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檢測替米考星的酶聯免疫試劑盒及其應用的制作方法

文檔序號:11062956閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種替米考星酶聯免疫檢測試劑盒,其包括包被有包被原的酶標板、替米考星特異性抗體、酶標記物、替米考星標準品溶液、底物顯色液、終止液、濃縮洗滌液、樣本稀釋液,所述酶標記物為酶標記抗抗體,所述包被原為替米考星藥物抗原,替米考星藥物抗原為替米考星半抗原與載體蛋白的偶聯物,所述替米考星半抗原的制備方法主要包括如下步驟:

(1)取1.0g替米考星,加DMF溶解,加氫化鈉0.138g,加2-(4-溴丁基)-1,3-二氧戊環0.72g,60℃攪拌5h,停止反應,冷卻到室溫,加水稀釋,加適量稀鹽酸調節PH值到7,1,2-二氯乙烷萃取,分去水相,水洗,無水硫酸鈉干燥,使用體積比為5:1的正己烷/乙醚重結晶,得到中間產物縮醛替米考星0.95g,收率83.33%,

(2)取0.95g中間產物縮醛替米考星加20ml乙醇溶解,加1mol/L稀鹽酸10ml,50℃攪拌反應4h,停止反應,加碳酸氫鈉水溶液,調節PH值到7,加乙酸乙酯萃取,水洗,無水硫酸鈉干燥,蒸干,上硅膠柱,使用體積比為5:1的二氯甲烷/甲醇洗脫分離,得到戊醛替米考星半抗原產物0.8g,收率88.9%。

2.如權利要求1所述的一種替米考星酶聯免疫檢測試劑盒,其特征在于:所述載體蛋白為牛血清白蛋白、鼠血清蛋白、兔血清蛋白、甲狀腺蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白或人血清白蛋白。

3.如權利要求1所述的一種替米考星酶聯免疫檢測試劑盒,其特征在于:所述的替米考星特異性抗體為替米考星藥物單克隆抗體。

4.如權利要求1-3任一項所述的一種替米考星酶聯免疫檢測試劑盒檢測樣本中替米考星殘留的方法,主要步驟包括:

1)將待測樣本進行前處理,得到待測樣本溶液;

2)用權利要求1-3任一項所述的替米考星酶聯免疫檢測試劑盒檢測待測樣本溶液;

3)分析檢測結果。

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