、紅糖按10kg~20kg：1kg比例混合均勻，即得到溶液A；

⑵在所述溶液A中加入混合菌液，混合均勻后得到混合液；然后按每1L混合液添加無機鹽1份，即得到溶液B；所述混合菌液與所述溶液A的比例為0.5kg~1kg：10kg~20kg；

⑶在所述溶液B中加入玉米粉，攪拌均勻，即得水分含量為30%~45%的原料；所述溶液B、玉米粉的比例為1kg~3kg：7kg~9kg；

⑷將所述原料裝入透明容器中，用透氣膜封口，在光照充分條件下于28℃~36℃發酵1~3天，且每6~12h攪拌一次，當混合菌達到20~200億cfu/g時，無菌條件下經干燥、粉碎、裝袋，即得有機肥菌劑。

所述步驟⑴中牛奶是指經過巴氏滅菌后的脫脂牛奶。

所述步驟⑵中無機鹽1份是由檸檬酸二鈉2.0g、磷酸二氫鉀2.0g、磷酸氫二鉀2.0g、硫酸錳0.05g、碳酸鈣20.0g組成。

所述步驟⑵中混合菌液是按下述方法制得：

①制備沼澤紅假單胞菌純培養菌種：按1g菌種沼澤紅假單胞菌（CICC 23812）用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液A接種于胰蛋白胨大豆瓊脂斜面培養基上，37℃條件下培養6~24h，即得；所述胰蛋白胨大豆瓊脂斜面培養基是指胰蛋白胨15.0g、大豆胨5.0g、氯化鈉5.0g、瓊脂15g溶于1L蒸餾水而得；

②制備褐球固氮菌純培養菌種：按1g菌種褐球固氮菌（CICC22660）用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液B接種于固氮斜面培養基上，37℃條件下培養6~24h，即得；所述固氮培養基是指酵母提取物0.5g、甘露醇20.0g、磷酸二氫鉀0.2g、磷酸氫二鉀0.8g、硫酸鎂0.2g，硫酸鈣0.1g、瓊脂15g溶于1L蒸餾水而得；

③制備放線菌純培養菌種：按1g菌種放線菌（CICC10672）用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液C接種于酵母麥芽汁瓊脂斜面培養基上，37℃條件下培養24~48h，即得；所述葡萄糖酵母麥芽汁瓊脂斜面培養基是指葡萄糖4.0g、酵母膏4.0g、麥芽提取物10.0g、碳酸鈣2.0g、瓊脂12.0g溶于1L蒸餾水而得；

④制備白腐菌純培養菌種：按1g菌種白腐菌（CICC14075）用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液D接種于馬鈴薯瓊脂斜面培養基上，37℃條件下培養24~48h，即得；所述馬鈴薯瓊脂斜面培養基是指馬鈴薯提取液1.0L、葡萄糖20.0g、瓊脂15.0g混合而成；

⑤在透明容器中裝1/2~2/3的溶液A，分別按所述溶液A體積的3~8%的接種量接種所述沼澤紅假單胞菌純培養菌種、褐球固氮菌純培養菌種、放線菌純培養菌種、白腐菌純培養菌種，然后分別采用透氣膜封口，并置于28℃~36℃、轉速為180~220r/min的搖床上培養2~6天，當菌量達到200億cfu/ml時，分別得到四種菌種擴增純培養液；

⑥將所述四種菌種擴增純培養液按1：1：1：1的重量比均勻混合后即得。

所述步驟⑶中玉米粉細度為80~100目。

本發明與現有技術相比具有以下優點：

1、本發明以玉米、牛奶、紅糖為原料，可規?；袡C肥菌劑，生產工藝簡單、原料成本低廉。

2、采用本發明所生產的菌種，腐熟效率高，溫度上升快，高溫維持時間長，有利于殺滅病原微生物及有害菌群。

3、本發明所生產的菌種具有較強固氮作用，保存了大量氮源，減少了氮的流失，提高了有機肥的肥力。

4、采用本發明所生產的菌種生產的有機肥，腐熟效果好，含有大量腐殖質，不產生燒苗現象，可疏松土壤，減少土壤板結，保持土壤水分的作用。

5、本發明實現了廢棄資源的綜合利用，符合國家產業政策，為種植企業和農戶節約生產成本，經濟效益、社會效益和環境效益顯著。

具體實施方式

實施例1 利用蔬菜產區種養廢棄物生產有機肥的菌劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴將牛奶、紅糖按10kg：1kg比例混合均勻，即得到溶液A。

