本發明涉及發酵，尤其涉及一種從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法。

背景技術：

1、在化妝品和保健品行業中，尋找具有美白和抗衰老活性的天然成分一直是研究的熱點。毛蕊花糖苷作為一種具有顯著美白和抗衰老效果的天然活性成分，因其獨特的藥理活性和安全性，受到了廣泛的關注，通常采用毛蕊花糖苷的制備方法提取毛蕊花糖苷。

2、但現有的制備方法存在價格昂貴，含量低，分離純化工序復雜，回收率低，單體純度低的問題。

技術實現思路

1、本發明的目的在于提供一種從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，旨在解決現有技術中的制備方法存在價格昂貴，含量低，分離純化工序復雜，回收率低，單體純度低的問題的技術問題。

2、為實現上述目的，本發明采用的一種從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，包括以下步驟：

3、步驟一、首先按比例取檸檬馬鞭草枝葉進行破碎和切段，制得檸檬馬鞭草短枝備用；

4、步驟二、隨后將檸檬馬鞭草短枝碎用檸檬酸水浸沒，并發酵36-72小時，高速離心并過濾，棄去離心液，得到發酵藥渣；

5、步驟三、之后用濃度為85%的乙醇提取兩次，收集兩次提取液，減壓真空回收乙醇，加水稀釋至乙醇濃度為10%以下，得到濃縮液備用；

6、步驟四、將上述濃縮液上d101大孔樹脂，采用濕法上柱，待上完后，飽和吸附45分鐘，用純凈水洗脫雜質，洗脫至無色無味至10個柱體積，流速1vb/hours；

7、步驟五、再用濃度為60%的乙醇水溶液洗脫4-8個柱體積，流速v=0.5vb/h，并收集洗脫液，將洗脫液減壓真空濃縮，并回收乙醇，得到濃縮浸膏；

8、步驟六、將濃縮浸膏200目硅膠拌勻，常溫干燥后，干法上加壓硅膠柱層析，用真空抽干硅膠中空氣，用丙酮乙酸乙酯洗脫劑，洗脫6-10個柱體積，流速v=1.0vb/h，壓強p=0.008kpa，收集洗脫液，減壓真空濃縮、干燥，得到類白色粉末；

9、步驟七、將類白色粉末用濃度為10%的乙醇溶解，過濾后，上葡聚糖凝膠樹脂sephadexlh-20，飽和吸附30分鐘，然后用濃度為75%的乙醇洗脫4-6個柱體積，流速v=0.5vb/h，收集洗脫液，減壓真空回收一半乙醇，冷卻靜置結晶24h后，過濾得到晶體即為毛蕊花糖苷。

10、其中，在步驟一中，對檸檬馬鞭草枝葉進行破碎和切段，制得檸檬馬鞭草短枝備用時，破碎和切段長度為0.3-0.5cm。

11、其中，在步驟二中，將檸檬馬鞭草短枝碎用檸檬酸水浸沒，并發酵36-72小時，高速離心并過濾，棄去離心液，得到發酵藥渣的過程中：

12、所采用的檸檬酸ph值為3~4，高速離心的轉速為3500r/min，時間為15min，過濾目數為800-1000目。

13、其中，在步驟三中，兩次提取時，第一次提取料液比例為1:8，提取溫度為90℃，索氏回流提取2小時；第二次提取料液比例1:6，提取溫度為90℃，提取時間為1小時。

14、其中，在步驟三中，加水稀釋至乙醇濃度為10%以下，得到濃縮液備用時，溫度t≤70℃，壓強≥0.1kpa。

15、其中，在步驟五中，回收乙醇時，溫度t≤70℃，壓強≥0.1kpa。

16、其中，在步驟六中，干法上加壓硅膠柱層析時，目數為100目硅膠，徑高比≥10:1，用丙酮乙酸乙酯洗脫劑所采用的丙酮：乙酸乙酯=3:1。

17、本發明的一種從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，本發明所述的原料為發酵后的檸檬馬鞭草發酵底物藥渣，不同于其他的原料；本發明采用的提取溶劑為弱酸醇提取（ph=4~5），不同于其他的水和乙醇；

18、本發明所述的分離方法為三次分離純化，先上大孔樹脂d101，其次上硅膠柱層析樹脂，在上葡聚糖凝膠樹脂，最后重結晶獲得單體化合物；

19、本發明提高了初始原料中毛蕊花糖苷的含量，由初始的檸檬馬鞭草莖葉1.57-4.11%，提高到了2.83-7.75%，讓起始原料中檸檬馬鞭草原料中的含量提高了2-5倍；

20、本發明使用三步分離純化，可以得到單體純度為90.42-99.17%的單體化合物毛蕊花糖苷；

21、本發明使最終得率提高了2-3倍，由現有的3-5%提高到了7.28—11.33%。

22、以此方式解決了現有技術中的制備方法存在價格昂貴，含量低，分離純化工序復雜，回收率低，單體純度低的問題的技術問題。

技術特征：

1.一種從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，其特征在于，

2.如權利要求1所述的從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，其特征在于，

3.如權利要求2所述的從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，其特征在于，

4.如權利要求3所述的從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，其特征在于，

5.如權利要求4所述的從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，其特征在于，

6.如權利要求5所述的從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，其特征在于，

7.如權利要求6所述的從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，其特征在于，

技術總結
本發明涉及發酵技術領域，尤其涉及一種從檸檬馬鞭草發酵底物中提取美白抗衰活性成分毛蕊花糖苷的制備方法，本發明的分離方法為三次分離純化，先上大孔樹脂D101，其次上硅膠柱層析樹脂，在上葡聚糖凝膠樹脂，最后重結晶獲得單體化合物；本發明提高了初始原料中毛蕊花糖苷的含量，由初始的檸檬馬鞭草莖葉1.57?4.11%，提高到了2.83?7.75%，讓起始原料中檸檬馬鞭草原料中的含量提高了2?5倍；本發明使用三步分離純化，可以得到單體純度為90.42?99.17%的單體化合物毛蕊花糖苷；本發明使最終得率提高了2?3倍，由現有的3?5%提高到了7.28—11.33%，以此方式解決了現有技術中的制備方法存在價格昂貴，含量低，分離純化工序復雜，回收率低，單體純度低的問題的技術問題。

技術研發人員：鐘新星,蔡明花,劉韓珍,吳俊
受保護的技術使用者：星和花（杭州）生物技術有限公司
技術研發日：
技術公布日：2025/4/24