麻豆精品无码国产在线播放,国产亚洲精品成人AA片新蒲金,国模无码大尺度一区二区三区,神马免费午夜福利剧场

一種特異性識別及靈敏檢測人血清蛋白的熒光試劑合成方法及應(yīng)用與流程

文檔序號:11107382閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種特異性識別及靈敏檢測人血清蛋白的熒光試劑,該熒光試劑為席夫堿類有機(jī)化合物,其特征在于,該化合物結(jié)構(gòu)式為:

2.權(quán)利要求1所述的特異性識別及靈敏檢測人血清蛋白的熒光試劑,其特征在于,該熒光試劑還可鑒別人血清蛋白及牛血清蛋白。

3.權(quán)利要求1或2所述的特異性識別及靈敏檢測人血清蛋白的熒光試劑的合成方法,其特征在于,包括如下步驟:

稱量二苯氨基-4-苯甲醛加入三頸瓶中,溫度設(shè)定為80-90℃,加入無水乙醇,加熱回流至剛好全溶;

稱量4-氨基苯并-15-冠-5-醚,加入無水乙醇溶解,滴加到上述醛溶液中,冷凝回流4h,反應(yīng)完成后靜置過夜,析出黃綠色晶體,過濾,真空干燥得到產(chǎn)物特異性識別及靈敏檢測人血清蛋白的熒光試劑,即DB-15C5。

4.權(quán)利要求1或2所述的熒光試劑在檢測人血清蛋白上的應(yīng)用。

5.權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于,包括如下步驟:

(1)測定溶液的配置,稱量DB-15C5入無水乙醇中溶解,得到5.0×10-3mol/L的母液,用保鮮膜和錫箔紙包裹好,密封,避光,置于冰箱中保存,同時,將人血清蛋白(HSA),牛血清蛋白(BSA),酪蛋白,肌紅蛋白,白蛋白,血紅蛋白,溶菌酶,細(xì)胞色素C分別以磷酸鹽緩沖液配制成1.0×10-4mol/L的蛋白儲備液備用;

(2)熒光識別HSA方法

取DB-15C5母液10μL于石英熒光比色皿中,再加入1mL磷酸鹽緩沖液或人工尿液,得到5.0×10-5mol/L的待測液;加入上述的蛋白儲備液200μL,在熒光分光光度計上設(shè)置360nm為激發(fā)波長,激發(fā)和發(fā)射狹縫調(diào)為2.5nm,5nm,在370~700nm范圍進(jìn)行掃描,得到DB-15C5在不同蛋白儲備液中存在時的熒光光譜;

(3)定量測定HSA含量

通過DB-15C5在不同濃度HSA存在時的熒光光譜,固定發(fā)射波長500nm,讀取熒光強(qiáng)度,以熒光強(qiáng)度(I)對HSA濃度(CHSA)作圖,建立得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定DB-15C5在未知樣品中的熒光強(qiáng)度,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到HSA含量。

6.權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的熒光測定時溶液配制磷酸鹽緩沖液所用水均為二次蒸餾水或更高純度的水,DB-15C5溶液配制采用1%(v%)無水乙醇助溶。

7.權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的磷酸鹽緩沖液為由NaCl 8g,KCl 0.2g,KH2PO4 0.24g,Na2HPO4 1.44g溶于1000mL水中配制而成,磷酸鹽緩沖液的pH為7.2-7.4。

8.權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的人工尿液由尿素1.02068g,乳酸0.0099088g,檸檬酸0.042028g,碳酸氫鈉0.210025g,氯化鈣0.027745g,氯化鈉0.52596g,七水硫酸鎂0.049294g,硫酸鈉0.14204g,磷酸二氫鉀0.095263g,磷酸氫二鉀0.159754g,氯化銨0.133725g溶于100ml蒸餾水并調(diào)節(jié)pH為6.0配制而成。

當(dāng)前第2頁1 2 3 
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
1
主站蜘蛛池模板: 花垣县| 黔西| 郑州市| 佛山市| 中江县| 峡江县| 仙桃市| 新田县| 遵化市| 苍南县| 修文县| 宝清县| 北流市| 博野县| 微山县| 望谟县| 大同市| 新丰县| 北流市| 防城港市| 柯坪县| 当雄县| 灵丘县| 山阴县| 弋阳县| 宣恩县| 汶上县| 霍山县| 吴江市| 临漳县| 陵川县| 滦平县| 静乐县| 耿马| 司法| 额济纳旗| 杭锦后旗| 阳曲县| 苍南县| 房山区| 沾益县|