其中：牛奶是指經過巴氏滅菌后的脫脂牛奶。

⑵在10kg溶液A中加入0.5kg混合菌液，混合均勻后得到混合液；然后按每1L混合液添加無機鹽1份，即得到溶液B。

其中：無機鹽1份是由檸檬酸二鈉2.0g、磷酸二氫鉀2.0g、磷酸氫二鉀2.0g、硫酸錳0.05g、碳酸鈣20.0g組成。

混合菌液是按下述方法制得：

①制備沼澤紅假單胞菌純培養菌種：按1g菌種沼澤紅假單胞菌（CICC 23812）用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液A接種于胰蛋白胨大豆瓊脂斜面培養基上，37℃條件下培養6~24h，即得；胰蛋白胨大豆瓊脂斜面培養基是指胰蛋白胨15.0g、大豆胨5.0g、氯化鈉5.0g、瓊脂15g溶于1L蒸餾水而得；

②制備褐球固氮菌純培養菌種：按1g菌種褐球固氮菌（CICC22660）用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液B接種于固氮斜面培養基上，37℃條件下培養6~24h，即得；固氮培養基是指酵母提取物0.5g、甘露醇20.0g、磷酸二氫鉀0.2g、磷酸氫二鉀0.8g、硫酸鎂0.2g，硫酸鈣0.1g、瓊脂15g溶于1L蒸餾水而得；

③制備放線菌純培養菌種：按1g菌種放線菌（CICC10672）用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液C接種于酵母麥芽汁瓊脂斜面培養基上，37℃條件下培養24~48h，即得；葡萄糖酵母麥芽汁瓊脂斜面培養基是指葡萄糖4.0g、酵母膏4.0g、麥芽提取物10.0g、碳酸鈣2.0g、瓊脂12.0g溶于1L蒸餾水而得；

④制備白腐菌純培養菌種：按1g菌種白腐菌（CICC14075）用10mL無菌水稀釋，然后取1mL稀釋液D接種于馬鈴薯瓊脂斜面培養基上，37℃條件下培養24~48h，即得；馬鈴薯瓊脂斜面培養基是指馬鈴薯提取液1.0L、葡萄糖20.0g、瓊脂15.0g混合而成；

⑤在透明容器中裝1/2~2/3的溶液A，分別按溶液A體積的3~8%的接種量接種沼澤紅假單胞菌純培養菌種、褐球固氮菌純培養菌種、放線菌純培養菌種、白腐菌純培養菌種，然后分別采用透氣膜封口，并置于28℃~36℃、轉速為180~220r/min的搖床上培養2~6天，當菌量達到200億cfu/ml時，分別得到四種菌種擴增純培養液；

⑥將四種菌種擴增純培養液按1：1：1：1的重量比均勻混合后即得。

⑶在1kg溶液B中加入7kg細度為80~100目的玉米粉，攪拌均勻，即得水分含量為30%~45%的原料。

⑷將原料裝入透明容器中，用透氣膜封口，在光照充分條件下于28℃~36℃發酵1~3天，且每6~12h攪拌一次，當混合菌達到20~200億cfu/g時，無菌條件下經干燥、粉碎、裝袋，即得有機肥菌劑。

實施例2 利用蔬菜產區種養廢棄物生產有機肥的菌劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴將牛奶、紅糖按20kg：1kg比例混合均勻，即得到溶液A。

其中牛奶同實施例1。

⑵在20kg溶液A中加入1kg混合菌液，混合均勻后得到混合液；然后按每1L混合液添加無機鹽1份，即得到溶液B。

其中無機鹽1份、混合菌液同實施例1。

⑶在3kg溶液B中加入9kg細度為80~100目的玉米粉，攪拌均勻，即得水分含量為30%~45%的原料。

⑷將原料裝入透明容器中，用透氣膜封口，在光照充分條件下于28℃~36℃發酵1~3天，且每6~12h攪拌一次，當混合菌達到20~200億cfu/g時，無菌條件下經干燥、粉碎、裝袋，即得有機肥菌劑。

實施例3 利用蔬菜產區種養廢棄物生產有機肥的菌劑的制備方法，包括以下步驟：

⑴將牛奶、紅糖按15kg：1kg比例混合均勻，即得到溶液A。

其中牛奶同實施例1。

⑵在15kg溶液A中加入0.8kg混合菌液，混合均勻后得到混合液；然后按每1L混合液添加無機鹽1份，即得到溶液B。

其中無機鹽1份、混合菌液同實施例1。

⑶在2kg溶液B中加入8kg細度為80~100目的玉米粉，攪拌均勻，即得水分含量為30%~45%的原料。

⑷將原料裝入透明容器中，用透氣膜封口，在光照充分條件下于28℃~36℃發酵1~3天，且每6~12h攪拌一次，當混合菌達到20~200億cfu/g時，無菌條件下經干燥、粉碎、裝袋，即得有機肥菌劑。